40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑高效液相色譜分析

覃華全楊春燕蔡鳳英

(1.珠海真綠色技術(shù)有限公司,廣東 珠海 519000 ; 2.廣東植物龍生物技術(shù)股份有限公司， 廣東 珠海 519000)

40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑高效液相色譜分析

覃華全1楊春燕2蔡鳳英2

(1.珠海真綠色技術(shù)有限公司,廣東 珠海 519000 ; 2.廣東植物龍生物技術(shù)股份有限公司， 廣東 珠海 519000)

本文采用簡(jiǎn)易便捷高效液相色譜法分析方法，對(duì)40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑復(fù)配制劑進(jìn)行定量定性分析，使用C18反相柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，以甲醇-水為流動(dòng)相，用外標(biāo)法對(duì)有效成分進(jìn)行分析定量。配制一系列濃度己唑醇(甲基硫菌靈)標(biāo)準(zhǔn)溶液，以己唑醇(甲基硫菌靈)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以己唑醇(甲基硫菌靈)峰面積作為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，相關(guān)系數(shù)r均為0.999。標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.19、0.055，變異系數(shù)分別為0.54%、1.06%，平均回收率分別為100%、100.2%。

甲基硫菌靈；己唑醇；高效液相色譜；分析

甲基硫菌靈(thiophanate-methyl)和己唑醇(hexaconazole)均為廣譜性低毒殺菌劑，對(duì)防治白粉病，銹病等都有良好的效果，經(jīng)過大量的藥效證明，二者復(fù)配做成懸浮劑后，速效性和防御性能得到大大提高，具有很好的市場(chǎng)潛力。目前上末見公開報(bào)道有關(guān)這兩個(gè)成分復(fù)配后的分析方法報(bào)道。[1-3]

所以經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)后，本文提出采用反相高效液相色譜法，采用常規(guī)C18柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，對(duì)有效成分進(jìn)行分析和定量。這個(gè)方法既簡(jiǎn)便又快速，適用于生產(chǎn)廠家對(duì)于產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)分析或者檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)對(duì)產(chǎn)品檢驗(yàn)。[4]

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

安捷倫1120型高效液相色譜儀，具有紫外可變波長(zhǎng)的檢測(cè)器。

甲醇色譜純；水為新蒸二次蒸餾水；甲基硫菌靈：純度≥98.0，己唑醇：純度≥98.0(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)院)；40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑(廣東植物龍生物技術(shù)股份有限公司研制)。

1.2 色譜條件

色譜柱：Agilent SB-C18 250mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，粒徑5μm；檢測(cè)器波長(zhǎng)：210nm，流動(dòng)相：甲醇∶水 = 85∶15(v/v)；流速：1.0mL/min；進(jìn)樣體積：10μL；柱溫：室溫；保留時(shí)間：甲基硫菌靈約2.8min，己唑醇約 5.2min。

1.3 溶液配制

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

稱取己唑醇標(biāo)準(zhǔn)品0.01g(精確到0.0002g)和甲基硫菌靈標(biāo)準(zhǔn)品0.07g(精確到0.0002g)，置于同一個(gè)25mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別移取上述溶液1mL同一個(gè)10mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。

1.3.2 試樣溶液配制

稱取40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑0.2g(精確到0.0002g)，置于25ml容量瓶中，先加3mL水稀釋，再用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。移取上述溶液1.0mL于10mL容量瓶，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，經(jīng)0.22μm濾膜過濾，清液待用。

1.4 測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，待相鄰兩針響應(yīng)值變化小于1.2%時(shí)，按照標(biāo)樣溶液，試樣溶液，試樣溶液，標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。典型的40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑色譜圖分別見圖1。

圖1 40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑的高效液相色譜圖

1.5 計(jì)算

將測(cè)得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中己唑醇(甲基硫菌靈)的峰面積分別進(jìn)行平均。己唑醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X(%)按下式計(jì)算。

式中：A1為標(biāo)樣溶液中己唑醇(甲基硫菌靈)的峰面積的平均值；A2為試樣溶液中己唑醇(甲基硫菌靈)的峰面積的平均值；m1為己唑醇(甲基硫菌靈)標(biāo)樣的質(zhì)量(g)；m2為試樣的質(zhì)量(g)；ω為標(biāo)樣己唑醇(甲基硫菌靈)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，數(shù)值以%表示。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性相關(guān)曲線

稱取己唑醇(99.0%)標(biāo)準(zhǔn)品0.0725g于25mL容量瓶中，甲醇溶解定容，分別吸取0.05mL、0.08mL、0.1mL、0.12mL、0.15mL于10mL容量瓶中，流動(dòng)相溶解定容。稱取甲基硫菌靈(99.0%)標(biāo)準(zhǔn)品0.0514g于另一25mL容量瓶中，甲醇溶解定容分別吸取0.5mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL、1.5mL于上述10mL容量瓶中，流動(dòng)相溶解定容。按照4.3.4測(cè)定方法，以己唑醇(甲基硫菌靈)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)，以己唑醇(甲基硫菌靈)峰面積作為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到己唑醇線性方程為y=-1637+33835x，相關(guān)系數(shù)r為0.999，甲基硫菌靈線性方程y=-12099+60256x，相關(guān)系數(shù)r為0.999，說明該線性相關(guān)曲線中的x與y之間的線性關(guān)系是顯著相關(guān)的，所建立的回歸直線方程是合理的。

2.2 精密度測(cè)定

方法精密度的測(cè)定通過對(duì)同一樣品進(jìn)行5次平行測(cè)定，測(cè)得的己唑醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.055，變異系數(shù)為1.06%，甲基硫菌靈質(zhì)量分?jǐn)?shù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.19，變異系數(shù)為0.54%，由表1可知該方法精密度較高。

表1 40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑精密度測(cè)定結(jié)果

2.3 準(zhǔn)確度測(cè)定

方法準(zhǔn)確度的測(cè)定采用標(biāo)準(zhǔn)加入法，稱取5份已測(cè)己唑醇(甲基硫菌靈)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的試樣，分別加入一定質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)樣品，按上述測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得己唑醇回收率在98%～102%之間，甲基硫菌靈回收率在98%～102%之間，測(cè)定數(shù)據(jù)見表2。

表2 40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑回收率測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)語(yǔ)

本文根據(jù)實(shí)際需要提出對(duì)40%甲基硫菌靈·己唑醇懸浮劑中有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)的分析方法，從實(shí)驗(yàn)線性相關(guān)曲線、精密度和回收率得知，此方法具有較高可行性，并且操作簡(jiǎn)單，快捷，具有較高的實(shí)用價(jià)值。

[1]劉長(zhǎng)令.世界農(nóng)藥大全:殺菌劑卷[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2006:281-282.

[2]劉長(zhǎng)令.世界農(nóng)藥大全:殺菌劑卷[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2008:170-171.

[3]畢秋艷.二元?dú)⒕鷦?fù)配增效機(jī)理初探[D].保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué).

[4]中國(guó)化工標(biāo)準(zhǔn)化研究所，中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社第二編輯室.農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)匯編.通用方法[M].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2006:108.129,479-483.