白花蛇舌草滴丸制備工藝的研究

鄭 茂，趙志娟，丁 紅(山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，太原 03000;山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室;通訊作者，E-mail:qdh6@sohu.com)

滴丸劑(guttate pills)系指固體或液體藥物與適宜基質(zhì)加熱熔化混勻后，滴入不相混溶的冷凝液中，收縮冷凝而制成的小丸狀制劑。由于合成基質(zhì)和固體分散技術(shù)的應(yīng)用使滴丸劑廣泛應(yīng)用于速釋制劑［1，2］。文獻(xiàn)研究［3，4］表明白花蛇舌草中的多種成分具有抗腫瘤作用，將其提取物制成滴丸劑，具有吸收快、生物利用度高，且工藝條件易于控制的特點。本實驗從處方組成、滴制工藝條件等方面考察了白花蛇舌草滴丸的成型工藝，為其進(jìn)一步研究提供基礎(chǔ)。

1 藥品與儀器

白花蛇舌草純化物(自制);PEG4000、PEG6000(天津基準(zhǔn)化學(xué)試劑有限公司);甲醇(色譜純，天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司);三乙胺、冰醋酸(均為分析純，天津光復(fù)科技發(fā)展有限公司)。Agilent1200 series高效液相色譜系統(tǒng);LB-812A型六管崩介儀(上海黃海制藥廠);MP-3002電子天平(上海恒瑞科技有限公司);HH-2電子恒溫水浴鍋(蘇州威爾實驗設(shè)備有限公司);滴丸裝置(自制)。

2 方法與結(jié)果

2.1 白花蛇舌草滴丸制備工藝的單因素考察

2.1.1 滴丸制備方法

2.1.1.1 白花蛇舌草藥材提取純化物的制備 將白花蛇舌草藥材400 g，粉碎，過60目篩，加8倍量95%乙醇回流提取2次，每次1.5 h，過濾，合并濾液減壓濃縮制得浸膏，對浸膏進(jìn)行前處理，而后用蒸餾水將所得粗品制成含熊果酸濃度為0.2 g/ml的混懸液，作為上樣溶液。取處理好的大孔樹脂濕法裝柱，徑高比為1∶10，將制得的混懸液作為上樣液上樣，靜置吸附3 h;然后用不同濃度的乙醇各100 ml進(jìn)行梯度洗脫，控制流速為2 ml/min，收集洗脫液，濃縮，真空干燥得白色結(jié)晶，即為白花蛇舌草藥材純化物，純化物中熊果酸的含量為33%左右。

2.1.1.2 熔融物的制備 取適量白花蛇舌草藥材提取純化物，研細(xì)，過80目篩，稱取適量置于蒸發(fā)皿中，加入適量無水乙醇，加熱溶解。另稱取基質(zhì)適量置于小燒杯中，70-75℃水浴加熱，待基質(zhì)完全熔化后加入藥材純化物，并攪拌均勻，于70℃水浴保溫，攪拌，直至乙醇揮盡為止，繼續(xù)靜置，于70℃水浴條件下保溫，待氣泡完全除盡后，備用。

2.1.1.3 滴丸的制備 用滴管自燒杯中取出熔融物，距離冷凝液口一定滴距處，以一定滴速滴入0-4℃的冷凝液中，待滴丸冷凝完全后，傾去冷凝液，收集滴丸，瀝凈并用濾紙除去丸上冷凝液。

2.1.2 基質(zhì)的選擇 滴丸劑的基質(zhì)選擇PEG4000、PEG6000以及兩者一定比例的混合物，以溶劑-熔融法制備滴丸。以藥物與基質(zhì)混合后熔融液的稠度、滴制難易、滴丸圓整度、溶散時限等為指標(biāo)，進(jìn)行基質(zhì)的選擇。結(jié)果 見表1。

表1 不同基質(zhì)制備滴丸的效果考察結(jié)果Table 1 Effect of different matrix on guttate pill preparation

結(jié)果表明，PEG4000為基質(zhì)時，藥液黏度適中，易于滴制，大小均勻，圓整度好，但成型性軟而不勻，故不宜單用。PEG6000本身黏度較大，熔融溫度偏高，且熔融液顏色較深，滴制困難，成型不好，制成的滴丸大小均一性差，圓整度不好。一定比例的PEG6000與PEG4000混合時，藥物與基質(zhì)有較好融合性。且隨PEG6000用量減少丸形漸好。當(dāng)比例為1∶1時，熔融液黏度適中，易于滴制，丸形變圓整，大小均勻，故選用基質(zhì)比例為1∶1為佳。

2.1.3 藥物與基質(zhì)配比的考察 分別選擇藥材純化物與混合基質(zhì)的配比為 1∶1、1∶1.5、1∶2、1∶2.5、1∶3，滴丸制備方法同上，以藥物融合性、熔融液稠度、丸形圓整度與丸重差異為指標(biāo)，確定藥物與基質(zhì)配比，結(jié)果見表2。

表2 藥物與基質(zhì)的比例考察結(jié)果Table 2 Effects of different proportions of drug and matrix on guttate pill preparation

結(jié)果表明，藥材純化物所占比例越低，與基質(zhì)融合的越好，熔融液黏稠度越低，滴制越易，丸形圓整度及均勻性越好，反之越差。藥物與基質(zhì)配比為1∶2以上時，融合性好，稠度適宜，易于滴制，且丸形圓整，為了盡可能減少服用劑量，最終確定配比為1∶2為宜。

2.1.4 熔融溫度的選擇 選擇熔融溫度65，70，75，80，85℃熔化，滴丸制備方法同上，以熔融狀態(tài)、藥液顏色、滴丸凝固時間和丸重差異等為指標(biāo)，以確定適宜的熔融溫度，結(jié)果見表3。

表3 不同熔融溫度對滴丸制備的影響Table 3 Effects of different melting tem peratures on guttate pill preparation

結(jié)果表明:熔融溫度為70-75℃時，基質(zhì)與藥物熔融狀態(tài)良好，滴丸凝固時間適中，藥液顏色淺，所制滴丸丸形圓整度好，丸重差異符合要求;當(dāng)熔融溫度高于80℃時藥液顏色逐漸變深，所制滴丸不易凝固，凝固所需時間延長，所得滴丸丸形圓整度一般?？紤]到應(yīng)加速乙醇的揮發(fā)，盡可能縮短滴制時間，因此確定熔融溫度為70-75℃左右較好。

2.1.5 滴制溫度的選擇 選擇滴制溫度60，65，70，75，80℃水浴溫度，滴丸制備方法同上，以熔融液稠度、滴制狀態(tài)、滴丸丸形和丸重差異等指標(biāo)評價，以確定滴制溫度，結(jié)果見表4。

表4 不同滴制溫度對滴丸制備的影響Table 4 Effects of different dropping temperatures on guttate pill preparation

結(jié)果表明，滴制溫度對滴丸成型的影響較明顯，60℃時，熔融液黏稠，滴制困難，丸形差;但溫度高于65℃時，易于滴制，丸形好，大小均勻，但溫度過高時藥液的表面張力變小，丸重減輕，溫度低時，丸重增大。另外藥液受熱可能會對藥效產(chǎn)生影響，故選擇70℃左右為宜。

2.1.6 滴管口徑(內(nèi)/外徑)的選擇 選擇滴管口徑(內(nèi)/外徑，mm/mm)分別為 1.4/2.6、2.0/3.1、2.5/3.6、3.0/4.2，滴丸制備方法同上，以滴丸丸形和丸重差異等指標(biāo)評價，以確定適宜的滴管口徑，結(jié)果見表5。

表5 不同滴管口徑(內(nèi)/外徑)對滴丸制備的影響Table 5 Effects of different dropper diameters(inner/outer diameter)on guttate pill preparation

結(jié)果表明，滴距口徑對滴丸的丸形、丸重等因素影響較大，隨著滴頭口徑增大，滴丸丸重增大，含藥量增加。面積大時收縮成球的力量強(qiáng)，因此小丸的圓整度一般比大丸好。當(dāng)?shù)晤^口徑(mm/mm)為3.0/4.2時，平均丸重為(41.3 ±0.2)mg，每丸含藥劑量大，考慮到大丸可減少單次服藥丸數(shù)，故確定滴頭口徑為3.0 mm/4.2 mm 為宜。

2.1.7 滴距的選擇 滴管口與冷凝液的距離選擇分別以 5，6，7，8，9，10 cm 的距離滴制，滴丸制備方法同上，以滴丸丸形和丸重差異等為指標(biāo)以確定滴距，結(jié)果見表6。

結(jié)果表明，當(dāng)?shù)尉嘈∮? cm時，液滴在空氣中停留時間短，收縮效果不好，易產(chǎn)生拖尾現(xiàn)象，圓整度差;滴距在8 cm以上時，因距離大易產(chǎn)生扁圓形滴丸，圓整度不好，或甚至液滴被跌散缺損，影響丸重。當(dāng)?shù)尉酁? cm時，所制滴丸圓整度好，丸重差異符合中國藥典要求，因此確定滴距為6 cm左右適宜。

表6 不同滴距對滴丸制備的影響Table 6 Effects of different dropping distance on guttate pill preparation

2.1.8 滴速的選擇 分別選擇 20，30，40，50滴/min的滴速，滴丸制備方法同上，以滴丸丸形、滴丸粘連和丸重差異等指標(biāo)評價，以確定適宜滴速，結(jié)果見表7。

表7 不同滴速對滴丸制備的影響Table 7 Effects of different dropping speed on guttate pill preparation

結(jié)果表明，滴速在40滴/min以下時，所制滴丸無粘連現(xiàn)象，丸重差異符合要求，丸形圓整;滴速為50滴/min時，所制滴丸易產(chǎn)生粘連現(xiàn)象，圓整度一般，丸重差異不符合要求;在保證滴丸質(zhì)量基礎(chǔ)上，考慮節(jié)能和生產(chǎn)效率，選擇滴速為40滴/min進(jìn)行滴制。

2.1.9 冷凝液高度的選擇 分別選擇冷凝液高度為20，25，30，35，40 cm，滴丸制備方法同上，以滴丸丸形、滴丸粘連和丸重差異等指標(biāo)評價，以確定適宜的冷凝液高度，結(jié)果見表8。

結(jié)果表明，冷凝液高度對滴丸成型的影響也較為明顯，當(dāng)高度為20-25 cm時，所制滴丸不能充分冷卻，有拖尾現(xiàn)象產(chǎn)生，且丸重差異不合格;冷凝液高度在30-40 cm范圍時，所制滴丸丸形圓整度好，丸重差異小，故確定冷凝液高度為30-40 cm為佳。

表8 不同冷凝液高度對滴丸制備的影響Table 8 Effects of different height of condensed liquid on guttate pill preparation

2.2 白花蛇舌草滴丸滴制條件的優(yōu)化

2.2.1 正交試驗 本試驗采用正交設(shè)計法［5］，結(jié)合單因素考察的結(jié)果，選取考察結(jié)果中對滴丸制備工藝成型影響較大的四個因素，如滴距(A)、冷凝液高度(B)、滴制溫度(C)、滴管口徑(D)進(jìn)行正交優(yōu)化設(shè)計，以滴丸的圓整度、丸重差異和溶散時限為指標(biāo)，按正交設(shè)計L9(34)表作四因素三水平試驗，進(jìn)行滴丸滴制條件的優(yōu)化篩選，因素水平表9。

表9 白花蛇舌草滴丸正交試驗因素水平表Table 9 Levels and factors of orthogonal test for guttate pill

表10 白花蛇舌草滴丸正交試驗結(jié)果表Table 10 Results of orthogonal test for pill

2.2.2 結(jié)果分析 正交試驗結(jié)果見表10，方差分析結(jié)果見表11。

正交試驗結(jié)果表中R值大小進(jìn)行分析，確定主次因素順序為:B＞A＞C＞D。其中，A因素:K1＞K2＞K3;B因素:K3＞K2＞K1;C因素:K2＞K3＞K1;D因素:K2＞K3＞K1。因此為最優(yōu)滴制條件A1B3C2D2，即滴距為6 cm、冷凝液高度35 cm、滴制溫度70 ℃、滴管口徑3.0 mm/4.2 mm。

表11 方差分析結(jié)果表Table 11 Results of variance analysis for guttate pill

由方差分析表可知，確定主次因素順序為:B＞A＞C＞D，與極差分析結(jié)果一致，且四個因素均對試驗結(jié)果有顯著性影響。

由正交試驗結(jié)果可知，綜合評分項最高得分0.924，所對應(yīng)的試驗條件得出最優(yōu)試驗方案為:滴距6 cm、冷凝液高度30 cm、滴制溫度70℃、滴管口徑3.0 mm/4.2 mm。此結(jié)論與單因素試驗所得結(jié)果在冷凝液高度的選擇上略有差別。試驗中，在35 cm高度的冷凝液中所制滴丸圓整度、重量差異與溶散時限等指標(biāo)均優(yōu)于在30 cm高度冷凝中所制得的滴丸。因此最終確定試驗條件為滴距6 cm、冷凝液高度35 cm、滴制溫度70 ℃、滴管口徑3.0 mm/4.2 mm。

3 討論

白花蛇舌草中的藥材提取物具有多種藥理活性，將提取物制成滴丸劑，有利于提高其生物利用度，提高藥效，并進(jìn)一步研究其抗腫瘤、抗菌、免疫調(diào)節(jié)以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)等藥理作用。本研究采用滴制法制備滴丸是基于固體分散體的原理，將藥物高度分散于基質(zhì)中，藥物以分子狀態(tài)、膠態(tài)、微晶或無定形粉末等狀態(tài)存在，同時能大幅度減小難溶性藥物的粒度，增大其溶出面積，加快有效成分的溶出速度，進(jìn)而提高其吸收效果。本實驗制得的滴丸制備工藝簡便、成本低、易于控制產(chǎn)品質(zhì)量，能提高患者順應(yīng)性，對滴丸劑的工業(yè)生產(chǎn)和臨床應(yīng)用研究均具有一定的推廣和應(yīng)用價值。

滴丸的質(zhì)量受很多因素影響，如藥液溫度、滴速、滴距及滴管口徑等因素都有可能影響其成型工藝。如基質(zhì)的比例較大時藥液的流動性好，滴丸成易，但可能會影響主藥的含量。又如冷卻劑黏度偏小易導(dǎo)致滴丸發(fā)生粘連，滴速及滴距的大小則可能對滴丸的外形有明顯的影響。在對滴丸的制備工藝進(jìn)行評價時，為避免主觀評分方法中的干擾因素，目前多采用客觀評價［5-7］，常采用滴丸圓整度、重量差異、溶散時限、硬度值、滴丸粒徑比值等指標(biāo)進(jìn)行評價，較為理想的評價方法是對滴丸各項指標(biāo)進(jìn)行綜合評分。本文采用溶散時限比值M1(最短溶散時間/溶散時間)、M2(丸重差異變異系數(shù)/最大丸重差異變異系數(shù))、M3(外觀質(zhì)量分?jǐn)?shù)/最大質(zhì)量分?jǐn)?shù))三項共同評分，此方式較合理，不同指標(biāo)的直觀分析結(jié)果與綜合評分結(jié)果一致性較好，結(jié)果可靠合理。

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