鉤藤生根壯苗培養(yǎng)基優(yōu)化及移栽基質的篩選

潘麗梅+馬小軍+韋榮昌+唐其+韋樹根+莫長明+付金娥

摘要：以鉤藤無菌莖尖組培苗為試驗材料，研究不同基本培養(yǎng)基、不同激素配比對鉤藤生根壯苗的影響；同時以優(yōu)良的組培苗為試驗材料，搭配不同比例的基質，研究其對鉤藤組培苗移栽成活率和生長狀況的影響。結果顯示，1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA激素組合的培養(yǎng)基生根壯苗效果最好，所發(fā)的新根粗壯，根長適中，根數(shù)較多，最適于煉苗移栽；移栽基質以體積比2∶1∶1的塘泥∶育苗土∶蛭石較佳，移栽成活率可達90%以上，且生長狀況最佳。

關鍵詞：鉤藤；生根壯苗；移栽；基質篩選

中圖分類號：S567.1+90.4文獻標志碼：A 文章編號：1002-1302（2014）11-0083-02

鉤藤[Uncariarhynchopylla（Miq.）Jacks]為茜草科鉤藤屬木本植物，別稱耿馬鉤藤、雙鉤藤、雙鉤、無柄果鉤藤[1]，產于廣東、廣西、云南、貴州、福建、湖南等地，常生于山谷溪邊的疏林或灌叢中，為我國的著名中藥。鉤藤的功能為清血平肝、息風定驚等，可用于風熱頭痛、感冒夾驚、驚痛抽搐等癥，所含鉤藤堿有降血壓作用，是一種較好的藥材，其根也可入藥[2-3]。由于鉤藤用途廣泛，療效明確，近年來國內外市場對該藥材的需求量激增，致使其野生資源遭到嚴重的采挖，資源漸顯枯竭，在進行鉤藤種苗的生產過程中，最快速有效的一條繁殖途徑為組織培養(yǎng)，而組織培養(yǎng)的關鍵環(huán)節(jié)就是對組培苗進行生根壯苗培養(yǎng)及移栽馴化，其中移栽基質是提高組培苗移栽成活率、促進種苗健壯生長的重要因素之一[4]，基質選擇的原則是疏松透氣，具有一定的保水保肥能力，容易滅菌處理，不利于雜菌孳生等[5]。因此，本試驗在組織培養(yǎng)基礎上優(yōu)化生根壯苗培養(yǎng)基，并對影響鉤藤組培苗移栽成活率和成苗生長的基質類型及配比進行優(yōu)化篩選研究，以期為鉤藤組培苗的規(guī)?；a提供參考和理論依據。

1材料與方法

鉤藤組培苗為廣西藥用植物園組織培養(yǎng)室經多次繼代繁殖的鉤藤莖尖組培苗。

1.1鉤藤生根壯苗培養(yǎng)基的優(yōu)化試驗

供試材料為3cm左右、葉片張開、綠色的鉤藤無菌試管幼苗，在超凈臺上將其取出后分別接種到高壓滅菌的生根壯苗培養(yǎng)基中，每瓶接種5株。生根壯苗培養(yǎng)基設6個處理：A1，1/2MS+0.2mg/LNAA；A2，1/2MS+0.2mg/LIBA；A3，1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA；B1，MS+0.2mg/LNAA；B2，MS+0.2mg/LIBA；B3，MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA。每個處理培養(yǎng)基中均加入蔗糖25g/L，瓊脂4.5g/L，活性炭1g/L，每個處理培養(yǎng)基均接種20瓶。接種后置于培養(yǎng)溫度為（25±2）℃、光照強度1500～2000lx下光照培養(yǎng)時間12h/d。培養(yǎng)30d后統(tǒng)計幼苗生根率、生根數(shù)、根長和株高，分析不同培養(yǎng)基對鉤藤組培苗生長情況的影響。

1.2鉤藤組培苗移栽基質的篩選試驗

1.2.1煉苗及預處理選擇在生根壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)時間為25d、高約4cm、葉片4～5張、長勢一致的已生根鉤藤莖尖苗。在移栽環(huán)境下先閉瓶強光煉苗3～5d，再打開瓶蓋繼續(xù)煉苗3～4d，每天保持噴霧澆水以避免葉片水分過快流失而萎蔫。移栽時選取生長狀況良好、株高3～5cm、根長2～3cm、每株具4～5條根系的組培苗作為移栽材料，用鑷子將小苗輕輕取出后用自來水沖洗干凈，在0.1%高錳酸鉀溶液中浸泡30s備用。

1.2.2移栽基質的消毒及配制移栽基質在使用前，于160℃高溫下烘8h消毒，以塘泥為基本基質，按不同比例（體積比）混合配制成8種移栽基質（表1），每種基質裝2個育苗框，每個育苗框30株苗，3次重復。

1.2.3組培苗的移栽將預處理的組培苗移栽到8種不同的試驗基質中，隨機移苗，注意及時噴水保持濕度。定期記錄移栽組培苗的成活率、株高、根數(shù)、根長、長勢等情況。

2結果與分析

2.1鉤藤生根壯苗培養(yǎng)基優(yōu)化試驗

由表2可知，接種在1/2MS培養(yǎng)基中的試管苗在接種1周后就開始出現(xiàn)新根的分化，而接種在MS培養(yǎng)基中的試管苗則是在接種后3周才有較明顯的新根分化，說明1/2MS培養(yǎng)基更有利于新根的分化；從生根率來看，也說明了1/2MS培養(yǎng)基更有利于新根的分化。在只添加NAA的生根培養(yǎng)基A1中，雖然平均根長較長，但其根較細小，容易折斷而不利于移栽成活；只添加IBA的生根培養(yǎng)基A2，根雖比A1中的根粗，但生根數(shù)變少，顏色呈現(xiàn)淡褐色；1/2MS培養(yǎng)基中以NAA與IBA組合使用（A3）的生根率最好，平均生根條數(shù)達到7.25條，平均根長3.62cm，與MS培養(yǎng)基相同激素組合（B3）的生根率相比差異極顯著。從組培苗的生長狀態(tài)來看，接種在MS培養(yǎng)基中的試管苗更傾向于根上部的生長，即莖葉的生長，而根系則生長緩慢，根部生長一段時間后生長點出現(xiàn)愈傷化現(xiàn)象，根不再生長，因此不適于作為生根培養(yǎng)基。綜合上述因素分析可知，A3處理最適合鉤藤壯苗生根。

2.2鉤藤組培苗移栽基質的篩選試驗

2.2.1不同基質對鉤藤組培苗移栽成活的影響從鉤藤組培苗移栽60d后的調查結果（圖1）可看出，T7處理的移栽成活率最高，為96.35%，且根系發(fā)達、粗壯；T6處理次之，為91.65%；T7、T6處理間差異不顯著，但均與其他處理間差異顯著，且與T1、T2處理差異極顯著；處理T1的成活率最低，且根系分支少而短，生長差，不適合作為鉤藤組培苗的移栽基質。

2.2.2不同基質對鉤藤組培苗葉片數(shù)的影響由圖2可以看出，經過30～40d的生長，穩(wěn)定成活后的鉤藤組培苗在不同基質處理下的平均葉片數(shù)均可達到4張以上，其中處理T7的平均葉片數(shù)最多，為6.11張，其次為T6處理，平均為5.93張，處理T5、T8的平均葉片數(shù)也達5張以上，這4個處理間差異均不顯著，但與其他4個處理差異顯著。

2.2.3不同基質對鉤藤組培苗株高的影響鉤藤組培苗移栽時的株高基本在4.5cm左右，由圖3可知，在不同基質中穩(wěn)定成活后，鉤藤組培苗株高均有增加，其中以處理T6的植株最高，達8.67cm，與T5、T7處理差異顯著，與T1、T2、T3、T4、T8處理差異極顯著；T5、T7間差異不顯著，T2、T3、T4處理間差異不顯著。可見，處理T6的植株根系最發(fā)達，最有利于吸收養(yǎng)分，植株生長快。

2.2.4不同基質對鉤藤組培苗莖粗的影響從圖4可以看出，不同基質處理間組培苗莖粗差異明顯，其中T7的莖最粗（0.19cm），T3最細（0.09cm），且T7與其他各處理間差異顯著或極顯著，與T2、T3、T4、T5處理間差異極顯著?？梢?，T7處理的組培苗的莖最粗，效果最好。

3結論與討論

3.1生根與壯苗

從基本培養(yǎng)基看，1/2MS培養(yǎng)基生根快，且長出的新根較粗壯，而MS培養(yǎng)基生根緩慢，且新根細長，根數(shù)少，因此1/2MS培養(yǎng)基更適合鉤藤組培苗生根。激素NAA與IBA對鉤藤組培苗的生根、壯苗均有促進作用，6個處理中以1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA組合（A3培養(yǎng)基）的生根壯苗效果最好，所發(fā)的新根粗壯，根長適中，最適于移栽煉苗。

3.2移栽

在環(huán)境適宜的條件下，組培苗移栽生根過程中栽培基質發(fā)揮著重要作用，基質的物理性狀及化學成分不同，其保水性、保肥能力以及透氣性不同，對組培苗的移栽成活和后期生長有重要的影響[6]。本試驗結果表明，在8種不同的移栽基質中，鉤藤組培苗的成活率和生長狀況差異明顯，根據各生長指標測定數(shù)據，最適合的基質配方是塘泥∶育苗土∶蛭石體積比為2∶1∶1的基質（T7），其次是塘泥∶育苗土∶珍珠巖體積比為2∶1∶1的基質（T6），移栽成活率均達90%以上，且長勢良好。加有園土的基質，鉤藤組培苗成活率普遍偏低，且植株長勢弱，葉色淡，莖稈纖細，根短小而弱，雖然園土的吸水性和保水性強，但比較容易板結，透氣性差，組培苗根系受到影響，從而引起種苗生長不旺盛。在塘泥中加入育苗土后，結合蛭石或珍珠巖，改善了塘泥的透氣性，提高了組培苗的成活率，進一步促生了新根，也促進了幼苗的生長，因而最適合組培苗移栽種植。

參考文獻：

[1]徐祥浩，吳翰.中國鉤藤屬植物的整理[J].華南農學院學報，1981（3）：21-32.

[2]韋樹根，馬小軍，施力軍，等.鉤藤扦插繁殖試驗[J].江蘇農業(yè)科學，2011，39（6）：415-416.

[3]施力軍，蘇建春，蔣向軍，等.鉤藤組培技術體系研究[J].安徽農業(yè)科學，2010，38（6）：2937，2955.

[4]何應對，馬蔚紅，韓麗娜，等.3種基質配方對香蕉組培苗生長的影響[J].中國南方果樹，2010，39（6）：38-39.

[5]吳麗芳，丁偉，陸偉東，等.不同基質對密閉培養(yǎng)下梔子組培苗移栽成活率的影響[J].江蘇農業(yè)科學，2010（1）：172-173.

[6]肖旭峰，劉明月.不同基質配比對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[J].江西農業(yè)大學學報，2008，30（3）：460-463.

2.2.3不同基質對鉤藤組培苗株高的影響鉤藤組培苗移栽時的株高基本在4.5cm左右，由圖3可知，在不同基質中穩(wěn)定成活后，鉤藤組培苗株高均有增加，其中以處理T6的植株最高，達8.67cm，與T5、T7處理差異顯著，與T1、T2、T3、T4、T8處理差異極顯著；T5、T7間差異不顯著，T2、T3、T4處理間差異不顯著。可見，處理T6的植株根系最發(fā)達，最有利于吸收養(yǎng)分，植株生長快。

2.2.4不同基質對鉤藤組培苗莖粗的影響從圖4可以看出，不同基質處理間組培苗莖粗差異明顯，其中T7的莖最粗（0.19cm），T3最細（0.09cm），且T7與其他各處理間差異顯著或極顯著，與T2、T3、T4、T5處理間差異極顯著。可見，T7處理的組培苗的莖最粗，效果最好。

3結論與討論

3.1生根與壯苗

從基本培養(yǎng)基看，1/2MS培養(yǎng)基生根快，且長出的新根較粗壯，而MS培養(yǎng)基生根緩慢，且新根細長，根數(shù)少，因此1/2MS培養(yǎng)基更適合鉤藤組培苗生根。激素NAA與IBA對鉤藤組培苗的生根、壯苗均有促進作用，6個處理中以1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA組合（A3培養(yǎng)基）的生根壯苗效果最好，所發(fā)的新根粗壯，根長適中，最適于移栽煉苗。

3.2移栽

在環(huán)境適宜的條件下，組培苗移栽生根過程中栽培基質發(fā)揮著重要作用，基質的物理性狀及化學成分不同，其保水性、保肥能力以及透氣性不同，對組培苗的移栽成活和后期生長有重要的影響[6]。本試驗結果表明，在8種不同的移栽基質中，鉤藤組培苗的成活率和生長狀況差異明顯，根據各生長指標測定數(shù)據，最適合的基質配方是塘泥∶育苗土∶蛭石體積比為2∶1∶1的基質（T7），其次是塘泥∶育苗土∶珍珠巖體積比為2∶1∶1的基質（T6），移栽成活率均達90%以上，且長勢良好。加有園土的基質，鉤藤組培苗成活率普遍偏低，且植株長勢弱，葉色淡，莖稈纖細，根短小而弱，雖然園土的吸水性和保水性強，但比較容易板結，透氣性差，組培苗根系受到影響，從而引起種苗生長不旺盛。在塘泥中加入育苗土后，結合蛭石或珍珠巖，改善了塘泥的透氣性，提高了組培苗的成活率，進一步促生了新根，也促進了幼苗的生長，因而最適合組培苗移栽種植。

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[6]肖旭峰，劉明月.不同基質配比對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[J].江西農業(yè)大學學報，2008，30（3）：460-463.

2.2.3不同基質對鉤藤組培苗株高的影響鉤藤組培苗移栽時的株高基本在4.5cm左右，由圖3可知，在不同基質中穩(wěn)定成活后，鉤藤組培苗株高均有增加，其中以處理T6的植株最高，達8.67cm，與T5、T7處理差異顯著，與T1、T2、T3、T4、T8處理差異極顯著；T5、T7間差異不顯著，T2、T3、T4處理間差異不顯著。可見，處理T6的植株根系最發(fā)達，最有利于吸收養(yǎng)分，植株生長快。

2.2.4不同基質對鉤藤組培苗莖粗的影響從圖4可以看出，不同基質處理間組培苗莖粗差異明顯，其中T7的莖最粗（0.19cm），T3最細（0.09cm），且T7與其他各處理間差異顯著或極顯著，與T2、T3、T4、T5處理間差異極顯著?？梢姡琓7處理的組培苗的莖最粗，效果最好。

3結論與討論

3.1生根與壯苗

從基本培養(yǎng)基看，1/2MS培養(yǎng)基生根快，且長出的新根較粗壯，而MS培養(yǎng)基生根緩慢，且新根細長，根數(shù)少，因此1/2MS培養(yǎng)基更適合鉤藤組培苗生根。激素NAA與IBA對鉤藤組培苗的生根、壯苗均有促進作用，6個處理中以1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA組合（A3培養(yǎng)基）的生根壯苗效果最好，所發(fā)的新根粗壯，根長適中，最適于移栽煉苗。

3.2移栽

在環(huán)境適宜的條件下，組培苗移栽生根過程中栽培基質發(fā)揮著重要作用，基質的物理性狀及化學成分不同，其保水性、保肥能力以及透氣性不同，對組培苗的移栽成活和后期生長有重要的影響[6]。本試驗結果表明，在8種不同的移栽基質中，鉤藤組培苗的成活率和生長狀況差異明顯，根據各生長指標測定數(shù)據，最適合的基質配方是塘泥∶育苗土∶蛭石體積比為2∶1∶1的基質（T7），其次是塘泥∶育苗土∶珍珠巖體積比為2∶1∶1的基質（T6），移栽成活率均達90%以上，且長勢良好。加有園土的基質，鉤藤組培苗成活率普遍偏低，且植株長勢弱，葉色淡，莖稈纖細，根短小而弱，雖然園土的吸水性和保水性強，但比較容易板結，透氣性差，組培苗根系受到影響，從而引起種苗生長不旺盛。在塘泥中加入育苗土后，結合蛭石或珍珠巖，改善了塘泥的透氣性，提高了組培苗的成活率，進一步促生了新根，也促進了幼苗的生長，因而最適合組培苗移栽種植。

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[4]何應對，馬蔚紅，韓麗娜，等.3種基質配方對香蕉組培苗生長的影響[J].中國南方果樹，2010，39（6）：38-39.

[5]吳麗芳，丁偉，陸偉東，等.不同基質對密閉培養(yǎng)下梔子組培苗移栽成活率的影響[J].江蘇農業(yè)科學，2010（1）：172-173.

[6]肖旭峰，劉明月.不同基質配比對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[J].江西農業(yè)大學學報，2008，30（3）：460-463.