鹽酸氨基葡萄糖對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎患者血清IL－1β、MMP－9和TNF－α表達(dá)的影響和臨床療效

何忠斌 朱海波

江蘇省淮安市淮陰醫(yī)院風(fēng)濕免疫科 223300

鹽酸氨基葡萄糖對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎患者血清
IL－1β、MMP－9和TNF－α表達(dá)的影響和臨床療效

何忠斌 朱海波

江蘇省淮安市淮陰醫(yī)院風(fēng)濕免疫科 223300

目的：觀察鹽酸氨基葡萄糖治療膝骨關(guān)節(jié)炎（Knee osteoarthritis，KOA）的療效及其對(duì)血清白細(xì)胞介素－1β（IL－1β）、基質(zhì)金屬蛋白酶－9（MMP－9）和腫瘤壞死因子－α（TNF－α）的影響。方法：將80例KOA患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，治療組口服鹽酸氨基葡萄糖治療，對(duì)照組口服美洛昔康治療，各組均以8周為1個(gè)療程，用ELISA法檢測(cè)治療前、后血清IL－1β、MMP－9和TNF－α的水平變化。比較兩組治療前、后膝關(guān)節(jié)功能LKSS評(píng)分、疼痛VAS評(píng)分及緩解疼痛時(shí)間的變化。結(jié)果：鹽酸氨基葡萄糖能顯著降低KOA患者血清中IL－1β、MMP－9和TNF－α的水平，優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.05），膝關(guān)節(jié)功能LKSS評(píng)分較對(duì)照組明顯提高（P＜0.05），疼痛VAS評(píng)分及緩解疼痛時(shí)間兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：鹽酸氨基葡萄糖能抑制KOA患者血清IL－1β、MMP－9和TNF－α的表達(dá)，能夠改善膝關(guān)節(jié)功能，達(dá)到治療KOA的作用。

鹽酸氨基葡萄糖 膝骨關(guān)節(jié)炎 白介素－1β 基質(zhì)金屬蛋白酶－9 腫瘤壞死因子－α

骨性關(guān)節(jié)炎（Osteoarthritis，OA）又稱退行性關(guān)節(jié)炎、增生性關(guān)節(jié)炎，主要侵害滑膜、關(guān)節(jié)軟骨和骨組織，導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼痛、功能障礙及畸形，是一種隨年齡上升而發(fā)生率顯著增加的關(guān)節(jié)疾病[1]。其中，膝骨性關(guān)節(jié)炎（Knee osteoarthritis，KOA）是OA中最為常見(jiàn)的，其病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，目前主要有軟骨酶降解學(xué)說(shuō)、軟骨下骨內(nèi)高壓學(xué)說(shuō)、細(xì)胞因子學(xué)說(shuō)、自由基學(xué)說(shuō)等[2]。近年來(lái)有一些證據(jù)表明，炎癥細(xì)胞因子，如：白細(xì)胞介素－1β（IL－1β）、基質(zhì)金屬蛋白酶－9（MMP－9）和腫瘤壞死因子－α（TNF－α）在KOA軟骨細(xì)胞破壞及其基質(zhì)衰退中發(fā)揮著重要作用[]。本研究旨在觀察鹽酸氨基葡萄糖治療KOA的臨床療效以及其對(duì)KOA患者血清中IL－1β、 MMP－9和TNF－α的影響。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2013年7月－2014年7月在我科門診就診的KOA患者80例，隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組。治療組40例，男19例，女21例，年齡45～75歲，平均年齡（64.5±10.8）歲，病程0.5～6年，平均病程（3.8±0.7）年。對(duì)照組40例，男18例，女22例，年齡46～78歲，平均年齡（66.7± 11.2）歲，病程0.6～7年，平均病程（3.9±0.8）年。兩組患者的性別、年齡、病程等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) （1）符合2001年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)（American College of Rheumatology，ACR）制訂的“KOA”臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）影像學(xué)應(yīng)用Kellgren－Lawrence分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，選擇Ⅰ～Ⅲ級(jí)的患者；（3）近1個(gè)月內(nèi)未服過(guò)激素、非甾體抗炎藥和（或）其他方法治療者；（4）本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審議批準(zhǔn)同意，受試對(duì)象治療期間僅應(yīng)用本研究方案治療，并簽署知情同意書(shū)。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）合并心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病者；（2）合并有膝關(guān)節(jié)骨折、半月板損傷、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)感染、骨腫瘤、骨結(jié)核、骨髓炎等其他疾病者；（3）有藥物過(guò)敏史、過(guò)敏體質(zhì)者；（4）依從性差，未能按時(shí)檢查、服藥，資料不全者。

1.4 治療方法 治療組予鹽酸氨基葡萄糖片（生產(chǎn)批號(hào)HC20130102，江蘇正大清江制藥有限公司，規(guī)格750mg片）750mg，口服，早晚各1次，連服8周；對(duì)照組予以美洛昔康片（生產(chǎn)批號(hào)20121201，海南澳美華制藥股份有限公司，規(guī)格7.5mg片）7.5mg，餐后服用，早晚各1次，連服8周。兩組治療期間停用其他NSAIDs藥物、糖皮質(zhì)激素及其他緩解關(guān)節(jié)痛藥物。

1.5 療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 膝關(guān)節(jié)功能采用Lysholm膝關(guān)節(jié)評(píng)分系統(tǒng)（Lysholm knee score，LKSS）進(jìn)行評(píng)分，該系統(tǒng)有8項(xiàng)，滿分100分，分值越高關(guān)節(jié)功能越好，包括支撐物的需求（5分）、跛行（5分）、腫脹（10分）、上下樓梯困難（10分）、下蹲困難（10分）、有無(wú)交鎖（15分）、疼痛（25分）、關(guān)節(jié)不穩(wěn)（25分）。疼痛評(píng)分采用視覺(jué)模擬評(píng)分法（Visual analogous scale，VAS），用1條10cm長(zhǎng)的線段，0表示無(wú)痛，10表示最痛，讓患者標(biāo)出其目前疼痛的位置。疼痛緩解時(shí)間界定：疼痛評(píng)定達(dá)到VAS≤3時(shí)所需要的治療時(shí)間。

1.6 觀察指標(biāo) 所有受試者于治療前與治療8周后；分別于空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血4ml，24h內(nèi)將標(biāo)本離心（3 000rmin，20min），分離血清，置于－20℃冰箱待檢，并于4周內(nèi)測(cè)定。IL－1β、MMP－9和TNF－α的檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）法，試劑由武漢博士德生物上程有限公司提供，應(yīng)用Baygene公司的ELX800酶標(biāo)儀及芬蘭Thermo公司的MK2洗板機(jī)，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)由專人進(jìn)行操作。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前、后血清IL－1β、MMP－9、TNF－α水平及LKSS、VAS評(píng)分比較 治療前兩組血清IL－1β、MMP－9、TNF－α水平及LKSS、VAS評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），兩組治療前、后血清IL－1β、MMP－9、TNF－α水平比較，兩組治療后均較治療前顯著下降（P＜0.05），治療組下降更為顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。兩組治療前、后膝關(guān)節(jié)功能LKSS、疼痛VAS評(píng)分比較，兩組治療后與治療前相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組治療后比較LKSS評(píng)分差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），治療組優(yōu)于對(duì)照組，但VAS評(píng)分治療后兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 患者血清IL－1β、MMP－9、TNF－α水平及VAS、LKSS評(píng)分比較（±s）

表1 患者血清IL－1β、MMP－9、TNF－α水平及VAS、LKSS評(píng)分比較（±s）

注：＊與治療前比較，P＜0.05，＃與對(duì)照組比較，P＜0.05。

指標(biāo)治療組（n＝40）對(duì)照組（n＝40）治療后IL－1β（pgml）123.3±11.9 69.4±7.7＊＃120.9±10.7 80.8±8.3治療前治療后治療前＊TNF－α（pgml）65.6±8.3 36.7±12.4＊＃63.9±9.0 47.7±10.6＊MMP－9（pgml）43.7±4.5 26.5±2.7＊＃42.1±3.9 36.8±3.6＊VAS 7.8±1.5 2.8±0.9＊7.7±1.6 2.9±1.1＊LKSS 66.7±8.8 89.2±10.2＊＃67.8±7.9 79.4±9.7＊

2.2 兩組疼痛緩解時(shí)間比較 治療組疼痛緩解時(shí)間為（3.66±1.78）周，對(duì)照組為（3.89±1.47）周，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

KOA是一種常見(jiàn)于中老年人群的關(guān)節(jié)退行性疾病，年齡在55～65歲的人群中，KOA的發(fā)病率高達(dá)40%[5]。目前KOA的病因病機(jī)不明，導(dǎo)致臨床上不能有效的控制其病情進(jìn)展。KOA的病理特點(diǎn)為關(guān)節(jié)軟骨變性、壞死、軟骨下及關(guān)節(jié)邊緣骨反應(yīng)性增生、硬化，導(dǎo)致骨贅形成。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，KOA發(fā)病機(jī)制可能與免疫紊亂有關(guān)，并有多種炎性因子參與其中[4]。

KOA是由多種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)參與的炎癥過(guò)程，細(xì)胞因子IL－1β、TNF－α是炎癥反應(yīng)的始動(dòng)因素[6]。細(xì)胞因子IL－1β、TNF－α通過(guò)刺激軟骨細(xì)胞退變，刺激滑膜細(xì)胞分泌前列腺素E2，引起基質(zhì)降解酶，尤其是基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）家族的產(chǎn)生，抑制Ⅱ型膠原的合成[7]。其中，MMP－9是金屬蛋白酶家族的主要成員之一，又稱為明膠酶B，分子量為92kD，由間質(zhì)細(xì)胞，如毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞分泌，參與上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和基質(zhì)角質(zhì)細(xì)胞核遷移等[8]，并通過(guò)降解膠原促進(jìn)骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生[9]。同時(shí)，IL－1β有促進(jìn)滑膜細(xì)胞黏附因子表達(dá)作用，從而加重滑膜炎癥及骨的吸收[10]，TNF－α還能夠引起局部毛細(xì)血管通透性增加，加重局部組織水腫和炎癥浸潤(rùn)[11]。

鹽酸氨基葡萄糖是一種氨基單糖，天然存在于人體關(guān)節(jié)軟骨中，是關(guān)節(jié)軟骨中蛋白多糖的主要成分之一[12]。其可抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的活性，阻斷IL－1β、TNF－α對(duì)軟骨的破壞，修復(fù)和重建關(guān)節(jié)軟骨，延緩病情的進(jìn)展，是治療KOA的特異性藥物[13]。臨床研究也證實(shí)氨基葡萄糖具有的抗氧化、抗炎癥特性，對(duì)骨關(guān)節(jié)炎有改善作用[14]。

本研究顯示，鹽酸氨基葡萄糖治療KOA 8周后能顯著降低KOA患者血清中IL－1β、MMP－9、TNF－α的水平（P＜0.05），優(yōu)于美洛昔康組，并能有效地改善膝關(guān)節(jié)功能。表明鹽酸氨基葡萄糖確實(shí)可以抑制炎性因子的分泌，阻斷骨關(guān)節(jié)的炎癥反應(yīng)，其作用機(jī)制可能是通過(guò)抑制IL－1β、MMP－9、TNF－α的釋放來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

[1] 邱貴興.骨關(guān)節(jié)炎流行病學(xué)和病因?qū)W新進(jìn)展〔J〕.繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育，2005，19（7）：68.

[2] 劉健，趙文海.對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制的研究概況〔J〕.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，10（2）：80－82.

[3] 朱芳曉，周潤(rùn)華，莫漢有，等.小白菊內(nèi)酯對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎兔模型血清及關(guān)節(jié)液腫瘤壞死因子－α和白介素－1β水平的影響〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志，2013，33（2）：862－863.

[4] Mahmoud RH，Nehal AF，Azza ME，et al.Alterations of the CD4，CD8Tcell subsets，interleukins－1β，IL－10，IL－17，tumor necrosis factor－αand soluble intercellular adhesion molecule－1 in rheumatoid arthritis and osteoarthritis：preliminary observations〔J〕.Pathol Oncol Res，2008，14（3）：321－328.

[5] 劉建民，陳新華.膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的病因分析〔J〕.人民軍醫(yī)，2008，51（7）：410.

[6] 陳巍，李彬，唐中堯，等.膝骨性關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)滑液IL－1β和TNF－α的表達(dá)及臨床意義〔J〕.廣東醫(yī)學(xué)，2010，31（15）：1998.

[7] Hulejova H，Baresova V，Klezl Z，et al.Increased level of cytokines and matrix metalloproteinase in osteoarthritic subchondral bone〔J〕.Cytokine，2007，38（3）：151－156.

[8] Fujiki M，Shineha J，Yamanokuchi K，et al.Effects of treat－mentwith polysulfated glycosaminoglycan on serum cartilage oligomericmatrix protein and C 2reactive protein concentrations，serum matrixmetalloproteinase 2and 9activities，and lameness in dogs withosteoarthritis〔J〕.Am J Vet Res，2007，68（8）：827－833.

[9] 阮佳莉，田京.金屬蛋白酶在骨關(guān)節(jié)炎表達(dá)的研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志，2013，19（7）：748－752.

[10] Yavuz U，S?kücüS，Albayrak A，et al.Efficacy comparisons of the intraarticular steroidal agents in the patients with knee osteoarthritis〔J〕.Rheumatol Int，2011，5（1）：11－17.

[11] 張鐵峰，李景峰.細(xì)胞因子IL－1β和TNF－α在骨關(guān)節(jié)炎軟骨中mRNA表達(dá)的變化及意義〔J〕.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2008，46（15）：116－117.

[12] 何文革，閆冬梅，李瑞陽(yáng).臭氧聯(lián)合鹽酸氨基葡萄糖用于膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎治療的療效觀察〔J〕.中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2014，29（7）：675－676.

[13] 劉漢華，蔣毅，孫躍玲，等.玻尿酸鈉聯(lián)合鹽酸氨基葡萄糖對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎患者血清MMP－9、TNF－α的影響〔J〕.內(nèi)科急危重雜志，2011，17（1）：26－27.

[14] 李明輝，劉洋，王彩民，等.鹽酸氨基葡萄糖聯(lián)合塞來(lái)昔布治療膝骨關(guān)節(jié)炎的隨機(jī)對(duì)照〔J〕.中國(guó)組織工程研究，2013，43（17）：7654－7660.

（本文通訊作者：朱海波）

（編輯羽飛）

The Influence of Glucosamine Hydrochloride on the Expression of Serum IL－1β，MMP－9 and TNF－αof Knee Osteoarthritis and the Clinical Curative Effect

HE Zhongbin，ZHU Haibo.Huaiyin Hospital of Huaian City，Jiangsu Province 223300

Objective：Observe the clinical curative effect of glucosamine hydrochloride on knee osteoarthritis（KOA）and the influence on serum interleukin－1β（IL－1β），matrix metalloproteinases－9（MMP－9）and tumor necrosis factor－α（TNF－α）.Methods：Divide 80KOA patients into 2groups randomly；the treatment group takes glucosamine hydrochloride orally while the control group takes meloxicam for 8weeks（one course of treatment）.ELISA method is applied to inspect the change of level of serum IL－1β，MMP－9and TNF－αbefore and after treatment.Compare the change of LKSS scores of knee joint function，pain VAS score and the time of pain relief of two groups before and after the treatment.Results：Glucosamine hydrochloride could reduce the level of IL－1β，MMP－9，and TNF－αin the serum of KOA patients significantly，which is better than that of control group（P＜0.05）；the knee joint function LKSS score is improved compared to the control group（P＜0.05）；the difference of pain VAS score and pain relief time of the two groups has no statistical significance（P＞0.05）.Conclusion：Glucosamine hydrochloride can inhibit the expression of IL－1β，MMP－9and TNF－αand can improve the function of knee joint thus to achieve the effect of treatment of KOA.

Glucosamine hydrochloride，Knee osteoarthritis，Interleukin－1β，Matrix metalloproteinases－9，Tumor necrosis factor－α

R684.3

A

1001－7585（2015）12－1566－03

2015－01－22