阿爾茨海默病生物標(biāo)志物及其檢測(cè)技術(shù)研究概況

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阿爾茨海默病生物標(biāo)志物及其檢測(cè)技術(shù)研究概況

徐志強(qiáng)1齊鵬楊曉慶2李萬(wàn)里3

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院三全學(xué)院，河南新鄉(xiāng)453003)

關(guān)鍵詞〔〕阿爾茨海默??；生物標(biāo)志物

1蘇州大學(xué)附屬第二醫(yī)院2平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院

3新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研中心

第一作者：徐志強(qiáng)(1989-)，男，碩士，主要從事神經(jīng)退行性疾病研究。

阿爾茨海默病(AD)表現(xiàn)為逐漸加重的近期記憶缺失，而遠(yuǎn)期記憶則相對(duì)不受病情進(jìn)展的影響。隨著病情的加重，逐漸出現(xiàn)記憶力減退、認(rèn)知功能障礙、行為異常和社交障礙。AD的病理改變主要累及大腦皮質(zhì)、海馬、前腦等區(qū)域，以淀粉樣血管病及神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)神經(jīng)原纖維纏結(jié)、神經(jīng)細(xì)胞喪失、細(xì)胞外淀粉樣肽沉積、神經(jīng)炎斑或老年斑形成為特征改變。目前，臨床上仍沒(méi)有有效的藥物和臨床途徑可治愈AD，早期發(fā)現(xiàn)AD并在臨床前期阻斷或延緩AD的病理生理變化，患者的生活質(zhì)量將會(huì)顯著提高。本文就早期AD相關(guān)生物標(biāo)志物及其檢測(cè)技術(shù)作一綜述。

1蛋白質(zhì)組學(xué)分析技術(shù)

1.1二維聚丙烯酰胺凝膠電泳分析二維電泳技術(shù)的發(fā)明始于1975年的O'Farrel,二維電泳技術(shù)將等電聚焦與十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)相結(jié)合,利用蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)及分子量的差異對(duì)混合蛋白樣品進(jìn)行分離，優(yōu)于兩者單獨(dú)使用分離效果。Li等〔1〕采用二維凝膠電泳和質(zhì)譜分析發(fā)現(xiàn)微囊藻毒素-亮氨酸藍(lán)藻派生-精氨酸(MCLR)引起的神經(jīng)毒性與球蛋白相關(guān)，并認(rèn)為MCLR引起的神經(jīng)毒性可能與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)。Yang等〔2〕采用二維凝膠電泳結(jié)合納米高性能液體色譜-電噴霧電離串聯(lián)質(zhì)譜(nano-HPLC-ESI-MS/MS)分析AD患者血清蛋白中肽碎片，并對(duì)6個(gè)差異表達(dá)的蛋白斑點(diǎn)進(jìn)行鑒定。發(fā)現(xiàn)在AD患者血清中跨α-胰蛋白酶抑制劑重鏈p、載脂蛋白A-Ⅳ、肌動(dòng)蛋白、α-1-抗胰蛋白酶和抗凝血酶Ⅲ這五種蛋白表達(dá)增強(qiáng)。Ciavardelli等〔3〕通過(guò)采用二維凝膠電泳和質(zhì)譜研究三重轉(zhuǎn)基因小鼠AD模型(3xTg-AD)轉(zhuǎn)基因小鼠和早老素-1基因敲除〔動(dòng)物蛋白的表達(dá)發(fā)生改變但不發(fā)展為β淀粉樣蛋白(Aβ)-tau蛋白依賴的病理，也不表現(xiàn)認(rèn)知能力下降，作為對(duì)照〕的小鼠。發(fā)現(xiàn)前者參與糖代謝和蛋白質(zhì)分解代謝的蛋白質(zhì)的表達(dá)上調(diào)。其研究結(jié)果對(duì)突變淀粉樣前體蛋白和磷酸化的tau蛋白的機(jī)制闡述有一定的幫助。Chou等〔4〕使用二維差異凝膠電泳和串聯(lián)質(zhì)譜定量測(cè)定進(jìn)行比較蛋白質(zhì)組學(xué)定量分析的方法，對(duì)3xTg-AD小鼠的線粒體蛋白質(zhì)組的變化進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)線粒體相關(guān)蛋白在3xTg-AD和非轉(zhuǎn)基因小鼠之間大腦皮層23種不同的蛋白質(zhì)的表達(dá)水平差異顯著。

1.2氣相和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(GC-MS和LC-MS/MS)分析液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)以液相色譜作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜作為檢測(cè)系統(tǒng)，經(jīng)純化后的樣品在液相色譜和質(zhì)譜部分進(jìn)行分離和離子化，經(jīng)由檢測(cè)器得到質(zhì)譜圖。液質(zhì)聯(lián)用利用了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢(shì)的互補(bǔ)，結(jié)合了色譜對(duì)復(fù)雜樣品的高分離能力和質(zhì)譜的高選擇性，高靈敏度及能夠提供相對(duì)分子量和結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點(diǎn)。它對(duì)化合物的結(jié)構(gòu)破壞性很小，因而，適合生物分子和有機(jī)分子的分離。與其他分析方法相比，質(zhì)譜具有更高的靈敏度，對(duì)未知分子結(jié)構(gòu)的定性分析也很準(zhǔn)確，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品相對(duì)于其他分析方法，要求相對(duì)較低。質(zhì)譜可與高效液相色譜聯(lián)用如(HPLC/MS),亦可和氣相聯(lián)用如GC/MS。因?yàn)橘|(zhì)譜和色譜靈敏度基本相同，質(zhì)譜的進(jìn)樣系統(tǒng)可以用分離效果很好的色譜來(lái)實(shí)現(xiàn)，質(zhì)譜作為色譜的鑒定儀也有分離好，速度快，應(yīng)用廣等優(yōu)點(diǎn)。Czech等〔5〕通過(guò)采用GC-MS和LC-MS/MS配合單變量和多變量統(tǒng)計(jì)分析法對(duì)79例AD患者和51名健康對(duì)照者腦脊液標(biāo)本分析 ，AD患者與健康對(duì)照組相比共有343種蛋白有表達(dá)差異。另外，皮質(zhì)醇水平升高似乎與AD的發(fā)展相關(guān)。 AD的嚴(yán)重程度與半胱氨酸水平增加和尿苷水平下降相關(guān)，且他們是最好的配對(duì)組合。Hu等〔6〕使用氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)，對(duì)野生型C57BL/6J小鼠和 TASTPM小鼠腦脊液和血漿進(jìn)行比對(duì)， TASTPM小鼠腦脊液中(D-果糖、L-纈氨酸、L-絲氨酸、L-蘇氨酸)和血漿中(D-葡萄糖、D-半乳糖、亞油酸、花生四烯酸代謝產(chǎn)物、棕櫚酸、D-葡糖酸)發(fā)生紊亂。Vanmierlo等〔7〕應(yīng)用氣相色譜/質(zhì)譜分析，對(duì)植物甾醇與AD組(n=67)和對(duì)照組(n=29)的患者血漿和腦脊液中濃度測(cè)定。發(fā)現(xiàn)AD患者腦脊液中Brassicasterol蛋白顯著降低，因此，Brassicasterol蛋白可能是一個(gè)與AD有關(guān)的生物標(biāo)志物。

1.3鳥(niǎo)槍法蛋白組學(xué)鳥(niǎo)槍法在基因組測(cè)序時(shí),先將DNA打斷,分段測(cè)序,然后利用計(jì)算機(jī)將片段重組在一起,確定生物的基因組序列。鳥(niǎo)槍法在蛋白組研究應(yīng)用與其相似,先將蛋白混合物降解成肽段,再用質(zhì)譜進(jìn)行分析測(cè)序,最后計(jì)算機(jī)根據(jù)設(shè)定好的運(yùn)算法則描繪出肽段在蛋白質(zhì)上的位置圖譜,確定該混合物中的蛋白成分。Shevchenko等〔8〕通過(guò)鳥(niǎo)槍法比較Tg2576模型的腦蛋白質(zhì)組。對(duì)1 085種蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定和縱向量化。確定了57種年齡依賴性的線粒體蛋白表達(dá)減少，其中的一些蛋白與AD的發(fā)生相關(guān)。Han等〔9〕通過(guò)多維質(zhì)譜為基礎(chǔ)的鳥(niǎo)槍脂類組學(xué)進(jìn)行前瞻性分析，確定超過(guò)800種脂類分子水平，發(fā)現(xiàn)載脂蛋白E4基因型與認(rèn)知表現(xiàn)相關(guān)。

1.4基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜系統(tǒng)分析法基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜的主要用途有：對(duì)生物大分子物質(zhì)分子量的測(cè)定，對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行高通量的鑒定，對(duì)有機(jī)小分子化合物分子量的測(cè)定，對(duì)寡核苷酸的分析，對(duì)基因的單核苷酸多態(tài)性的分析等。目前在AD相關(guān)蛋白的測(cè)定中已經(jīng)起到了一定的作用。淀粉樣肽的蛋白水解加工在AD的形成過(guò)程中起到重要作用，淀粉樣肽的蛋白水解控制大腦Aβ水平。Taki〔10〕通過(guò)薄層色譜(TLC)-印跡/基質(zhì)輔助激光解吸/電離-飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF)系統(tǒng)(MS)建立了一個(gè)新的糖和脂類組學(xué)方法，發(fā)現(xiàn)AD患者海馬灰質(zhì)神經(jīng)節(jié)苷脂GD1b GT1B的水平比帕金森病和正常對(duì)照組的水平有所降低。他們認(rèn)為AD是一種受海馬區(qū)神經(jīng)節(jié)苷脂代謝性影響的疾病。

2腦脊液(CSF)中AD的生物標(biāo)志物

2.1tau蛋白神經(jīng)細(xì)胞骨架的主要成分是微管系統(tǒng)，對(duì)細(xì)胞功能的維持起重要作用，微管由α、β微管蛋白和微管相關(guān)蛋白組成。tau 蛋白是一種微管結(jié)合蛋白(MAP)，與微管結(jié)合并保持微管結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。微管蛋白與tau蛋白結(jié)合作為早期微管組裝核心，從而促進(jìn)其他微管蛋白在此核心上延伸聚集形成微管。tau 蛋白的微管結(jié)合能力主要由絲氨酸、蘇氨酸磷酸化來(lái)調(diào)節(jié)〔11〕。

Sj?gren等〔12〕發(fā)現(xiàn)AD患者與年齡匹配的對(duì)照受試者相比隨著年齡的增加CSF總tau水平顯著提高。并發(fā)現(xiàn)90%以上研究對(duì)象的CSF中tau蛋白水平升高的輕度認(rèn)知障礙(MCI)會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)锳D。tau蛋白的水平可能是由MCI轉(zhuǎn)變?yōu)锳D的標(biāo)志物。Zetterberg等〔13〕通過(guò)對(duì)不同的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病CSF生物標(biāo)志物的水平變化分析發(fā)現(xiàn)AD患者CSF中總tau蛋白，過(guò)磷酸化tau蛋白水平升高，而Aβ1～42的水平降低。Blasko等〔14〕通過(guò)評(píng)估CSF水平的13個(gè)潛在的生物標(biāo)志物在治療AD、額顳葉癡呆癥、酒精性癡呆、抑郁癥和無(wú)任何神經(jīng)精神疾病的對(duì)照組中的作用，發(fā)現(xiàn)P-tau181/Aβ42的比值比越高患AD的概率越大。Humpel〔15〕通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，AD體內(nèi)CSF的總tau蛋白和P-tau蛋白增加。并發(fā)現(xiàn)tau蛋白磷酸化蘇氨酸231可提高AD和額顳葉癡呆的區(qū)分，tau蛋白磷酸化絲氨酸181提高AD和路易體癡呆之間的區(qū)分。Mattsson等〔16〕通過(guò)對(duì)大樣本研究，發(fā)現(xiàn)隨著年齡的增加AD患者CSF中Aβ1～42減少，總tau增加，tau蛋白磷酸化增加。

2.2Aβ淀粉樣蛋白斑的主要組成部分是4 kD的Aβ，它代表一個(gè)37～43-氨基酸的Aβ種類，Aβ40，即組成主要種類的疏水性肽的非均相混合物。更長(zhǎng)的變種Aβ42和Aβ43具有高度聚集傾向。最近證明，Aβ42以及Aβ43是高致病性的，認(rèn)為會(huì)通過(guò)觸發(fā)一系列的事件導(dǎo)致AD，神經(jīng)退行性疾病和老年癡呆癥最終導(dǎo)致所謂的淀粉樣蛋白級(jí)聯(lián)致病。 Aβ是由β-淀粉樣蛋白前體蛋白的水解加工，在Ⅰ型膜蛋白，β-分泌酶和γ-分泌酶的聯(lián)合作用產(chǎn)生的〔17〕。Stefani等〔18〕通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn)， CSF的生物標(biāo)記物Aβ1～42、T-tau蛋白、總tau蛋白和tau蛋白磷酸化蘇氨酸181可鑒別AD和血管性癡呆。并且AD患者Aβ1～42的水平非常低。Noguchi等〔19〕通過(guò)評(píng)估CSF-tau蛋白，CSF-Aβ42和CSF-ptau的進(jìn)行性核上性麻痹(PSP)和皮質(zhì)基底節(jié)變性(CBD)的生化指標(biāo)，研究對(duì)象為18例PSP，CBD的9例，69例AD和43名對(duì)照者。發(fā)現(xiàn)在AD患者CSF中Aβ1～42水平顯著下降。CSF中的Aβ1～42和高總tau蛋白的低水平可作為AD的診斷。Gustafson等〔20〕在1992～2002年通過(guò)對(duì)55名婦女(年齡70～84歲)的縱向調(diào)查，結(jié)果顯示，Aβ42是預(yù)測(cè)認(rèn)知功能下降或癡呆癥的唯一指標(biāo)。Pesaresi等〔21〕通過(guò)對(duì)146例散發(fā)性AD患者，89例MCI和89例年齡匹配的對(duì)照的血漿Aβ1～42水平的比較。發(fā)現(xiàn)AD患者有顯著較低的水平。Aβ1～42的減少可能是AD狀態(tài)的一個(gè)標(biāo)記，具體而言，從正常狀態(tài)或MCI到AD的過(guò)渡，而不是發(fā)生在疾病的神經(jīng)變性過(guò)程的一個(gè)標(biāo)記。

3血液中AD的生物標(biāo)志物

3.1淀粉樣前體蛋白和Aβ由淀粉樣前體蛋白的順序裂解所致β-淀粉樣肽的分泌被普遍認(rèn)為是AD因果關(guān)系的基礎(chǔ)。Mayeux等〔22〕通過(guò)對(duì)530例參與老化和老年癡呆癥患者的流行病學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)血漿Aβ40和Aβ42的水平與年齡相關(guān)，在一些患者體內(nèi)血漿Aβ40和Aβ42的水平較高，但之后都降低了，高血漿水平的Aβ42可能與AD患者的死亡率有關(guān)。Pomara等〔23〕通過(guò)對(duì)34例老年受試者的血漿Aβ40和Aβ42水平與認(rèn)知功能下降的研究發(fā)現(xiàn)，血漿Aβ42水平可能和老年人的認(rèn)知下降水平有關(guān)。van Oijen等〔24〕通過(guò)對(duì)6 713例參加的癡呆風(fēng)險(xiǎn)研究，隨機(jī)抽取了1 756例進(jìn)行記錄。在隨訪期間(平均8.6年)，對(duì)392例癡呆進(jìn)行了鑒定。調(diào)查Aβ的血漿濃度和癡呆癥的風(fēng)險(xiǎn)及其亞型的Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型之間的關(guān)聯(lián)。發(fā)現(xiàn)高血漿濃度的Aβ40，尤其是在血漿Aβ42水平降低時(shí)，AD的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增高。Graff-Radford〔25〕等通過(guò)對(duì)563例認(rèn)知能力正常的志愿者(平均年齡78歲，62%為女性)使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，血漿Aβ40和Aβ42水平隨訪2～12(平均3.7)年，進(jìn)行隊(duì)列分析檢測(cè)MCI和AD的發(fā)病病例。發(fā)現(xiàn)在隨訪期間53名受試者發(fā)生了MCI或AD，回歸分析結(jié)果顯示，血漿Aβ42與Aβ40的比值降低和認(rèn)知能力的降低顯著相關(guān)。

3.2載脂蛋白(Apo)ApoE基因在人類中，存在ε2，ε3和ε4 3種不同的多態(tài)性等位基因。ε4等位基因頻率在一般人群中是0.15，但AD患者中是0.4〔26〕。ε4等位基因與AD的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中ApoE基因編碼的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)結(jié)合對(duì)于膽固醇運(yùn)輸是至關(guān)重要的。因此，膽固醇運(yùn)輸?shù)母蓴_ApoEε4等位基因攜帶者患AD風(fēng)險(xiǎn)可能增加。

Soares等〔27〕通過(guò)對(duì)396例MCI患者，112例AD患者和58例健康對(duì)照的研究發(fā)現(xiàn)，所有具有Apo ε 3/ε4 或 ε4/ε4基因的參與者都表現(xiàn)出明顯的生化特征：低C-反應(yīng)蛋白水平，高皮質(zhì)醇，高白細(xì)胞介素(IL)13，高ApoB及高γ-干擾素。并認(rèn)為ApoB可能作為AD和ACI的篩選工具。Song等〔28〕對(duì)664例(257例MCI，407例認(rèn)知正常)平均年齡78歲的參與者隨訪兩年以上，發(fā)現(xiàn)血漿中低水平的ApoA1、ApoA2、ApoH和高水平的ApoE和ApoJ，ApoB/ApoA1的高比值。ApoEε4等位基因攜帶者血漿ApoE、ApoC3、ApoH水平較高，但是具有較低水平的ApoB。他們發(fā)現(xiàn)具有較高水平的ApoA1、ApoA2、ApoH且ApoB/ApoA1比率升高者將更有可能發(fā)生認(rèn)知能力降低。Doecke等〔29〕通過(guò)對(duì)一個(gè)擁有754例正常個(gè)體作為對(duì)照和207例AD患者進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)在AD患者體內(nèi)皮質(zhì)醇、胰多肽、胰島素樣生長(zhǎng)因子、結(jié)合蛋白2、微球蛋白、血管細(xì)胞黏附分子1、癌胚抗原、基質(zhì)金屬蛋白酶2、CD40、巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α、超氧化物歧氧化物歧化酶和同型半胱氨酸標(biāo)記物的顯著增加和表皮生長(zhǎng)因子受體、ApoE、血紅蛋白、鈣、鋅、IL17、白蛋白下降。

3.3炎性反應(yīng)因子在AD患者血漿中可以檢測(cè)到一些炎癥因子，表明炎癥在AD病理發(fā)展過(guò)程中有一定作用，隨著小膠質(zhì)細(xì)胞的激活一些細(xì)胞趨化因子也隨之產(chǎn)生,進(jìn)而誘導(dǎo)產(chǎn)生巨球蛋白等，IL又可以誘導(dǎo)一氧化氮合酶，最終以氧化應(yīng)激損傷神經(jīng)元。Engelhart等〔30〕對(duì)AD患者的研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-1和IL-6的血漿水平較高的老年受試者發(fā)生癡呆的風(fēng)險(xiǎn)增加。Tan等〔31〕研究，分析外周血細(xì)胞釋放細(xì)胞因子，較高程度的外周血單核細(xì)胞釋放IL-1β和腫瘤壞死因子(TNF)-α，增加了發(fā)生AD的風(fēng)險(xiǎn)。Pratico等〔32〕通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，血漿游離體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的特異性標(biāo)記物：8，12-iso-iPF(2α)-Ⅵ在體內(nèi)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用，從而增加AD和MCI的發(fā)病概率。

4AD相關(guān)的候選生物標(biāo)志物

Wang等〔33〕使用GC-MS技術(shù)加上多元統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)二十二碳六烯酸很有可能作為AD診斷的潛在生物標(biāo)記物。任進(jìn)民等〔34〕采用高效液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS)檢測(cè)20例AD患者和29例正常對(duì)照老年人血漿，發(fā)現(xiàn)AD患者血漿中脫氫表雄酮硫酸酯含量降低對(duì)診斷老年性癡呆有較高的敏感性和特異性,有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值,脫氫表雄酮硫酸酯可作為AD的一項(xiàng)早期診斷指標(biāo)。 Li等〔35〕對(duì)AD 患者和健康老年人血漿進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)溶血卵磷脂，鞘氨醇和色氨酸可作為診斷AD潛在的生物標(biāo)志物。Greenberg等〔36〕發(fā)現(xiàn)AD患者血漿中3種膽汁酸含量增加，并提示進(jìn)一步的代謝組學(xué)分析可能會(huì)發(fā)現(xiàn)診斷AD更有價(jià)值的生物標(biāo)記物。Salek等〔37〕對(duì)轉(zhuǎn)基因小鼠TgCRND8 8個(gè)大腦區(qū)域(大腦皮質(zhì)、額葉皮層、小腦、海馬、嗅球、腦橋、中腦和紋狀體)進(jìn)行研究，在觀察的TgCRND8 老鼠內(nèi)發(fā)現(xiàn)：海馬，額葉皮層(異常γ-氨基丁酸)這些區(qū)域的相應(yīng)加載圖分析表明，N-乙?；?L-天門(mén)冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、牛磺酸(海馬例外)、γ-氨基丁酸、膽堿、磷酸膽堿(合并的共振)、磷酸肌酸、肌酸和琥珀酸減少；海馬皮質(zhì)、額葉皮層(異常γ-氨基丁酸)乳酸(除了在中腦)、天門(mén)冬氨酸、甘氨酸及其他氨基酸包括丙氨酸(額葉皮層例外)，亮氨酸，異亮氨酸，纈氨酸和水溶性游離脂肪酸增加。這些改變可增強(qiáng)診斷和監(jiān)測(cè)AD。Tukiainen等〔38〕研究了180份血清樣品，其中30%為MCI(神經(jīng)心理診斷嚴(yán)重AD的風(fēng)險(xiǎn)增加)，發(fā)現(xiàn)Ω-3 脂肪酸和糖蛋白的改變能增加AD 發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，支持炎癥和代謝綜合征并存時(shí)能夠形成使認(rèn)知功能下降的高危環(huán)境的觀點(diǎn)。Kaddurah-Daouk等〔39〕對(duì)15 例AD 患者CSF進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)酪氨酸、色氨酸、嘌呤、生育酚等物質(zhì)的改變，去甲腎上腺素和其相關(guān)的代謝物減少，并分析了酪氨酸、色氨酸、嘌呤、生育酚等物質(zhì)的代謝路徑。需要進(jìn)一步對(duì)這些生物標(biāo)記物做大樣本AD人群的代謝組學(xué)研究，以期能夠更好地預(yù)測(cè)臨床前期疾病。

綜上，近年來(lái)一些新技術(shù)的開(kāi)發(fā)使用，更加促進(jìn)了蛋白組學(xué)的研究，基質(zhì)輔助激光解析電離-飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF/TOF MS)，高效液相色譜與電感耦合等離子質(zhì)譜(HPLC-ICP-MS)，液相色譜-紫外光譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-UV-MS),熒光差異顯示雙向電泳技術(shù)AKTA層析技術(shù)表面增強(qiáng)激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(SELDI-TOF),鳥(niǎo)槍法蛋白質(zhì)組學(xué)等對(duì)蛋白的分離、定性和定量的檢測(cè)，將有助于新的AD生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)。

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〔2014-07-12修回〕

(編輯杜娟)

通訊作者：李萬(wàn)里(1955-)，男，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事神經(jīng)退行性疾病免疫學(xué)機(jī)制研究。

中圖分類號(hào)〔〕R741〔

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

文章編號(hào)〕1005-9202(2015)21-6317-04；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.21.148