梓醇對(duì)糖尿病及其并發(fā)癥作用的研究進(jìn)展

梓醇對(duì)糖尿病及其并發(fā)癥作用的研究進(jìn)展

許瑞，劉莉，畢艷平，鄒國(guó)良

摘要：梓醇是從地黃根部分離出來(lái)的一種環(huán)烯醚萜類(lèi)化合物，具有降血糖、抗氧化、抗炎等藥理作用。本研究對(duì)其在糖尿病其并發(fā)癥的作用、機(jī)制、療效研究進(jìn)展作一綜述。對(duì)梓醇功能作進(jìn)一步研究，可為糖尿病及其并發(fā)癥的治療提供新的選擇。

關(guān)鍵詞：糖尿??；梓醇；藥理作用；進(jìn)展

中圖分類(lèi)號(hào)：R587R255

基金項(xiàng)目：黑龍江省自然科學(xué)基金(No.H201323)；黑龍江省博士后科研基金(No.LRB11381)；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)研究生創(chuàng)新科研基金

通訊作者：鄒國(guó)良,E-mail：zouguoliang198118@163.com.

收稿日期：(2014-08-04)

近年來(lái)很多中草藥中的活性單體物質(zhì)被分離提純，且其作用在相關(guān)藥理實(shí)驗(yàn)研究及臨床應(yīng)用中也得到了證實(shí)。梓醇是從中藥地黃根部分離提純的一種糖苷，是地黃的主要有效成分之一，具有降血糖、抗氧化、抗炎、抗腦血管損傷、抗心肌損傷、降血脂和抗癌等多種生物活性。本研究綜述了近年來(lái)梓醇對(duì)糖尿病及其并發(fā)癥作用機(jī)制、療效的研究進(jìn)展。

1梓醇對(duì)糖尿病的作用及其作用機(jī)制

1.1梓醇激活內(nèi)源性阿片物質(zhì)通路納曲酮或納洛酮是一種阿片受體拮抗劑。內(nèi)源性β-內(nèi)啡肽由腎上腺髓質(zhì)分泌、釋放入血，激活位于骨骼肌、肝等外周組織的阿片受體，磷酸化的阿片受體上調(diào)骨骼肌中葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-4(GLUT-4)的表達(dá)和抑制肝組織中丙酮酸羧激酶(PEPCK)的活性，從而增加骨骼肌對(duì)葡萄糖的攝取和減少肝糖異生。而胰島素缺陷將導(dǎo)致肝組織代謝的調(diào)節(jié)酶發(fā)生改變，如調(diào)節(jié)肝臟代謝的關(guān)鍵酶-PEPCK表達(dá)的增加。另外，骨骼肌GLUT-4的表達(dá)也是由胰島素所介導(dǎo)的。應(yīng)用50 mg/kg鏈脲菌素(streptozocin，STZ)注射于大鼠的腹腔誘導(dǎo)成糖尿病鼠，連續(xù)口服梓醇3 d。觀察到糖尿病鼠血漿中免疫活性類(lèi)β-內(nèi)啡肽(BER)升高，血糖下降，肝組織PEPCK表達(dá)減少和骨骼肌GLUT-4表達(dá)增加。進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)切除大鼠雙側(cè)腎上腺或去除阿片μ受體或應(yīng)用納曲酮或納洛銅可抑制梓醇的降糖活性，然而納曲酮或納洛銅還下調(diào)梓醇降低肝組織PEPCK和升高骨骼肌GLUT-4的mRNA和蛋白質(zhì)水平[1]。提示梓醇的降血糖活性與內(nèi)源性β-內(nèi)啡肽通路激活以及肝組織PEPCK和骨骼肌GLUT-4表達(dá)改變有關(guān)。

作者單位： 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院(哈爾濱 150040)，E-mail：xurui4112@163.com

1.2梓醇增強(qiáng)骨骼肌對(duì)葡萄糖的攝取、增加肝糖原的合成骨骼肌和肝臟是攝取、消耗和轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖的主要組織。在骨骼肌的碳水化合物代謝中，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜的過(guò)程是一個(gè)限速過(guò)程，主要依賴(lài)于胰島素介導(dǎo)的葡萄糖載體調(diào)控?；A(chǔ)代謝時(shí)，骨骼肌攝取葡萄糖較少，且葡萄糖以糖原的形式儲(chǔ)存于骨骼肌和肝臟。因此，胰島素介導(dǎo)的骨骼肌、肝臟等外周組織對(duì)葡萄糖的利用是血糖調(diào)節(jié)的主要途徑。經(jīng)尾靜脈注射STZ誘導(dǎo)的糖尿病鼠進(jìn)行靜脈糖耐量試驗(yàn)。結(jié)果顯示于股靜脈注射葡萄糖5 min和20 min后，經(jīng)梓醇預(yù)處理組鼠的血糖升高幅度顯著低于模型組。但在注射葡萄糖30 min后，兩組血糖無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示梓醇可增強(qiáng)葡萄糖在體內(nèi)的利用，且呈時(shí)間依賴(lài)性。進(jìn)一步研究觀察到靜脈注射梓醇的降糖活性在(0.01～0.1)mg/kg范圍內(nèi)與劑量呈正相關(guān)，但隨著劑量增加到0.15 mg/kg，梓醇的降糖活性不再增加。而且還研究了梓醇通過(guò)刺激STZ誘導(dǎo)的糖尿病鼠比目魚(yú)肌對(duì)葡萄糖的攝入來(lái)闡明葡萄糖利用發(fā)生變化的機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)梓醇刺激30 min后，比目魚(yú)肌對(duì)2-脫氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose，2-DG)的攝入呈濃度依賴(lài)性的從(26.55±0.90)pmol/(mg·5min)增加到了(33.08±1.62)pmol/(mg·5min)。提示梓醇增加糖尿病鼠骨骼肌對(duì)葡萄糖的攝取增加葡萄糖的利用。肝糖原分解是糖尿病患者空腹血糖升高的主要原因。而且，在糖酵解過(guò)程中肝糖原轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖。STZ誘導(dǎo)的糖尿病鼠肝細(xì)胞接受30 min梓醇培育后，其肝糖原的合成顯著增加，并呈濃度依賴(lài)性[2]。提示梓醇既可以增加肝糖原合成，又抑制肝糖原的分解。因此，梓醇通過(guò)增加糖尿病鼠葡萄糖的利用來(lái)降低血糖，且在外周組織利用葡萄糖方面具有類(lèi)胰島素作用，而不依賴(lài)于胰島素的存在。

1.3梓醇抑制碳水化合物水解酶活性，減少小腸對(duì)葡萄糖的吸收食物中的碳水化合物是人體的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一。碳水化合物首先被碳水化合物水解酶水解成寡聚糖、二聚糖，然后在二聚糖酶的催化下轉(zhuǎn)化為易于吸收的單糖。因此，限制和延遲腸道對(duì)碳水化合物的吸收將會(huì)有助于改善血糖濃度和減少糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生。糖尿病時(shí)，身體各部位組織結(jié)構(gòu)發(fā)生代謝紊亂和病理改變，如腸黏膜形態(tài)和功能的變化，即腸道高血糖狀態(tài)。碳水化合物水解酶是由腸黏膜所分泌。腸黏膜發(fā)生改變致使碳水化合物水解酶活性變化，如麥芽糖酶、蔗糖酶活性增強(qiáng)從而引起腸道對(duì)葡萄糖吸收增加，最終導(dǎo)致餐后高血糖。Deng等[3]通過(guò)腹腔注射STZ誘導(dǎo)大鼠成糖尿病模型，致使大鼠體重、口服蔗糖耐量(OSTT)和空腹血漿胰島素降低，而食物攝入、尿量、尿糖、空腹血糖和小腸二聚糖酶活性增加。連續(xù)灌胃給黃連丸提取物(梓醇和黃連素)3 d后能逆轉(zhuǎn)上述變化。黃連丸提取物還能抑制體外腸黏膜勻漿液中的蔗糖酶和麥芽糖酶的活性。黃連丸提取物通過(guò)抑制碳水化合物水解酶，尤其是蔗糖酶和麥芽糖酶的活性減少小腸對(duì)葡萄糖的吸收進(jìn)而發(fā)揮降血糖功效。同時(shí)，黃連丸提取物不僅降低糖尿病鼠空腹血糖，還降低餐后血糖。已有報(bào)道[4]，黃連素顯著降低小腸黏膜的二聚糖酶和α-葡萄糖苷酶的活性，并且抑制小腸黏膜刷狀緣的蔗糖酶-異麥芽糖酶復(fù)合物mRNA表達(dá)。而梓醇為黃連丸提取物的主要成分，可能也具有同樣的功效。

1.4梓醇改善胰島素抵抗

1.4.1梓醇與GLUT-4、IRs-1、IRs-1Ser307和CAP的關(guān)系GLUT-4是分布于人體脂肪、骨骼肌和心肌組織細(xì)胞內(nèi)主要的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，胰島素受體底物-1(IRs-1)參與胰島素信號(hào)傳導(dǎo)。胰島素通過(guò)與受體結(jié)合，激活I(lǐng)Rs-1，發(fā)生磷酸化的IRs-1再通過(guò)與PI3K的p85調(diào)節(jié)亞單位結(jié)合，催化pllo，激活PI3K進(jìn)而促進(jìn)胰島素介導(dǎo)的糖轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程。IRs-l絲氨酸307(IRs-1Ser3o7)磷酸化參與胰島素負(fù)反饋調(diào)節(jié)，它既影響IRs-1與胰島素受體的相互作用，又使IRs-1酪氨酸脫磷酸化，影響胰島素信號(hào)的下游傳導(dǎo)[5]，此為糖尿病時(shí)胰島素抵抗(IR)的主要分子機(jī)制。因此，增強(qiáng)胰島素信號(hào)傳導(dǎo)對(duì)改善IR至關(guān)重要。采用高糖聯(lián)合高胰島素誘導(dǎo)小鼠3T3-L1脂肪細(xì)胞建立IR模型，利用葡萄糖氧化酶法檢測(cè)到培養(yǎng)液中葡萄糖消耗量降低，以Westem Blot法檢測(cè)到GLUT-4蛋白和IRs-1蛋白表達(dá)降低和IRs-1 Ser307磷酸化蛋白表達(dá)增強(qiáng)。經(jīng)過(guò)5 μmoL梓醇干預(yù)后，培養(yǎng)液中葡萄糖的消耗量顯著增加，脂肪細(xì)胞中GLUT-4蛋白表達(dá)增強(qiáng)和IRs-1 Ser307磷酸化蛋白表達(dá)降低，但I(xiàn)Rs-1蛋白表達(dá)無(wú)顯著變化[6]。提示梓醇通過(guò)改變葡萄糖的消耗和細(xì)胞中GLUT-4蛋白和IRs-1Ser307蛋白的表達(dá)增強(qiáng)胰島素信號(hào)傳導(dǎo)進(jìn)而改善IR。陳立等[7]用同樣的方法再次觀察到上述現(xiàn)象，證實(shí)梓醇增強(qiáng)脂肪細(xì)胞GLUT-4表達(dá)，但梓醇對(duì)C-Cb1相關(guān)蛋白(C-Cb1 related protein，CAP)表達(dá)無(wú)顯著影響。

1.4.2梓醇與過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)的關(guān)系PPAR是一類(lèi)由配體調(diào)節(jié)的核激素受體，其表達(dá)減少超過(guò)生理活化與活性的中度均與胰島素抵抗有關(guān)系。在含或不含10 nmol/L胰島素的條件下，由地塞米松誘導(dǎo)的小鼠IR脂肪細(xì)胞經(jīng)5 μmoL梓醇干預(yù)后其葡萄糖消耗量和轉(zhuǎn)運(yùn)率較模型組明顯改善，但PPARγ-mRNA的表達(dá)與模型組無(wú)差異[8]。

1.4.3梓醇與炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α的關(guān)系于偉華等[9]發(fā)現(xiàn)糖尿病患者無(wú)論是否合并血管病變，其血清中炎癥因子 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平均明顯高于健康人，而且三種炎癥因子之間呈正相關(guān)。因此推測(cè)炎性因子在糖尿病及其血管并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用，且IL-1β、IL-6、TNF-α 可作為糖尿病及其血管并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的危險(xiǎn)指標(biāo)。炎癥因子可通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)炎癥反應(yīng)的信號(hào)傳導(dǎo)，抑制脂肪細(xì)胞等胰島素敏感細(xì)胞的IRs-l絲氨酸和酪氨酸磷酸化，進(jìn)而阻斷胰島素信號(hào)傳導(dǎo)導(dǎo)致IR，同樣可引起脂肪組織代謝紊亂，增加外周游離脂肪酸的釋放而導(dǎo)致IR。陰奇男等[10]觀察到梓醇不僅能改善小鼠IR脂肪細(xì)胞葡萄糖的消耗，還明顯減少脂肪細(xì)胞TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌和下調(diào)脂肪細(xì)胞TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA的表達(dá)。提示梓醇通過(guò)改善炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及其mRNA的表達(dá)來(lái)增加胰島素敏感性。

1.4.4梓醇與抵抗素Resistin的關(guān)系Resistin 是只存在于脂肪組織的多肽類(lèi)細(xì)胞因子。原代培養(yǎng)的前脂肪組織和未分化成熟的3T3-L1細(xì)胞中沒(méi)有resistin mRNA表達(dá)，但是這兩種細(xì)胞成熟為脂肪細(xì)胞后則表現(xiàn)為resistin mRNA高表達(dá)[11]。Resistin 能夠通過(guò)多種方式參與IR： ①通過(guò)控制肝糖原分解來(lái)調(diào)節(jié)糖耐量；②作為一種細(xì)胞因子，通過(guò)自分泌調(diào)節(jié)糖尿病早期功能分子，如胰高血糖素的合成，通過(guò)旁分泌降低胰島素介導(dǎo)的骨骼肌的糖攝?。虎塾绊懡M織內(nèi)部葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制而來(lái)抑制胰島素介導(dǎo)的葡萄糖吸收；④通過(guò)SCOS-3抑制胰島素受體絲氨酸磷酸化。既往研究，在胰島素存在時(shí)純化的resistin減少脂肪組織對(duì)葡萄糖的吸收，但有抗 resistin 抗體存在時(shí)，脂肪組織對(duì)葡萄糖的吸收顯著高于基礎(chǔ)水平時(shí)[12]。劉明等[13]研究發(fā)現(xiàn)，梓醇除了增加高糖高胰島素聯(lián)合誘導(dǎo)的鼠IR脂肪細(xì)胞糖分解量外，還抑制脂肪細(xì)胞resistin分泌及其mRNA的表達(dá)。說(shuō)明梓醇改善IR與改善脂肪細(xì)胞resistin分泌和表達(dá)相關(guān)。

2梓醇對(duì)糖尿病并發(fā)癥的作用及其作用機(jī)制

2.1梓醇對(duì)糖尿病腎病(DN)的作用及其作用機(jī)制糖尿病腎病是糖尿病最常見(jiàn)也是最嚴(yán)重的慢性微血管并發(fā)癥之一，可引起終末期腎臟病變。氧化應(yīng)激損傷、細(xì)胞因子的上調(diào)、腎臟血流動(dòng)力學(xué)異常、糖代謝紊亂、遺傳和環(huán)境因素等多種機(jī)制參與了糖尿病腎病的發(fā)展。生理狀態(tài)下，細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)的合成和降解處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，主要由基質(zhì)金屬蛋白酶和金屬蛋白酶抑制劑協(xié)同調(diào)節(jié)。高糖刺激ECM的分泌持續(xù)異常增加，將導(dǎo)致腎臟纖維化甚至衰竭[14]。細(xì)胞外基質(zhì)在腎小球系膜的進(jìn)行性蓄積被認(rèn)為與糖尿病腎病的進(jìn)展有密切關(guān)系[15]。因此，有效抑制ECM增殖和蓄積的療法，有可能阻止糖尿病腎病腎小球纖維化的進(jìn)展。

2.1.1梓醇改善血管緊張素Ⅱ等介導(dǎo)的ECM增殖、蓄積高糖增加糖尿病腎組織中的血管緊張素Ⅱ濃度，接著順序性激活腎小球中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、血小板源性生長(zhǎng)因子以及結(jié)締組織生長(zhǎng)因子，過(guò)度表達(dá)的生長(zhǎng)因子，尤其是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子引起下游信號(hào)Smad2/3磷酸化，導(dǎo)致ECM(主要是Ⅳ膠原和纖維連接蛋白)在腎小球系膜細(xì)胞增殖和蓄積[16]。因此，這些因子可作為腎組織纖維化早期的危險(xiǎn)指標(biāo)。Dong等[17]發(fā)現(xiàn)口服60 mg/kg和120 mg/kg梓醇可顯著減少糖尿病鼠腎臟體重指數(shù)、隨機(jī)血糖和糖化血清蛋白；改善血尿素氮、尿蛋白含量和腎臟病理變化；并降低皮質(zhì)內(nèi)血管緊張素Ⅱ，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子，結(jié)締組織生長(zhǎng)因子，纖維連接蛋白和Ⅳ膠原的水平，但組間血肌酐的水平無(wú)明顯差異。同時(shí)觀察到梓醇下調(diào)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子的mRNA表達(dá)。而口服30 mg/kg梓醇和在正常對(duì)照組加入梓醇上述效果不顯著。因此，梓醇有效改善糖尿病腎組織功能和結(jié)構(gòu)的早期改變與下調(diào)血管緊張素Ⅱ、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子的分泌及其mRNA的表達(dá)來(lái)減少ECM增殖和蓄積有關(guān)。

2.1.2梓醇改善胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)介導(dǎo)的ECM增殖、蓄積IGF-1不僅促進(jìn)腎小球系膜ECM，如纖維連接蛋白和各型膠原增殖、蓄積引起腎小球基膜增厚和硬化，還抑制金屬基質(zhì)蛋白酶的活性，阻滯ECM降解[18]，促進(jìn)糖尿病腎病發(fā)展。IGF-1 磷酸化激活下游信號(hào)通路PI3K/PKB或Akt，抑制細(xì)胞凋亡促進(jìn)其分化、增殖[19]。一次性腹腔注射50 mg/kgSTZ造成大鼠糖尿病模型，且在PAS 及 PASM 染色下大鼠腎小球ECM明顯增多，系膜細(xì)胞增生，基膜增厚和少數(shù)結(jié)節(jié)性腎小球硬化改變。連續(xù)腹腔注射5 mg/kg梓醇2周后上述病理改變均有不同程度減輕，這與部分下調(diào)糖尿病大鼠腎小球系膜細(xì)胞 IGF-1 和 Akt 的表達(dá)有關(guān)。但對(duì)糖尿病大鼠 24 h 尿白蛋白、尿 MA/Cre值、血肌酐、尿素氮、肌酐清除率等腎功能指標(biāo)，血糖、糖化血紅蛋白以及腎重/體重比值影響不明顯[20]，這可能與劑量和時(shí)間窗相關(guān)。提示該劑量該時(shí)間窗下的梓醇對(duì)腎臟的保護(hù)不依賴(lài)于其降糖作用。

2.2梓醇對(duì)糖尿病腦病的作用及其作用機(jī)制

2.2.1與抗氧化應(yīng)激相關(guān)糖尿病腦組織功能和結(jié)構(gòu)的慢性進(jìn)行性改變主要以認(rèn)知功能障礙以及記憶力和智力的下降為特征。在高血糖的狀態(tài)下，活性氧自由基增加，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)等內(nèi)源性抗氧化劑活性下降，導(dǎo)致活性氧自由基的清除受到抑制，增強(qiáng)體內(nèi)氧化應(yīng)激，進(jìn)而或直接傷害海馬和大腦皮質(zhì)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸而引起細(xì)胞壞死，或間接影響細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)路徑和基因調(diào)節(jié)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。因此，氧化應(yīng)激參與糖尿病腦病的發(fā)生發(fā)展。STZ誘導(dǎo)的糖尿病腦病鼠，常伴有隨機(jī)血糖升高，GSH-Px、SOD、過(guò)氧化氫酶(CAT)活性下調(diào)和丙二醛(MDA)濃度升高，海馬CA1細(xì)胞數(shù)量和神經(jīng)生長(zhǎng)因子含量下降導(dǎo)致神經(jīng)元損害和認(rèn)知功能障礙。連續(xù)灌胃予梓醇6周可下調(diào)氧化應(yīng)激，減輕或阻止糖尿病神經(jīng)元損傷和認(rèn)知功能障礙。深入研究發(fā)現(xiàn)梓醇的腦保護(hù)作用對(duì)藥用劑量呈依賴(lài)性，10 mg/kg梓醇已顯示出明顯的保護(hù)作用，隨著劑量的增加，其保護(hù)作用增強(qiáng)。但100 mg/kg梓醇干預(yù)組海馬CA1區(qū)存活神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量與正常對(duì)照組無(wú)差異。且梓醇在劑量為10 mg/kg時(shí)對(duì)血糖和體重的影響不顯著[21]。因此，梓醇可通過(guò)抗氧化應(yīng)激來(lái)改善糖尿病腦組織結(jié)構(gòu)和功能的改變。

2.2.2與神經(jīng)元Caveoolin/ MAPK /CREB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活有關(guān)持續(xù)高血糖影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)生理功能，特別易造成空間認(rèn)知能力障礙 。王璐等[22]研究發(fā)現(xiàn)，于小鼠腹腔注射四氧嘧啶誘導(dǎo)成糖尿病小鼠，其空間學(xué)習(xí)記憶能力下降和海馬胰島素受體激活的相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路表達(dá)下調(diào)。但經(jīng)過(guò)連續(xù) 15 d腹腔注射梓醇后，利用Morris水迷宮訓(xùn)練檢測(cè)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力，顯示梓醇治療組的學(xué)習(xí)記憶能力均明顯高于糖尿病組；并利用 Western Blot 檢測(cè)小鼠腦內(nèi)海馬學(xué)習(xí)記憶相關(guān)信號(hào)蛋白的表達(dá)，顯示糖尿病組P42/P44 MAPK蛋白磷酸化水平、窖蛋白-1(Caveoolin- 1)的表達(dá)明顯低于對(duì)照組，梓醇治療后上述明顯上調(diào)；糖尿病組轉(zhuǎn)錄因子 CREBZ 的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，梓醇治療后CREBZ 的表達(dá)下調(diào)。而糖尿病組蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)和生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(Growth Associated Protein 43，GAP -43)表達(dá)較對(duì)照組明顯降低，但梓醇治療組的表達(dá)與糖尿病組無(wú)顯著性差異。提示梓醇可能通過(guò)激活神經(jīng)元Caveoolin/ MAPK /CREB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路提高糖尿病小鼠空間學(xué)習(xí)記憶的能力，而非PKC-GAP -43磷酸化途徑發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。

2.3梓醇對(duì)糖尿病周?chē)窠?jīng)病變的作用及其作用機(jī)制IGF-1具有促進(jìn)神經(jīng)元修復(fù)和軸突生長(zhǎng)、抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡或壞死和恢復(fù)神經(jīng)細(xì)胞線(xiàn)粒體的功能改變等活性。參與糖尿病神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制可能與IGF-1通路有關(guān)，即通過(guò)IGF-1與IGF-1受體結(jié)合，IGF-1受體酪氨酸自動(dòng)磷酸化后，順序性激活PI3K/Akt信號(hào)通路、下游分子caspase-9，介導(dǎo)細(xì)胞分化、增殖和抗細(xì)胞凋亡。在糖尿病大鼠模型中，模型組和腹腔注射5 mg/kg梓醇干預(yù)2周組間大鼠的體重、血糖和糖化血紅蛋白，以及反映神經(jīng)電生理的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MNCV)、感覺(jué)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(SNCV)和F波的最短潛伏期(minFLat)均無(wú)顯著差異。而利用透射電鏡觀察到與正常大鼠相比，糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)有明顯的髓鞘變性，梓醇干預(yù)后其有明顯的改善。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)梓醇上調(diào)IGF-1和Akt的表達(dá)，但均低于正常對(duì)照組[23]。提示糖尿病周?chē)窠?jīng)病變(DPN)的發(fā)生發(fā)展與PI3K-Akt通路被阻斷相關(guān)，而梓醇對(duì)糖尿病大鼠周?chē)窠?jīng)的保護(hù)作用與上調(diào)IGF-1表達(dá)，部分改善其傳導(dǎo)通路的活性有關(guān)，并且不影響血糖的變化。

3展望

梓醇作為一種小分子的天然藥物對(duì)糖尿病及其并發(fā)癥如糖尿病腎病、糖尿病腦病和糖尿病周?chē)窠?jīng)病變有一定的防治作用，具有激活內(nèi)源性β-內(nèi)啡肽通路、增強(qiáng)骨骼肌對(duì)葡萄糖的攝取、增加肝糖原的合成、減少小腸對(duì)葡萄糖的吸收、改善IR、減少ECM增殖和蓄積以及抗氧化等藥理作用。這些藥理作用表明梓醇在治療糖尿病及其并發(fā)癥方面有著光明的前景。因此，對(duì)梓醇作用機(jī)制做深入研究，可為糖尿病及其并發(fā)癥藥物的開(kāi)發(fā)和糖尿病及其并發(fā)癥的治療奠定一定的基礎(chǔ)，故其具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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(本文編輯王雅潔)