疊鞘石斛化學成分研究

許 莉， 劉賢武， 王江瑞， 葉 強， 郭 力， 張廷模

（成都中醫(yī)藥大學藥學院，中藥材標準化教育部重點實驗室，中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用國家重點實驗室培育基地，四川成都611137）

［成分分析］

疊鞘石斛化學成分研究

許 莉， 劉賢武*， 王江瑞， 葉 強， 郭 力， 張廷模

（成都中醫(yī)藥大學藥學院，中藥材標準化教育部重點實驗室，中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用國家重點實驗室培育基地，四川成都611137）

目的研究疊鞘石斛化學成分。方法疊鞘石斛乙酸乙酯部位采用硅膠柱層析、重結(jié)晶等方法分離純化，并通過理化性質(zhì)和波譜技術(shù)鑒定化合物結(jié)構(gòu)。結(jié)果從疊鞘石斛中分離得到10個化合物，分別鑒定為松柏醛 （1）、香蘭素 （2）、香草酸 （3）、丁香醛 （4）、丁香酸 （5）、5-乙酰氧甲基糠醛 （6）、5-羥甲基糠醛 （7）、鄰苯二甲酸二 （2-乙基己）酯 （8）、草木樨苷甲酯 （9）、4，5-二羥基-2-甲氧基-9，10-二氫菲 （10）。結(jié)論所有化合物均為首次從疊鞘石斛中分離得到。

疊鞘石斛；乙酸乙酯部位；化學成分

石斛一名最早見于 《山海經(jīng)》，作為藥用始載于 《神農(nóng)本草經(jīng)》，并被列為上品。其氣微，味甘，性微寒，歸胃、腎經(jīng)，具有益胃生津、滋陰清熱的功效，中醫(yī)臨床主要用于治療陰傷津虧、口干煩渴、食少干嘔、病后虛熱、目暗不明等癥［1-2］。我國的石斛屬植物有74種和2個變種，主要分布于云南、四川、貴州、廣西等地。疊鞘石斛DendrobiuMaurantiacuMRchb.f.var.denneanum（Kerr）Z.H.Tsi為蘭科石斛屬植物線葉石斛D. aurantiacuMRchb.f.的變種，是四川石斛的主流品種之一。清代 《植物名實圖考》記載：“金蘭即石斛之一種，花如蘭而瓣肥短，色金黃有光灼，灼開足則扁闊口哆中露紅紋尤艷。”，經(jīng)考證即為疊鞘石斛［3-5］。 《夾江縣志》 記載，早在嘉慶年間，當?shù)厮a(chǎn) “嘉定石斛”就頗具規(guī)模，遠銷全國各地。目前四川省樂山市夾江縣已廣為栽培并供藥用，資源較豐富。本實驗對疊鞘石斛乙酸乙酯部位化學成分進行研究，結(jié)果從中分離鑒定出10個化合物。

1 儀器和材料

X-4型顯微熔點測定儀 （上海精密科學儀器有限公司）；Bruker Avance 400核磁共振儀（瑞士Bruker公司）；R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（瑞士BUCHI公司）；SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵 （鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；UPTII優(yōu)普超純水器（成都超純科技有限公司）；DZG-6050型真空干燥箱 （上海森信實驗儀器有限公司）。柱層析硅膠 （200～300目，青島海洋化工有限公司）；Sephadex LH-20葡聚糖凝膠（英國GE Healthcare）；GF254硅膠制備薄層 （煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司）。所用試劑均為分析純 （國藥集團化學試劑有限公司）。

疊鞘石斛購自四川萬安石斛產(chǎn)業(yè)開發(fā)有限公司，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學中藥鑒定教研室李敏教授鑒定為疊鞘石斛DendrobiuMaurantiacuMRchb.f. var.denneanum（Kerr）Z.H.Tsi。

2 提取分離

疊鞘石斛藥材粗粉10 kg，用95%乙醇回流提取5次，每次1 h，合并提取液，減壓回收溶劑，得浸膏530 g。浸膏用水溶解，制成混懸液，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，得到石油醚浸膏105 g、乙酸乙酯浸膏240 g、正丁醇浸膏110 g。乙酸乙酯部位用硅膠柱梯度洗脫 （二氯甲烷-甲醇系統(tǒng)，100∶1～0∶100），薄層色譜檢測合并相同部分，采用硅膠、MCI、LH-20葡聚糖凝膠等色譜柱和重結(jié)晶等方法對其進行分離純化，共得到10個化合物。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色針晶 （丙酮），mp 80～82℃。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：9.65（1H，d，J=5.2 Hz，H-9），7.40（1H，d，J=10.4 Hz，H-7），7.12（1H，dd，J=8.2，1.7 Hz，H-6），6.96（1H，d，J=5.2 Hz，H-5），6.59（1H，dd，J=15.8，7.2 Hz，H-8），5.99（1H，brs，4-OH），3.85（3H，s，3-OCH3）。波譜數(shù)據(jù)與文獻 ［6］報道相符合，故鑒定其為松柏醛（coniferaldehyde）。

化合物2：白色固體，mp 81～82℃。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：9.80（1H，s，1-CHO），7.43（2H，m，H-2，6），7.04（1H，d，J=6.0 Hz，H-5），6.18（1H，s，4-OH），3.97（3H，s，3-OCH3）。波譜數(shù)據(jù)與文獻 ［7］報道相符合，故鑒定其為香蘭素（vanillin）。

化合物3：無色結(jié)晶。1H-NMR（400 MHz，CD3COCD3）δ：7.60（1H，dd，J=8.2，1.8 Hz，H-6），7.56（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），6.91（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），3.90（3H，s，3-OCH3）。13C-NMR（100 MHz，CD3COCD3）：122.8（C-1），115.5（C-2），152.0（C-3），148.0（C-4），113.4 （C-5），124.9 （C-6），167.7（-COOH），56.3（-OCH3）。波譜數(shù)據(jù)與文獻［8］報道相符合，故鑒定其為香草酸（vanillic acid）。

化合物4：白色粉末，mp 254～256℃。1HNMR（400 MHz，CDCl3）δ：9.82（1H，s，H-7），7.15（2H，s，H-2，6），6.20（1H，s，4-OH），3.97（6H，s，3，5-OCH3）。波譜數(shù)據(jù)與文獻［9］報道相符合，故鑒定其為丁香醛（syringaldehyde）。

化合物5：白色針晶 （丙酮），13C-NMR譜發(fā)現(xiàn)其為對稱結(jié)構(gòu)。1H-NMR（400 MHz，CD3COCD3）δ：7.33（2H，s，H-2，6），3.88（6H，s，3，5-OCH3）。13C-NMR（100 MHz，CD3COCD3）δ：121.4（C-1），108.1（C-2，6），141.6（C-4），148.3（C-3，5），167.5（1-COOH），56.6（3，5-OCH3）。波譜數(shù)據(jù)與文獻 ［10］報道相符合，故鑒定其為丁香酸（syringic acid）。

化合物6：黃色油狀物。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：9.64（1H，s，2-CHO），7.21（1H，d，J=3.2 Hz，H-3），6.59（1H，d，J=3.6 Hz，H-4），5.12（2H，s，H-6），2.11（3H，s，5-CH3）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：177.8（C-1），152.8（C-2），121.7（C-3），112.6（C-4），155.4（C-5），57.8（C-6），20.7（5-CH3COO）。波譜數(shù)據(jù)與文獻 ［11］報道相符合，故鑒定其為5-乙酰氧甲基糠醛（5-acetoxymethylfuraldehyde）。

化合物7：棕色油狀物。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：9.56（1H，s，2-CHO），7.20（1H，d，J=3.6 Hz，H-3），6.50（1H，d，J=3.6 Hz，H-4），4.70（2H，s，H-6）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：177.8（C-1），152.4（C-2），123.0（C-3），110.1（C-4），160.8（C-5），57.7（C-6）。波譜數(shù)據(jù)與文獻 ［11］報道相符合，故鑒定其為5-羥甲基糠醛（5-hydromethylfuraldehyde）。

化合物8：淡黃色油狀物，13C-NMR譜發(fā)現(xiàn)在δ132.4、130.8、128.8處有3個苯環(huán)上的碳信號，表明該化合物為對稱結(jié)構(gòu)。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：7.71（2H，m，H-3，6），7.53（2H，m，H-4，5），4.22（4H，dd，J=6.0 Hz，5.6 Hz，H-1＇，1″），1.68（2H，m，H-2＇，2″），1.25～1.42（16H，m，H-3＇，3″，4＇，4″，5＇，5″，7＇，7″），0.89～0.95（12H，m，H-6＇，6″，8＇，8″）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：167.7（C-1），132.4（C-2），130.8（C-4，5），128.8（C-3，6），68.1 （C-1＇，1″），38.7 （C-2＇，2″），30.3（C-3＇，3″），28.9（C-4＇，4″），23.7（C-7＇，7″），22.9（C-5＇，5″），14.0（C-6＇，6″），10.9（C-8＇，8″）。波譜數(shù)據(jù)與文獻 ［12］報道相符合，故鑒定其為鄰苯二甲酸二 （2-乙基己）酯 （bis（2-ethylhexyl）phthalate）。

化合物9：無色針狀結(jié)晶。1H-NMR（400MHz，CD3OD）δ：8.15（1H，d，J=16.4 Hz，H-7），7.65（1H，dd，J=8.0 Hz，1.6 Hz，H-6），7.26（1H，d，J=8.0 Hz，H-8），7.06（1H，t，J= 7.6 Hz，H-5），7.39（1H，ddd，J=8.8 Hz，8.0 Hz，1.6 Hz，H-4），5.0（d，J=7.6 Hz，1-Glc）；3.30～3.91（2-Glc～6-Glc）。13C-NMR（CD3OD，100 MHz）δ：169.9（C-9），157.6（C-2），141.3（C-7），133.0（C-4），131.5（C-6），128.8（C-5），123.6（C-1），122.7（C-8），118.8（C-3），52.2（C-10），102.3（C-1＇），71.2（C-4＇），74.9（C-2＇），78.1（C-3＇），78.3（C-5＇），62.5（C-6＇）。波譜數(shù)據(jù)與文獻 ［13］報道相符合，鑒定其為草木樨苷甲酯（melilotoside methyl ester）。

化合物10：白色粉末。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：7.15（1H，m，H-7），6.95（1H，d，J=8.0 Hz，H-8），6.86（1H，d，J=7.2 Hz，H-6），6.49（2H，s，H-1，3），3.93（3H，s，2-OCH3），2.66（4H，m，H-9，10）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：109.2（C-1），155.6（C-2），99.0（C-3），153.2（C-4），155.0（C-5），117.8（C-6），127.9（C-7），119.9（C-8），31.1（C-9），30.7（C-10），143.8（C-1a），115.2（C-4a），120.6（C-5a），140.6（C-8a），57.0（2-OCH3）。波譜數(shù)據(jù)與文獻［14］報道相符合，鑒定其為4，5-二羥基-2-甲氧基-9，10-二氫菲（4，5-dihydroxy-2-methoxy-9，10-dihydrophenanthrene）。

［1］馬繼興.神農(nóng)本草經(jīng)輯注［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1995.

［2］ 《全國中草藥匯編》編寫組.全國中草藥匯編 （上）［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：225.

［3］包雪聲，順慶生，張申洪，等.中國藥用石斛圖志［M］.上海：上海科學技術(shù)文獻出版社，2005：34.

［4］包雪聲，順慶生，陳立鉆，等.中國藥用石斛彩色圖譜［M］.上海：復旦大學出版社，2001：66-67.

［5］中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志：第19卷［M］.北京：科學出版社，1999：88-89.

［6］謝紅剛，張宏武，張 江，等.羊耳菊的化學成分［J］.中國天然藥物，2007，5（3）：193-196.

［7］陳 顥，李麗娟，張繼光.旱冬瓜乙酸乙酯萃取相化學成分研究［J］.云南化工，2011，38（5）：14-17.

［8］王海鳴，李支薇，田光超，等.桐花樹樹皮化學成分的研究［J］.廣東化工，2014，41（4）：26-27.

［9］宋光西，馬玲云，魏 鋒，等.暴馬子皮化學成分研究［J］.中國藥學雜志，2012，47（24）：1979-1982.

［10］張愛軍，任鳳霞，趙毅民.藏藥獨一味化學成分的研究［J］.中國藥學雜志，2011，46（2）：102-104.

［11］宋秋月，付迎波，劉 江，等.當歸的化學成分研究［J］.中草藥，2011，42（10）：1900-1904.

［12］張 濤，樸俊虹，袁 蕾，等.刺五加化學成分及自由基清除活性研究［J］.中草藥，2012，43（6）：1057-1060.

［13］Purohit MC，Rawat MSM，Pant G，et al.A methyl ester of melilotoside froMthe sapwood of Prunus cornuta［J］.Phytochemistry，1993，32（2）：431-432.

［14］Matsuda H，Morikawa T，Xie H，et al.Antiallergic phenanthrenes and stilbenes froMthe tubers of Gymnadenia conopsea［J］.Planta Med，2004，70（9）：847-855.

CheMical constituents of DendrobiuMaurantiacuMRchb.f.var.denneanum（Kerr）Z.H.Tsi

XU Li， LIU Xian-wu*， WANG Jiang-rui， YE Qiang， GUO Li， ZHANG Ting-mo
（Schoolof Pharmacy，Chengdu University of Traditonal Chinese Medicine；Key Laboratory of Standardization of Chinese HerbalMedicine，TheMinistry of Education；The Breeding Base of State Key Laboratory of Resources Systems Research and Development Utilization of Chinese Herbal Medicines，Chengdu 611137，China）

AIMTo investigate the chemical constituents of DendrobiuMaurantiacuMRchb.f.var.denneanum（Kerr）Z.H.Tsi.METHODSThe ethyl acetate portion of D.aurantiacuMethanolic extractwas isolated by silica gel，and recrystallized，and their structures were elucidated on the basis of spectral analysis and physicochemical properties.RESULTSTen compounds were obtained and identified as coniferaldehyde（1），vanillin（2），vanillic acid（3），syringaldehyde（4），syringic acid（5），5-acetoxymethylfuraldehyde（6），5-hydro methylfuraldehyde（7），bis（2-ethylhexyl）phthalate（8），melilotosidemethyl ester（9），4，5-dihydroxy-2-methoxy-9，10-dihydrophenanthrene（10）.CONCLUSIONAll compounds are isolated froMthis plant for the first time.

DendrobiuMaurantiacuMRchb.f.var.denneanum（Kerr）Z.H.Tsi；ethyl acetate portion；chemical constituents

R284.1

：A

：1001-1528（2015）05-1010-03

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.05.018

2014-07-18

科技部十二五支撐項目 （2011BAI13B02-8）；四川省科技廳課題 （2011JY0048）

許 莉（1987—），女，博士，研究方向為中藥化學成分和質(zhì)量標準。Tel：15908163019，E-mail：xulicd1987@sina.coM*通信作者：劉賢武 （1970—），男，教授，研究方向為中藥理論及應用。