孫艷芳
(河北省定興縣農(nóng)業(yè)局,河北定興 072650)
豬繁殖與呼吸綜合征研究進(jìn)展
孫艷芳
(河北省定興縣農(nóng)業(yè)局,河北定興 072650)
豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的一種急性接觸性傳染病,以母豬繁殖障礙及仔豬呼吸困難為主要特征。豬繁殖與呼吸綜合征可引起懷孕母豬流產(chǎn)、木乃伊胎、死胎、弱仔等繁殖性障礙,仔豬則主要以呼吸道癥狀為特征,且死亡率極高。PRRSV進(jìn)入豬機(jī)體內(nèi)可引起免疫抑制現(xiàn)象,使其免疫力下降,對(duì)外界病原菌的抵抗力減弱,進(jìn)而引發(fā)豬傳染病發(fā)生,對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害巨大。
1987年此病最先在美國(guó)被報(bào)到,1988年加拿大也發(fā)生了該病,并很快蔓延到德國(guó)、英國(guó)、法國(guó)、比利時(shí)、荷蘭等國(guó),呈暴發(fā)流行狀態(tài)。亞洲地區(qū)日本最早1988年發(fā)現(xiàn)該病,并于1993年首次分離到病毒。1995年我國(guó)首次發(fā)現(xiàn)疑似病例,郭寶清等人從疑似病豬身上分離出了PRRSV,證實(shí)了此病在我國(guó)的存在。目前,PRRS在我國(guó)廣泛分布,東北、華北、華東、華南等地區(qū)相繼發(fā)現(xiàn)并分離到病毒,且很多地區(qū)血清學(xué)陽性率非常高,并呈上升態(tài)勢(shì),防控形勢(shì)十分嚴(yán)峻。PRRS常常伴發(fā)鏈球菌、支原體、流感病毒、圓環(huán)病毒、豬瘟病毒等病原微生物的感染,多種疾病并發(fā),臨床癥狀復(fù)雜多變,進(jìn)一步增加了防治的難度。本文對(duì)PRRS的病原學(xué)、免疫學(xué)、免疫學(xué)及診斷技術(shù)的研究進(jìn)展進(jìn)行介紹,為其研究和防控提供理論依據(jù)。
豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)屬于尼多病毒目、動(dòng)脈炎病毒科、動(dòng)脈炎病毒屬,是一種不分節(jié)段的單股正鏈 RNA 病毒,呈卵圓形,內(nèi)部是二十面體的核衣殼,有囊膜,表面有纖突,無凝血性。PRRSV對(duì)有機(jī)溶劑敏感,氯仿和乙醚等化學(xué)物質(zhì)可迅速將其滅活。其熱穩(wěn)定性差,溫度越高其死亡速度越快。PRRSV的最適pH值為6.5~7.5,酸性或堿性環(huán)境中會(huì)迅速失活,耐受力弱。PRRSV主要分為歐洲型和美洲型兩種,我國(guó)大部分分離的病毒屬于美洲型。
PRRSV進(jìn)入豬機(jī)體后,首先通過病毒表面的E蛋白、M蛋白和N蛋白,刺激產(chǎn)生體液免疫,產(chǎn)生的抗體通過血清學(xué)方法很容易檢測(cè)。感染后7d,首先可檢測(cè)到IgM特異性抗體;感染后14d,可檢測(cè)到IgG特異性抗體。有研究表明,PRRSV的特異性循環(huán)抗體可保持一年時(shí)間。細(xì)胞免疫在機(jī)體抵抗PRRSV感染的過程中同樣發(fā)揮著重要作用。反復(fù)感染PRRSV豬的淋巴細(xì)胞增生反應(yīng)強(qiáng)度變大,細(xì)胞數(shù)量增多。PRRSV 存在抗體依賴性增強(qiáng)作用,因此疫苗產(chǎn)生的低水平抗體可能增強(qiáng)病毒在機(jī)體內(nèi)的繁殖。所以豬場(chǎng)要定期檢測(cè)抗體水平,及時(shí)加強(qiáng)免疫,避免出現(xiàn)此種現(xiàn)象。
對(duì)于疑似病豬,首先可以通過臨床癥狀和病理解剖變化進(jìn)行初步診斷。母豬感染后,初期出現(xiàn)厭食、發(fā)燒、呼吸困難、流鼻涕似感冒癥狀,后期則四肢癱瘓無力、流產(chǎn)等繁殖障礙。仔豬感染后,主要癥狀為嗜睡、咳嗽、呼吸困難,有些出現(xiàn)腹瀉和結(jié)膜炎,最后繼發(fā)感染而死亡。PRRSV可侵害豬的肺、肝、脾臟、胸腺、扁桃體和淋巴結(jié)等,主要集中在呼吸系統(tǒng)和淋巴組織。剖檢可發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)腫大,肺部有彌漫性間質(zhì)性肺炎,病死仔豬有時(shí)可見胸腔積液和皮下、肌肉及腹腔水腫。
近年來,分子生物學(xué)技術(shù)快速發(fā)展,并在疾病診斷中廣泛應(yīng)用,是現(xiàn)在病原學(xué)檢測(cè)的重要手段。PRRSV是單股正鏈 RNA 病毒,需通過發(fā)反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)其特異性基因片段,快速診斷該病的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)室常用的基因?yàn)镺RF7,因?yàn)槠渚幋a的N蛋白質(zhì)包括所有不同毒株都具有的共同表面抗原表位。疑似病豬的血清、鼻涕、精液及肺臟、脾臟、淋巴結(jié)等組織器官均可直接提取其核酸物質(zhì),然后用RT-PCR 擴(kuò)增特異性基因片段,進(jìn)行基因檢測(cè)。婁高明等人設(shè)計(jì)了一對(duì)特異性引物,用于擴(kuò)增PRRSV 核衣殼蛋白 ORF7的一段基因序列,結(jié)果顯示此引物不僅能大量擴(kuò)增出特異性的核酸片段,基因片段測(cè)序后還可將美洲型和歐洲型區(qū)分開來。
血清學(xué)診斷主要是檢測(cè)PRRSV 抗體,常用的方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、間接免疫熒光試驗(yàn)、免疫過氧化物酶單層試驗(yàn)和血清中和試驗(yàn)等。此種診斷方法操作簡(jiǎn)單,敏感性和特異性均較高。目前,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在RRRS 的診斷中應(yīng)用廣泛。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)操作條件要求低、方便、易行,操作過程簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷可以標(biāo)準(zhǔn)化,具有快速、經(jīng)濟(jì)、敏感等特點(diǎn),且適合大批量樣品同時(shí)開展。
疫苗免疫是預(yù)防動(dòng)物傳染病發(fā)生的最常用和有用的方法。用于預(yù)防 PRRS 的疫苗有傳統(tǒng)疫苗(滅活疫苗、弱毒疫苗)和新型疫苗(DNA疫苗、基因工程重組疫苗和亞單位疫苗)。PRRS滅活疫苗具有安全性高、便于貯存運(yùn)輸、對(duì)母源抗體干擾較小等諸多優(yōu)點(diǎn),是人們預(yù)防控制PRRS的首選疫苗。但滅活疫苗也普遍存在著免疫效果不太好的缺點(diǎn)。現(xiàn)在,全世界已商品化的PRRS弱毒疫苗有數(shù)十種,其中我國(guó)已批準(zhǔn)投放市場(chǎng)的CH-1R株P(guān)RRS弱毒苗不僅對(duì)經(jīng)典毒株抵抗力強(qiáng),且對(duì)高致病性野毒株的免疫保護(hù)效果也很好。近年來,隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展,DNA疫苗等新型疫苗應(yīng)運(yùn)而生,但大多屬于科研研發(fā)階段,投入到實(shí)際生產(chǎn)的較少。
目前,采取全方位的綜合措施防控PRRS的發(fā)生,是大部分養(yǎng)豬場(chǎng)的首選,其中切斷其傳播途徑是防控PRRS發(fā)生的關(guān)鍵。首先要做好引種檢測(cè)工作,及時(shí)淘汰掉病豬,構(gòu)建無PRRSV豬群。其次要做好豬舍的消毒和清掃工作,保持良好的生產(chǎn)環(huán)境,并加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,提高豬群自身免疫力。飼養(yǎng)管理水平較高的規(guī)?;N豬場(chǎng)可采用早期斷奶和異地飼養(yǎng)技術(shù),阻止 PRRSV 的水平傳播,構(gòu)建無PRRSV種豬群。
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孫艷芳(1978-),女,中級(jí)獸醫(yī)師,主要從事動(dòng)物檢疫監(jiān)督工作。