靈芝提取液對(duì)抗氯化鋇所致心律失常的實(shí)驗(yàn)研究①

劉海燕，梁彩梅，楊文寶，黃秋菊，趙善民

（1.右江民族醫(yī)學(xué)院2012級(jí)臨床醫(yī)學(xué)本科，廣西 百色 53300 E－mail：1436179787＠qq.com；2.右江民族醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，廣西 百色 533000）

靈芝是中醫(yī)藥學(xué)寶庫中的珍品，可謂“國寶”，具有調(diào)節(jié)體能、改善防御功能、預(yù)防疾病功能、抗衰老等生理功能。目前對(duì)靈芝的藥理研究證明了其具有很高的藥用價(jià)值，且近年來也被廣泛用于臨床，如治療失眠健忘、咳嗽氣喘，以及治療腫瘤和糖尿病等方面都有很好療效［1］。而且靈芝還具有降血壓抗炎鎮(zhèn)痛，抗衰老，治療冠心病等作用［2］。但對(duì)其抗心律失常作用研究甚少。本實(shí)驗(yàn)以小白鼠為研究對(duì)象，探討靈芝提取液對(duì)抗心律失常的作用，為臨床應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選用體重為20～25g小白鼠，50只，雌雄不拘，清潔級(jí)，由右江民族醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供［許可證號(hào)：SYXK 桂2011－0010］。

1.2 藥品 靈芝、鹽酸普萘洛爾片、氯化鋇。靈芝購自百色市民康大藥房，產(chǎn)地：云南，批號(hào)：140601，規(guī)格：凈選。鹽酸普萘洛爾規(guī)格：10mg×100片，產(chǎn)地：山西云鵬制藥有限公司，氯化鋇：規(guī)格500g，產(chǎn)地：廣東汕頭市西隴化工廠，均由右江民族醫(yī)學(xué)院生理實(shí)驗(yàn)室提供。

1.3 儀器 心電圖機(jī)（廣州市艾迪科遜醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)）由右江民族醫(yī)學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)中心提供，型號(hào)為ECG－6511，編號(hào)為：20024150。

1.4 方法

1.4.1 靈芝提取液的制備 取靈芝干品100g，剪碎，置于1 000ml蒸餾水浸泡1h后，置于燒杯中加熱煮沸，改小火煮30min，冷卻至室溫后用紗布過濾，保留濾液。濾渣再用同樣方法煮，合并兩次濾液，文火。并將提取液滅菌、消毒，調(diào)pH 為7.30～7.50，滲透壓為300mOsm／kg·H2O。

1.4.2 普萘洛爾溶液的制備 取10 mg普萘洛爾片劑100片，溶于200 ml生理鹽水，使其濃度為0.5g／ml的藥液供小鼠尾靜脈注射。

1.4.3 氯化鋇溶液的制備 取10g氯化鋇粉末溶于100ml的生理鹽水，使其濃度為0.1g／ml的藥液供小鼠尾靜脈注射。

1.4.4 動(dòng)物分組 將50 只小白鼠隨機(jī)分為空白組（生理鹽水組）、對(duì)照組（普萘洛爾組）、低濃度組（靈芝提取液0.5g／ml）、中濃度組（靈芝提取液0.7g／ml）、高濃度組（靈芝提取液1g／ml）5組。在建立心律失常模型后，根據(jù)不同分組，注射不同藥物濃度。

1.4.5 小鼠心律失常模型的建立 將小鼠固定于小鼠固定器中，按0.1 ml／10g劑量于尾靜脈注射氯化鋇溶液，1～2min后小鼠將會(huì)出現(xiàn)心律失常。

1.4.6 實(shí)驗(yàn)過程 20%烏拉坦腹腔注射（劑量為0.1 ml／10g）麻醉，將麻醉的小鼠固定于鼠臺(tái)，連接已預(yù)熱的心電圖機(jī)的電極，記錄正常的Ⅱ?qū)?lián)心電圖（紙速度為25mm／s，標(biāo)準(zhǔn)電壓1mV＝10mm），然后向小鼠尾靜脈注射劑量為0.1ml／10g的0.1%氯化鋇溶液，建立心律失常模型，5min后，記錄心電圖，再按照分組，注射相應(yīng)藥物濃度，記錄用藥后心電圖，觀察和比較各組小白鼠用藥后對(duì)抗心律失常的情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK 法，以P ＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

建立模型后，注射低、中、高濃度靈芝提取液后，心率減慢，而且與空白組對(duì)比，低、中、高濃度組心率顯著減慢（P ＜0.01），說明靈芝提取液具有抗心律失常作用。此外，與對(duì)照組相比，低、中濃度組的心率減慢（P＜0.01），說明靈芝提取液抗心律失常比西藥普萘洛爾更顯著。同本組比較，對(duì)照組的QRS波時(shí)間延長，而低、中、高濃度組的QRS 時(shí)間也延長，但延長時(shí)間較短，見表1。

表1 5組動(dòng)物模型用藥前后心電圖表現(xiàn) （±s，n ＝10）

表1 5組動(dòng)物模型用藥前后心電圖表現(xiàn) （±s，n ＝10）

注：與空白組比較，a：P ＜0.01，b：P ＜0.05；與對(duì)照組比較，c：P ＜0.01，d：P ＜0.05

心率（次／分）P 波 時(shí) 間（s）QRS波時(shí)間（s）P－R間期（s）組別用藥前 建模時(shí) 用藥后用藥前 建模時(shí) 用藥后用藥前 建模時(shí) 用藥后用藥前 建模時(shí) 用藥后空白組 357.60±121.56 610.00±84.33 625.00±95.01 0.012±0.009 0.033±0.013 0.033±0.033 0.045±0.009 0.026±0.0.007 0.028±0.009 0.016±0.013 0.041±0.010 0.039±0.007對(duì)照組 621.70±103.97 621.70±103.97 461.80±41.62 0.028±0.037 0.037±0.007 0.036±0.008 0.048±0.023 0.053±0.007 0.055±0.016 0.028±0.032 0.053±0.037 0.049±0.033低濃度組 439.00±84.98 658.20±214.25 544.50±49.69ad 0.005±0.013 0.034±0.014 0.040±0.000 0.040±0.000 0.026±0.014 0.039±0.003 0.032±0.017 0.032±0.014 0.036±0.013中濃度組 444.60±117.70 676.40±81.00 600.90±67.03c 0.011±0.010 0.064±0.119 0.035±0.011 0.027±0.019 0.028±0.022 0.029±0.022c 0.025±0.024 0.029±0.026 0.031±0.026高濃度組 431.30±65.60 711.60±64.39 516.20±45.73a 0.010±0.014 0.038±0.010 0.039±0.007 0.044±0.013 0.041±0.023 0.046±0.016 0.048±0.010 0.048±0.017 0.055±0.026

3 討論

利用尾靜脈注射氯化鋇是致小鼠心律失常的常規(guī)方法，故此可建立心律失常模型。從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中，我們可以看出在建立模型后，注射低、中、高濃度靈芝提取液后，心率會(huì)出現(xiàn)減慢，而且與空白組對(duì)比，低、中、高濃度組、心率顯著減慢（P ＜0.01），說明靈芝提取液具有抗心動(dòng)過速作用。此外，與對(duì)照組相比，低、中濃度組的心率下降（P ＜0.01），說明靈芝提取液抗心律失常性能比西藥普萘洛顯著。此外，還可看出，同本組比較，對(duì)照組的用藥QRS波時(shí)間有所延長，而低、中、高組的QRS波時(shí)間雖也延長，但延長比對(duì)照組短，即靈芝提取液的QRS延長時(shí)間比普萘洛爾延長時(shí)間短，說明在用靈芝提取液后QRS波時(shí)間得到抑制，心肌除極時(shí)間縮短，有利于心肌電活動(dòng)恢復(fù)，更近一步說明靈芝提取液的抗心律效果比普萘洛爾更顯著。氯化鋇誘發(fā)的心律失常與多種離子流相關(guān)，靜脈注射氯化鋇可以增加心肌蒲氏纖維Na＋、Ca2＋電流，抑制心肌細(xì)胞K＋電流而誘發(fā)心律失常［3］。而普萘洛爾為β受體阻斷藥物，具有強(qiáng)β受體阻斷作用，對(duì)β1 和β2受體選擇性很低，用藥后可使心率減慢，心肌收縮力和心排血量降低，冠脈血流量降低，心肌耗氧量減少，達(dá)到抗心律失常作用［4］。而靈芝子實(shí)體多糖能抑制四氧嘧啶誘導(dǎo)的NF－κB的活性，保護(hù)胰腺β細(xì)胞免受傷害，能降低血液黏度，增加心肌收縮力，增加冠狀動(dòng)脈血流量和心輸出量，改善心律［5］。此外，有研究表明，靈芝含有靈芝多糖，具有抗血栓血凝、抗血脂、清除氧自由基作用［6－7］。在心律失常后，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生大量的氧自由基，導(dǎo)致體內(nèi)SOD 消耗增加以及自由基清除劑活性降低，從而引起氧自由基在體內(nèi)聚集并與細(xì)胞膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)產(chǎn)生MDA，破壞膜的完整性，使心肌細(xì)胞電活動(dòng)紊亂而發(fā)生惡性循環(huán)［8］。至于靈芝提取液是否通過清除心律失常后產(chǎn)生的自由基而起到抗心律失常作用，還需進(jìn)一步探討。目前臨床上使用的抗心律失常的藥物，均存在不足。而80年代以來，新開發(fā)的抗心律失常藥物為數(shù)不多，綜合臨床應(yīng)用抗心律失常藥物的實(shí)踐，人們提出并強(qiáng)調(diào)了抗心律失常藥物的致（促）心律失常作用［9］。因此，通過研究靈芝提取液對(duì)小白鼠抗心律失常實(shí)驗(yàn)，表明靈芝水提取物具有抗心律失常作用，為開發(fā)新的抗心律失常的藥物提供了新的理論基礎(chǔ)。

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