丁歡+胡嵐+龍莎+朱良紅+何勇
摘要:本文采用幾種化學(xué)和酶處理方法對(duì)蠶絲進(jìn)行脫膠,探索蠶絲的最佳脫膠方法。研究結(jié)果表明,生物酶法脫膠條件溫和,脫膠率較高,高達(dá)90%~100%,通過掃描電子顯微鏡(SEM)觀察各種脫膠絲的微觀表面圖,生物酶法脫膠對(duì)絲素表面不會(huì)產(chǎn)生損傷。因此得出結(jié)論生物酶法綜合脫膠效果較為理想。
關(guān)鍵詞:生絲;脫膠;脫膠率;SEM表征
1 ? ?引言
絲膠是一種球狀蛋白,產(chǎn)生于蠶體的中部絹絲腺[1],以鱗片狀不規(guī)則地包覆在從后部絹絲腺進(jìn)入中部絲腺腔內(nèi)的絲素表面,并貯存在腺腔中,約占繭絲總重量的25%。絲膠對(duì)絲素起保護(hù)作用,但過多的絲膠會(huì)影響蠶絲的光澤和手感,還會(huì)影響其漂白效果,導(dǎo)致染色不勻,因此,蠶絲上的絲膠必須去除??偨Y(jié)現(xiàn)有的蠶絲脫膠方法主要有:水浴煮沸脫膠、碳酸鈉脫膠、中性皂脫膠、高溫高壓脫膠及酶脫膠等方法[2-4]。由于絲膠對(duì)于化學(xué)藥劑的敏感性比絲素高,因此有研究設(shè)法通過化學(xué)方法對(duì)蠶絲進(jìn)行脫膠。化學(xué)脫膠的原理是利用絲膠和絲素對(duì)于堿類、無機(jī)酸等化學(xué)藥劑穩(wěn)定性的差異而去除絲膠。隨著研究的不斷深入,用生物酶對(duì)蠶絲進(jìn)行脫膠的研究也越來越廣泛。生物酶脫膠的主要原理是不同酶對(duì)蛋白質(zhì)的水解具有專一性和高效性。眾所周知,絲素和絲膠都是蛋白質(zhì),但兩者在氨基酸的組成和結(jié)構(gòu)上差異甚大,前者屬線狀蛋白質(zhì),后者屬球狀蛋白質(zhì)。絲膠中極性側(cè)鏈氨基酸含量較多,含量高達(dá)74%左右,而非極性側(cè)鏈氨基酸占25.39%[5-8]。然而,絲素中含量最高的是丙氨酸和甘氨酸,這些氨基酸形成結(jié)構(gòu)緊密結(jié)晶區(qū),所以不易發(fā)生酶解反應(yīng)[9-10]。因此,利用蛋白酶能先與絲膠生成中間物,然后再經(jīng)水解放出原來的酶,通過適當(dāng)?shù)牡鞍酌复偈菇z膠水解。本文采用幾種化學(xué)和酶處理方法對(duì)蠶絲進(jìn)行脫膠,探索蠶絲的最佳脫膠方法。
2 ? ?試驗(yàn)部分
材料:生絲20/22D。
試劑:木瓜蛋白酶,胰蛋白酶,堿性蛋白酶,中性蛋白酶,風(fēng)味蛋白酶(南寧龐博生物工程有限公司),Na2CO3,Na3PO4,硼酸,硼砂,尿素,丁二酸(成都方正化工有限責(zé)任公司)。
儀器型號(hào)具體如表1。
表1 ? ?儀器型號(hào)廠家列表
3 ? ?脫膠條件
對(duì)于化學(xué)脫膠方法研究得比較廣泛也比較成熟,因此我們參考張雨青[11]的脫膠方法進(jìn)行了化學(xué)脫膠方法的條件設(shè)計(jì)。對(duì)于生物酶法脫膠條件的設(shè)計(jì),根據(jù)各種酶的最高酶效條件進(jìn)行脫膠條件的設(shè)計(jì),具體各種試劑的條件如表2所示。
4 ? ?結(jié)果與討論
4.1 ?脫膠率
對(duì)本研究中各種脫膠條件進(jìn)行3次重復(fù)取平均值,按照公式(1),計(jì)算得到各種脫膠方法對(duì)生絲20/22D進(jìn)行脫膠后的脫膠率,將所有結(jié)果匯總?cè)鐖D1所示。首先,我們可以明顯看出,用生物酶法脫膠整體的脫膠率均高于幾種化學(xué)脫膠方法。其次,化學(xué)方法中脫膠率最高的為尿素,是在強(qiáng)堿及高溫劇烈條件下對(duì)蠶絲進(jìn)行脫膠,脫膠率最高達(dá)到22%左右,而用蛋白酶脫膠條件均比較溫和,用蛋白酶脫膠除風(fēng)味蛋白酶外,本研究中其余5種蛋白酶的脫膠率均在25%。同時(shí),化學(xué)脫膠會(huì)產(chǎn)生大量污水,以目前的生產(chǎn)技術(shù),每加工1t的蠶絲就會(huì)有150kg~250kg的絲膠蛋白隨生產(chǎn)廢水流失,致使生產(chǎn)廢水中絲膠等有機(jī)物含量嚴(yán)重超標(biāo),使水體富營(yíng)養(yǎng)化并喪失自凈能力[12-13]。而蛋白酶可以循環(huán)利用且可以通過簡(jiǎn)單的高溫方法進(jìn)行滅活。因此,利用蛋白酶脫膠是一種簡(jiǎn)便高效,節(jié)能減排的綠色型脫膠方法。
脫膠率 (%) = [(A0-A1)/A0] × 100 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? (1)
其中:A0——脫膠前生絲試樣的干重,g;
A1——脫膠后生絲試樣的干重,g。
4.2 ?掃描電子顯微鏡(SEM)表征
脫膠效果不但影響蠶絲的光澤和手感,還會(huì)影響其漂白效果和染色效果等各種后加工工序,因此,本文對(duì)各種脫膠方法脫膠前后試樣進(jìn)行了掃描電子顯微鏡(SEM)觀察,結(jié)果如圖2所示。首先,通過觀察發(fā)現(xiàn)化學(xué)脫膠方法中因脫膠率低,脫膠不完全,因此脫膠后絲素表面相應(yīng)不同程度附著未脫去的絲膠。而相比之下,由于生物蛋白酶脫膠效率普遍較高,所以蠶絲表面都比較光滑平整,脫膠較為干凈。由于生物酶法脫膠條件比較溫和,因此脫膠后絲素表面幾乎沒有出現(xiàn)損傷和刻痕,而較為苛刻的化學(xué)條件下脫膠后絲素表面產(chǎn)生了不同程度的損傷和刻痕。綜上所述,生物酶法脫膠是一種簡(jiǎn)單高效、節(jié)能減排、綠色環(huán)保的理想脫膠法。
5 ? ?結(jié)論
比較不同方法脫膠,效果最好的是酶脫膠,酶脫膠過后絲素表面光潔,透明,基本無損傷。酶脫膠具有工序少、時(shí)間短、節(jié)約能源、利于環(huán)保和降低成本等優(yōu)勢(shì),是脫膠工藝發(fā)展的重點(diǎn)。其中,木瓜蛋白酶脫膠綜合效果最好。
參考文獻(xiàn):
[1] 楊百春,王祥榮.絲膠及其應(yīng)用[J].國(guó)外絲綢,2000,(5):32.
[2] 張雨青.蠶絲脫膠方法的比較分析[J].蠶業(yè)科學(xué),2002,2(1):75-79.
[3] 李維賢,趙耀明,王朝陽,等.蠶繭的高溫高壓水脫膠研究[J].紡織學(xué)報(bào),2003,(2):164-166.
[4] 蔣少軍,吳紅玲.蠶絲的酶處理[J].四川絲綢,2002,(4):23-25.
[5] 黃君霆.蠶絲纖維組成的研究[J].蠶桑通報(bào),2001,32(4): 1-5.
[6] 封平.蠶絲蛋白的結(jié)構(gòu)及食用性研究[J].食品研究與開發(fā),2004, 25(6): 51-54.
[7] 張?jiān)氯A,徐安英.蠶絲纖維超細(xì)結(jié)構(gòu)的研究[J].國(guó)外絲綢,2006, (6): 1-2.
[8] 劉永成,邵正中,孫玉宇.蠶絲蛋白的結(jié)構(gòu)和功能[J].高分子通報(bào),1998,3:17-23.
[9] 鄭今歡,邵建中,劉今強(qiáng).蠶絲絲素纖維中氨基酸在絲素纖維的徑向分布研究[J].高分子學(xué)報(bào),2002,(6):818-823.
[10] 聞?shì)督?,王輝,朱新生.絲素蛋白的構(gòu)象與結(jié)晶度[J].紡織學(xué)報(bào),2005,26(1): 110-112.
[11] 張雨青.蠶絲脫膠方法的比較分析[J].蠶業(yè)科學(xué),2002,28(1):75-79.
[12]梁秀玲,高曉坤.家蠶繭絲膠的利用與回收技術(shù)研究綜述[J].廣西蠶業(yè).2010,47(4):40-44.
[13] M, Mondal, K, Trivedy, S. Nirmal Kumar. The silk proteins, sericin and fibroin in silkworm, Bombyx mori Linn,-a review [J]. Casplan journal of Environmental Sciences, 2007,5(2):63-76.
(作者單位:重慶纖維檢驗(yàn)局)