• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    封閉式負(fù)壓吸引治療中不同負(fù)壓模式對(duì)療效影響實(shí)驗(yàn)研究*

    2014-12-16 08:28:36西安市中心醫(yī)院燒傷整形外科西安710003
    陜西醫(yī)學(xué)雜志 2014年11期
    關(guān)鍵詞:變壓毛囊肉芽

    西安市中心醫(yī)院燒傷整形外科 (西安710003) 郝 劍 劉 賓 汪 陽(yáng) 陶 諫 田 萍

    負(fù)壓 創(chuàng) 面 治 療 技 術(shù) (Negative pressure wound therapy,NPWT)是一種促進(jìn)創(chuàng)面愈合的醫(yī)療技術(shù)。該技術(shù)是將吸引裝置與特殊的傷口敷料連接后,使傷口保持在負(fù)壓狀態(tài),可以改善創(chuàng)面微循環(huán),促進(jìn)創(chuàng)面肉芽生長(zhǎng),減少細(xì)菌定植和繁殖,保持傷口環(huán)境濕潤(rùn),從而達(dá)到治療創(chuàng)面的目的。封閉式負(fù)壓吸引技術(shù)可分為持續(xù)性負(fù)壓吸引、間斷式負(fù)壓吸引以及變壓式負(fù)壓吸引,而目前臨床上對(duì)于應(yīng)用該技術(shù)治療慢性創(chuàng)面時(shí)負(fù)壓模式的選擇沒(méi)有一個(gè)統(tǒng)一的規(guī)范與標(biāo)準(zhǔn)。我們通過(guò)初步的實(shí)驗(yàn),探索應(yīng)用封閉式負(fù)壓引流技術(shù)治療慢性創(chuàng)面時(shí)的較為合理的負(fù)壓治療模式,為該技術(shù)在臨床創(chuàng)面治療領(lǐng)域更廣泛的應(yīng)用打下良好的理論基礎(chǔ)。

    材料與方法

    1 材 料 封閉式負(fù)壓吸引裝置及敷料(武漢維斯第公司)。構(gòu)建兔耳慢性創(chuàng)面模型:健康CL級(jí)新西蘭大耳白兔24只,48~60月齡(老齡兔),體重3.9~5.0kg。30g/L戊巴比妥鈉1.5ml/kg耳緣靜脈麻醉,多普勒血流儀測(cè)定兔耳背側(cè)動(dòng)靜脈走向及分布,從根部向遠(yuǎn)端分段結(jié)扎兔耳中央動(dòng)脈及頭側(cè)動(dòng)靜脈,結(jié)扎后血管呈紫黑色,在耳根部切開(kāi)皮膚,切斷中央動(dòng)脈及頭側(cè)動(dòng)靜脈,保留尾側(cè)靜脈及周圍皮膚約0.5cm,將軟骨膜掀開(kāi)并向兩側(cè)分離約0.5cm,去除游離的軟骨膜,縫合皮膚。用手術(shù)刀在耳腹側(cè)制5cm×2cm的長(zhǎng)方形創(chuàng)面,刮除軟骨膜,暴露軟骨。以明膠海棉薄片蘸取0.9%生理鹽水覆于每個(gè)創(chuàng)面 外層覆蓋無(wú)菌密封薄膜。為維持缺血狀態(tài),于術(shù)后3d、6d、9d和12d在兔耳根部多次行環(huán)扎手術(shù),直至軟骨表面形成穩(wěn)定創(chuàng)面。

    2 方 法

    2.1 分組:將入選兔耳慢性創(chuàng)面模型隨機(jī)分為三組,每組8只16例創(chuàng)面,第一組為持續(xù)性負(fù)壓吸引組,第二組為間斷性負(fù)壓吸引組,第三組為變壓性負(fù)壓吸引組。創(chuàng)面及創(chuàng)周用生理鹽水和氯己定(1∶1000)清洗后,按創(chuàng)面大小修剪多孔藻酸鹽敷料,置入創(chuàng)面至創(chuàng)緣,引流管由創(chuàng)緣直接引出,透明貼膜封閉整個(gè)創(chuàng)面。將引流管通過(guò)連接管連于負(fù)壓終端,持續(xù)負(fù)壓吸引組負(fù)壓參數(shù)120mmHg,間斷負(fù)壓吸引組負(fù)壓參數(shù)為0mmHg及120mmHg,變壓負(fù)壓吸引組負(fù)壓參數(shù)為10~120mmHg。在三種壓力治療模式下分別對(duì)兔耳慢性創(chuàng)面進(jìn)負(fù)壓吸引治療。

    2.2 創(chuàng)面大體觀察:將上述三治療組分別于負(fù)壓下處理24、48、72h后更換創(chuàng)面藻酸鹽敷料,觀察創(chuàng)面的滲出、異味以及肉芽組織生長(zhǎng)情況。在治療前及每個(gè)治療時(shí)間點(diǎn)分別于創(chuàng)緣切取2mm×2mm×2mm大小的組織塊及創(chuàng)緣正常皮膚行后續(xù)組織學(xué)檢查。

    2.3 創(chuàng)面收縮測(cè)量:分別于負(fù)壓持續(xù)處理24、48、72h測(cè)量各組創(chuàng)面的長(zhǎng)度及寬度,計(jì)算創(chuàng)面收縮率[1]。

    2.4 細(xì)胞周期測(cè)定:活檢組織生理鹽水清洗后,置于5ml Dispase液中,37℃,2h。分離表皮(刮除方法),加入0.1g/L的胰蛋白酶5ml,吹打3~5min,取上清。200目濾網(wǎng)過(guò)濾,取濾液,加入50ml/L小牛血清離心(1000r/min,10min)。棄上清,加入 DMEM 5ml,輕輕吹打后同法離心2次,去除小碎片。棄上清,加入PBS 1ml,輕輕吹打,調(diào)整細(xì)胞數(shù)至(1~2)×106。將細(xì)胞懸液加入2ml 4%酒精中固定,封口,4℃保存。固定的細(xì)胞懸液用PBS離心洗滌2次,調(diào)整細(xì)胞數(shù)至1×106,加入PI染液1ml,4℃冰箱避光染色30min,流式細(xì)胞儀測(cè)定分析細(xì)胞周期。

    2.5 免疫組化SABC法檢測(cè)細(xì)胞核增殖抗原(PCNA):參照Boster公司產(chǎn)品使用說(shuō)明操作。15μm石蠟切片,二甲苯脫蠟,甲醇-30ml/L 過(guò)氧化氫,30min,PBS 清 洗 5min×3 次,50ml/L 兔 抗 血 清30min,PCNA單抗(1∶200)室溫過(guò)夜,PBS清洗5min×3次,羊抗兔血清(1∶200),室溫30min,SABC室溫下30min。PBS清洗5min×3次,DAB顯色,脫水、透明,封片,觀察。以0.01mol/L的PBS代替一抗作陰性對(duì)照。結(jié)果判斷:400倍光鏡下觀察記錄5個(gè)視野內(nèi)平均陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)低于5個(gè)計(jì)為(-),5~10個(gè)計(jì)為(+),10個(gè)以上計(jì)為(?),大于半數(shù)計(jì)為(?)。

    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,組織學(xué)及免疫組化結(jié)果按等級(jí)資料分析;細(xì)胞周期測(cè)定值作成組t檢驗(yàn),方差不齊時(shí)作t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    結(jié) 果

    1 創(chuàng)面大體觀察結(jié)果 24h:持續(xù)負(fù)壓組、間斷負(fù)壓及變壓負(fù)壓三組均引流通暢、創(chuàng)面分泌物減少、創(chuàng)面出現(xiàn)收縮;48h:三組均引流通暢,創(chuàng)面分泌物減少,持續(xù)負(fù)壓組創(chuàng)面縮小無(wú)明顯變化,間斷及變壓兩組創(chuàng)面持續(xù)縮小;72h:三組均引流通暢、其中變壓治療組肉芽組織鮮紅并均勻擴(kuò)大;持續(xù)負(fù)壓吸引組肉芽組織散在,分布不均勻,間斷負(fù)壓治療組肉芽組織生長(zhǎng)情況介于二者之間。

    2 創(chuàng)面收縮率 經(jīng)過(guò)負(fù)壓吸引治療的各組創(chuàng)面均出現(xiàn)明顯收縮,其中持續(xù)負(fù)壓吸引組創(chuàng)面持續(xù)收縮72h,但創(chuàng)面面積縮小不明顯。間斷負(fù)壓吸引組和變壓負(fù)壓吸引組負(fù)壓治療開(kāi)始后也出現(xiàn)明顯創(chuàng)面收縮,且隨治療時(shí)間延長(zhǎng)創(chuàng)面面積出現(xiàn)逐漸縮?。ǜ綀D)。

    3 細(xì)胞周期測(cè)定 正常皮膚組織細(xì)胞以G0/G1期為主,S期及G2+M期細(xì)胞比例較小。治療后24h及48h,持續(xù)負(fù)壓吸引組S期及G2+M期細(xì)胞均與創(chuàng)緣正常皮膚基本相同,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無(wú)顯著性差異(P>0.05);治療48h間斷負(fù)壓及變壓負(fù)壓吸引組S期及G2+M期細(xì)胞出現(xiàn)增多(P<0.05);治療后72h,三組S期及G2+M期細(xì)胞均較正常皮膚組明顯增多 (P<0.05)。這表明:負(fù)壓治療的早期(24h之內(nèi))創(chuàng)面未出現(xiàn)明顯的上皮細(xì)胞增生;間斷負(fù)壓和變壓治療較持續(xù)負(fù)壓能夠更早的誘導(dǎo)組織細(xì)胞增生,見(jiàn)表1。

    附圖 三種負(fù)壓模式不同治療時(shí)間創(chuàng)面面積收縮率

    表1 正常皮膚與不同負(fù)壓模式處理組創(chuàng)面細(xì)胞周期變化(±s)

    表1 正常皮膚與不同負(fù)壓模式處理組創(chuàng)面細(xì)胞周期變化(±s)

    24h 48h 72h細(xì)胞周期 正常皮膚80.23±8.34 77.41±8.47 76.27±7.89 S 7.58±3.58 8.08±3.43 8.12±3.28 7.41±3.26 7.62±3.48 14.18±4.27 15.67±5.19 15.31±4.79 16.97±5.14 17.36±5.09 G2+M 1.24±1.16 1.91±1.12 1.90±1.09 1.37±1.03 1.95±1.04 4.59±2.36 4.86±2.29持續(xù)負(fù)壓 間斷負(fù)壓 變壓負(fù)壓G0/G191.18±8.03 90.01±8.24 89.98±8.17 91.22±8.35 90.43±8.37 81.23±7.65 79.47±8.54持續(xù)負(fù)壓 間斷負(fù)壓 變壓負(fù)壓 持續(xù)負(fù)壓 間斷負(fù)壓 變壓負(fù)壓4.46±1.99 5.52±2.18 6.37±1.96

    治療24h三組S期及G2+M期細(xì)胞與正常皮膚組比較無(wú)顯著差異(P>0.05);治療48h間斷負(fù)壓,變壓負(fù)壓兩組S期及G2+M期細(xì)胞與正常皮膚組比較,有顯著性差異(P<0.05);持續(xù)負(fù)壓組S期及G2+M期細(xì)胞與正常皮膚組比較,無(wú)顯著性差異(P>0.05);治療72h三組S期及G2+M期細(xì)胞與正常皮膚組比較,有顯著性差異(P<0.05)。

    4 PCNA表達(dá)改變 正常皮膚組織中細(xì)胞核增殖抗原(PCNA)表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞主要是皮膚基底細(xì)胞,表皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及毛囊上皮細(xì)胞PCNA均為陰性。治療24h,持續(xù)負(fù)壓、間斷負(fù)壓及變壓負(fù)壓三組創(chuàng)面組織中皮膚基底細(xì)胞,表皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及毛囊上皮細(xì)胞PCNA均為陰性,表明在負(fù)壓治療的早期(24h內(nèi)),創(chuàng)面沒(méi)有出現(xiàn)明顯的組織細(xì)胞增殖;治療48h,變壓負(fù)壓及間斷負(fù)壓治療組,成纖維細(xì)胞及毛囊上皮細(xì)胞PCNA出現(xiàn)陽(yáng)性,持續(xù)負(fù)壓組為陰性;治療72h,變壓負(fù)壓及間斷負(fù)壓治療組,成纖維細(xì)胞及毛囊上皮細(xì)胞PCNA表達(dá)明顯增強(qiáng),而成纖維細(xì)胞更為明顯;持續(xù)負(fù)壓治療組三種細(xì)胞PCNA表達(dá)均出現(xiàn)陽(yáng)性,此結(jié)果提示間斷負(fù)壓及變壓負(fù)壓治療可能較早的誘發(fā)創(chuàng)面組織細(xì)胞的增殖,見(jiàn)表2。

    治療24h:三負(fù)壓處理組中三類細(xì)胞PCNA表達(dá)水平與正常皮膚組比較,無(wú)顯著性差異(P>0.05);治療48h:間斷負(fù)壓與變壓負(fù)壓中成纖維與毛囊細(xì)胞PCNA表達(dá)水平與正常皮膚組比較,有顯著性差異(P<0.05);治療72h:持續(xù)負(fù)壓、間斷負(fù)壓、變壓負(fù)壓三組中成纖維與毛囊細(xì)胞PCNA表達(dá)水平與正常皮膚組比較,有顯著性差異(P<0.05)。

    表2 正常皮膚與不同負(fù)壓處理組創(chuàng)面PCNA表達(dá)水平(±s)

    表2 正常皮膚與不同負(fù)壓處理組創(chuàng)面PCNA表達(dá)水平(±s)

    24h 48h 72h分組 正常皮膚持續(xù)負(fù)壓 間斷負(fù)壓 變壓負(fù)壓基底細(xì)胞 +~? / / / / / -~+ -~+ -~+ -~+持續(xù)負(fù)壓 間斷負(fù)壓 變壓負(fù)壓 持續(xù)負(fù)壓 間斷負(fù)壓 變壓負(fù)壓成纖維細(xì)胞 — — — — — +~? +~? -+~? ?~? ?~?毛囊上皮細(xì)胞 — — — — — + + +~? +~? +~?

    討 論

    作為近幾年來(lái)興起的一種促進(jìn)創(chuàng)面愈合的技術(shù),封閉式負(fù)壓吸引為慢性創(chuàng)面的處理及治療提供了一種良好的選擇[2,3]。封閉式負(fù)壓吸引技術(shù)為創(chuàng)面肉芽組織生長(zhǎng)提供了一個(gè)相對(duì)封閉、潮濕及無(wú)菌的環(huán)境,它可促進(jìn)創(chuàng)面的血液微循環(huán)及肉芽組織生長(zhǎng),降低換藥所帶來(lái)的創(chuàng)面疼痛。國(guó)內(nèi)外學(xué)者將負(fù)壓創(chuàng)面治療技術(shù)應(yīng)用于多種急、慢性創(chuàng)面的治療或促進(jìn)移植皮膚、皮瓣的成活,均取得了良好的效果[4]。

    目前,臨床上負(fù)壓吸引治療所用的壓力模式多為持續(xù)性恒定壓力,這種治療模式的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單方便、易于推廣,在有中心負(fù)壓病房的臨床科室很容易開(kāi)展。然而歐美負(fù)壓創(chuàng)傷治療學(xué)會(huì)的基礎(chǔ)理論研究顯示,在一定范圍的負(fù)壓下,間斷壓力或者變化壓力的吸引方法,更加符合創(chuàng)面修復(fù)的病理循環(huán)周期,有利于細(xì)胞的有絲分裂和蛋白合成以及各種組織再生和肉芽生長(zhǎng),加速創(chuàng)傷愈合過(guò)程[5]。因此我們將三種負(fù)壓模式作用于兔耳慢性創(chuàng)面模型,通過(guò)對(duì)各種壓力模式下不同時(shí)間創(chuàng)面大體外觀、收縮率、細(xì)胞周期及細(xì)胞核增殖抗原表達(dá)的測(cè)定與分析,探討間斷性負(fù)壓以及變壓性負(fù)壓這兩種不同負(fù)壓治療模式在臨床應(yīng)用的可行性。

    通過(guò)對(duì)三種負(fù)壓模式處理后創(chuàng)面外觀的觀察發(fā)現(xiàn):三種壓力模式在72h左右均可以達(dá)到誘導(dǎo)肉芽組織生長(zhǎng)、通暢引流及促進(jìn)創(chuàng)面收縮的治療效果。而間斷負(fù)壓以及變壓負(fù)壓在促進(jìn)肉芽組織生長(zhǎng)及創(chuàng)面收縮方面的效果更加明顯。持續(xù)負(fù)壓吸引可以立即誘發(fā)創(chuàng)面的收縮,且在整個(gè)治療的過(guò)程保持不變。間斷負(fù)壓以及變壓負(fù)壓在治療的開(kāi)始也立刻出現(xiàn)創(chuàng)面的收縮,但與持續(xù)負(fù)壓吸引不同的是,這種收縮是逐漸增加的,也就是說(shuō),傷口面積在逐漸減。因此在治療72h后,我們可以發(fā)現(xiàn)間斷負(fù)壓及變壓負(fù)壓組的創(chuàng)面面積明顯較持續(xù)負(fù)壓組變小。這種差異的可能原因是由于間斷負(fù)壓及變壓負(fù)壓的按摩效果,刺激創(chuàng)面邊緣組織的細(xì)胞骨架重構(gòu)、導(dǎo)致信號(hào)Cascade及生長(zhǎng)因子釋放,促進(jìn)細(xì)胞的有絲分裂以及組織生長(zhǎng)[6,7]。

    通過(guò)應(yīng)用流式細(xì)胞儀測(cè)定各組樣本組織細(xì)胞DNA含量,計(jì)算出各期細(xì)胞所占比例,發(fā)現(xiàn)三種負(fù)壓模式處理創(chuàng)面在24hS期及G2+M期細(xì)胞較正常皮膚均未明顯增多;48h間斷及變壓負(fù)壓治療組S期及G2+M期細(xì)胞出現(xiàn)增多;72h三組創(chuàng)面S期及G2+M期細(xì)胞均明顯增多;提示組織細(xì)胞增殖活躍,創(chuàng)面進(jìn)入修復(fù)狀態(tài)在傳統(tǒng)的持續(xù)性負(fù)壓吸引治療中開(kāi)始于治療后72h而通過(guò)改變負(fù)壓吸引模式為間斷性或變壓性,則有能將這一修復(fù)開(kāi)始時(shí)間提前至治療開(kāi)始后48h。

    正常情況下,PCNA存在于部分皮膚基底細(xì)胞核內(nèi),如出現(xiàn)在成纖維細(xì)胞或其他細(xì)胞內(nèi),則表示組織細(xì)胞增殖活躍。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在治療后72h三種負(fù)壓治療模式中創(chuàng)面組織中皮膚毛囊上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞PCNA均呈現(xiàn)高表達(dá),均與對(duì)照組創(chuàng)緣周圍正常皮膚有顯著差異。治療48h間斷負(fù)壓及變壓負(fù)壓治療組創(chuàng)面組織中皮膚毛囊上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞PCNA均呈現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá),與對(duì)照組創(chuàng)緣周圍正常皮膚有顯著差異,而持續(xù)負(fù)壓吸引組則為弱陽(yáng)性表達(dá)。在治療開(kāi)始的24h三組創(chuàng)面PCNA均呈陰性。這一結(jié)果也與創(chuàng)面細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)結(jié)論相符。

    封閉式負(fù)壓吸引治療可改善創(chuàng)面的血液微循環(huán)并促進(jìn)創(chuàng)面肉芽組織生長(zhǎng)。相對(duì)傳統(tǒng)的持續(xù)負(fù)壓,間斷負(fù)壓及變壓負(fù)壓這兩種負(fù)壓吸引模式,能夠較早的誘導(dǎo)創(chuàng)面細(xì)胞增殖,促進(jìn)肉芽組織生長(zhǎng)及傷口收縮。因此,在封閉式負(fù)壓吸引技術(shù)治療慢性創(chuàng)面時(shí),間斷負(fù)壓和變壓負(fù)壓這兩種模式可以作為治療中的優(yōu)先選擇。

    [1] Borgquist O,Ingemansson R,Malmsjo M.Micro-and macromechanical effects on the wound bed by negative pressure wound therapy using gauze and foam[J].Ann Plast Surg,2010,64(6):789-93.

    [2] Armstrong DG,Lavery LA.Negative pressure wound therapy after partial diabetic foot amputation:a multicentre,randomised controlled trial[J].Lancet,2005,366:1704-1710.

    [3] Lavery LA,Boulton AJ,Niezgoda JA,et al.A comparison of diabetic foot ulcer outcomes using negative pressure wound therapy versus historical standard of care[J].Int Wound J,2007,4:103-113.

    [4] Saraiya HA,Shah N.Use of indigenously made negativepressure wound therapy system for patients with diabetic foot[J].Adv Skin Wound Care,2013,26(2):74-7.

    [5] Borgquist O,Ingemansson R,Malmsjo M.The effect of intermittent and variable negative pressure wound therapy on wound edge microvascular blood flow[J].Ostomy Wound Manage,2010,56(3):60-7.

    [6] Borgquist O,Ingemansson R,Malmso M.Micro-and macromechanical effects on the wound bed by negative pressure wound therapy using gauze and foam[J].Ann Plast Surg,2010,64(6):789-93.

    [7] Saxena V,Hwang CW,Huang S,et al.Vacuum-assisted closure:microdeformations of wounds and cell proliferation[J].Plast Reconstr Surg,2004,114(5):1086-96.

    猜你喜歡
    變壓毛囊肉芽
    首個(gè)人工毛囊問(wèn)世
    軍事文摘(2023年2期)2023-02-17 09:20:24
    基于變壓吸附分離技術(shù)在氣體中的應(yīng)用研究
    一種變頻變壓的雙頻注入絕緣監(jiān)測(cè)方法
    芪榆油紗布外敷對(duì)糖尿病足患者肉芽生長(zhǎng)及創(chuàng)面愈合的影響
    中西醫(yī)結(jié)合治療毛囊閉鎖三聯(lián)征2例
    高滲鹽水紗聯(lián)合優(yōu)拓對(duì)肉芽組織水腫創(chuàng)面的效果觀察
    美容點(diǎn)痣掃斑筆
    治療脫發(fā)趕在毛囊萎縮前
    保健與生活(2016年1期)2016-04-12 18:29:44
    慶大霉素高滲鹽水在手足外科感染性肉芽組織創(chuàng)面換藥中的應(yīng)用
    航空用24脈波自耦變壓整流裝置的研究
    亚洲欧美日韩高清在线视频| 人人妻人人澡人人看| 首页视频小说图片口味搜索| 久久热在线av| 亚洲精品在线美女| 国产一卡二卡三卡精品| 极品教师在线免费播放| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 午夜福利影视在线免费观看| 午夜影院日韩av| av有码第一页| 午夜老司机福利片| 亚洲一区二区三区不卡视频| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲无线在线观看| 日韩有码中文字幕| 欧美最黄视频在线播放免费| 纯流量卡能插随身wifi吗| 日韩欧美三级三区| 一本久久中文字幕| 高潮久久久久久久久久久不卡| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 免费看a级黄色片| 91成年电影在线观看| 久99久视频精品免费| 午夜免费鲁丝| 免费在线观看影片大全网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 国产精品电影一区二区三区| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲九九香蕉| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲色图综合在线观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 久久久久久大精品| 国产国语露脸激情在线看| 国产精品电影一区二区三区| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产熟女xx| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 成在线人永久免费视频| 亚洲av电影在线进入| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲精华国产精华精| 久久亚洲真实| 免费搜索国产男女视频| 禁无遮挡网站| 极品人妻少妇av视频| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产成人av激情在线播放| 国产熟女xx| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 一级黄色大片毛片| 手机成人av网站| 中文亚洲av片在线观看爽| 男人舔女人的私密视频| 午夜影院日韩av| 国产精品免费一区二区三区在线| videosex国产| 满18在线观看网站| tocl精华| 亚洲欧美精品综合久久99| 我的亚洲天堂| 亚洲午夜理论影院| 手机成人av网站| 午夜激情av网站| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 午夜影院日韩av| 波多野结衣av一区二区av| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲精品在线观看二区| 美女午夜性视频免费| 亚洲,欧美精品.| 美女大奶头视频| 国产一区二区激情短视频| 精品免费久久久久久久清纯| 麻豆国产av国片精品| 日本一区二区免费在线视频| 色尼玛亚洲综合影院| 一级毛片高清免费大全| 成年版毛片免费区| 激情在线观看视频在线高清| 久久久久久免费高清国产稀缺| 香蕉久久夜色| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲专区国产一区二区| 日本黄色视频三级网站网址| 国产又爽黄色视频| 午夜视频精品福利| 又黄又粗又硬又大视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| 9热在线视频观看99| 亚洲午夜理论影院| 男男h啪啪无遮挡| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 热99re8久久精品国产| 人妻久久中文字幕网| 欧美另类亚洲清纯唯美| 9色porny在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产成人免费无遮挡视频| 欧美中文日本在线观看视频| 性少妇av在线| www.精华液| 国产区一区二久久| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 欧美成狂野欧美在线观看| 精品国产一区二区久久| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲成a人片在线一区二区| 波多野结衣一区麻豆| 国产精品 欧美亚洲| 日韩大码丰满熟妇| videosex国产| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 亚洲男人天堂网一区| 女同久久另类99精品国产91| 此物有八面人人有两片| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产在线精品亚洲第一网站| 啦啦啦韩国在线观看视频| 一二三四在线观看免费中文在| 91字幕亚洲| 亚洲熟女毛片儿| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲av成人av| 制服丝袜大香蕉在线| 99在线视频只有这里精品首页| 婷婷丁香在线五月| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 午夜视频精品福利| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 18禁观看日本| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 黄频高清免费视频| 久久久水蜜桃国产精品网| 成人亚洲精品一区在线观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲精品在线观看二区| 成人亚洲精品一区在线观看| 欧美成狂野欧美在线观看| 久久久久九九精品影院| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 日韩大尺度精品在线看网址 | 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲全国av大片| 欧美成人午夜精品| 亚洲成人久久性| 变态另类丝袜制服| 国产91精品成人一区二区三区| 高清黄色对白视频在线免费看| 性少妇av在线| 国产高清videossex| aaaaa片日本免费| 日本在线视频免费播放| 成人永久免费在线观看视频| 久久久国产欧美日韩av| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 欧美色视频一区免费| 成人18禁在线播放| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 韩国av一区二区三区四区| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 最近最新中文字幕大全电影3 | 搡老熟女国产l中国老女人| 丝袜在线中文字幕| av欧美777| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 丁香六月欧美| 神马国产精品三级电影在线观看 | 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产成年人精品一区二区| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 啪啪无遮挡十八禁网站| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲情色 制服丝袜| 精品福利观看| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 日本免费a在线| 国产精华一区二区三区| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 欧美成人一区二区免费高清观看 | 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲伊人色综图| 淫秽高清视频在线观看| 热99re8久久精品国产| 亚洲免费av在线视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 美女扒开内裤让男人捅视频| 午夜福利影视在线免费观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲 国产 在线| 黄色 视频免费看| 自线自在国产av| 深夜精品福利| 亚洲人成伊人成综合网2020| 天天一区二区日本电影三级 | 午夜成年电影在线免费观看| 亚洲色图综合在线观看| 悠悠久久av| 亚洲av电影在线进入| 亚洲男人的天堂狠狠| 色哟哟哟哟哟哟| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲人成电影免费在线| 国产精品 欧美亚洲| 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲自拍偷在线| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 老鸭窝网址在线观看| 狂野欧美激情性xxxx| 超碰成人久久| 99re在线观看精品视频| 制服丝袜大香蕉在线| 国产精品亚洲av一区麻豆| av电影中文网址| 欧美在线黄色| 免费看美女性在线毛片视频| e午夜精品久久久久久久| 丝袜美足系列| 日韩精品青青久久久久久| 淫秽高清视频在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产亚洲精品av在线| 成人三级黄色视频| 精品一区二区三区四区五区乱码| 一区二区三区激情视频| 亚洲精华国产精华精| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产片内射在线| 午夜福利18| 好男人在线观看高清免费视频 | 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 最好的美女福利视频网| 免费在线观看黄色视频的| 久热爱精品视频在线9| 99国产综合亚洲精品| 国产在线精品亚洲第一网站| 精品国产美女av久久久久小说| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲精品国产区一区二| 国产成人影院久久av| 又黄又粗又硬又大视频| 成在线人永久免费视频| 热re99久久国产66热| 午夜福利,免费看| 国产亚洲欧美精品永久| 久久国产乱子伦精品免费另类| 后天国语完整版免费观看| 成年版毛片免费区| 国产高清有码在线观看视频 | 最新在线观看一区二区三区| 亚洲 国产 在线| 亚洲五月婷婷丁香| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 咕卡用的链子| 亚洲,欧美精品.| 日日干狠狠操夜夜爽| 99在线视频只有这里精品首页| 欧美乱码精品一区二区三区| 午夜福利18| 18禁美女被吸乳视频| 一级片免费观看大全| 成人亚洲精品av一区二区| 在线观看www视频免费| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 18禁国产床啪视频网站| 一级作爱视频免费观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 精品国产亚洲在线| 亚洲中文av在线| 人妻久久中文字幕网| 亚洲熟女毛片儿| 免费观看人在逋| 十分钟在线观看高清视频www| 中文亚洲av片在线观看爽| 老熟妇仑乱视频hdxx| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产高清videossex| 精品电影一区二区在线| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 三级毛片av免费| 亚洲最大成人中文| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 欧美丝袜亚洲另类 | 18禁黄网站禁片午夜丰满| 黑人操中国人逼视频| 国产野战对白在线观看| 91av网站免费观看| 老司机福利观看| av免费在线观看网站| 亚洲av美国av| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 99在线视频只有这里精品首页| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲国产精品999在线| av视频在线观看入口| √禁漫天堂资源中文www| 国产乱人伦免费视频| 精品乱码久久久久久99久播| 桃红色精品国产亚洲av| 国产精品一区二区免费欧美| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产一区二区三区综合在线观看| 一进一出抽搐动态| 在线国产一区二区在线| av中文乱码字幕在线| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美丝袜亚洲另类 | 午夜免费鲁丝| 国产精品影院久久| 亚洲黑人精品在线| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| av天堂在线播放| 欧美成人性av电影在线观看| www.精华液| 久久婷婷成人综合色麻豆| 免费高清在线观看日韩| 十分钟在线观看高清视频www| 97人妻天天添夜夜摸| 国产精品久久久人人做人人爽| 久久性视频一级片| 啦啦啦韩国在线观看视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 日韩大码丰满熟妇| 看片在线看免费视频| 午夜a级毛片| 大香蕉久久成人网| 中文字幕高清在线视频| 欧美在线黄色| 一边摸一边抽搐一进一小说| 91老司机精品| 国产三级在线视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 日本在线视频免费播放| 亚洲熟女毛片儿| 久久久久久国产a免费观看| 欧美成狂野欧美在线观看| 欧美日本视频| 男女午夜视频在线观看| 日本 欧美在线| 精品一区二区三区av网在线观看| 久久人人97超碰香蕉20202| 两个人视频免费观看高清| 九色国产91popny在线| 嫩草影视91久久| 18禁美女被吸乳视频| 天堂影院成人在线观看| ponron亚洲| 免费高清在线观看日韩| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲九九香蕉| 黑人欧美特级aaaaaa片| 午夜福利欧美成人| 国产精品精品国产色婷婷| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲人成电影观看| 国产激情欧美一区二区| 亚洲成人免费电影在线观看| 99热只有精品国产| 亚洲人成电影免费在线| 久久久久久久久中文| 日韩免费av在线播放| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久午夜亚洲精品久久| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产精品综合久久久久久久免费 | 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 少妇的丰满在线观看| 制服人妻中文乱码| 亚洲最大成人中文| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 妹子高潮喷水视频| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 精品第一国产精品| 久久久国产欧美日韩av| 国产色视频综合| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产精品二区激情视频| 美女扒开内裤让男人捅视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 国产精品1区2区在线观看.| 久久久久久久午夜电影| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲 国产 在线| 电影成人av| 看黄色毛片网站| 午夜免费观看网址| 国产区一区二久久| 又紧又爽又黄一区二区| 欧美激情极品国产一区二区三区| 免费不卡黄色视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 国产一区在线观看成人免费| 久久久久国内视频| 岛国在线观看网站| 国产精品精品国产色婷婷| 国产成人av激情在线播放| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 999久久久国产精品视频| 99riav亚洲国产免费| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲av电影在线进入| 国产精品一区二区在线不卡| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 99在线视频只有这里精品首页| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲第一电影网av| 可以在线观看的亚洲视频| 在线观看66精品国产| 性色av乱码一区二区三区2| 真人做人爱边吃奶动态| 91麻豆精品激情在线观看国产| 99久久国产精品久久久| 日本黄色视频三级网站网址| 满18在线观看网站| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产黄a三级三级三级人| 91大片在线观看| av在线播放免费不卡| www国产在线视频色| 免费看a级黄色片| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲熟女毛片儿| a级毛片在线看网站| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 日韩欧美免费精品| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 欧美精品啪啪一区二区三区| 久久久精品欧美日韩精品| 看免费av毛片| 色综合亚洲欧美另类图片| 中文字幕色久视频| av天堂在线播放| 一进一出抽搐动态| 999精品在线视频| 香蕉国产在线看| 女同久久另类99精品国产91| 欧美在线一区亚洲| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美激情高清一区二区三区| 亚洲国产欧美网| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 精品人妻在线不人妻| 国产精品久久电影中文字幕| 丁香欧美五月| 欧美中文日本在线观看视频| 国产三级在线视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 97碰自拍视频| 男人操女人黄网站| 久久精品91蜜桃| 中国美女看黄片| 麻豆成人av在线观看| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲最大成人中文| 亚洲av熟女| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲av电影在线进入| 亚洲av片天天在线观看| 黄色视频不卡| 91大片在线观看| 黄色女人牲交| 日本三级黄在线观看| 两个人免费观看高清视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 日本欧美视频一区| 欧美中文日本在线观看视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 老司机午夜十八禁免费视频| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 免费在线观看影片大全网站| 国产亚洲av嫩草精品影院| 成年版毛片免费区| av超薄肉色丝袜交足视频| 国语自产精品视频在线第100页| 大型av网站在线播放| 又黄又爽又免费观看的视频| 日本a在线网址| 少妇熟女aⅴ在线视频| 欧美日韩乱码在线| 成人精品一区二区免费| 国产午夜精品久久久久久| 欧美大码av| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久影院123| 日韩欧美三级三区| 国产成人av激情在线播放| 老汉色av国产亚洲站长工具| 看免费av毛片| videosex国产| 国产亚洲精品av在线| 黄频高清免费视频| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 日本免费a在线| 色老头精品视频在线观看| 电影成人av| 一区二区三区激情视频| 制服诱惑二区| 午夜福利高清视频| 国产麻豆成人av免费视频| 午夜免费成人在线视频| av片东京热男人的天堂| 国产精品久久久av美女十八| 国产精品久久电影中文字幕| 国产不卡一卡二| 涩涩av久久男人的天堂| 视频区欧美日本亚洲| 男男h啪啪无遮挡| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产亚洲精品一区二区www| 69av精品久久久久久| 在线观看免费视频日本深夜| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久久久久免费高清国产稀缺| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产精品影院久久| 精品久久蜜臀av无| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲av成人av| 亚洲av成人一区二区三| 日本免费a在线| 曰老女人黄片| 在线观看午夜福利视频| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 午夜福利免费观看在线| 搡老熟女国产l中国老女人| 日本免费a在线| 国产精品国产高清国产av| 久久精品成人免费网站| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 欧美日韩一级在线毛片| 午夜免费成人在线视频| 老司机福利观看| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲av电影在线进入| 天天一区二区日本电影三级 | 麻豆成人av在线观看| 制服诱惑二区| 亚洲精品一区av在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 国产又色又爽无遮挡免费看| 多毛熟女@视频| 国产精品二区激情视频| 麻豆一二三区av精品| 日韩欧美免费精品| 亚洲一区中文字幕在线| 久久性视频一级片| 日韩免费av在线播放| 国产麻豆69| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 精品日产1卡2卡| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产1区2区3区精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产成人精品久久二区二区91| 国产精品1区2区在线观看.| tocl精华| 自线自在国产av| 精品久久蜜臀av无| av在线播放免费不卡| 久久午夜综合久久蜜桃| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产亚洲精品av在线| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲熟女毛片儿| 午夜老司机福利片| 亚洲国产看品久久| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 色老头精品视频在线观看| 91国产中文字幕| 神马国产精品三级电影在线观看 | videosex国产| 岛国在线观看网站| 成年人黄色毛片网站| 乱人伦中国视频| 多毛熟女@视频| 亚洲精品美女久久av网站| 国产亚洲精品一区二区www| 免费看十八禁软件| 亚洲专区中文字幕在线| 老司机福利观看| 岛国视频午夜一区免费看|