蜂王漿中氨基酸含量的測定

趙麗

（國家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心，北京100094）

蜂王漿又名蜂皇漿、蜂乳，蜂王乳，是蜜蜂巢中培育幼蟲的青年工蜂咽頭腺的分泌物，是供給將要變成蜂王的幼蟲的食物。蜂王漿的成分十分復雜，含有大量蛋白質(zhì)，糖類，氨基酸，核酸，脂肪酸，還有一定量的未知物質(zhì)。蜂王漿的功能一直被人們所關(guān)注，大量研究表明，蜂王漿中含有多種活性成分[1-2]，具有一定生理和藥理作用，如提高免疫力、抗菌、抗疲勞等，在臨床，醫(yī)藥，食品，保健品，化妝品等方面都有著廣泛的應用[3-6]，目前已有許多蜂王漿產(chǎn)品在國內(nèi)市場銷售。氨基酸是衡量蜂王漿營養(yǎng)價值的一項重要指標，本試驗通過鹽酸水解-氨基酸自動分析儀法測定蜂王漿中的氨基酸的含量。

1 材料與方法

1.1 儀器設備

L8800型氨基酸自動分析儀：日立公司；RE-2000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器：上海市亞榮生化儀器廠；GZX-9140型顯數(shù)鼓風干燥機：上海博迅實業(yè)有限公司；Milli-Q去離子水發(fā)生器：美國Milli-Q公司。

1.2 試劑

鹽酸、檸檬酸三鈉、氫氧化鈉、氯化鈉、檸檬酸、乙醇、乙酸鈉、冰醋酸、茚三酮、乙二醇獨甲醚、硼氫化鈉，以上試劑均為分析純

1.3 測定方法

稱取混合均勻的蜂王漿樣品0.5g（精確至0.0001 g）于水解管中，加入6 mol/L的鹽酸溶液5 mL。水解管中沖入氮氣，擰緊瓶蓋使水解管密封，將水解管放入110℃恒溫干燥箱內(nèi)水解22 h后，取出冷卻。

打開水解管，將水解液全部轉(zhuǎn)入50 mL容量瓶中用去離子水定容至刻度，液體經(jīng)0.22 μm的濾膜過濾，作為待測液。

待測液放入氨基酸自動分析儀中檢測，外標法定量，色譜條件：標準分析柱4.6 mm×60.0 mm，反應柱溫度57℃，反應器溫度153℃，進樣量20 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 六種市售蜂王漿產(chǎn)品中氨基酸的含量

蜂王漿中各氨基酸含量及譜圖分別如表1和圖1所示。

由表1測定結(jié)果可以看出，市售六種蜂王漿樣品中均含17種氨基酸，其中有5種氨基酸含量較高，依次為天門冬氨酸（平均值為23.02 g/kg）＞谷氨酸（平均值為13.29 g/kg）＞脯氨酸（平均值為11.90 g/kg）＞亮氨酸（平均值為9.99 g/kg）＞賴氨酸（平均值為9.66 g/kg）。

表1 6種蜂王漿樣品中氨基酸含量Table 1 The amino acid content of royal jelly g/kg

圖1 蜂王漿樣品氨基酸色譜圖Fig.1 Chromatograms of amino acids in royal jelly

天冬氨酸又名天門冬氨酸，它是生物體內(nèi)賴氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸等氨基酸的前體。它可作鉀離子和鎂高的載體向心肌送電解質(zhì)，從而改善心肌的心縮功能，同時降低氧的消耗量。臨床上用來治療心臟病、肝病、糖尿病等。天冬氨酸鐵鹽可治療貧血[7]。

谷氨酸是生物機體內(nèi)氮代謝的基本氨基酸之一，在代謝上具有重要意義。谷氨酸是中樞神經(jīng)系統(tǒng)主要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，在腦缺血造成的神經(jīng)元損傷過程中發(fā)揮重要作用。腦缺血時多種機制參與了谷氨酸釋放的調(diào)節(jié)，如Ca2+依賴性的出胞式釋放、谷氨酸轉(zhuǎn)運體調(diào)節(jié)的釋放、水腫誘發(fā)的釋放和受體調(diào)節(jié)的釋放等[8]。谷氨酸作為神經(jīng)中樞及大腦皮質(zhì)的補劑，對于治療腦震蕩或神經(jīng)損傷，癲癇以及對弱智兒童均有一定療效。

脯氨酸是身體生產(chǎn)膠原蛋白和軟骨所需的氨基酸。脯氨酸的作用包括幫助人體分解蛋白質(zhì)，用于創(chuàng)造體內(nèi)健康細胞。它對維持皮膚和結(jié)締組織健康成長非常重要（特別是組織創(chuàng)傷部位）。脯氨酸和賴氨酸都是生產(chǎn)羥脯氨酸和羥賴氨酸所需要的，這兩種氨基酸構(gòu)建膠原蛋白。膠原有助于愈合軟骨，并給關(guān)節(jié)和脊椎提供緩沖，可作為各種軟組織疾病的藥物，如結(jié)締組織受損、風濕性關(guān)節(jié)炎等，又可加快傷口愈合，以及治療各種皮膚疾病[9]。

亮氨酸是哺乳動物的必需氨基酸和生酮生糖氨基酸，研究發(fā)現(xiàn)，亮氨酸是骨骼肌與心肌唯一可調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)的氨基酸，可以促進骨骼肌蛋白質(zhì)的合成，在調(diào)節(jié)氨基酸與蛋白質(zhì)代謝方面起重要作用[10]。另外也有研究表明，亮氨酸可以通過促進胰島素和GLP-1分泌來降低血糖[11]。

賴氨酸能促進人體發(fā)育、增強免疫功能，并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用。賴氨酸在體內(nèi)參與體蛋白如骨骼肌酶和多肽激素的合成；是生酮氨基酸之一，當缺乏可利用的碳水化合物時，可參與生成酮體和葡萄糖的代謝（在禁食情況下，是重要的能量來源之一）；維持體內(nèi)酸堿平衡；作為合成肉毒堿的前體物，參與脂肪代謝；另外，賴氨酸還可以提高機體抵抗應激的能力[12]。從表1中得知，所檢測的不同蜂王漿樣品中含有的氨基酸的種類相同，并且在含量上差異也不是很明顯，說明蜂王漿產(chǎn)品氨基酸組成穩(wěn)定且相似，其生理功能也相似。

2.2 蜂王漿中必需氨基酸的分析

對食物營養(yǎng)價值的評價，氨基酸起著十分重要的作用，尤其是必需氨基酸的含量與比例，對食物必需氨基酸的評價參考WHO/FAO推薦的氨基酸模式譜，各必需氨基酸的比例越接近標準模式譜規(guī)定的比值，說明其越符合人體的飲食所需其營養(yǎng)價值越高。本實驗所測定的蜂王漿樣品中，含有7種（蘇氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸）人體必需氨基酸。從表2中可以看出，除蛋氨酸和苯丙氨酸較低外，其他6中人體必需氨基酸的比例均與WHO/FAO推薦的標準模式譜相接近，并且必需氨基酸占總氨基酸比例均高于推薦值，可見蜂王漿可以作為人體攝取必需氨基酸的一個重要來源。

表2 蜂王漿中必需氨基酸的比例與WHO/FAO標準模式譜的比較Table 2 The comparison between EAA in royal jelly and the WHO/FAO standard mode

3 結(jié)果與討論

氨基酸在人體中具有重要的生理功能，尤其是必需氨基酸，在人體內(nèi)有極其重要的生理和營養(yǎng)意義，也是食品營養(yǎng)價值評定的重要指標之一[7，13]。人體缺乏一種或幾種必需氨基酸，就不能維持正常的生長發(fā)育。本研究表明國內(nèi)市場普遍銷售的幾種蜂王漿產(chǎn)品中的氨基酸含量與組成十分豐富與合理，營養(yǎng)成分齊全，必需氨基酸和非必須氨基酸比例適宜，是一種天然營養(yǎng)的健康的食品，因此蜂王漿是有利于人體氨基酸營養(yǎng)平衡的優(yōu)質(zhì)食品原料[14-15]。加上蜂王漿的其他生理功效，使得蜂王漿成為市場上暢銷的保健食品。

我國是蜂王漿高產(chǎn)國，相當一部分產(chǎn)品用于出口，進一步研究蜂王漿中復雜成分的活性，是我們應當重視的課題，蜂王漿中氨基酸含量的測定為以后人們的研究提供數(shù)據(jù)支持，也為更好的開發(fā)蜂王漿產(chǎn)品提供依據(jù)。

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