飼糧陰陽離子平衡對熱應激奶牛機體礦物質代謝的影響

臧長江 潘 榕 郭同軍 王連群 卜登攀 周振峰

(1.新疆農業(yè)大學動物科學學院，新疆肉乳用草食動物營養(yǎng)實驗室，烏魯木齊 830052;2.中國農業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所，動物營養(yǎng)學國家重點實驗室，北京 100193;3.新疆畜牧科學院飼料所，烏魯木齊 830000;4.塔里木大學動物科學學院，阿拉爾 843300)

動物機體的酸堿平衡反映的是飼糧的離子平衡狀況，飼糧陰陽離子平衡(dietary cation-anion balance，DCAB)是影響動物機體內酸堿平衡的重要因素。研究DCAB對奶牛機體礦物質代謝的影響，對研究熱應激條件下奶牛機體酸堿平衡、礦物元素在機體內的代謝具有重要的意義。通過改變DCAB可以直接影響動物體內的滲透壓、酸堿平衡、消化道內的電解質平衡以及水鹽的代謝等生理生化指標，進而影響動物的健康和生產性能［1－3］。若奶牛飼糧陰陽離子失衡，會引起血液pH升高或降低，嚴重時會導致機體酸堿平衡失調，瘤胃內環(huán)境的紊亂，進而影響奶牛的正常代謝活動和生產性能［4－6］。飼糧的酸堿度是影響奶牛體內酸堿平衡的主要因素，因此，DCAB成為動物營養(yǎng)學家關注的焦點。不同的泌乳階段血液中的的濃度不同，泌乳前期奶牛產奶量較高，飼喂大量的精料，易發(fā)生瘤胃酸中毒或亞急性瘤胃酸中毒，泌乳后期則易發(fā)生堿中毒，通過改變DCAB可以有效預防和緩解因酸堿不平衡導致的中毒現象［7－8］。鑒于這種狀況，本文對DCAB 進行深入研究，探討不同DCAB水平對奶牛機體礦物質代謝的影響，為奶牛生產性能的提高及一些疾病的解決途徑提供理論依據和技術參考。

1 材料與方法

1.1 試驗設計

試驗采用單因素完全隨機試驗設計，選取75頭健康的泌乳中期［泌乳日齡為(104.8±12.0)d］中國荷斯坦奶牛，根據胎次［(2.0±0.2)胎］、產奶量［(26.52±0.33)kg］、體重［(550.0±52.5)kg］相近的原則隨機分為5組，分別以添加不同水平的陰陽離子平衡鹽來調整DCAB值，試驗共設5組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組和對照組)，分別飼喂 DCAB值 為 195.76、186.68、177.77、166.94、239.12 mEq/kg干物質(DM)的飼糧。Ⅰ、Ⅱ組中添加的為離子鹽A(動物營養(yǎng)學國家重點實驗室自行研制)，Ⅲ、Ⅳ組添加的為離子鹽B(由北京中畜陽光牧業(yè)科技發(fā)展有限公司提供)。試驗期為67 d，其中預試期7 d，正式試驗期60 d。

1.2 試驗飼糧及飼養(yǎng)管理

奶牛飼糧參照《奶牛飼養(yǎng)標準》(NY/T 34—2004)進行配制;各組之間除添加的陰陽離子平衡鹽劑量不同外，飼養(yǎng)管理一致。奶牛飼養(yǎng)方式采用雙列對頭固定頸夾式飼養(yǎng)，喂料方式為先粗后精人工飼喂，將陰陽離子平衡鹽與精料充分混合均勻，確保奶牛完全采食。奶牛每日飼喂3次、擠奶3次，分別于07:00、14:00和20:00飼喂擠奶。每天喂料結束后散放到運動場自由運動，飲水槽保證足夠清潔的飲水。試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(DM basis)

續(xù)表1

1.3 樣品采集

1.3.1 飼料樣品的采集與處理

試驗期間每隔30 d收集1次飼料樣和剩料樣，于－20℃保存;試驗結束后，飼料及剩料樣品于65℃烘干48 h，計算初水分后，根據剩余料數量適當縮小樣品，粉碎過40目篩，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 乳樣品采集

試驗期每隔15 d收集1次奶樣，每頭牛按早、中、晚產量(4∶3∶3)取樣后制成混合樣(共200 mL)，－20℃保存。

1.3.3 血液樣品采集

分別于試驗前、試驗30和60 d，在晨飼后2 h，利用一次性真空采血管(奧地利GREINER公司生產，不含抗凝劑)采集尾根動脈/靜脈血液2管(9 mL/管)，立即將采血管置入冰盒并及時送回實驗室于3 000×g，4℃離心15 min分離血清。分離后的血清分裝于離心管中于－20℃保存。

1.3.4 尿樣的收集

分別于試驗15、30、45、60 d各收集尿樣1次，每次采集約200 mL尿液轉移至潔凈的塑料瓶內，測定其pH，在測定pH后加入少許稀硫酸，－20℃保存。

1.4 試驗環(huán)境溫濕度的監(jiān)測

本試驗中的75頭奶牛集中飼養(yǎng)在建有四面敞口采食大棚的運動場中，通過監(jiān)測環(huán)境溫濕度變化評價奶牛的熱應激狀況。將干濕球溫度表(型號TMWS－A2，天津市天馬儀器廠生產，有效量程:－10～40 ℃，10～90 °RH)懸掛在采食大棚中心的下方，距地面約2 m，保證溫濕度表的有效通風，防止陽光照射和雨淋，并要避免奶牛觸及。試驗期間每天在奶牛采食前06:00、12:00和20:00記錄溫濕度表讀數。

1.5 分析方法

1.5.1 飼料常規(guī)成分

粗蛋白質(GB/T 6432—1994)、水分(GB/T 6435—1986)含量采用國家標準方法測定。中性、酸性洗滌纖維含量測定采用Van Soest方法分析［9］，分析過程中添加淀粉酶(Termamyl 120 L，Type S，Danmark)和無水亞硫酸鈉。飼料中鈉(Na)、鉀(K)濃度等采用原子吸收法測定(型號HITACHI Z－2000原子吸收儀，日立株式會社生產)。DCAB值按照文獻［10］公式進行計算。

1.5.2 呼吸頻率及直腸溫度的測定

在試驗期內分別于00:00、12:00、18:00左右用秒表和計數器測定安靜狀態(tài)下試驗牛腹部和胸廓的起伏次數，每次測5 min，計算每分鐘的呼吸次數，取其平均數作為奶牛的呼吸頻率;將獸用玻璃體溫計的水銀柱甩至底部，用酒精棉球擦拭消毒，將感應部分插入直腸10 cm處，5 min后取出讀數并記錄。

1.5.3 乳、血清、尿液中 K、鈣(Ca)等濃度的測定

乳、血清、尿液樣品中 K、Ca、Na、鎂(Mg)等濃度的測定采用原子吸收法測定;樣品經過濕法或微波消解，稀釋相應的倍數并加入基體改進劑后，導入火焰原子吸收儀測定，與標準工作曲線比較后定量。

1.5.4 尿液 pH 的測定

試驗15、30、45、60 d收集尿液樣品時將收集到的尿液稍微降溫后及時使用便攜式pH計(意大利HANNA公司生產)測定其pH。

1.6 數據分析和統計

基礎數據用Excel進行整理，利用SAS 9.0軟件中有重復觀測數據的Mixd混合模型統計，固定效應有試驗處理、試驗期(d)及二者之間的交互作用。方差結構采用AR(1)，數據為最小二乘均值，顯著性水平為 P＜0.05，極顯著水平為P＜0.01，采用Tukey方法進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 試驗環(huán)境溫濕度的監(jiān)測與奶牛熱應激的評價

由表2可知，在整個試驗期間，牛舍的平均溫度均高于29.62℃，溫濕指數(temperature humidity index，THI)最低為 84.45，按照美國新澤西州立大學和堪薩斯州立大學對奶牛熱應激評價的研究結果［6］，當熱應激指數THI≥72時，奶牛即產生熱應激，這一評價標準目前已得到各國研究人員的認可。而我國的研究結果表明，當牛舍溫度達到28.1℃，THI達到69時奶牛即可產生熱應激。本試驗采用在國際上得到認可的THI72法來評價奶牛熱應激狀況［2］。試驗過程中，通過對環(huán)境溫度、相對濕度的監(jiān)測，結果表明，在整個試驗期，奶牛均處于熱應激狀態(tài)，隨著試驗時間的延長，熱應激的程度在不斷的加重。

表2 試驗期牛舍環(huán)境溫度及溫濕指數Table 2 The environment temperature and THI of barn in trial period

2.2 DCAB對熱應激條件下奶牛直腸溫度及呼吸頻率的影響

由表3可知，在熱應激條件下，奶牛的直腸溫度均不同程度的提高(奶牛的正常體溫37.5～39.1℃)，對照組最高，Ⅰ組最低，但各組之間差異不顯著(P＞0.05)，奶牛呼吸頻率隨著DCAB值的升高而升高，但各組之間差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 DCAB對熱應激條件下牛奶乳中礦物質濃度的影響

由表4可知，通過改變飼糧DCAB值，對奶牛乳中 K、Ca、Mg、P 的濃度無顯著影響(P＞0.05)，但對Na和Cl的濃度產生了一定的影響，與Ⅲ、Ⅳ組相比，Ⅰ、Ⅱ和對照組奶牛乳中Na的濃度均有不同程度的提高，差異顯著(P＜0.05)，Ⅰ、Ⅱ、對照組之間差異不顯著(P＞0.05)，Ⅲ、Ⅳ組之間也無顯著性差異(P＞0.05);與Ⅲ、Ⅳ組相比，Ⅰ、Ⅱ、對照組奶牛乳中 Cl的濃度顯著降低(P＜0.05)，Ⅲ、Ⅳ組之間差異不顯著(P＞0.05)，Ⅰ、Ⅱ和對照組之間也無顯著性差異(P＞0.05)。

表3 DCAB對熱應激條件下奶牛直腸溫度及呼吸頻率的影響Table 3 Effects of DCAB on rectal temperature and respiratory frequency of dairy cows in the conditions of heat stress

表4 DCAB對熱應激條件下奶牛乳中礦物質濃度的影響Table 4 Effects of DCAB on mineral concentrations in milk of dairy cows in the conditions of heat stress mg/mL

2.4 DCAB對熱應激條件下奶牛血清中礦物質代謝的影響

由表5可知，DCAB值對奶牛血清中K、Mg、P的濃度影響差異不顯著(P＞0.05)，對奶牛血清中Ca、Cl的濃度影響較大，血清中Ca的濃度隨著DCAB值的升高有降低的趨勢，Ⅳ組中Ca的濃度最高，達到了2.178 mmol/L;血清中Cl的濃度隨著飼糧DCAB值的降低呈上升趨勢，Ⅳ組最高，在各組中DCAB值對Ca、Cl濃度的影響均未達到顯著水平(P＞0.05)。DCAB值對奶牛血清中Na的濃度也產生了一定的影響，對Ⅰ和對照組影響較大，但各組之間也均未達到顯著水平(P＞0.05)。

表5 DCAB對熱應激條件下奶牛血清中礦物質代謝的影響Table 5 Effects of DCAB on mineral metabolism in serum of dairy cows in the conditions of heat stress mmol/L

2.5 DCAB對熱應激條件下奶牛尿液中礦物質濃度及尿液p H的影響

由表6可知，飼糧DCAB值對尿液中K、Ca、Na、Mg的濃度影響差異不顯著(P＞0.05);對尿液中Cl的濃度影響較大，隨著飼糧DCAB值的降低，尿液中Cl的濃度呈上升趨勢，與對照組相比，Ⅰ、Ⅱ組分別提高了 33.826%、35.598%，差異顯著(P＜0.05);Ⅲ、Ⅳ 組 分 別 提 高 了 95.421%、76.957%，差異極顯著(P＜0.01);Ⅲ、Ⅳ組與Ⅰ、Ⅱ組相比，也有一定程度的提高，差異顯著(P＜0.05)。對尿液pH的影響隨著飼糧DCAB值的升高而升高，Ⅰ、Ⅱ和對照組與Ⅲ、Ⅳ組相比，顯著提高(P＜0.05)，Ⅰ、Ⅱ和對照組之間差異不顯著(P＞0.05)，Ⅲ和Ⅳ組之間差異也不顯著(P＞0.05)。

表6 DCAB對熱應激條件下奶牛尿液中礦物質濃度及尿液pH的影響Table 6 Effects of DCAB on mineral concentrations and pH in urine of dairy cows in the conditions of heat stress

3 討 論

3.1 DCAB對熱應激條件下奶牛直腸溫度及呼吸頻率的影響

直腸溫度、奶溫和腹腔溫度常用來表示體核溫度，三者相似，直腸溫度作為一個主要的生理指標，通常用來診斷機體健康狀態(tài)、預測機體和生產性能的變化，評價環(huán)境對動物生長、妊娠和繁殖的影響程度，奶牛的直腸溫度通過各種調節(jié)機制而保持著相對穩(wěn)定，正常條件下，奶牛直腸溫度為38℃左右，當熱應激條件下，奶牛直腸溫度開始上升，奶牛的行為和生產性能開始發(fā)生變化，體溫的升高是奶牛抵御熱應激的一種方式，有利于體熱的散發(fā)［11］。李秋鳳［7］研究結果表明，在熱應激條件下，DCAB值為275 mEq/kg DM時，對泌乳前期荷斯坦奶牛的直腸溫度和呼吸頻率有一定的降低，DCAB值對泌乳后期荷斯坦奶牛的直腸溫度和呼吸頻率無顯著影響。本試驗通過改變飼糧DCAB值，對奶牛直腸溫度產生了一定的影響，各試驗組與對照組相比，均有不同程度的降低，但差異不顯著，對照組較高可能與采食量的增加有關，對照組奶牛對粗飼料采食量的增加在機體內代謝過程中將產生一部分熱量［12］，這與體溫的升高是否存在必然的聯系，對體溫的升高影響有多大還有待進一步的研究。

隨著環(huán)境溫度的升高，奶牛的呼吸頻率加快，當環(huán)境溫度低于30℃時，呼吸頻率變化緩慢，30℃以上時，呼吸頻率與環(huán)境溫度成正比。由于氣溫升高，體熱散發(fā)困難，奶牛主要依靠熱性呼吸和發(fā)汗散熱。溫度從等溫區(qū)上升到32℃以上時，奶牛的呼吸頻率則從20次/min上升到100次/min，甚至更高［13］。在本試驗中，通過改變飼糧DCAB值，對奶牛的呼吸頻率產生了一定的影響，隨著DCAB值的降低呼吸頻率有下降的趨勢，但與非熱應激期相比(正常呼吸頻率為18～35次/min)均出現較大程度的升高，這主要是因環(huán)境溫度的升高所導致。

3.2 DCAB對熱應激條件下奶牛生產性能及乳中礦物質濃度的影響

本試驗的前期研究結果表明，在熱應激條件下，飼糧中添加陰陽離子平衡鹽時，隨著DCAB值的增加產奶量有增加的趨勢［12］。在熱應激初期(試 驗 前 30 d)，飼 糧 DCAB值 在 167～196 mEq/kg DM時，產奶量下降幅度較小;而在熱應激后期(試驗后30 d)，飼糧DCAB值為187～239 mEq/kg DM時，產奶量下降幅度較小;但就整個試驗期而言，飼糧DCAB值為197 mEq/kg DM時，產奶量下降幅度最小。

牛乳中的礦物質主要以鹽的形式存在，一部分與蛋白質結合，少量被脂肪球吸附。牛乳中鹽的組成及其存在狀態(tài)對牛乳的物理化學特性影響很大?？偟膩碚f離子具有維持牛乳的等電點、調節(jié)乳的滲透壓以及形成酪蛋白膠粒的作用，正常牛乳中含有約 0.7%的無機鹽，主要是 K、Ca、P、S、Cl及其他微量成分，其中 Na、K、Cl呈離子狀態(tài)，Ca、Mg、P一部分呈溶液狀態(tài)，一部分呈懸濁狀態(tài)，無機成分在加工過程中對牛乳的穩(wěn)定性起著重要的作用［14］。牛乳中各礦物質的濃度也是機體健康狀況的一種反映，當奶?；既榉垦讜r，牛乳中K的濃度有下降的趨勢［8，15］。本試驗結果表明，隨著飼糧DCAB值的升高，牛乳中Na的濃度呈上升趨勢，當DCAB值高于187 mEq/kg DM時，上升幅度較大，達到了顯著水平;牛奶中Cl的濃度隨著飼糧DCAB值的升高呈下降趨勢，Ⅰ、Ⅱ和對照組最為明顯，一般正常牛乳中 Na的濃度為 0.3～0.7 g/L，Cl的濃度為 0.8～1.4 g/L［16］，本試驗結果牛乳中Na的濃度在正常范圍之內，但Cl濃度偏低，這可能與飼糧中Cl的含量、氣候環(huán)境等因素有關。

3.3 DCAB對熱應激條件下奶牛礦物質代謝及尿液p H的影響

血清電解質在維持動物的正常代謝方面有非常重要的作用，具有多種生理功能，如維持細胞的通透性，肌肉、神經細胞的應激性，維持細胞內、外的滲透壓，調節(jié)機體的酸堿平衡，組成機體組織，形成生物活性物質、酶等。它們參與機體各種生命活動。Na、K、Cl主要參與維持機體酸堿平衡、滲透壓平衡，此外它們還有獨特的功能，即維持瘤胃內環(huán)境的穩(wěn)定，以保證微生物的生長，Na、K、Cl的濃度改變可能通過改變瘤胃內環(huán)境的理化特性來間接地影響瘤胃微生物蛋白質的合成。K在幾個酶控生化反應中起著激活和輔酶的作用，而且又是牛乳的主要礦物元素之一。Sanchez等［17－18］報道，飼糧K的含量從0.66%DM基礎升高以后，奶牛的DM采食量和泌乳量都有了提高，而且在熱應激期間，DM采食量的降低和泌乳的需要、排汗流失［19］及維持酸堿平衡［20］都提高了 K 的需要量。Beede等［21］研究結果表明，熱應激期間，飼糧K含量達到1.5%DM基礎時，奶?？色@得最佳的泌乳性能。動物在遭受熱應激時，由于采食量減少，Na、K的攝入量不足，同時由于唾液的大量分泌和皮膚蒸發(fā)量增加，機體代謝紊亂而使血清中的Na、K濃度降低，而影響動物機體的正常代謝活動。因此，維持細胞中Na、K、Cl的正常水平非常重要。本試驗結果表明，在熱應激條件下，DCAB對血清中K的濃度無顯著影響，相對穩(wěn)定，而尿液中K的濃度和飼糧中K的含量呈正相關。血清中Na的濃度隨著DCAB值的升高呈升高的趨勢，而尿液中Na的濃度和血清中Na的濃度保持一致，說明血清、尿液中Na的濃度和飼糧中Na的含量有很大的相關。血清和尿液中Cl的濃度受飼糧DCAB值影響較大，隨著DCAB值的降低而呈升高趨勢，Ⅲ、Ⅳ組與Ⅰ、Ⅱ和對照組相比，尿液中Cl的濃度達到了顯著水平［22］，尿液當中的Cl濃度是飼糧當中Cl含量的最直接反映［10］，血液中Cl的濃度升高，與奶牛飼喂高精料飼糧體內發(fā)生輕度代謝性酸中毒有關［23－24］。

Ca是重要的代謝調節(jié)物，它可激活許多種酶，降低神經肌肉的興奮性，降低毛細血管和膜的通透性，維持正常的肌肉收縮，維持神經沖動的正常傳導等。血漿中游離的Ca的濃度必須恒定在一個極小的范圍內，對于維持正常的生理活動非常重要［25－26］。動物機體具有調節(jié)血液中 Ca濃度的機制，通過控制Ca的吸收、骨中Ca的沉積和動員及由尿的排出來維持血Ca的恒定。Mg也是動物體內的重要礦物元素之一，它對緩解動物應激有重要作用。Mg的缺乏都對奶牛的生產性能產生負面影響。本試驗結果表明，降低飼糧DCAB值，血清中Ca的濃度有升高的趨勢，但差異不顯著，同時，尿液中Ca的濃度也呈上升趨勢，說明機體對Ca濃度的調節(jié)穩(wěn)定在一個極小的范圍之內。DCAB對血清、尿液中Mg的濃度無顯著影響。一般情況下，降低奶牛尿液pH是DCAB產生調控效應的基礎和前提，S、Cl離子被機體吸收后在腎臟產生相應的負電荷，機體為了維持酸堿平衡、滲透壓平衡而分泌排出相應的H+，進而使尿液的pH降低［27－28］，在本試驗條件下，通過改變飼糧 DCAB值，對奶牛尿液pH產生了顯著的影響，隨著飼糧DCAB值的降低，尿液pH呈下降趨勢，且達到了顯著水平，這與Hu等［29］報道的結果一致。

4 結 論

在熱應激條件下添加陰陽離子平衡鹽調整飼糧DCAB值在177.77 mEq/kg DM 以下時，對降低奶牛的呼吸頻率、緩解熱應激、增加血清Ca濃度效果較好;添加離子鹽對牛乳、血清、尿液中K、Mg、P的濃度影響較小，但對Na、Cl的濃度影響較大，對改善奶牛健康起到了積極的作用。

［1］ RéRAT M，PHILIPP A，HESS H D，et al.Effect of different potassium levels in hay on acid-base status and mineral balance in periparturient dairy cows［J］.Journal of Dairy Science，2009，92(12):6123－6133.

［2］ 李建國，桑潤滋，張正珊，等.熱應激對奶牛生理常值、血液生化指標、繁殖及泌乳性能的影響［J］.河北農業(yè)大學學報，1998，21(4):69－75.

［3］ 李大剛.陰離子鹽和維生素D對圍產期奶牛鈣調控機制和健康作用的研究［D］.博士學位論文.北京:中國農業(yè)科學院，2006.

［4］ RAMOS-NIEVES J M，THERING B J，WALDRON M R，et al.Effects of anion supplementation to low-potassium prepartum diets on macromineral status and performance of periparturient dairy cows［J］.Journal of Dairy Science，2009，92(11):5677－5691.

［5］ MORRILL K M，MARSTON S P，WHITEHOUSE N L，et al.Anionic salts in the prepartum diet and addition of sodium bicarbonate to colostrum replacer，and their effects on immunoglobulin G absorption in the neonate［J］.Journal of Dairy Science，2010，93(5):2067－2075.

［6］ BROUK M.Evaluating and selecting cooling systems for different climates［C］//Proceedings of the 7th Western Dairy Management Conference.Reno:［s.n.］，2005:33－40.

［7］ 李秋鳳.日糧陰陽離子平衡對不同泌乳階段熱應激奶牛的影響研究［D］.碩士學位論文.保定:河北農業(yè)大學，2002.

［8］ 李斌，郭衛(wèi)忠，孫長勉，等.干奶后期飼喂陰離子鹽對奶牛離子平衡和產奶的影響［J］.乳業(yè)科學與技術，2003(4):186－189.

［9］ 王加啟，于建國.飼料分析與檢驗［M］.北京:中國計量出版社，2004.

［10］ TUCKER W B，XIN Z，HEMKEN R W.Influence of calcium chloride on systemic acid-base status and calcium metabolism in dairy heifers［J］.Journal of Dairy Science，1991，74(4):1401－407.

［11］ BERMAN A，FOLMAN Y，KAIM M，et al.Upper critical temperatures and forced ventilation effects for high-yielding dairy cows in a subtropical climate［J］.Journal of Dairy Science，1985，68(6):1488－1495.

［12］ 臧長江，王加啟，周振鋒，等.熱應激條件下日糧陰陽離子平衡對奶牛生產性能的影響［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2008，35(11):101－105.

［13］ 姚勤.奶牛日糧陰陽離子平衡調節(jié)及溫熱環(huán)境評價［D］.碩士學位論文.南京:南京農業(yè)大學，2005.

［14］ 張和平，張列兵.現代乳品工業(yè)手冊［M］.北京:中國輕工業(yè)出版社，2005.

［15］ 邢慧敏，云振宇，李妍，等.牛乳體細胞數與乳中離子含量相關性的研究［J］.食品科學，2007，28(5):53－55.

［16］ 郭本恒.乳品化學［M］.北京:中國輕工業(yè)出版社，2001.

［17］ SANCHEZ W K，MCGUIRE M A，BEEDE D K.Macromineral nutrition by heat stress interactions in dairy cattle:review and original research［J］.Journal of Dairy Science，1994，77(7):2051－2079.

［18］ SANCHEZ W K，BEEDE D K，DELORENZO M A.Macromineral element interrelationships and lactational performance:empirical models from a large data set［J］.Journal of Dairy Science，1994，77(10):3096－3001.

［19］ BEEDE D K，COLLIER R J.Potential nutritional strategies for intensively managed cattle during thermal stress［J］.Journal of Animal Science，1986，62:543－554.

［20］ BEEDE D K，MALLONEE PG，SCHNEIDER PL，et al.Potassium nutrition of heat-stressed lactating dairy cows［J］.South African Journal of Animal Science，1983，13:198－206.

［21］ BEEDE D K，SHEARER J K.Nutritional management of dairy cattle during hot weather［J］.Agric-Practice，1991，12:5－13.

［22］ ESCOBOSA A，COPPOCK E C.Effects of dietary sodium bicarbonate and calcium chloride on physiological responses of lactating dairy cows in hot weather［J］.Journal of Dairy Science，1984，67(3):574－584.

［23］ GOFF J P，HORST R L.Effects of the addition of potassium or sodium，but not calcium，to prepartum ra-tions on milk fever in dairy cows［J］.Journal of Dairy Science，1997，80(1):176－186.

［24］ 吳文旋，李勝利.不同日糧陰陽離子差對喀斯特地區(qū)圍產期奶牛代謝、健康及泌乳性能的研究［J］.畜牧獸醫(yī)學報，2011，42(8):1113－1119.

［25］ YEN J T，POOD W G，PRIOR R L.Calcium chloride as a regulator of feed intake and weight gain in pigs［J］.Journal of Animal Science，1981，52:778.

［26］ TUCKER W B，XIN Z，HEMKEN R W，et al.Influence of dietary calcium chloride on adaptive changes in acid-base status and mineral metabolism in lactating dairy cows fed a diet high in sodium bicarbonate［J］.Journal of Dairy Science，1988，71(6):1587－1597.

［27］ STEWART P A.Modern quantitative acid-base chemistry［J］.Canadian Journal of Physiology and Pharmacology，1983，61(12):1444－1461.

［28］ LIESEGANG A，CHIAPPI C，RISTELI J，et al.Influence of different calcium contents in diets supplemented with anionic salts on bone metabolism in periparturient dairy cows［J］.Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition，2007，91(3/4):120－129.

［29］ HU W，MURPHY M R，CONSTABLE P D，et al.Dietary cation-anion difference effects on performance and acid-base status of dairy cows postpartum［J］.Journal of Dairy Science，2007，90(7):3367－3375.