兒童感染人博卡病毒的研究進(jìn)展

邢吳敏 韓新民

南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇南京210029

兒童感染人博卡病毒的研究進(jìn)展

邢吳敏 韓新民

南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇南京210029

人博卡病毒是近年來(lái)一種在呼吸道和消化道新發(fā)現(xiàn)的病原體，目前其發(fā)病情況、發(fā)病機(jī)制及治療尚不十分明確，但其在臨床的檢出率并不低，且?？梢疠^為嚴(yán)重的急性下呼吸道感染，極大地危害患兒的生命健康。目前，尚未研究出針對(duì)此類病毒的特效西藥，對(duì)小兒博卡病毒肺炎的中醫(yī)藥報(bào)道也是極少，因此值得進(jìn)行深入研究。

人博卡病毒曰兒童曰研究進(jìn)展

呼吸道感染是兒童時(shí)期最常見(jiàn)的疾病，亦是引起兒童死亡的常見(jiàn)原因，病毒又是兒童呼吸道感染的最常見(jiàn)病原體，其中近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的人博卡病毒（human bocavirus，HBOV）是兒科臨床上較為多見(jiàn)的一種病原體[1]。人博卡病毒于2005年首次在下呼吸道感染的瑞典兒童的鼻咽分泌物中分離[2]。隨后，世界各地紛紛證實(shí)有該病毒流行，提示人博卡病毒呈全球分布。本文將從以下幾個(gè)方面進(jìn)行綜述，以加深臨床醫(yī)生對(duì)該病毒的認(rèn)識(shí)。

1 人博卡病毒的發(fā)現(xiàn)及命名

2005年9月6日，Allander等[2]從17例下呼吸道感染患兒的鼻咽分泌物中分離出一種過(guò)去未被檢出的病原體，基于該病毒的氨基酸序列特征與牛（bovine）博卡病毒和犬（canine）細(xì)小病毒相似，因此被命名為人博卡病毒，源于bovine中的bo和canine中的ca字母的組合[3]，后因其他分型的出現(xiàn)，而被稱為人博卡病毒。基于其核酸序列特征將其歸屬于細(xì)小病毒科，細(xì)小病毒亞科，博卡病毒屬。2005年9月22日澳大利亞學(xué)者再次從急性呼吸道感染的患兒中檢測(cè)出同一種病毒[4]，隨后很多國(guó)家或地區(qū)相繼證實(shí)有人博卡病毒流行。2005年12月，劉巧突等[5]采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)從湖南急性肺炎患兒的標(biāo)本中首次檢出人博卡病毒。目前人博卡病毒分4型：人博卡病毒1、人博卡病毒2、人博卡病毒3、人博卡病毒4[2，6-7]，人博卡病毒1～4型在胃腸道標(biāo)本中均有檢出，而人博卡病毒1～3型除在胃腸道標(biāo)本中檢出外，在呼吸道分泌物中也都有檢出[8]。

2 人博卡病毒的基因特征分析

人博卡病毒病毒顆粒呈直徑21～28 nm的球形，二十面體立體對(duì)稱結(jié)構(gòu)，是一種線性單鏈DNA、無(wú)包膜病毒，長(zhǎng)約5.2 kb，有3個(gè)開放讀碼框，2個(gè)主要的開放式閱讀框，分別編碼兩個(gè)主要結(jié)構(gòu)蛋白（VP1和VP2），1個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白（NS1）和1個(gè)次要開放閱讀框編碼非結(jié)構(gòu)蛋白（NP1）[9-11]。NS1能夠啟動(dòng)病毒DNA的復(fù)制，最早被轉(zhuǎn)錄、翻譯，NP1的功能尚不明確。VP1、VP2極其相似，是病毒衣殼的重要結(jié)構(gòu)蛋白，二者含有一個(gè)相同的C端，所不同的是VP1的N端有其特有磷脂酶A片段[12]，與病毒的感染有關(guān)。人博卡病毒基因組中編碼非結(jié)構(gòu)蛋白（NS1、NP1）的區(qū)域比較保守，而編碼核衣殼蛋白（VPl和VP2）的區(qū)域較易發(fā)生突變[13]。人博卡病毒基因組不編碼聚合酶，其DNA復(fù)制完全依賴宿主細(xì)胞DNA的聚合酶進(jìn)行復(fù)制。

3 人博卡病毒的流行病學(xué)特征

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)人博卡病毒流行病學(xué)方面的研究已取得一定進(jìn)展。自2005年瑞典首次報(bào)道人博卡病毒后，各個(gè)國(guó)家和地區(qū)相繼在患者的呼吸道分泌物、糞便、血液及腦脊液等樣本中發(fā)現(xiàn)此病毒，但目前臨床流行病學(xué)報(bào)道的人博卡病毒的陽(yáng)性檢出率相差較大，這可能與樣本類型、采樣時(shí)間、樣本處理程序、患者年齡、檢測(cè)方法敏感性和病情等有關(guān)。人博卡病毒多在呼吸道分泌物標(biāo)本中被檢出，因此通過(guò)呼吸道傳播的可能性很高，但亦不能排除糞-口傳播及血液傳播的可能性。人博卡病毒可以感染不同年齡組人群，而兒童為主要感染人群。人博卡病毒沒(méi)有明顯季節(jié)性，全年均可感染，但相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道感染多集中在冬春季節(jié)[13-14]。

3.1 國(guó)外人博卡病毒的流行狀況

人博卡病毒感染在不同國(guó)家和地區(qū)的發(fā)病率為1.5%～24.6%[14-15]。韓國(guó)的Jong等[16]收集2010～2011年1528例呼吸道感染的兒童檢測(cè)示187例人博卡病毒陽(yáng)性，陽(yáng)性率為12.2%，以12～24個(gè)月的患兒居多，感染高峰為6月份。越南的Tran等[17]收集了2010年4月～2011年5月急性呼吸道感染的患兒標(biāo)本1082份，陽(yáng)性率為7.2%，其中12～23個(gè)月患兒感染率高，從10月份至來(lái)年4月的旱季的感染率高于5月份到10月份的雨季。希臘的Katerina等[18]對(duì)1年內(nèi)收集的370例呼吸道感染患兒標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，人博卡病毒的感染率為3.2%，患兒平均年齡1.8歲，僅在寒冷的季節(jié)有檢出。沙特阿拉伯的Abdel-Moneim等[19]對(duì)80例收集于2012年1～5月的呼吸道感染患兒的鼻咽拭子進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈鎖反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)，人博卡病毒的感染率是22.5%，陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于其他國(guó)家和地區(qū)，其中以2歲以下的的患兒居多。日本學(xué)者Endo等[20]對(duì)204份血清樣本進(jìn)行特異性抗體的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)6歲以上呼吸道感染患兒中血清抗人博卡病毒抗體陽(yáng)性率為94%～100%，這可能于患兒感染人博卡病毒后機(jī)體產(chǎn)生的保護(hù)免疫有關(guān)。在消化道感染方面，伊朗學(xué)者M(jìn)onavari等[21]對(duì)200例年齡1～5歲因急性胃腸炎住院的患兒的糞便標(biāo)本進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)，有16例人博卡病毒陽(yáng)性，陽(yáng)性率為8%。

3.2 我國(guó)的流行情況

Chen等[22]對(duì)2009年1月～2011年3月長(zhǎng)庚兒童醫(yī)院113例2歲以下毛細(xì)支氣管炎的患兒做病毒檢測(cè)，查出人博卡病毒陽(yáng)性率為19.5%，為第二常見(jiàn)病原體。利蓓荃等[23]于2009年1月～2010年12月收集急性呼吸道感染的3826例患兒的痰標(biāo)本，人博卡病毒的陽(yáng)性率為7.13%，感染年齡多為1～12個(gè)月的患兒，發(fā)病季節(jié)以秋冬為主。肖霓光等[24]對(duì)2007年9月～2008年3月長(zhǎng)沙的773例急性下呼吸道感染患兒的鼻咽分泌物檢測(cè)，得到87例感染人博卡病毒，陽(yáng)性率為11.4%，感染年齡為18 d～64個(gè)月，冬春季流行。張琴等[25]選取2009年11月～2010年6月南京呼吸道感染患兒鼻咽吸取物標(biāo)本100份，檢測(cè)出5例感染人博卡病毒，陽(yáng)性率為5%。李曉燕等[26]收集2008年9月～2009年5月天津急性下呼吸道感染住院兒童的鼻咽吸取物標(biāo)本202份，其中感染人博卡病毒14例，陽(yáng)性率為6.9%，所有陽(yáng)性患兒的年齡均≤6歲，6月～12月齡患兒感染率最高，為14.3%。楊晶艷等[27]于2010年5月～2011年8月收集四川大學(xué)華西第二醫(yī)院呼吸道感染兒童的787例呼吸道分泌物標(biāo)本，其中65例人博卡病毒陽(yáng)性，檢出率為8.26%，其中33例混合感染其它呼吸道病毒，感染對(duì)象以＜3歲兒童為主，季節(jié)分布不明顯，以2010年5、7、8、12月檢出率較高。

4 人博卡病毒感染的臨床特征

人博卡病毒首先在有呼吸道癥狀的患者的分泌物中檢出，人博卡病毒與呼吸道感染的關(guān)系有較多、較深的文獻(xiàn)支持。長(zhǎng)沙地區(qū)87例感染人博卡病毒的患兒大部分出現(xiàn)陣發(fā)性干咳，其次是發(fā)熱（71.2%）、喘息（31.0%）、腹瀉（8.0%）及呼吸困難（5.7%），臨床診斷以支氣管肺炎、肺炎為主，分別占60.9%和23.0%，其次是毛細(xì)支氣管炎占10.3%，另外還有少數(shù)診斷為急性支氣管炎、支氣管哮喘和喉炎[24]。利蓓荃等[23]報(bào)道蘇州地區(qū)89例單純?nèi)瞬┛ú《靖腥竞粑栏腥净純褐性\斷為上呼吸道感染4例（4.49%），大葉性肺炎5例（5.62%），重癥肺炎4例（4.49%），支氣管肺炎76例（85.39%）。主要臨床癥狀有咳嗽86例（96.63%），發(fā)熱50例（56.18%），喘息41例（46.07%），胃腸道癥狀12例（13.48%），肺部啰音75例（84.27%）。人博卡病毒還可引起病毒血癥[28-30]，還有報(bào)道稱其與嬰幼兒喘息性疾病存在相關(guān)性[31-32]。人博卡病毒也可引起重癥感染，表現(xiàn)為缺氧、呼吸窘迫、喘息、咳嗽和發(fā)熱[33]，可并發(fā)氣胸、縱隔氣腫、皮下氣腫和急性呼吸衰竭，甚至危及生命[34]。另外，人博卡病毒在急性胃腸炎患兒的大便及腦炎患兒的腦脊液中也被檢出。前者主要是腹瀉和嘔吐等急性胃腸炎癥狀。Mitui等[35]報(bào)道2例嚴(yán)重腦炎死亡患兒的腦脊液及血液檢出人博卡病毒，提示人博卡病毒是導(dǎo)致此次嚴(yán)重腦炎的主要病原體。

5 實(shí)驗(yàn)室檢查

目前，國(guó)際上對(duì)人博卡病毒感染的診斷沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，電鏡、病毒分離培養(yǎng)法、分子生物學(xué)及免疫學(xué)方法均可檢測(cè)人博卡病毒，電鏡檢測(cè)比較直觀可靠，可對(duì)人博卡病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察，但其具有設(shè)備昂貴、操作技術(shù)要求高，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)且陽(yáng)性率低等缺點(diǎn)，故不適用于臨床[36]。人博卡病毒體外細(xì)胞培養(yǎng)增殖不易，Dijkman等[9]通過(guò)立體培養(yǎng)的呼吸道上皮實(shí)現(xiàn)了人博卡病毒的體外增殖，人博卡病毒體外的成功培養(yǎng)對(duì)其致病性等研究有所幫助。PCR法是目前臨床診斷人博卡病毒感染最常用的方法，具有快速、敏感等優(yōu)點(diǎn)，常規(guī)PCR可以對(duì)病毒DNA進(jìn)行定性，定量PCR可以檢測(cè)病毒載量[37]。免疫學(xué)方法可以對(duì)人體血清中的特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)，人博卡病毒感染早期血清中出現(xiàn)的IgM抗體2～3 d便可消失，不利于早期診斷，而隨后出現(xiàn)的IgG抗體在血清中存在時(shí)間較長(zhǎng)，因此多根據(jù)IgG抗體滴度的變化來(lái)診斷是否存在既往人博卡病毒感染[32]。

6 治療及展望

目前，尚無(wú)人博卡病毒感染的抗病毒藥物相關(guān)研究。西醫(yī)對(duì)于人博卡病毒感染的治療主要以抗病毒、對(duì)癥治療及預(yù)防并發(fā)癥為主，其療效也存在爭(zhēng)議。Schenck等[38]回顧性分析1例造血干細(xì)胞移植后的患兒，該患兒住院期間的鼻咽分泌物、血液、糞便標(biāo)本內(nèi)均檢測(cè)到人博卡病毒-1 DNA，然而在更昔洛韋、膦甲酸鈉治療后，人博卡病毒-1 DNA在血清、鼻咽部抽吸物、糞便標(biāo)本中均未檢測(cè)到。而Kupfer等[39]對(duì)1份呼吸道標(biāo)本中檢測(cè)到人博卡病毒-1 DNA的B細(xì)胞淋巴瘤患者注射更昔洛韋后臨床癥狀無(wú)明顯改善。

近年來(lái)中醫(yī)藥治療小兒病毒性肺炎進(jìn)展較快，研究?jī)?nèi)容廣泛。但對(duì)人博卡病毒肺炎的研究近乎空白，我們查閱了國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)，未見(jiàn)到一篇中醫(yī)藥關(guān)于人博卡病毒的報(bào)道。近年中醫(yī)藥對(duì)病毒性肺炎的研究已取得一定的進(jìn)展，汪受傳等[40]研究表明，金欣口服液對(duì)呼吸道合胞病毒（RSV）引起的病毒性肺炎有很好的療效。杜麗娜等[41]研究表明，槲皮素、虎杖苷、黃芩素、漢黃芩素、異鼠李素、大黃素甲醚對(duì)RSV具有直接滅活作用，是金欣口服液抗RSV的物質(zhì)基礎(chǔ)。除去以汪受傳等[40]及杜麗娜等[41]對(duì)RSV較為系統(tǒng)的臨床及實(shí)驗(yàn)室研究報(bào)告外，其余研究主要以散在的臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為主，較系統(tǒng)的證治標(biāo)準(zhǔn)研究相對(duì)較少。臨床多以癥狀體征診斷為主，經(jīng)病原學(xué)診斷確診者仍較少，治療上多以個(gè)人經(jīng)驗(yàn)為主，尚缺乏統(tǒng)一的治療標(biāo)準(zhǔn)。人博卡病毒作為新近發(fā)現(xiàn)病原體，在治療方面的研究目前近乎空白，中醫(yī)藥在抗病毒方面具有明顯優(yōu)勢(shì)，發(fā)揮中醫(yī)藥特色治療小兒病毒性肺炎，采用專方專藥治療單種病毒感染，在提高治愈率，降低病死率方面，發(fā)揮著重要的作用。

目前，關(guān)于人博卡病毒的西醫(yī)臨床研究資料較少且不完整，中醫(yī)藥對(duì)此病毒的臨床研究也近乎空白，因此值得我們深入研究。我們應(yīng)在前人對(duì)小兒病毒性肺炎多年臨床和科學(xué)研究的基礎(chǔ)上，建立合適的動(dòng)物模型，研究人博卡病毒感染的致病機(jī)制，進(jìn)一步對(duì)小兒博卡病毒性肺炎的證治規(guī)律進(jìn)行深入研究，運(yùn)用辨證論治的方法，在現(xiàn)代病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)的指導(dǎo)幫助下，研究專方專藥對(duì)該病毒的治療效果及機(jī)制，充分發(fā)揮中醫(yī)中藥的優(yōu)勢(shì)，提高小兒博卡病毒性肺炎的臨床療效，減少治療后的不良反應(yīng)及副作用，降低其發(fā)病率及病死率，并對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)、規(guī)范、多中心的臨床研究，總結(jié)出小兒博卡毒性肺炎的病癥診斷標(biāo)準(zhǔn)及有效的治療方法，進(jìn)而研發(fā)出有效的治療藥物，為兒童的健康成長(zhǎng)服務(wù)，這是近年來(lái)研究的重點(diǎn)。

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Study progress of Human Bocavirus infection of children

XING WuminHAN Xinmin
The Affiliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine,Jiangsu Province,Nanjing210029,China

Human bocavirus(HBOV)is a new pathogens,it is discovered from respiratory tract and digestive tract.The incidence,pathogenesis and treatment of HBOV are not clear,but the clinical detection rate of HBOV is high.It often causes severe acute lower respiratory infections.HBOV had great harm to the patient's life and health.At present,the effects drugs for the virus has not been developed by Western medicine,and the clinical research report of traditional Chinese medicine on the HBOV pneumonia in children was rare.Therefore,it is worth for us doing a further research.

Human Bocavirus;Children;Review recent progress

R373.1

A

1673-7210（2015）04（b）-0034-04

2015-01-14本文編輯：任念）

國(guó)家中醫(yī)藥管理局國(guó)家中醫(yī)臨床研究基地業(yè)務(wù)建設(shè)科研專項(xiàng)課題（編號(hào)JDZX2012102）。

邢吳敏（1988.4-），女，山西晉城人，南京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)兒科學(xué)專業(yè)2012級(jí)在讀碩士研究生；研究方向：小兒肺系疾病。

韓新民（1957.4-），男，博士，教授，主任醫(yī)師，南京中醫(yī)藥大學(xué)兒科教研室主任，江蘇省中醫(yī)院兒科副主任；研究方向：小兒呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病。