前列腺素E（凱時）改善糖尿病大鼠周圍神經(jīng)傳導速度研究

孫世博，劉宗武，吳易航

1.長春市中心醫(yī)院干診科，吉林長春 130051；2.吉林省人民醫(yī)院心內科，吉林長春 130021；3.華中科技大學醫(yī)學部，湖北武漢 430074

前列腺素E（凱時）改善糖尿病大鼠周圍神經(jīng)傳導速度研究

孫世博1，劉宗武2，吳易航3

1.長春市中心醫(yī)院干診科，吉林長春 130051；2.吉林省人民醫(yī)院心內科，吉林長春 130021；3.華中科技大學醫(yī)學部，湖北武漢 430074

目的探討前列腺素E（凱時）改善糖尿病大鼠周圍神經(jīng)病變(DPN)作用，并通過觀察不同時間點給藥的治療效果，從而探索凱時用于糖尿病周圍神經(jīng)?。―PN）的最佳治療時間點。方法①應用鏈脲佐菌素（STZ）腹腔注射造Ⅰ型糖尿?。―M）大鼠模型；②分組：正常對照組、糖尿病組、凱時治療組，其中后兩組又隨機分為5個時間觀察點（0周、2周、4周、8周、12周）；③用尼高力肌電圖機檢測不同時間點每組大鼠坐骨神經(jīng)運動及感覺神經(jīng)傳導速度。結果①應用STZ腹腔注射可成功造模。②糖尿病大鼠4周時已經(jīng)開始出現(xiàn)坐骨神經(jīng)感覺運動傳導速度減慢，并且隨病程延長逐漸加重，即病損程度與病程呈正相關。③凱時具有明顯的改善周圍神經(jīng)運動感覺傳導速度的作用，在4周后不同時間點給藥均可改善神經(jīng)傳導速度，給藥時間越早，運動感覺神經(jīng)傳導速度改善越顯著，治療效果越好。結論指導臨床治療糖尿病周圍神經(jīng)病（DPN）的最佳治療時間點，即在運動感覺神經(jīng)傳導速度剛剛開始減慢時給藥治療效果最佳，并可見延緩病程進展。

糖尿?。恢車窠?jīng)??；坐骨神經(jīng)傳導速度；前列腺素E（凱時）

糖尿病周圍神經(jīng)?。―PN）是糖尿病常見的慢性并發(fā)癥之一，是糖尿病的代謝障礙導致的周圍神經(jīng)病，臨床上屬于亞急性感覺運動麻痹綜合征Ⅱ類，是亞急性非對稱性多灶性多發(fā)神經(jīng)病、多數(shù)性單神經(jīng)病的典型類型。采用嚴格標準的人群調查資料顯示，糖尿病性神經(jīng)病發(fā)病率約30%。我國報道糖尿病性神經(jīng)病變約占糖尿病病例的4%～6.1%，常見于50歲以上糖尿病病人，30歲以下病人少見，兒童糖尿病患者罕見。DPN常見類型是遠端對稱性感覺性多發(fā)性神經(jīng)病伴自主神經(jīng)功能障礙。糖尿病遠端對稱性多發(fā)性神經(jīng)病的主要病損是有髓神經(jīng)纖維缺失，軸突階段性脫髓鞘及髓鞘形成，偶見反復脫髓鞘及Schwann細胞髓鞘再生導致洋蔥頭樣改變，無髓鞘纖維減少，后根、脊髓后柱、灰白交通支及交感神經(jīng)節(jié)可見類似改變。病變可累及中樞神經(jīng)以及周圍神經(jīng)，以累及后者更為常見，約占60%以上，周圍神經(jīng)病變的臨床表現(xiàn)為四肢遠端對稱性的或非對稱性的運動、感覺以及自主神經(jīng)功能障礙，起病隱襲，最初肢體遠端持續(xù)麻木，足底燒灼感、針刺感和刀割樣疼痛等，多在夜間加重，病程較長，隨病程延長癥狀性加重，目前尚無確切的預防及治療方法，發(fā)病機制尚未完全闡明，考慮與微血管病變學說、生化及代謝異常學說、免疫及遺傳等多方面原因有關。該研究目的在于探尋糖尿病大鼠出現(xiàn)運動感覺神經(jīng)傳導速度改變始動時間點，病變嚴重程度是否與病程存在相關性；同時在不同時間點給予前列腺素E（凱時）能否改善神經(jīng)傳導速度，哪個時間點開始給藥治療效果最顯著，傳導速度剛剛開始改變時給藥即早期給藥是否與治療效果存在正相關，從而找尋最佳給藥時間點，以達到最佳治療效果，減輕病人痛苦，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物分組

選取體重為200～220 g的健康成熟Wistar大鼠80只，隨機選取10只為正常對照組（NC組），其余70只作為糖尿病大鼠制備模型，7 d后選取造模成功的糖尿病大鼠60只，隨機分為兩組：糖尿病大鼠組（DM組）28只、糖尿病大鼠+凱時組（DM+凱時組）32只。予凱時10μg/(kg·d)尾靜脈靜注,連續(xù)10 d制備凱時給藥組。剔除未成模大鼠10只。

1.2 實驗性糖尿病大鼠模型的制備

①制模：造模前大鼠需嚴格禁食24 h，可不禁水，禁食滿24 h后用即時配制的STZ溶液，按50mg/kg的劑量，大鼠腹腔內注射，72 h后，用德國拜耳血糖儀測尾靜脈血糖，非空腹血糖持續(xù)3 d≥16.7mmo1/L為Ⅰ型糖尿病大鼠模型，血糖<16.7mmol/L的為未成模大鼠。

②正常對照組大鼠僅予腹腔注射等體積的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。

1.3 大鼠坐骨神經(jīng)傳導速度的測定

將各組大鼠用10%水合氯醛（300 mg/kg）麻醉后，用尼高力肌電圖機檢測成模后不同時間觀察點（0周、2周、4周、8周、12周）大鼠下肢坐骨神經(jīng)運動和感覺傳導速度。

（1）運動神經(jīng)傳導速度（MNCV）測定：①大鼠取仰臥位，然后放置電極，固定刺激電極的位置后給予電刺激；②刺激量由小到大逐漸增加至超強刺激，引起肌肉動作電位的最大強度后再增加20%～30%，至出現(xiàn)穩(wěn)定的肌肉動作電位；③神經(jīng)傳導速度的計算：公式為：神經(jīng)傳導速度（m/s）=兩點間距離（cm）距離×10/兩點間潛伏期差值（ms）。波幅的測定通常取峰-峰值。

（2）感覺神經(jīng)傳導速度（SNCV）：順行測定法是將刺激電極置于感覺神經(jīng)遠端，記錄電極置于神經(jīng)干的近端，然后測定其潛伏期和記錄感覺神經(jīng)動作電位（SNAPs）；波幅采用峰-峰值，刺激電極與記錄電極之間的距離除以潛伏期為SCV。

1.4 統(tǒng)計方法

應用SPSS軟件包對各計量資料進行統(tǒng)計學分析，實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示。

2 各組大鼠坐骨神經(jīng)傳導速度測定數(shù)值

2.1 運動傳導速度測定數(shù)值

分別檢測各組大鼠不同時間點（0周、2周、4周、8周、12周）坐骨神經(jīng)運動傳導速度（MNCV）。結果：成模前及成模1個月內糖尿病(DM)組和正常對照（NC）組大鼠運動神經(jīng)傳導速度（MNCV）無顯著差異；自成模開始后1個月，糖尿?。―M）組大鼠MNCV開始逐漸減慢，并隨發(fā)病時間延長而逐漸加重；糖尿病(DM)+凱時組分別在4周、8周、12周時間觀察點給藥均能改善神經(jīng)傳導速度，自4周開始給藥大鼠MNCV減慢速度較8周、12周組顯著減緩，8周時給藥較12周MNCV減慢延緩；4周、8周、12周時與正常對照（NC）組比較均差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。

表1 大鼠坐骨神經(jīng)MNCV測定動態(tài)變化比較[m/s，]

表1 大鼠坐骨神經(jīng)MNCV測定動態(tài)變化比較[m/s，]

注：*與正常對照組比較，P<0.05。

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2.2 感覺神經(jīng)傳導速度測定結果

分別檢測各組大鼠不同時間點（0周、2周、4周、8周、12周）坐骨神經(jīng)感覺傳導速度（SNCV）。結果：成模前及成模1個月內糖尿?。―M）組和正常對照（NC）組大鼠SNCV無顯著差異；自成模后1個月，糖尿?。―M）組大鼠SNCV開始逐漸減慢，并隨發(fā)病時間延長而逐漸加重；糖尿?。―M）+凱時組分別在4周、8周、12周給藥均能改善感覺神經(jīng)傳導速度（SNCV），自4周開始給藥大鼠SNCV減慢速度較8周、12周組顯著減緩，8周時給藥較12周MNCV減慢延緩；4周、8周、12周時與正常對照（NC）組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。

表2 各組大鼠坐骨神經(jīng)SNCV動態(tài)變化比較[m/s，]

表2 各組大鼠坐骨神經(jīng)SNCV動態(tài)變化比較[m/s，]

注：*與正常對照組比較，P<0.05。

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3 討論

改革開放以來，我國糖尿病患者逐年上升，發(fā)病率居高不下，30年以來大約增加了5～6倍，目前我國糖尿病患者總數(shù)己達5000萬人以上，糖尿病周圍神經(jīng)病變占其并發(fā)癥比例尤為增高。美國的一項年齡18歲以上89643例群體樣本調查發(fā)現(xiàn)糖尿病患者2592人，感覺性癥狀體征的發(fā)生率在胰島素依賴性糖尿?。↖D-DM）患者為30.2%，在非胰島素依賴性糖尿病（NIDDM）男性患者為36%，NIDDM女性患者39.8%，非糖尿病男、女發(fā)病率分別為9.8%和11.8%。目前缺乏特效確切的治療藥物及防治方法。前列腺素E1(prostaglandin E1,PGE1)是一種高效生理活性物質,目前臨床應用的凱時是一種新型制劑，特點是PGE1受到脂微球的保護,可以有效減少其在肺臟中的失活,減少對血管的刺激，不良反應小、效果好[1]。同時具有抑制血小板聚集,改善微循環(huán)的作用。近年來,還用于糖尿病周圍神經(jīng)病變的治療[2]。前列腺素E1還是一種有多種生物活性的血管擴張劑[3]。該研究發(fā)現(xiàn)：DM組大鼠4周后開始出現(xiàn)MNCV、SNCV減低，隨病程延長呈進行性減慢趨勢，自4周開始給藥大鼠MNCV減慢速度較8周、12周組顯著減緩，8周時給藥較12周MNCV減慢延緩。說明DM大鼠早期周圍神經(jīng)即可出現(xiàn)明顯的神經(jīng)功能障礙，且其損傷程度隨病程延長而加重，應用前列腺素E可明顯改善神經(jīng)傳導速度，尤其在剛剛出現(xiàn)神經(jīng)傳導速度下降時即早期干預治療效果明顯，前列地爾對DPN患者的臨床癥狀及神經(jīng)傳導速度均有顯著的改善作用,應用過程中未見明顯全身不良反應,與楊麗等[4-5]研究結果相似。提示臨床早期應用，早期獲益。

[1]伊麗瑾,岳蘊華.綜合治療糖尿病周圍神經(jīng)和實驗醫(yī)學雜志,2005,4(1):25-27.

[2]譚元菊,安崢.前列地爾治療糖尿病性周圍神經(jīng)病變的中國醫(yī)院用藥評價與分析,2004,4(3):175-177.

[3]孫正凱.前列地爾治療老年糖醫(yī)藥,2005,46(16):73.

[4]孟俊華,李曉英,邵麗敏,等.前列地爾治療糖尿的療效和安全性.藥物不良反應雜志,2006,8(1)：22-23.

[5]楊麗.前列地爾治療糖尿病周圍神經(jīng)病變的療院學報, 2006,27(1):95.

Prostaglandin E(Kai Shi)to Im prove Peripheral Nerve Conduction Velocity in Diabetic Rats

SUN Shi-bo1，LIU Zong-wu2，WU Yi-hang3
1.Changchun Central Hospital,Changchun,Jilin Province,130051 China;2.People's Hospital of Province,Changchun,Jilin Province,130021 China;3.Huazhong University of Science and Technology,Wuhan,Hubei Province,430074 China

ObjectiveTo investigate the effect of prostaglandin E(Kai Shi)on peripheral nerve lesions(DPN)in diabetic rats and to explore the best treatment time of for diabetic peripheral neuropathy(DPN)by observing the therapeutic effect of different time points.Methods1,the application of streptozotocin(STZ).element(STZ)intraperitoneal injection made in type 1 diabetesmellitus(DM)ratsmodel;2,divided into two groups:normal control group,diabetes group and Kay in the treatment group.The 2 group were randomly assigned for treatment of five time point(0 week,2 weeks,4 weeks,8 weeks and 12 weeks);3,with a Nicolet EMGmachine detected at different time points in each group of rats sciatic nervemotor and sensory nerve conduction velocity.ResultsSTZwas successfully used tomake a successfulmodel.II in diabetic rats at 4 weeks have begun to sciatic nervemotor and sensory conduction velocity slowing,and as the disease aggravated,namely lesion degree and duration of illness was positively.In the 4 weeks,the effect of the sensory conduction velocity of peripheral nerve conduction velocity,which can improve the nerve conduction velocity,the sooner the time of administration,the more significant themotor sensory nerve conduction velocity,the better the treatment effect.ConclusionThe best treatment time points for the clinical treatment of diabetic peripheral neuropathy(DPN),that is,the effect of the treatment of the nerve conduction velocity of sensory nerve is the best,and can be seen to delay the progress of the disease.

Diabetes;Peripheral neuropathy;Sciatic nerve conduction velocity;Prostaglandin E(Kai Shi)

R587.1

A

1672-4062（2015）11（a）－0087-03

10.16658/j.cnki.1672-4062.2015.21.087

2015-08-04）

孫世博（1980.12-），女，吉林長春人，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向：神經(jīng)病學。

劉宗武（1977.10-），吉林人，碩士，副主任醫(yī)師，研究方向：心血管的介入治療。