復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病患者樹突細(xì)胞Dectin-1受體的功能研究

穰真 崔凡 李薇 王有為

復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病（RVVC）指12個月中發(fā)作4次或4次以上有癥狀的外陰陰道念珠菌?。╒VC）［1］，在發(fā)病過程中，宿主抗念珠菌感染免疫發(fā)揮核心作用的是屬于專職抗原提呈細(xì)胞的樹突細(xì)胞（DC）［2］。DC 表面的 Dectin-1 受體能夠結(jié)合念珠菌細(xì)胞壁中的β-1,3葡聚糖，從而介導(dǎo)細(xì)胞對念珠菌的識別，DC自身活化，繼而活化細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶（Syk）、CARD9的信號傳導(dǎo)通路，選擇性地促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌，最終通過巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的吞噬殺滅真菌，參與宿主抗真菌感染天然免疫的識別啟動［3］。有研究表明，Dectin-1缺陷的老鼠較野生型老鼠更容易發(fā)生白念珠菌感染［4］，證明Dectin-1功能是否正常直接影響宿主抗真菌感染免疫的能力。進(jìn)一步的研究證實，Dectin-1缺陷的個體更容易繼發(fā)黏膜真菌感染，而不是系統(tǒng)性真菌感染［5］。我們治療了1例1年反復(fù)發(fā)作6次的RVVC患者，患者34歲，衛(wèi)生習(xí)慣較好，近1年無性生活，每次對氟康唑治療敏感，無其他性傳播疾病或免疫缺陷性疾病，細(xì)胞免疫和體液免疫檢測均未見異常。本研究試圖通過分析該患者DC與念珠菌相互作用中DC活化成熟和Dectin-1受體的信號傳導(dǎo)通路及其效應(yīng)，尋找該患者疾病反復(fù)發(fā)作的可能原因。

材料與方法

一、RVVC患者陰道分泌物的真菌培養(yǎng)和鑒定

取該RVVC患者陰道分泌物接種于SDA培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)3 d，形成白色奶酪樣菌落，表面光滑、柔軟。挑取菌落做小培養(yǎng)，鏡下可見大量成簇的卵圓形孢子和假菌絲。挑取單個菌落，用真菌DNA提取試劑盒（美國Omega）提取真菌DNA。用通用引物ITS1和ITS2擴增真菌的ITS1-2區(qū)［6］，得到約210 bp產(chǎn)物。測序后上傳Genbank，經(jīng)Blast比對，與Candida albicans strain M293B相似度為100%（登錄號KP675485.1），證實為白念珠菌。

二、單核細(xì)胞提取及DC的誘導(dǎo)分化

患者及健康對照均需簽署知情同意書。取該RVVC患者及1例健康對照成年女性（系患者孿生妹妹，從未有過陰道炎病史，未系統(tǒng)使用抗真菌藥物、糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑，無糖尿病或自身免疫性疾?。┑撵o脈血待用。在50ml離心管內(nèi)，將30ml靜脈血置于15 ml Ficoll gradient-1077（美國Sigma-Aldrich公司）之上，共分6管，1 250×g離心20 min。小心吸取中央的外周血多形核細(xì)胞（PBMC），用含1%胎牛血清（FBS）的HBSS離心洗滌后，在RPMI 1640（美國Hyclone，含10%FBS、1%L-谷氨酰胺、0.05 mmol/L 2-巰基乙醇）培養(yǎng)液中37℃5%CO2孵育1 h。棄上清液，于培養(yǎng)皿中加入含0.5 mmol/L EDTA及1%FBS的HBSS（美國Hyclone公司），孵育10 min。反復(fù)吹打，分離貼壁細(xì)胞；獲取的細(xì)胞洗滌2次，經(jīng)單核細(xì)胞提取試劑盒（加拿大STEMCELL Technologies公司）中的抗體“雞尾酒”孵育，穿過LS column和MACS磁力裝置，通過陰性選擇法分離得到單核細(xì)胞。單核細(xì)胞在含1 000 U/ml粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）和500 U/ml白細(xì)胞介素4（IL-4）的RPMI1640培養(yǎng)液中孵育7d。培養(yǎng)液和細(xì)胞因子每隔1 d更換1次。鏡下觀察，單核細(xì)胞體積增大，向四周伸出樹枝狀分支。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面CD1a表達(dá)較誘導(dǎo)前體細(xì)胞明顯增加，表明單核細(xì)胞分化為樹突細(xì)胞。

三、樹突細(xì)胞成熟率測定

本實驗所用菌株分離自該RVVC患者陰道培養(yǎng)物。念珠菌臨床株（1×106/ml）與RVVC患者的DC（1×106/ml）在 10 ml RPMI 1640培養(yǎng)液（含 10%FBS、1%L谷氨酰胺、0.05 mmol/L 2-巰基乙醇）中，37℃、5%CO2共培養(yǎng)24 h。同時設(shè)立患者DC單獨培養(yǎng)組、抗人Dectin-1抗體（美國Santa Cruz公司）+念珠菌+RVVC患者DC共培養(yǎng)組、健康女性DC單獨培養(yǎng)組、念珠菌與健康女性DC共培養(yǎng)組以及抗人Dectin-1抗體+念珠菌+健康女性DC共培養(yǎng)組做對照。各實驗組分3個亞組，各亞組設(shè)3個復(fù)孔。共培養(yǎng)結(jié)束后收集各組細(xì)胞，1 250×g離心5 min，棄上清液，再用含1%FBS的PBS離心洗滌2次。各實驗組的3個亞組分別加入熒光標(biāo)記的鼠抗人CD1a-PE抗體（美國BD Pharmingen公司）+鼠抗人CD83-FITC抗體（美國BD Pharmingen公司）、鼠抗人CD1a-PE抗體+鼠抗人CD86-FITC抗體（美國BD Pharmingen公司）以及鼠抗人CD1a-PE抗體+鼠抗人CD80-FITC抗體（美國BD Pharmingen公司），冰盒中避光孵育15 min。收集各組細(xì)胞，暗處離心洗滌2次，并最終懸浮于500 μl含1%FBS的PBS中。用流式細(xì)胞儀（美國BD公司）檢測各培養(yǎng)組細(xì)胞 CD83+、CD86+、CD80+在 CD1a+細(xì)胞中的百分比。使用Winlist 6.0軟件分析實驗結(jié)果。

四、Western印跡法分析樹突細(xì)胞Dectin-1、磷酸化Syk和CARD9蛋白的表達(dá)

念珠菌臨床株與RVVC患者的DC在10 ml RPMI 1640培養(yǎng)液37℃，5%CO2共培養(yǎng)2 h，密度均為1×106/ml。同時設(shè)立抗人Dectin-1抗體+念珠菌+患者DC共培養(yǎng)組、念珠菌與健康女性DC共培養(yǎng)組以及抗人Dectin-1抗體+念珠菌+健康女性DC共培養(yǎng)組做對照。各實驗組設(shè)3個復(fù)孔。培養(yǎng)結(jié)束后收集各培養(yǎng)組細(xì)胞，加入200 μl Chaps蛋白抽提緩沖液（美國Cell Signaling Technology公司）反復(fù)凍融2次，4℃15 000×g離心10 min，吸取上清蛋白于-80℃保存。各組細(xì)胞蛋白于12%SDSPAGE膠200 V電泳60 min后轉(zhuǎn)移至PVDF膜。5%脫脂奶粉封閉PVDF 1 h，加入兔抗人磷酸化Syk（脾臟酪氨酸激酶）抗體（英國Abcam公司）室溫孵育2 h。洗膜后加入HRP結(jié)合的抗兔IgG抗體（美國Cell Signaling Technology公司）繼續(xù)孵育1 h。洗膜后，PVDF與SuperSignal West Dura底物工作液（美國Thermo Scientific公司）反應(yīng)5 min，繼而在X光下成像。用Restore Western Blot Stripping Buffer（美國Thermo Scientific公司）洗脫與PVDF膜結(jié)合的抗體。再次用兔抗人CARD9單克隆抗體（美國Cell Signaling Technology公司）及HRP結(jié)合的抗兔IgG抗體（美國Cell Signaling Technology公司）檢測CARD9表達(dá)情況。第3次洗脫抗體后，加入鼠抗人β肌動蛋白單克隆抗體（美國Sigma-Aldrich公司）與PVDF膜共孵育2 h，繼而加入HRP結(jié)合的抗鼠IgG抗體（美國Cell Signaling Technology公司）作用1 h，顯色、曝光。另取念珠菌和患者的DC共培養(yǎng)組以及念珠菌和健康女性DC共培養(yǎng)組于培養(yǎng)第0和2 h的蛋白，電泳后轉(zhuǎn)膜。加入兔抗人Dectin-1抗體（美國Cell Signaling Technology公司）孵育，洗膜后再加入HRP結(jié)合的抗兔IgG抗體，繼續(xù)孵育。洗膜，加底物反應(yīng)后成像。洗脫抗體，加入鼠抗人β肌動蛋白抗體，檢測內(nèi)參表達(dá)水平。

五、ELISA法檢測樹突細(xì)胞分泌的IL-23、腫瘤壞死因子α（TNF-α）和IL-12水平

念珠菌臨床株與RVVC患者的DC（密度均為1×106/ml）在 10 ml RPMI 1640培養(yǎng)液 37℃、5%CO2共培養(yǎng)6 h。同時設(shè)立DC單獨培養(yǎng)組、抗人Dectin-1抗體+念珠菌+患者DC共培養(yǎng)組、念珠菌與健康女性DC共培養(yǎng)組以及抗人Dectin-1抗體+念珠菌+健康女性DC共培養(yǎng)組做對照。各實驗組設(shè)3個復(fù)孔。培養(yǎng)開始前及終止時，收集各培養(yǎng)組培養(yǎng)液，1 250×g離心5 min，吸取上清液。用3種ELISA試劑盒（美國R&D）分別檢測培養(yǎng)液中IL-23、TNF-α和IL-12p70的水平。

六、統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計量資料用t檢驗，顯著性水平取α=0.05，自由度v=（2-1）×（3-1）=2，若伴隨概率P＜0.05，則差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、RVVC患者DC表面部分標(biāo)記表達(dá)抑制

健康人DC培養(yǎng)24 h，與培養(yǎng)前相比，細(xì)胞表面CD83 （t=0.465，P=0.882）、CD86 （t=0.279，P=0.876）和 CD80（t=1.029，P=0.742）表達(dá)無顯著變化（表1）；而與白念珠菌共培養(yǎng)24 h后，DC+白念珠菌組細(xì)胞表面 CD83（t=6.177，P=0.013）、CD86（t=105.961，P=0.001）和 CD80（t=9.428，P=0.010）表達(dá)較培養(yǎng)前顯著增加；與DC+白念珠菌組相比，Dectin-1抗體+DC+白念珠菌組DC表面的CD83（t=5.261，P=0.027）、CD86（t=3.196，P=0.018）和CD80（t=4.860，P=0.016）的表達(dá)受到明顯抑制。

RVVC患者DC培養(yǎng)24 h，與培養(yǎng)前相比，細(xì)胞表面 CD83（t=3.06，P=0.789）、CD86（t=0.952，P=0.441）和 CD80（t=0.480，P=0.679）表達(dá)無顯著變化（表1）；與白念珠菌共培養(yǎng)24 h后，DC+白念珠菌組細(xì)胞表面 CD83（t=1.558，P=0.098）、CD86（t=1.458，P=0.114）和 CD80（t=2.450，P=0.077）表達(dá)較培養(yǎng)前無明顯變化；Dectin-1抗體+DC+白念珠菌組 DC 表面的 CD83（t=0.967，P=0.492）、CD86（t=1.019，P=0.575）和 CD80（t=0.735，P=0.581）表達(dá)與DC+白念珠菌組相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病（RVVC）患者和健康人樹突細(xì)胞（DC）與白念珠菌共培養(yǎng)后表面分子表達(dá)的變化（%，±s）

表1 復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病（RVVC）患者和健康人樹突細(xì)胞（DC）與白念珠菌共培養(yǎng)后表面分子表達(dá)的變化（%，±s）

注：v=2

組別 C D 1 a+C D 8 3+ C D 1 a+C D 8 6+ C D 1 a+C D 8 0+共培養(yǎng)前 培養(yǎng)2 4 h 共培養(yǎng)前 培養(yǎng)2 4 h 共培養(yǎng)前 培養(yǎng)2 4 h健康人D C 3 1.4 6±4.9 1 3 0.9 3±3.0 3 5 2.9 2±5.9 3 5 3.7 8±6.8 0 5 4.2 7±2.0 9 5 3.1 7±3.7 8 D C+白念珠菌 4 5.6 8±2.9 4 7 4.6 7±6.1 9 7 2.6 0±3.7 3 D e c t i n-1+D C+白念珠菌 3 8.8 6±1.7 9 5 9.8 0±2.4 3 6 1.7 5±2.8 6 R V V C患者D C 3 3.3 5±2.1 7 3 3.7 4±1.7 6 5 2.8 9±2.9 9 5 5.0 5±2.7 7 5 4.4 0±2.8 6 5 5.4 9±1.2 4 D C+白念珠菌 3 7.5 9±2.6 4 5 9.1 4±4.4 7 5 9.8 1±2.7 4 D e c t i n-1+D C+白念珠菌 3 6.2 4±1.6 3 6 1.2 4±3.9 5 5 7.6 1±5.7 4

二、RVVC患者DC的磷酸化Syk和CARD9蛋白活化障礙

Dectin-1蛋白表達(dá)過程中，由于選擇性剪切，分為8種亞型。與白念珠菌共培養(yǎng)前及2 h后，健康人和RVVC患者DC的Dectin-1蛋白各亞型表達(dá)水平均未見明顯差別（圖1）。與白念珠菌共培養(yǎng)2 h后，健康人DC的磷酸化Syk和其下游的CARD9蛋白的表達(dá)輕度增加（圖2）。加入抗人Dectin-1抗體后，健康人DC的Syk和CARD9的表達(dá)受到明顯抑制。

圖1 Western印跡法分析復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌?。≧VVC）患者和健康人對照樹突細(xì)胞（DC）Dectin-1表達(dá)情況 1：健康人DC共培養(yǎng)前；2：健康人DC與白念珠菌共培養(yǎng)2 h；3：RVVC患者DC共培養(yǎng)前；4：RVVC患者DC與白念珠菌共培養(yǎng)2 h。14 000～45 000：不同亞型Dectin-1蛋白；42 000：β肌動蛋白。與白念珠菌共培養(yǎng)前后，健康人和RVVC患者DC的Dectin-1蛋白表達(dá)水平均無明顯變化

圖2 Western印跡法分析復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌?。≧VVC）患者和健康人對照樹突細(xì)胞（DC）磷酸化Syk和CARD9表達(dá)情況 1、3：健康人DC共培養(yǎng)前；2、4：RVVC患者DC共培養(yǎng)前；5：健康人DC+白念珠菌；6：RVVC患者DC+白念珠菌；7：抗人Dectin-1抗體+健康人DC+白念珠菌；8：抗人Dectin-1抗體+RVVC患者DC+白念珠菌。共培養(yǎng)2 h，健康人DC+白念珠菌的Syk和CARD9表達(dá)顯著增加，其余3組Syk表達(dá)略有增加，但是相對健康人DC+白念珠菌共培養(yǎng)組增加不明顯，而CARD9表達(dá)幾乎沒有變化

RVVC患者DC與白念珠菌相互作用時，Syk表達(dá)輕度增加，但是增加幅度相對于健康人DC+白念珠菌組不明顯，下游的CARD9表達(dá)活化也不明顯。加入抗人Dectin-1抗體后，RVVC患者DC的Syk和CARD9的表達(dá)沒有進(jìn)一步抑制。

三、RVVC患者 DC的 IL-23、TNF-α和 IL-12分泌降低

經(jīng)過6 h培養(yǎng)，健康人DC單獨培養(yǎng)組分泌的IL-23（t=1.750，P=0.833）、TNF-α（t=0.152，P=0.856）和 IL-12（t=0.607，P=0.450）較培養(yǎng)前并無顯著變化（表2），而DC+白念珠菌組DC分泌的IL-23（t=5.321，P=0.009）、TNF-α（t=6.992，P=0.001）和 IL-12（t=17.141，P=0.000 1）較培養(yǎng)前明顯升高，Dectin-1+DC+白念珠菌組與DC+白念珠菌組相比，DC分泌的 IL-23（t=3.726，P=0.016）、TNF-α（t=5.291，P=0.002） 和 IL-12（t=16.720，P=0.0002）受到顯著抑制。

RVVC患者DC培養(yǎng)6 h，與培養(yǎng)前相比，DC組分泌的 IL-23（t=1.387，P=0.300）、TNF-α（t=9.500，P=0.11）和 IL-12（t=0.898，P=0.464）表達(dá)無顯著變化；與白念珠菌共培養(yǎng)6 h，DC+白念珠菌組 DC 分泌的 IL-23（t=1.863，P=0.204）、TNF-α（t=4.737，P=0.068）和 IL-12（t=1.412，P=0.171）較培養(yǎng)前變化不明顯；Dectin-1+DC+白念珠菌組與DC+白念珠菌組相比，DC分泌的IL-23（t=9.01，P=0.304）、TNF-α（t=3.464，P=0.516）和 IL-12（t=1.600，P=0.449）未見進(jìn)一步降低。

討 論

當(dāng)前RVVC發(fā)病機制側(cè)重于宿主免疫方向研究，包括：①宿主陰道黏膜局部Th1和Th2細(xì)胞分別介導(dǎo)的細(xì)胞免疫和體液免疫之間的平衡（CD4+/CD8+T細(xì)胞的比例）［7］；②單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)介導(dǎo)的固有免疫和獲得性免疫在宿主抗系統(tǒng)性或局部念珠菌感染中的作用［8］；③Toll樣受體家族介導(dǎo)免疫細(xì)胞對念珠菌的識別［9］等。該病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸是多因素共同作用的結(jié)果。一般認(rèn)為DC在宿主陰道黏膜局部抗念珠菌感染免疫反應(yīng)中發(fā)揮核心作用。真菌細(xì)胞壁富含甘露糖、β葡聚糖和幾丁質(zhì)等多糖成分。DC表面的Dectin-1能夠結(jié)合真菌細(xì)胞壁中的β-1,3葡聚糖，介導(dǎo)DC對真菌的識別和自身活化［10］，分泌細(xì)胞因子誘導(dǎo)Th17和Th1活化，啟動抗真菌感染的天然免疫［2］，從而在抗真菌的固有免疫中發(fā)揮主導(dǎo)作用。本實驗我們提取1例RVVC患者單核細(xì)胞，體外誘導(dǎo)分化為DC，研究其免疫功能。

表2 復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病患者和健康人樹突細(xì)胞（DC）與白念珠菌共培養(yǎng)后部分細(xì)胞因子分泌水平（ng/L，±s）

表2 復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病患者和健康人樹突細(xì)胞（DC）與白念珠菌共培養(yǎng)后部分細(xì)胞因子分泌水平（ng/L，±s）

注：v=2

組別 0 6 h 0 6 h 0 6 h健康人D C 6 4.6 7±1 1.5 9 6 7.0 0±1 3.7 3 4 3.6 7±1 0.6 0 4 5.0 0±5.5 7 3 1.0 0±2.6 4 3 3.3 3±4.0 4 D C+白念珠菌 1 5 6.3 3±3 1.5 6 1 2 9.3 3±1 4.2 9 2 0 5.3 3±1 8.0 0 D e c t i n-1+D C+白念珠菌 8 2.3 3±6.1 1 6 7.3 3±6.0 3 6 6.6 7±7.0 9復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病患者D C 6 3.0 0±4.5 8 6 4.6 7±6.6 6 4 1.3 3±4.0 4 4 7.6 7±5.1 3 2 9.6 7±4.7 3 2 9.0 0±7.9 4 D C+白念珠菌 7 3.3 3±5.0 3 5 3.6 7±7.5 7 3 6.0 0±4.5 8 D e c t i n-1+D C+白念珠菌 6 7.3 3±7.2 3 5 7.6 7±6.1 1 3 8.6 7±3.0 5

DC表面的Dectin-1與其配體結(jié)合后，能夠誘導(dǎo)DC的成熟、活化，分泌一系列調(diào)節(jié)抗真菌免疫的細(xì)胞因子［11］。參考相關(guān)領(lǐng)域研究的經(jīng)驗［12］，我們誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化為DC時，培養(yǎng)基只加入GM-CSF和IL-4，缺乏TNF-α、IFN-γ，只能培育出不成熟DC。CD1a是DC區(qū)別于單核細(xì)胞的特異性標(biāo)志，通過篩查CD1a陽性細(xì)胞率可反映單核細(xì)胞誘導(dǎo)為DC的比例。CD83是DC成熟性的標(biāo)志分子，而CD86和CD80是成熟DC表面的協(xié)同刺激分子，與T細(xì)胞結(jié)合后釋放協(xié)同刺激信號，參與T細(xì)胞活化［13］。我們測定 CD1a+CD83+、CD1a+CD86+、CD1a+CD80+細(xì)胞的百分比，能夠在混合細(xì)胞中選擇性反映DC的成熟度。實驗證明，白念珠菌在體外可以誘導(dǎo)健康人DC成熟度增加。由于Dectin-1介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)通路在DC成熟、活化中起重要作用，阻斷Dectin-1受體會影響健康人DC的成熟率。RVVC患者DC對白念珠菌誘導(dǎo)的活化不敏感，且抗Dectin-1抗體沒有進(jìn)一步降低其成熟率，推測Dectin-1介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)通路可能存在障礙，故對該通路的主要信號蛋白進(jìn)行分析。

作為與天然免疫相關(guān)的模式識別受體（PRR），Dectin-1是一種C型凝集素穿膜受體，胞內(nèi)部分含有ITAM樣模體。與Toll樣受體配合，Dectin-1與真菌細(xì)胞壁中的β-1,3葡聚糖結(jié)合后，ITAM中的酪氨酸會被磷酸化［14］，繼而募集 Syk 結(jié)合于其上［15］。活化后的Syk進(jìn)一步活化CARD9，并組裝形成CARD9-BCL10-MALT1 復(fù)合體（CBM）［16］。CBM 繼續(xù)活化NF-κB，后者可以誘導(dǎo)DC合成IL-23、IL-12、TNF-α 等細(xì)胞因子［17］。IL-23 和 TNF-α 等能夠誘導(dǎo)Th17分泌IL-17，而IL-12可以誘導(dǎo)Th1分泌干擾素γ，最終激活巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞吞噬、殺滅真菌［18］。本研究發(fā)現(xiàn)，共培養(yǎng)前后，健康人和RVVC患者DC的Dectin-1蛋白表達(dá)水平?jīng)]有顯著差別。進(jìn)一步分析Syk和CARD9的表達(dá)水平，該RVVC患者DC與白念珠菌共培養(yǎng)時，Syk和CARD9表達(dá)水平較健康人顯著下降。Syk是Dectin-1的靶蛋白，Syk表達(dá)抑制，高度提示Dectin-1的功能缺陷。CARD9是Syk的下游信號蛋白，它的表達(dá)障礙是繼發(fā)于Syk的結(jié)果?？谷薉ectin-1抗體對RVVC患者DC的Syk和CARD9的表達(dá)并沒有進(jìn)一步抑制作用，提示該通路已經(jīng)存在障礙。健康人DC與白念珠菌共培養(yǎng)后分泌的IL-23、TNF-α和IL-12較共培養(yǎng)前顯著升高，而RVVC患者變化不顯著，同時抗人Dectin-1抗體對RVVC患者DC分泌的上述細(xì)胞因子無明顯抑制作用，提示RVVC患者Dectin-1、Syk依賴的信號傳導(dǎo)途徑功能障礙。

本研究結(jié)果提示，該RVVC患者DC的Dectin-1受體活化細(xì)胞內(nèi)Syk障礙，繼而引發(fā)信號傳導(dǎo)通路中其他因子，如CARD9表達(dá)下調(diào)。Syk依賴的信號傳導(dǎo)通路缺陷導(dǎo)致DC自身成熟活化障礙，同時分泌的調(diào)節(jié)宿主抗真菌感染免疫的細(xì)胞因子降低，殺滅真菌的天然免疫功能受損。陰道黏膜局部抗真菌感染免疫缺陷，可能與該患者病情反復(fù)發(fā)作有關(guān)。RVVC發(fā)病因素復(fù)雜，個體差異較大。本研究結(jié)果僅提示了該患者病情復(fù)發(fā)的可能原因，但是Dectin-1通過何種機制干擾下游信號傳導(dǎo)通路以及RVVC人群中有多大比例存在該現(xiàn)象，尚需進(jìn)一步研究。

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