基于氣相色譜法的湖南油茶籽油摻雜判定

佘佳榮 ，晁 燕 ，譚利娟

（1.湖南省林產(chǎn)品質(zhì)量檢驗檢測中心，湖南 長沙 410004；2.中南林業(yè)科技大學(xué)，湖南 長沙 410004；3.湖南林之神生物科技有限公司，湖南 長沙 410004）

基于氣相色譜法的湖南油茶籽油摻雜判定

佘佳榮1，2，晁 燕3，譚利娟1

（1.湖南省林產(chǎn)品質(zhì)量檢驗檢測中心，湖南 長沙 410004；2.中南林業(yè)科技大學(xué)，湖南 長沙 410004；3.湖南林之神生物科技有限公司，湖南 長沙 410004）

對自行提取的16個湖南油茶籽樣品和20家油茶籽油生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的油茶籽油進(jìn)行了氣相色譜法脂肪酸組成測定，并對摻入了不同比例豆油、花生油、玉米油、葵花籽油、菜籽油、米糠油、棕櫚油和油茶籽油組成的二元體系樣品進(jìn)行了脂肪酸組成分析，通過分析脂肪酸組成的變化，建立了快速、精準(zhǔn)地檢測油茶籽油中摻雜大豆油、花生油、玉米油、葵花油、菜籽油、米糠油、棕櫚油含量的氣相色譜油茶籽油摻假判定方法。

油茶籽油；氣相色譜法；摻雜物質(zhì)

根據(jù)美國國家醫(yī)藥中心實驗證實：茶油對降低膽固醇和抗癌有一定的功效，在國際上被稱“長壽油”[1-2]。 茶油也被《中國藥典》作為藥用油收載[3]。因此，油茶籽油深受國內(nèi)國際市場歡迎。山茶樹每年采收一次，種植周期比較長，新種的茶樹需要5～6 a才能采收果實，且山茶樹的產(chǎn)量不高，一公頃茶園產(chǎn)油量1.3 kg左右，茶籽油貨緊價揚(yáng)。近幾年來，市場上開始出現(xiàn)了以廉價的大豆油、花生油、玉米油、米糠油、菜籽油、棕櫚油等植物油摻入到油茶籽油中的現(xiàn)象。

目前檢測茶油摻雜的主要方法有顯色法、分光光度法、氣相法[4-5]、液相法[6-8]、紅外光譜法[9]、電子鼻法[10]等方法。楊柳等[11]利用頂空－氣質(zhì)聯(lián)用法鑒別油茶籽油真?zhèn)?，表明了每種油都有其特有的揮發(fā)性成分，但真正可以起到定性作用的、含量較高的不多。原姣姣等[12]采用傅里葉近紅外透射光譜技術(shù)，建立了檢測油茶籽油中摻雜豆油含量的近紅外光譜的定量模型，表明近紅外透射光譜法能夠快速、準(zhǔn)確地定量分析摻假油茶籽油中豆油的含量（范圍為0%～ 50%）。Wang等[13]利用衰減全反射紅外光譜和光纖漫反射近紅外光譜對油茶籽油中摻入大豆油的摻假（比例為5%～25%）進(jìn)行了比較分析，認(rèn)為2種方法都可行。周怡兵等[14]利用氣相色譜法測定了山茶油中脂肪酸組成及含量，并認(rèn)為該方法能夠簡便快速測定山茶油中脂肪酸的組成和含量。彭思敏等[15]采用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)獲取了茶油、花生油、大豆油、菜籽油的純油脂及茶油摻假后的油脂摻假模型。

本實驗采用氣相色譜法，對湖南自行提取的16個油茶籽樣品和湖南本地20家油茶籽油生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的油茶籽油進(jìn)行脂肪酸組成測定，并對不同比例的豆油、花生油、玉米油、葵花油、菜籽油、米糠油、棕櫚油和油茶籽油組成的二元體系樣品進(jìn)行了脂肪酸組成分析，通過分析脂肪酸組成的變化，建立了快速、精準(zhǔn)地檢測油茶籽油中摻雜大豆油、花生油、玉米油、葵花油、菜籽油、米糠油、棕櫚油含量的氣相色譜油茶籽油摻假判定方法，以期為市場上快速檢測摻假油茶籽油提供一定的方法及理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料與試劑

茶籽分別采自湖南常寧、耒陽、瀏陽、平江、長沙縣。

一級壓榨油茶籽油、大豆油、花生油、玉米油、葵花油、菜籽油（低芥酸）、米糠油、棕櫚油均由湖南林之神生物科技有限公司提供。

脂肪酸甲酯包括軟脂酸(即棕櫚酸C16∶0)、硬脂酸(c18∶0)、油酸(C18∶1)、亞油酸(C18∶2)、亞麻酸(C18∶3)、花生酸(C20∶o)、花生一烯酸(C20∶1)、山崳酸(C22∶o)、芥酸(C22∶1)的甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，為NU-CHEKPREP提供；其他試劑均為AR級。

1.2 儀器

GC- 2010PLUS氣相色譜儀：日本島津公司。色譜柱：毛細(xì)管柱，30m×0.25 mm ×0.25 μm，柱內(nèi)膜涂布50%苯基和50%二甲基聚硅氧烷；或等效色譜柱。檢測器：氫火焰檢測器，檢測器溫度250℃。載氣流速：柱流量，1.0mL/min；空氣，300mL/min；氫氣，30mL/min；柱溫，230℃；氣化室溫度，250℃；分流比，1∶30；進(jìn)樣量0.5 μL。

1.3 方法

1.3.1 茶油的提取

以索氏抽提法提取茶籽油脂。操作步驟：取油茶籽仁在恒溫干燥箱104 ℃干燥至恒質(zhì)量后冷卻粉碎；稱取一定質(zhì)量粉末，用濾紙棉線包扎好后放入索氏抽提裝置中，用石油醚（30～60℃）作萃取劑提取6 h；繼續(xù)蒸發(fā)回收萃取溶劑，得到茶油。

1.3.2 酯化反應(yīng)

采用《GB/T 17376-2008 動植物油脂 脂肪酸甲酯制備》中酯交換法進(jìn)行茶油脂肪酸甲酯制備。

1.3.3 摻假鑒別

微量進(jìn)樣器直接取0.5 μL酯化后樣液進(jìn)氣相色譜儀分析，以脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合溶液各組分保留時間定性，直接面積歸一化法計算樣品中各脂肪酸的相對百分含量。

1.3.4 實驗設(shè)計

（1） 湖南各地區(qū)茶油脂肪酸成分分析

從湖南常寧、耒陽、瀏陽、平江、長沙縣5地采集16個茶籽樣品，帶回實驗室自行提取油茶籽油，進(jìn)行脂肪酸組成分析。

對湖南本地的20家油茶籽油生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的油茶籽油進(jìn)行脂肪酸組成進(jìn)行測定。

（2）其他植物油脂肪酸成分分析

分別對大豆油、花生油、玉米油、葵花油、菜籽油、米糠油、18℃棕櫚油進(jìn)行了脂肪酸組成分析。

（3）摻和試驗

以油茶籽油含量大于或等于摻和油總質(zhì)量的80%，以大豆油、花生油、玉米油、葵花油、菜籽油、米糠油、棕櫚油為添加成分（占摻和油總體積的5%～20%），觀察摻合油的脂肪酸組成的變化，每一樣品設(shè)3個平行。

2 結(jié)果與分析

2.1 湖南油茶籽油脂肪酸組成分析

通過對湖南常寧、耒陽、瀏陽、平江、長沙縣5地16個茶籽樣品的溶劑提取的油茶籽油及20家油茶籽油生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的油茶籽油進(jìn)行測定，結(jié)果表明不同產(chǎn)地的油茶種子的脂肪酸種類和含量存在一定的差異，測得的脂肪酸組成成分結(jié)果見表1。

表1 湖南本地油茶籽油樣品脂肪酸組成Table 1Components of adulterated Hunan Camellia oil

從表1可得湖南油茶籽油的脂肪酸組成含量百分比，其中油酸含量為76.9%～81.7%，亞油酸含量為6.5%～9.9%，亞麻酸含量為0.16%～0.65%。

2.2 其他7種植物油的脂肪酸組成分析

大豆油、花生油、玉米油、葵花籽油、菜籽油（低芥酸）、米糠油、18℃棕櫚油的脂肪酸組成成分見表2。

表2 大豆油、花生油、玉米油、葵花油、菜籽油、米糠油、棕櫚油的脂肪酸組成成分Table 2Main fatty acid components in common edible vegetable oil%

從表2可以看出，不同種類植物油的本質(zhì)差別就是脂肪酸組成不同，它們脂肪酸組成有著非常明顯的差異。大豆油、花生油、玉米油、葵花籽油、菜籽籽油（低芥酸）、米糠油、棕櫚油中油酸含量均較油茶籽油低，而亞油酸含量均比油茶籽油高，另大豆油和低芥酸菜籽油的亞麻酸含量分別為5.4%和7.2%，均高于油茶籽油樣品中的最高亞麻酸含量（0.65%）。18℃棕櫚油的棕櫚酸與亞油酸含量分別為38.2%、11.8%，均高于油茶籽油的棕櫚酸和亞油酸含量。

2.3 摻雜油茶籽油的脂肪酸組成分析

從表3可以看出，在油茶籽油中添加大豆油、花生油、玉米油、葵花籽油、菜籽油（低芥酸）、米糠油、棕櫚油后，隨著添加油在摻和油中的比例不斷增加，摻合油的脂肪酸組成中油酸含量逐漸降低，亞油酸含量逐漸增高。

在油茶籽油中添加菜籽油時，摻合油的脂肪酸成分除油酸與亞油酸含量發(fā)生變化外，亞麻酸含量也發(fā)生了顯著變化，當(dāng)向油茶籽油中摻入20%的菜籽油時，其亞麻酸含量達(dá)到了1.65%。

表3 按照不同比例在油茶籽油中摻入其他植物油后脂肪酸組成中油酸、亞油酸、亞麻酸的測定值Table 3Component (oleic acid, linoleic acid, linolenic acid) changes of Camellia oil after being adulterated%

由于油茶籽油中的棕櫚酸含量在8%左右，而棕櫚油的棕櫚酸含量在38%左右，油茶籽油中摻入棕櫚酸之后，其棕櫚酸含量會明顯上升，因此依據(jù)棕櫚酸含量，可判定山茶油中摻入了棕櫚油。

以摻入大豆油的油茶籽油脂肪酸組成實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行了回歸分析，結(jié)果如圖1所示。按照不同比例在油茶籽油中摻入大豆油后油酸、亞油酸、亞麻酸的實測值與摻雜量呈線性關(guān)系，符合回歸方程，相關(guān)系數(shù)分別為R2=0.999 7，R2=0.999 9，R2=0.999 6。

3 結(jié) 論

圖1 按照不同比例在油茶籽油中摻入大豆油后油酸、亞油酸、亞麻酸的實測值Fig.1Component (oleic acid, linoleic acid, linolenic acid) changes of Camellia oil after adulterated with soybean oil

本試驗對湖南油茶籽油及在油茶籽油中摻入不同比例的大豆油、花生油、玉米油、葵花油、菜籽油、米糠油、棕櫚油中的脂肪酸組分和含量進(jìn)行分析，結(jié)果表明用氣相色譜法鑒別摻入了一種其他植物油的油茶籽油是可行的。這與嚴(yán)曉麗等[16]研究的用氣相色譜法可對山茶油中摻入棕櫚油、菜籽油、大豆油 、棉籽油作定性及定量分析結(jié)果基本一致。

本實驗室也做了同時摻雜2種以上的植物油，由于特征組分相互疊加影響，對于摻入組分含量低于總摻合油質(zhì)量15%的摻合油，無法用氣相色譜法從脂肪酸組成分析中找到依據(jù)，因此本研究認(rèn)為氣相色譜法不適宜用作摻入了少量的2種以上植物油的鑒別。

[1]朱 勇,王湘瑩,馬錦林,等.鐘海雁不同物種油茶籽仁含油率及其茶油的脂肪酸組成[J].經(jīng)濟(jì)林研究, 2013, 31(2):135-137.

[2]樊金拴,我國木本油料生產(chǎn)發(fā)展的現(xiàn)狀與前景[J].經(jīng)濟(jì)林研究,2008,26(2):116- 122.

[3]國家藥典委員會主編.中華人民共和國藥典一部[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:278.

[4]Kapoulas V M, Andrikopoulos N K. Detection of olive oil a-dulteration with linoleic acid-rich oils by reversed-phase highperformance liquid chromatography [J].Chromatogra-phy, 1986,366: 311-320.

[5]李克瑞, 漆龍霖, 趙思東, 等. 山茶屬27種植物油脂理化性質(zhì)及脂肪酸組成的研究[J].中南林學(xué)院學(xué)報,1984,4(2):101-109.

[6]Gurdeniz G,Ozen B.Detection of adulteration of extra-virgin olive oil by chemometric analysis of mid-infrared spectral date [J]. Food chemistry, 2009,116(2):519-525.

[7]趙清潔,龍奇志,鐘海雁,等.半制備液相色譜法分離制備油茶果皮多酚[J].經(jīng)濟(jì)林研究,2012,30(2): 73-77.

[8]Bernd Carstensen,Wolfgang Schwack.GPC Isolation and Gas Chromatographic Determination of Minor Compounds in Vegetable Oils[J].Lipid Technology,2002,14(6):135-138.

[9]袁德義,彭邵鋒,鄒 鋒.油茶種子脂肪酸與游離氨基酸的分析[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報,2011,31(1):77-79,85.

[10]Hai Z, Wang J. Detection of adulteration in camellia seed oil and sesame oil using an electronic nose[J].European Jour-nal Lipid Science Technology, 2006,108:116-124.

[11]楊 柳,吳翠蓉,朱杰麗,等.頂空 -氣質(zhì)聯(lián)用法鑒別油茶籽油真?zhèn)蝃J].中國糧油學(xué)報,2012,27(11):105-109.

[12]原姣姣,王成章,陳虹霞.近紅外透射光譜分析油茶籽油摻入豆油的研究[J].中國糧油學(xué)報,2012,27(3):110-114.

[13]Wang L, Lee Frank S C, Wang X R, et al. Feasibility study of quantifying and discriminating soybean oil adulteration in Camellia oils by attenuated total ref l ectance MIR and fi ber optic diffuse ref l ectance NIR[J].Food chemistry, 2006,95:529-536.

[14]周怡兵,林 野,劉利亞,等.氣相色譜法測定山茶油中脂肪酸組成及含量[J].中國衛(wèi)生工程學(xué),2013,12(2):152-153.

[15]彭思敏,吳衛(wèi)國,黃天柱,基于脂肪酸含量變化的茶油摻假判別[J].糧食科技與經(jīng)濟(jì),2013,38(1):30-33.

[16]嚴(yán)曉麗,徐 昕.氣相色譜法鑒別摻假山茶油定性及定量研究[J].食品工程,2011,2(6):47-50.

Judgment methods for adulterated Camellia oil based on Hunan Camellia oil with gas chromatography

SHE Jia-rong1,2, CHAO Yan3, TAN Li-juan1
(1.Center of Hunan Forestry Administration for Forestry Products Quality Inspection and Testing, Changsha 410004, Hunan, China;2. Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, Hunan, China; 3. Hunan Linzhizhishen Biotechnology CO,LTD, Changsha 410004, Hunan, China)

The compositions of fatty acids from self-extracted 16 samples ofCamellia oleosaseeds andCamelliaoil produced by 20local enterprises in Hunan province were measured by gas chromatography, and the compositions from samples of binary system composed by different ration of oil-tea camellia seed oil adulterated with soybean, peanut, corn, sunflower, rapeseed, rice bran or palm oil were analyzed, and through measuring the fatty acids changes of in the oil samples, a series of judgment methods for judgingCamelliaoil adulteration were set up, which can rapidly and precisely detect what the adulterated substances are.

Camelliaoil; gas chromatography; adulterated substances

S789；S794.4

A

1673-923X(2014)05-0088-04

2013-08-01

林業(yè)公益性行業(yè)科研專項（201304705）

佘佳榮（1983-），女，湖南長沙人，工程師，碩士，主要進(jìn)行分析檢測技術(shù)研究

[本文編校：謝榮秀]