精氨酸酶-1、肝細(xì)胞抗原和磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3 的表達(dá)在肝癌中的意義

劉愛玲 田芝奧 王欣霖

1.江蘇省如皋市中醫(yī)院病理科（江蘇 如皋，226500）2.江蘇省如皋市人民醫(yī)院感染科

肝細(xì)胞肝癌是我國最常見和高發(fā)的惡性腫瘤之一，已成為惡性腫瘤中的第2 位殺手［1］。遺傳背景、食用黃曲霉毒素、乙型肝炎及丙型肝炎病毒感染、肝硬化、低硒、乙醇、促孕藥物均是肝細(xì)胞癌的促癌因素［2］，近年來有逐漸上升的趨勢。盡管肝癌是較常見的腫瘤，但在臨床實際工作中如何正確區(qū)分良性與惡性、區(qū)分原發(fā)還是轉(zhuǎn)移的腫瘤仍是病理醫(yī)師經(jīng)常遇到的問題。本文就我院近年來肝癌病例進(jìn)行回顧性分析，比較精氨酸酶-1（Arg-1）、肝細(xì)胞抗原（Hep Par 1）、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）在肝癌、肝良性上皮性腫瘤的表達(dá)情況，探討它們聯(lián)合應(yīng)用在肝臟腫瘤的診斷和鑒別診斷上的意義。

1 資料與方法

1.1 病例來源 收集2009年1月—2013年4年間進(jìn)行肝癌手術(shù)及肝臟穿刺標(biāo)本11例，4例肝臟良性上皮性腫瘤標(biāo)本。

1.2 免疫組織化學(xué)染色 免疫表型檢測采用Maxvision 一步法。Arg-1 兔抗人單克隆抗體，GPC-3 鼠抗人單克隆抗體、Hep Par 1 鼠單克隆抗體均購自Maixin-Bio 公司。Arg-1、GPC-3、Hep Par 1 均以檸檬酸鹽緩沖液進(jìn)行抗原修復(fù)，先高火3 min，低火15 min 后自然冷卻。用已知陽性的標(biāo)本作為陽性對照，用PBS 代替一抗作為陰性對照。Arg-1 為彌漫胞質(zhì)著色、部分胞核著色，GPC-3 為胞質(zhì)胞、膜著色，Hep Par 1 為胞質(zhì)著色。

2 結(jié)果

Arg-1 在8例原發(fā)性肝癌中有7例表達(dá)（87.5%），3例轉(zhuǎn)移性肝癌中1例表達(dá)（33.3%），在4例肝良性上皮性腫瘤均有表達(dá)（100%）；Hep Par 1 在8例原發(fā)性肝癌中5例表達(dá)（62.5%），在3例轉(zhuǎn)移性肝癌中1例表達(dá)（33.3%），在4例肝良性上皮性腫瘤中均有表達(dá)（100%）；GPC-3 在8例原發(fā)性肝癌中6例表達(dá)（75.0%），在3例轉(zhuǎn)移性肝癌中1例表達(dá)（33.3%），在肝良性上皮性腫瘤中無表達(dá)。Arg-1 在原發(fā)性肝癌中表達(dá)率為87.5%為最高，遠(yuǎn)高于Hep Par 1、GPC-3；GPC-3 在原發(fā)性肝癌表達(dá)率75%，在良性腫瘤中無表達(dá)；Arg-1、Hep Par 1 在肝良性腫瘤均100%表達(dá)，可見Arg-1 敏感性最好，GPC-3 在肝癌中的表達(dá)最特異，是鑒別良惡性腫瘤的首選標(biāo)記；Hep Par 1 在原發(fā)性肝癌中也有較高表達(dá)62.5%，也是較特異的指標(biāo)。

3 討論

對肝上皮性腫瘤的準(zhǔn)確診斷和鑒別診斷是關(guān)系到是否能得到正確合理治療的關(guān)鍵和前提，這就需要病理醫(yī)生要有較高的診斷水準(zhǔn)和豐富的經(jīng)驗，但實際工作中特別是基層醫(yī)院醫(yī)生由于肝臟標(biāo)本數(shù)量少，經(jīng)驗不夠豐富，僅靠HE（蘇木素-伊紅）染色和有限的免疫組化指標(biāo)給診斷造成了困難。如何利用現(xiàn)有的條件對肝上皮性腫瘤準(zhǔn)確診斷，一直是我們探索的目標(biāo)。

顯微鏡下，肝細(xì)胞癌細(xì)胞學(xué)類型主要有肝細(xì)胞型、透明細(xì)胞型、梭形細(xì)胞型（肉瘤樣細(xì)胞型）、巨細(xì)胞型、鱗狀細(xì)胞型等，其組織學(xué)類型有梁索型、假腺管型、實體型（致密型）、硬化型?？梢姀浡愿胃]樣血管網(wǎng)，CD34 可證實，為重要的診斷依據(jù)。由于核膜內(nèi)折封入部分胞質(zhì)所致肝癌細(xì)胞中還可常見核內(nèi)包涵體，有的胞漿中可見Mallory透明小體，類似于酒精性肝病中的圓形透明小體（內(nèi)含有甲胎蛋白等物質(zhì)），這些都是診斷肝細(xì)胞癌的依據(jù)。

肝細(xì)胞癌的發(fā)展是一個漸進(jìn)的過程，大多數(shù)都經(jīng)歷從肝炎、肝硬化、異型增生結(jié)節(jié)到癌的過程。異型增生結(jié)節(jié)與高分化癌的鑒別一直是個難點和討論的熱點，肝細(xì)胞本身的形態(tài)多樣性，使得和肝結(jié)節(jié)、肝腺瘤等良性腫瘤在病理形態(tài)上有重疊，加之，肝臟又是一個惡性腫瘤易轉(zhuǎn)移的臟器，常會給實際診斷工作帶來困難。因此，僅僅依靠HE 染色和目前有限的免疫組織化學(xué)檢查，難免造成誤診、漏診，故回顧性分析我院肝上皮性腫瘤病例并學(xué)習(xí)參考現(xiàn)有文獻(xiàn)資料，希望能運用新手段對肝臟腫瘤的診斷與鑒別診斷有所幫助。

Arg-1 是肝臟鳥氨酸循環(huán)中的催化酶之一，在鳥氨酸循環(huán)的最后階段起催化作用，在肝臟中有較高表達(dá)，對人體氨毒有重要解毒功能。近年來有學(xué)者認(rèn)為，Arg-1 在肝臟腫瘤中有高表達(dá)率特異性96%，敏感性72%，并且高于Hep Par 1 和GPC-3［3，4］，因此學(xué)者提出它是一種鑒別肝臟腫瘤的標(biāo)志物，尤其是在肝轉(zhuǎn)移性腫瘤和肝腫瘤轉(zhuǎn)移到其他臟器的鑒別診斷中有重要意義。本研究顯示，Arg-1 在8例肝細(xì)胞癌中有7例表現(xiàn)為彌漫的胞質(zhì)或胞核陽性，敏感率為87.5%；Hep Par 1 在肝細(xì)胞癌中的陽性率為62.5%，GPC-3 在肝細(xì)胞癌中的陽性率為75%，兩者均低于Arg-1 的陽性率，這與文獻(xiàn)中報導(dǎo)一致。

有學(xué)者對GPC-3 在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)情況有了較多報道，GPC-3 在肝細(xì)胞癌中的陽性表達(dá)率為72%～85%［5］，本組研究為75%。在癌旁肝細(xì)胞、4例良性病變中GPC-3 均無表達(dá)，可見GPC-3 對肝細(xì)胞癌有較高的特異性，在鑒別肝細(xì)胞癌和肝良性病變中有重要意義，所以我們建議將GPC-3 與Arg-1 聯(lián)用，這將很大程度上提高肝臟腫瘤的良惡性鑒別的準(zhǔn)確性。

Hep Par 1 是一種用小鼠抗人肝細(xì)胞抗原（Hepatocyte IgG1）克隆出的單克隆抗體，在其他組織中不出現(xiàn)［6］。有學(xué)者報導(dǎo)其敏感性為80%～90%，特異性為100%［7］。本觀察其在肝細(xì)胞癌中陽性表達(dá)率為62.5%，在肝良性腫瘤中表達(dá)率為100%，因此在肝腫瘤中是一個較特異指標(biāo)。

總之，Arg-1、Hep Par 1、GPC-3 的表達(dá)在肝臟腫瘤的診斷與鑒別診斷中非常有意義。Arg-1 在3 種抗體中敏感性最高，對肝細(xì)胞癌、肝臟轉(zhuǎn)移癌及轉(zhuǎn)移到其他臟器的癌的鑒別有非常大的價值，但其在肝良性腫瘤中100%表達(dá)，使得良惡性腫瘤的鑒別有一定的局限性，因此，我們認(rèn)為將Arg-1、Hep Par 1、GPC-3 都作為一線抗體三者聯(lián)合應(yīng)用將會大大提高診斷的準(zhǔn)確性。

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