HPLC法測定兒寶咀嚼片中橙皮苷的含量

王小青 張后富 張瑾楠 鄧羅英 彭旦明 趙詩云 吳東風(fēng)

（江西省中醫(yī)藥研究院 南昌330046）

兒寶咀嚼片由太子參、北沙參、茯苓、山藥、麥芽（炒）、陳皮、白芍（炒）、山楂（炒）、白扁豆（炒）、麥冬、葛根（煨）組成，具有健脾益氣、生津開胃的效果[1]。用于小兒面黃體弱，納呆厭食，脾虛久瀉，精神不振，口干燥渴，盜汗。陳皮具有理氣健脾、燥濕化痰的功效[2]，與該制劑的功能主治有密切關(guān)系，因此建立了陳皮中橙皮苷的含量測定方法，以便更好地控制該制劑質(zhì)量。

1 儀器與試藥

實(shí)驗(yàn)儀器：島津LC-10AT；SPD-M10AP型；安捷倫HP1100；二極管陣列檢測器。橙皮苷對照品（批號：110721-201211，含量測定用）由中國生物制品藥品檢定所提供。

2 實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱為 Hypersil，ODS2-C18（5 μm，250mm×4.6mm），流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸（19:81）；室溫；流速：1.0mL/min；檢測波長為 283nm。

2.2 對照品溶液的制備 取橙皮苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成濃度為每1 mL含橙皮苷0.03 mg。

2.3 供試品溶液的制備 取本品20片，精密稱定，研細(xì)，取約2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液[3]。

2.4 陰性供試品溶液的制備 取處方中缺陳皮藥材的陰性樣品，照供試品溶液制備項(xiàng)下操作，即得缺陳皮陰性對照供試液。

2.5 檢測波長的選擇 利用高效液相色譜中二極管陣列監(jiān)測器的波長掃描功能，進(jìn)行波長掃描，得到橙皮苷最大吸收峰的紫外吸收光譜，最大吸收波長為283 nm。

2.6 結(jié)果 供試品溶液和對照品溶液在17.9 min均有橙皮苷的特征峰出現(xiàn)，而陰性供試品溶液在17.9 min左右沒有峰，故其他藥材不干擾橙皮苷的含量測定。

3 方法學(xué)研究

3.1 線性試驗(yàn) 精密稱取橙皮苷對照品12.00 mg，至50 mL量瓶中，加甲醇溶解并至刻度。得橙皮苷對照品溶液（x=240 μg/mL）。分別吸取 0.5、1.25、2.5、3.75、5.0 mL至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度。橙 皮 苷 對 照 品 濃 度 分 別 為 12、30、60、90、120 μg/mL，分別進(jìn)樣 10 μL，記錄峰面積，結(jié)果橙皮苷對照品在12～240 μg/mL范圍內(nèi)進(jìn)樣量與峰面積線性關(guān)系良好，回歸方程y=18 903x+66 031，相關(guān)系數(shù)為0.999 4。

3.2 精密度試驗(yàn) 取一份樣品連續(xù)進(jìn)樣六次，進(jìn)樣量10 μL，所得結(jié)果為0.65%。結(jié)果證明本方法精密度良好。

3.3 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取本品，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案中所述的方法進(jìn)行操作，共制備6份供試品溶液，分別進(jìn)樣10 μL，測定峰面積，計(jì)算含量，平均含量為0.71 mg/片，RSD為0.98%。結(jié)果證明本方法重現(xiàn)性良好。

3.4 加樣回收試驗(yàn) 取已測得含量的兒寶咀嚼片粉末，約1 g，精密稱定，按已知橙皮苷含量的80%、100%和120%分別加入一定量橙皮苷對照品，同供試品溶液的制備項(xiàng)下操作，制備橙皮苷加樣回收率供試品溶液并測定。結(jié)果平均回收率為98.23%，RSD為0.67%。

4 樣品測定

取兒寶咀嚼片產(chǎn)品，按供試品溶液的制備項(xiàng)下操作，制備供試品溶液。照上述色譜條件，進(jìn)樣10 μL，計(jì)算橙皮苷含量。結(jié)果見表1。

表1 橙皮苷樣品測定試驗(yàn) mg/片

5 討論

兒寶咀嚼片中太子參為本制劑君藥，但太子參暫時(shí)還沒有特征對照品，考慮到陳皮具有理氣健脾、燥濕化痰的功效，與該制劑的功能主治有密切關(guān)系，因此建立了陳皮中橙皮苷的含量測定方法[4]。本方法曾經(jīng)采用加熱回流20、40、60、90 min，但回流提取 40 min 以上才可將橙皮苷提取完全，因此將提取時(shí)間定為60 min。兒寶咀嚼片采用HPLC測定條件，取得了較為滿意的結(jié)果，該方法靈敏度、重復(fù)性均較好，樣品預(yù)處理簡單，確定該方法有效。

[1]國家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國藥典.第一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.176

[2]戴敬,郝培培,楊曉婧,等.HPLC測定女金丸中橙皮苷的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2011,17(16):78-81

[3]梁遠(yuǎn)園,馮彪,祝晨蔯,等.HPLC法測定枳實(shí)藥材中橙皮苷與柚皮苷的含量[J].中藥新藥與臨床藥理,2006,17(5):359-361

[4]孫冬梅,畢曉黎,胥愛麗,等.HPLC法測定不同產(chǎn)地陳皮藥材中橙皮苷的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2009,15(11):1-3