垂體腺瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶－2和β－連環(huán)蛋白的表達與其侵襲性的相關(guān)性研究

李偉強，楊勁松

(1.太康縣人民醫(yī)院，河南 周口461400;2.鄭州大學實驗動物中心，河南 鄭州450052)

垂體腺瘤常見的顱內(nèi)神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，大多數(shù)為良性，預(yù)后較好，但有部分患者具有一定的侵襲性，這與垂體腺瘤復(fù)發(fā)、惡性傾向等具有有關(guān)關(guān)系［1］。但是，目前關(guān)于垂體腺瘤的侵襲性機制及對預(yù)后的影響尚未完全闡明?；|(zhì)金屬蛋白酶－2 和β－連環(huán)蛋白均是與腫瘤有關(guān)的具有多種功能的蛋白，作者采用免疫組化S-P 法檢測垂體腺瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶－2 和β－連環(huán)蛋白的表達，并分析兩者表達水平與垂體腺瘤侵襲性的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 入組2010年1月至2014年6月鄭州大學第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科和太康縣人民醫(yī)院神經(jīng)外科開顱或微創(chuàng)手術(shù)切除的垂體腺瘤組織83 例，所有組織標本均經(jīng)病理組織學確診，男47 例，女36 例，年齡31 ～76 歲，中位年齡45 歲;病理類型:泌乳素腺瘤35 例，生長激素腺瘤17 例，混合性腺瘤13 例，促腎上腺皮質(zhì)激素腺瘤9 例，無功能性腺瘤9 例;根據(jù)Wilson改良Hardy 分類系統(tǒng)分級分期法［2］對全組87 例垂體腺瘤進行分期，根據(jù)分期結(jié)果將其分為2 類，其中侵襲性垂體腺瘤40 例、非侵襲性垂體腺瘤43 例。

1.2 免疫組化S-P 法檢測垂體腺瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-2 和β-連環(huán)蛋白的表達 所有標本均經(jīng)質(zhì)量分數(shù)4%甲醛固定、石蠟包埋，然后制成4 μm 切片，按照免疫組化S-P 試劑盒說明書進行垂體腺瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶－2 和β－連環(huán)蛋白表達檢測，并以已知陽性組織切片作為陽性對照，以PBS 代替一抗作為陰性對照。本研究所用鼠抗人基質(zhì)金屬蛋白酶－2和β－連環(huán)蛋白單克隆抗體及免疫組化S-P 試劑盒均購自福州邁新生物工程有限公司。

1.3 結(jié)果評判 所有切片均在高倍鏡下，隨機取5 個視野，用全自動彩色病理圖像分析儀測定其灰度值，并取其平均數(shù)作為最終結(jié)果，灰度值越高，表達水平越低;灰度值越低，表達水平越高。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 17.0 進行數(shù)據(jù)處理，灰度值用±s 表示，2 組之間比較采用t 檢驗，并采用Pearson 相關(guān)分析法分析兩者的相關(guān)性，檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

基質(zhì)金屬蛋白酶－2 表達于垂體腺瘤細胞的胞漿內(nèi)，β－連環(huán)蛋白表達于垂體腺瘤細胞的細胞膜及少量細胞漿內(nèi)，兩者均染色呈淺黃色至棕黃色。根據(jù)圖像分析結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)，侵襲性垂體腺瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶－2 的灰度值為137.4 ±9.6，顯著低于非侵襲性垂體腺瘤的173.8 ±15.4，提示侵襲性垂體腺瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶－2 的表達水平顯著高于非侵襲性垂體腺瘤(P ＜0.05);侵襲性垂體腺瘤組織中β－連環(huán)蛋白的灰度值為157.6 ±13.4，顯著高于非侵襲性垂體腺瘤的145.2 ±10.1，提示侵襲性垂體腺瘤組織中β－連環(huán)蛋白的表達水平顯著低于非侵襲性垂體腺瘤(P ＜0.05)。經(jīng)Pearson 相關(guān)分析法分析后發(fā)現(xiàn)，垂體腺瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶－2 和β－連環(huán)蛋白的表達呈負相關(guān)(r=－0.637，P ＜0.05)。

3 討論

垂體腺瘤常見的顱內(nèi)神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，發(fā)病率僅次于腦膠質(zhì)瘤和腦膜瘤，垂體腺瘤大多數(shù)為良性，經(jīng)微創(chuàng)或開顱手術(shù)切除后預(yù)后良好，但有部分患者腫瘤組織具有一定的侵襲性，使得腫瘤組織切除不干凈，易于復(fù)發(fā)，以及向周圍組織浸潤［1－3］。基質(zhì)金屬蛋白酶－2是基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員之一，在細胞外基質(zhì)的降解中具有重要作用，能夠促進細胞外基質(zhì)的降解，破壞基底膜，使腫瘤細胞易于向周圍擴散，發(fā)生腫瘤的侵襲遷移，其已經(jīng)被證實在胃癌、乳腺癌、宮頸癌等多種實體瘤中存在高表達，并促進腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移等［4］。本文結(jié)果顯示，侵襲性垂體腺瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶－2 的表達顯著高于非侵襲性垂體腺瘤，提示基質(zhì)金屬蛋白酶－2 可能在垂體腺瘤的侵襲性發(fā)生中具有促進作用，這與蔡華等［4］的研究結(jié)果一致。β－連環(huán)蛋白是由CTNNB1 基因編碼的一種多肽鏈蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量約為92 000 ～95 000，其既是同型細胞間黏附連接的主要結(jié)構(gòu)成分，又是Wnt 信號傳導(dǎo)的下游元件。正常情況下，β－連環(huán)蛋白大多與細胞膜上的E－鈣黏蛋白結(jié)合，形成復(fù)合體，介導(dǎo)同型細胞之間的黏附，維持上皮細胞的完整性和極性，精確調(diào)控細胞的遷移［4］;少量存在于細胞漿中的β－連環(huán)蛋白則發(fā)揮介導(dǎo)Wnt 信號傳導(dǎo)的作用［5］。研究［6－7］證實，多種惡性腫瘤組織中存在β－連環(huán)蛋白的異常表達，β－連環(huán)蛋白表達水平的高低可以作為獨立的腫瘤預(yù)后評估指標。本研究結(jié)果顯示，侵襲性垂體腺瘤組織中β－連環(huán)蛋白的表達水平顯著低于非侵襲性垂體腺瘤，提示減少β－連環(huán)蛋白表達可能具有誘發(fā)垂體腺瘤侵襲的作用，這與夏多貴等［8］的研究結(jié)果一致。另外，本研究結(jié)果還顯示，垂體腺瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶－2和β－連環(huán)蛋白的表達呈負相關(guān)關(guān)系，提示兩者在垂體腺瘤組織侵襲性發(fā)生的過程中相互影響?？傊?，垂體腺瘤組織中存在基質(zhì)金屬蛋白酶－2 和β－連環(huán)蛋白的異常表達，其表達水平檢測可用于垂體腺瘤侵襲性的評估。

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