1%甲基硫菌靈糊劑的高效液相色譜法測(cè)定

曲鵬晶

（1.山西省應(yīng)用化學(xué)研究所，山西 太原 030027；2.山西省化肥農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站，山西 太原 030027）

引 言

甲基硫菌靈是一種農(nóng)用的廣譜性內(nèi)吸低毒殺菌劑，具有內(nèi)吸、預(yù)防和治療作用。1%甲基硫菌靈糊劑是由甲基硫菌靈原藥與適宜的填料、助劑和水加工制成的殺菌劑。甲基硫菌靈糊劑作為一種新的劑型農(nóng)藥，外觀呈均勻的糊狀物，用以防治蘋果樹腐爛病、輪紋病及干腐病等，效果明顯，深受廣大用戶的好評(píng)［1］。

目前，1%甲基硫菌靈糊劑的測(cè)定沒有相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，亦未檢索到采用本實(shí)驗(yàn)所用樣品處理分析實(shí)驗(yàn)條件的報(bào)道。本文采用反相高效液相色譜法測(cè)定甲基硫菌靈含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法甲基硫菌靈在一定的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，平均回收率為99.35%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.930 7%。該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確可行、靈敏度高。

1 實(shí)驗(yàn)部分［2－5］

1.1 方法提要

試樣用甲醇溶解，以V（甲醇）＋V（水）＝70＋30為流動(dòng)相，采用C18反相色譜柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，在275nm波長(zhǎng)下，對(duì)試樣中的甲基硫菌靈進(jìn)行高效液相色譜分離和測(cè)定，以外標(biāo)法定量。

甲基硫菌靈化學(xué)名稱：1，2－二（3－甲氧碳基－2－硫脲基）苯。

甲基硫菌靈結(jié)構(gòu)式：

1.2 試劑與儀器

甲醇，色譜純，天津市大茂化學(xué)試劑廠；

水，新蒸二次蒸餾水，自制；

甲基硫菌靈標(biāo)樣，已知準(zhǔn)確質(zhì)量分?jǐn)?shù)，≥98.0%，沈陽(yáng)化工研究院；

1%甲基硫菌靈糊劑試樣，山西省應(yīng)用化學(xué)研究所、山西北方果康寶農(nóng)藥有限公司。

高效液相色譜儀，SY8000（具可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器）；

數(shù)據(jù)處理機(jī)；

色譜柱，SinoChorm ODS－BP，200mm×4.6mm（i.d.）不銹鋼柱，內(nèi)裝C18填充物，5μm；

磨口燒瓶，25mL；

水浴恒溫振蕩器，SHA－C，金壇市白塔金昌實(shí)驗(yàn)儀器廠；

超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；

過濾器，濾膜孔徑約0.45μm。

1.3 高效液相色譜操作條件

流動(dòng)相，V（甲醇）＋V（水）＝70＋30，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后脫氣20min；

流速，1.0mL／min；

柱溫，室溫±2℃；

檢測(cè)波長(zhǎng)，275nm；

進(jìn)樣體積，10μL；

保留時(shí)間，甲基硫菌靈約6.2min。

上述液相色譜操作參數(shù)是典型的，可根據(jù)不同儀器的特點(diǎn)對(duì)給定操作參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取甲基硫菌靈標(biāo)樣0.05g（精確至0.000 2g）于50mL容量瓶中，用甲醇溶解稀釋并定容，搖勻，用0.45μm孔徑過濾器過濾，備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取含甲基硫菌靈0.05g（精確至0.000 2g）的試樣于50mL容量瓶中，先加入適量甲醇溶液，超聲提取10min，再用甲醇稀釋并定容，搖勻靜置，用0.45μm孔徑過濾器過濾，取清液備用。

1.5 測(cè)定

1.3操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值的重復(fù)性。待相鄰2針甲基硫菌靈的相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.5%時(shí)，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.6 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前、后2針標(biāo)樣溶液中甲基硫菌靈的峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中甲基硫菌靈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X（%）按式（1）計(jì)算。

式中：A1為標(biāo)樣溶液中甲基硫菌靈峰面積的平均值；A2為試樣溶液中甲基硫菌靈峰面積的平均值；m1為甲基硫菌靈標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣質(zhì)量，g；P為甲基硫菌靈標(biāo)樣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；2為稀釋換算系數(shù)。

1.7 液相色譜圖

甲基硫菌靈標(biāo)樣和1%甲基硫菌靈糊劑試樣的高效液相色譜圖見圖1和圖2。

2 結(jié)果與討論

2.1 萃取有機(jī)溶劑及流動(dòng)相的選擇

圖1 標(biāo)樣溶液中甲基硫菌靈的液相色譜圖

圖2 1%甲基硫菌靈糊劑試樣溶液中甲基硫菌靈的液相色譜圖

對(duì)于1%甲基硫菌靈糊劑的萃取，我們選用不同的有機(jī)溶劑混合浸取進(jìn)行測(cè)試，最后選定甲醇溶劑。樣品經(jīng)浸泡、振蕩、超聲處理，分離效果最好。分別試用不同比例的甲醇－水作為流動(dòng)相對(duì)試樣進(jìn)行分離檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)體積比為55∶45比較合適，得到了分離完全、峰型對(duì)稱、尖銳的甲基硫菌靈色譜峰。同時(shí)，為了使甲基硫菌靈的保留時(shí)間適當(dāng)，采用1.0mL／min的流速進(jìn)行分析。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

經(jīng)200nm～290nm紫外波長(zhǎng)范圍內(nèi)對(duì)標(biāo)樣溶液進(jìn)行掃描發(fā)現(xiàn)，在222nm處甲基硫菌靈有較強(qiáng)吸收峰，最終選定275nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.3 分析方法的線性相關(guān)性測(cè)定

在1.3色譜條件下，分別配制5個(gè)不同濃度的甲基硫菌靈標(biāo)樣溶液，按上述液相色譜條件進(jìn)樣，每個(gè)濃度分析2次，求其峰面積的平均值。以甲基硫菌靈質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、甲基硫菌靈峰面積為縱坐標(biāo)，繪出線性關(guān)系圖（見表1和圖3）。甲基硫菌靈的線性方程為y＝6 375.2x－1 691.8，相關(guān)系數(shù)為r＝0.996 2。

表1 線性相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

圖3 甲基硫菌靈的線性關(guān)系圖

2.4 分析方法的精密度實(shí)驗(yàn)

按實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)同一樣品中的甲基硫菌靈質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行5次平行測(cè)定，并進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)偏差及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的統(tǒng)計(jì)運(yùn)算，結(jié)果見表2。由表2得到，本方法對(duì)同一樣品中甲基硫菌靈分析的標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.245×10－2，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.930 7%。

表2 精密度測(cè)定數(shù)據(jù)

2.5 方法的準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

在一已知準(zhǔn)確質(zhì)量分?jǐn)?shù)的試樣中加入不同質(zhì)量的甲基硫菌靈標(biāo)樣，按實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行衍生化處理后進(jìn)樣分析，測(cè)定本方法的加標(biāo)回收率。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表3。測(cè)得甲基硫菌靈的回收率在97.10%～102.27%，平均回收率為98.26%?？梢?，本實(shí)驗(yàn)方法的準(zhǔn)確度能滿足定量要求。

3 結(jié)論

采用高效液相色譜法測(cè)定1%甲基硫菌靈糊劑中甲基硫菌靈含量，在實(shí)驗(yàn)的色譜條件下得到良好的分離，檢測(cè)波長(zhǎng)222nm，流速1.0mL／min。該方法甲基硫菌靈在一定的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，甲基硫菌靈的平均回收率99.35%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差2.930 7%。該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確可行、靈敏度高，適用于產(chǎn)品的質(zhì)量控制和檢驗(yàn)分析。

表3 方法的準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

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