2006～2012年青海省海西州中心血站ELISA實驗室內(nèi)質(zhì)控的回顧性分析

劉志強

2006年衛(wèi)生部頒布了《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實驗室質(zhì)量管理規(guī)范》，在兩個規(guī)范基礎(chǔ)上，本血站逐步完善了實驗室的硬件建設(shè)，建立了符合本血站工作實際的質(zhì)量管理體系、制定了檢驗科標準化操作規(guī)程（SOP）、開展了對檢驗人員培訓、積極參加衛(wèi)生部臨檢中心、省血液質(zhì)量控制中心等的室間質(zhì)評工作，使實驗室檢測能力得到逐步提高。在實驗室能力建設(shè)過程中，本血站也建立和實施了與檢測項目相適應(yīng)的室內(nèi)質(zhì)量控制程序，以保證檢驗結(jié)果達到預期的質(zhì)量標準。實驗室室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)分析是檢測者在常規(guī)的血液檢測過程中認識、分析、改進的重要手段，通過持續(xù)關(guān)注質(zhì)控圖，根據(jù)預先制定的質(zhì)控策略和質(zhì)控圖的提示，決定是否對實驗過程進行干預。本研究選取2006～2012年海西州中心血站血液檢測實驗室的內(nèi)部質(zhì)量控數(shù)據(jù)的變異系數(shù)進行了統(tǒng)計分析，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 質(zhì)控血清 由衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供。含量分別為：HBsAg 0.2 IU/mL，抗-HCV 1 NCU/mL，抗-HIV 0.5 NCU/mL，TP 1 NCU/mL。

1.2 試劑 HBsAg、抗-HCV，抗-HIV，TP檢測試劑盒初檢為北京萬泰，復檢為廈門新創(chuàng)。均為ELISA試劑盒，經(jīng)中國藥品生物制品檢定所檢定合格，每批試劑有廠家完整的批批檢報告單，且經(jīng)血站質(zhì)管科抽檢符合，2℃～8℃儲存，在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器 MultiskanMK 3酶標儀（芬蘭雷勃分析儀器公司，芬蘭）、瑞士Tecansunrise酶標儀（帝肯公司，瑞士）、Tecan hydro flex洗板機（瑞士帝肯公司，瑞士）。

1.4 方法

1.4.1 開始檢測前，操作人員應(yīng)當有充分的時間熟悉試劑或儀器的操作說明，實驗原理，規(guī)格，實驗步驟，局限性，質(zhì)量控制和健康安全信息，檢測人員應(yīng)完全掌握試驗操作、確定關(guān)鍵的操作步驟步驟并正確操作。質(zhì)控血清與待檢標本在本血站ELISA試驗室相同條件下進行檢測，每項檢測均帶一孔質(zhì)控血清，按試劑盒說明書要求進行操作。采用Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控ELISA實驗過程穩(wěn)定性。即在實驗室常規(guī)檢測條件下，連續(xù)測定同一批號的弱陽性質(zhì)控品10～20 d，收集至少20個質(zhì)控數(shù)據(jù)，對數(shù)據(jù)進行離群值檢驗，剔除超過±3 s以外的數(shù)據(jù)，計算標準差、均值、變異系數(shù)值后作Levey-Jennings質(zhì)控框架圖，從21次起以后的檢測數(shù)據(jù)代入Levey-Jennings質(zhì)控框架圖，按照室內(nèi)質(zhì)控的基本方法進行室內(nèi)質(zhì)控。在試驗過程中，如果更換新批號試劑，鑒于ELISA實驗的特性和試劑批間的不穩(wěn)定性，重新建立Levey-Jennings質(zhì)控圖框架。如果更換新批號質(zhì)控品，在試劑批號不變的情況下，采用將新批號質(zhì)控品和舊批號質(zhì)控品同時檢測的方式，以確保在舊批號質(zhì)控品使用結(jié)束前，獲得計算新批號質(zhì)控品均值和標準差的數(shù)據(jù)，建立Levey-Jennings質(zhì)控圖框架。如果質(zhì)控圖使用過程中，出現(xiàn)均值的偏移和標準差變化，需分析并消除產(chǎn)生偏差的原因，重新調(diào)整Levey-Jennings質(zhì)控圖框架，并分析出相應(yīng)的變異系數(shù)。

1.4.2 室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)的匯總和統(tǒng)計 每種試劑或質(zhì)控品批號更換后，對該檢測項目質(zhì)控數(shù)據(jù)的平均數(shù)、標準差和變異系數(shù)（CV）統(tǒng)計、分析、匯總整理并存檔。

1.4.3 本資料所用CV值為2006～2013年每個檢測項目初檢、復檢的原始質(zhì)控數(shù)據(jù)CV的累積變異系數(shù)。

1.5 統(tǒng)計學方法使用簡明統(tǒng)計軟件Concise Statistics,CS 10.34，采用秩和檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

7年間各項目ELISA實驗室內(nèi)質(zhì)控變異系數(shù)（CV）比較見表1。

表1 7年間各項目ELISA實驗室內(nèi)質(zhì)控變異系數(shù)（CV）比較

3 討論

實驗室內(nèi)質(zhì)量控制是實驗室質(zhì)量保證體系中的重要組成部分，是監(jiān)測和評價實驗室工作質(zhì)量采取的必要的檢查和控制手段。室內(nèi)質(zhì)控能確保實驗室血液檢測結(jié)果的分析誤差控制在允許限度內(nèi)，從而保證分析結(jié)果具有一定精密度和準確度，使檢測數(shù)據(jù)在規(guī)定的置信概率內(nèi)，保證測定結(jié)果的穩(wěn)定性，將測定結(jié)果的精密度控制在一定的允許范圍內(nèi)，并能及時發(fā)現(xiàn)、分析出檢測過程產(chǎn)生誤差諸因素中（包括方法、標準物、儀器設(shè)備、試劑、操作者水平等）是那個因素起著較大作用，以便有針對性地改進工作。室內(nèi)質(zhì)控通常采用試劑盒陰陽性對照、弱陽性質(zhì)控品實時監(jiān)控實驗的有效性，同時采用弱陽性質(zhì)控品和Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控實驗的穩(wěn)定性。

表1顯示，通過對2006～2012年變異系數(shù)的對比分析，海西州中心血站隨著實驗室設(shè)備、環(huán)境硬件能力提高、檢測人員水平持續(xù)改進，實驗室檢測能力逐年提高。海西州中心血站ELISA實驗室一直使用半自動化檢測血液樣品，在此過程中衛(wèi)生部2006年《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實驗室質(zhì)量管理規(guī)范》、2012年《血站技術(shù)操作規(guī)程（2012版）》出臺，海西州中心血站ELISA實驗室也依據(jù)兩個規(guī)范建立了《實驗室標準操作規(guī)程》并結(jié)合血站工作實際進行修訂和換版，逐步完善實驗操作程序的規(guī)范化，持續(xù)改進其有效性，確保了血液檢測的準確性；運行了血站信息化管理系統(tǒng)《唐山現(xiàn)代血站信息化管理系統(tǒng)5.0》；更新了檢測設(shè)備酶標儀，由國產(chǎn)設(shè)備更換為進口設(shè)備；加強了對檢測人員的培訓和操作能力的提高。通過這些措施的開展，血站實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制工作逐年提高，各項檢測項目內(nèi)質(zhì)控變異逐年降低充分說明基層血站實驗室建立和開展完善的血站實驗室管理工作，可以有效保證血液檢測的準確性。

通過對表1數(shù)據(jù)分析，在2012年本站因升級換代血站信息管理系統(tǒng)和更換了酶標儀、洗板機等部分檢測設(shè)備，CV值略有增大，這與實驗工作人員對新的軟硬件設(shè)備的操作熟練度有一定的關(guān)聯(lián)，這將在今后工作中持續(xù)關(guān)注并改進。

基層中心血站實驗室檢測硬件與人員素質(zhì)等方面相對薄弱，通過本站ELISA實驗室內(nèi)質(zhì)控變異系數(shù)的分析，ELISA試驗過程影響因素較多[1]，要建立能確保臨床用血檢測安全的實驗室，就要持續(xù)改進和完善實驗室工作人員、儀器設(shè)備、質(zhì)量控制等軟硬件的建設(shè)和管理：（1）加強引進高學歷、高職稱的技術(shù)人員[2]來本站進行技術(shù)指導與業(yè)務(wù)幫扶，加強本站檢驗工作人員的業(yè)務(wù)能力的培訓，提高檢驗人員質(zhì)量意識，嚴格執(zhí)行標準化操作規(guī)程規(guī)范操作[3]，明確職責，強化考核，規(guī)范工作人員行為，減少人為因素造成的實驗偏差；（2）加強并完善實驗室硬件建設(shè)，引進先進的儀器設(shè)備和計算機管理軟件，加強對設(shè)備的維護和保養(yǎng)，定期校準，盡可能消除操作環(huán)節(jié)中的誤差，保證加樣量的準確，確保檢測結(jié)果穩(wěn)定。本站實驗室先后更新了酶標儀、洗板機等設(shè)備并定期校準，升級了血站信息管理系統(tǒng)；逐步使實驗室的軟件硬進一步滿足實驗要求，保證實驗結(jié)果的準確和穩(wěn)定；（3）持續(xù)改進和完善實驗室環(huán)境，保證穩(wěn)定的溫濕度等試驗條件，確保實驗檢測結(jié)果準確、穩(wěn)定；（4）建立實施符合本實驗室的內(nèi)質(zhì)控方法，完善質(zhì)控框架。按照《血站技術(shù)操作規(guī)程（2012版）》附錄D要求，采用Levey-Jennings質(zhì)控圖，采用弱陽性質(zhì)控品和Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控實驗的穩(wěn)定性；（5）降低試劑批間變異[4-5]，根據(jù)實驗室使用試劑的頻次，科學合理定購試劑數(shù)量，盡量增大同一批號的試劑和質(zhì)控品的庫存量，并嚴格按規(guī)定的條件貯存和使用[6]，工作人員還要注意試劑或質(zhì)控品更換時按要求及時做好質(zhì)控圖框架的構(gòu)建[7]，確保實驗的穩(wěn)定，最大限度降低試劑批間差造成的系統(tǒng)誤差；（6）參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心和青海省臨床檢驗中心血的室間質(zhì)評，重視外部審核，認真聽取審核員的意見和建議，改變慣性思維，及時采取糾正措施，改進不足[7]，以確保室驗室檢測結(jié)果的準確性。

綜上所述，做為基層血站ELISA實驗室必須按照《血站實驗室質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實驗室質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站技術(shù)操作規(guī)程（2012版）》等相關(guān)規(guī)范，按標準化、規(guī)范化、制度化、科學化要求進行實驗室建設(shè)和管理,不斷完善和持續(xù)改進實驗室質(zhì)量體系,深入開展室內(nèi)質(zhì)控和參加室間質(zhì)評活動[8],才能提高ELISA實驗室檢測能力與水平，保證血液檢測質(zhì)量，保障臨床用血的安全。

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