基于文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)的昆蟲細(xì)胞色素P450研究發(fā)展態(tài)勢分析

劉小寧，劉 寧，李 芬，馬愛芳，馬 紀(jì)，高希武

(1.新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，新疆生物資源基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，烏魯木齊 830046;2.新疆農(nóng)科院農(nóng)作物品種資源研究所，烏魯木齊 830091;3.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院，北京 100193)

細(xì)胞色素P450 酶系是廣泛存在于生物體中的一類代謝酶系，是一種多功能氧化酶(冷欣夫和邱星輝，2001)，而細(xì)胞色素P450 是多功能氧化酶的重要組成部分，起著與底物結(jié)合以及末端氧化酶的作用(Gotoh，1992)。細(xì)胞色素P450 酶系具有底物廣泛性和功能多樣性的特點(diǎn)，可以代謝多種內(nèi)源性物質(zhì)(保幼激素及其類似物、蛻皮甾醇和脂肪酸等)和外源性物質(zhì)(藥物、植物次生物質(zhì)及其毒素等)，其中對植物次生物質(zhì)的代謝在昆蟲對寄主植物的適應(yīng)性方面起了主要作用，而對殺蟲劑的代謝是昆蟲產(chǎn)生抗藥性的主要機(jī)制。因其在生物學(xué)上的重要性，自發(fā)現(xiàn)以來，一直作為生物學(xué)研究的一個(gè)重要對象(Nebert et al.，1991;Nelson et al.，1993，1996;Negishi et al.，1996;)。開展昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究，不僅對我們深入研究害蟲的抗藥性機(jī)制，植食性昆蟲與植物的協(xié)同進(jìn)化機(jī)制具有重要意義，還為新農(nóng)藥的設(shè)計(jì)研發(fā)、害蟲治理新策略的研究提供理論依據(jù)。

總結(jié)與理性反思是科學(xué)發(fā)展的一個(gè)重要方法。對一門科學(xué)的發(fā)展歷史的反思，最好的方法之一就是對該領(lǐng)域已有的研究成果進(jìn)行總結(jié)歸納。為此，基于作者在害蟲抗藥性方面多年的研究和技術(shù)跟蹤，利用文獻(xiàn)計(jì)量法和詞頻分析法，對昆蟲細(xì)胞色素P450 研究領(lǐng)域的成果進(jìn)行梳理、總結(jié)和歸納，分析昆蟲細(xì)胞色素P450 研究近年來的變化趨勢，從科研論文的產(chǎn)出和研究范圍等角度，揭示昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究動(dòng)態(tài)，以期對昆蟲細(xì)胞色素P450 的深入研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 研究材料

本文是以近年來正式發(fā)表的昆蟲細(xì)胞色素P450 文獻(xiàn)信息為研究材料，采用文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)對文獻(xiàn)內(nèi)容進(jìn)行客觀、系統(tǒng)和量化描述、分析，全面總結(jié)和分析昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究動(dòng)向變化。

1.2 數(shù)據(jù)來源

為能較全面地反映昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究現(xiàn)狀，本文數(shù)據(jù)來源于中國知網(wǎng)(CNKI)中的中國學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫和Science Direct 電子期刊數(shù)據(jù)庫。CNKI 數(shù)據(jù)庫是目前世界上最大的連續(xù)動(dòng)態(tài)更新的中文期刊全文數(shù)據(jù)庫，收錄國內(nèi)學(xué)術(shù)期刊近8000種，全文文獻(xiàn)總量3000 多萬篇;Science Direct 電子期刊數(shù)據(jù)庫全文收錄了2000 余種Elsevier Science 公司出版的學(xué)術(shù)期刊，其中的1400多種期刊都是SCI、EI 等國際公認(rèn)的權(quán)威大型檢索數(shù)據(jù)庫收錄的各個(gè)學(xué)科的核心學(xué)術(shù)期刊。這兩個(gè)數(shù)據(jù)庫內(nèi)容覆蓋了自然科學(xué)、工程技術(shù)、農(nóng)業(yè)、哲學(xué)、醫(yī)學(xué)等24個(gè)學(xué)科，是目前的權(quán)威期刊文獻(xiàn)檢索工具。因此，基于這兩個(gè)數(shù)據(jù)庫來檢索昆蟲細(xì)胞色素P450 研究文獻(xiàn)并對其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果能夠全面反映該研究領(lǐng)域的概貌。

1.3 檢索策略

文獻(xiàn)主題有著高度的相關(guān)性，故本文的檢索策略是以主題為檢索途徑，分別在CNKI 數(shù)據(jù)庫和Science Direct 電子期刊數(shù)據(jù)庫中檢索主題是“P450+昆蟲”進(jìn)行檢索，文獻(xiàn)的檢索時(shí)段為1999-2012年。對獲得的該時(shí)段發(fā)表的文獻(xiàn)，通過文獻(xiàn)篇名進(jìn)行文獻(xiàn)內(nèi)容甄別，剔除所有的短訊、會議介紹等檢索文獻(xiàn)數(shù)，獲取昆蟲P450 研究文獻(xiàn)總計(jì)中文文獻(xiàn)206 篇、英文文獻(xiàn)712 篇。

1.4 研究動(dòng)態(tài)分析

詞頻分析法是利用能夠揭示或表達(dá)文獻(xiàn)核心內(nèi)容的關(guān)鍵詞在某一研究領(lǐng)域文獻(xiàn)中出現(xiàn)的頻次高低來確定該領(lǐng)域研究熱點(diǎn)和發(fā)展動(dòng)向的一種文獻(xiàn)計(jì)量方法。關(guān)鍵詞是用于表達(dá)文獻(xiàn)主題內(nèi)容的核心詞匯，關(guān)鍵詞搜索是一種重要的文獻(xiàn)查詢方法。如果某一關(guān)鍵詞在其所在領(lǐng)域的文獻(xiàn)中大量出現(xiàn)，則可反映出該關(guān)鍵詞所表征的研究主題是該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)(王芳，2007)。本文采用詞頻分析法對Science Direct 電子期刊數(shù)據(jù)庫中昆蟲細(xì)胞色素P450 的文獻(xiàn)(1999-2012年)進(jìn)行分析研究。

2 結(jié)果與分析

2.1 昆蟲細(xì)胞色素P450 研究領(lǐng)域發(fā)展概況

在1999-2012年間，按上述檢索方法共檢索到英文文獻(xiàn)712 篇，如圖1 所示，國際上(含中國)的昆蟲細(xì)胞色素P450 英文文獻(xiàn)總量呈波浪式上升趨勢，2012年，文獻(xiàn)數(shù)達(dá)到頂峰為95 篇，是1999年文獻(xiàn)數(shù)的413%。我國的昆蟲細(xì)胞色素P450 文獻(xiàn)數(shù)量在2006年前呈現(xiàn)平穩(wěn)發(fā)展，后呈現(xiàn)出波浪式上升趨勢，見圖2。從國內(nèi)外昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究文獻(xiàn)數(shù)量及年際間的變動(dòng)分析，昆蟲細(xì)胞色素P450 作為重要的多功能代謝酶，其生物學(xué)重要性越來越得到人們的認(rèn)識和關(guān)注，已經(jīng)成為國內(nèi)外學(xué)者、機(jī)構(gòu)的研究重點(diǎn)和熱點(diǎn)。

在對圖1 和圖2 的進(jìn)一步比較分析中，在最能代表昆蟲細(xì)胞色素P450 領(lǐng)域技術(shù)研究水平的英文文獻(xiàn)上，可以看出我國文獻(xiàn)數(shù)在1999-2005年間基本穩(wěn)定，變動(dòng)甚微;2006年開始變動(dòng)放大并逐步上升，2012年，文獻(xiàn)數(shù)達(dá)到頂峰的7 篇，占到當(dāng)年國際英文文獻(xiàn)數(shù)的7.4%，而1999年的英文文獻(xiàn)數(shù)僅占當(dāng)年國際英文文獻(xiàn)的4.3%。結(jié)合中文文獻(xiàn)數(shù)的年際間變化，可以肯定我國在1999-2005年期間，有關(guān)昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究團(tuán)隊(duì)相對集中，2005年后開始受到國內(nèi)的廣泛關(guān)注，研究團(tuán)隊(duì)相對擴(kuò)大，研究的水平逐步提高，科技創(chuàng)新能力和水平與國際的差距逐步在縮小，一定程度上反映了我國目前的科技研究現(xiàn)狀，以及科技自主創(chuàng)新能力與國際發(fā)達(dá)國家仍存在著不容忽視的差距。

圖1 1999-2012年國際昆蟲細(xì)胞色素P450 領(lǐng)域英文文獻(xiàn)的年際分布Fig.1 The amount of literature in Science Direct database related to insect cytochrome P450 during 1999-2012

圖2 1999-2012年中國昆蟲細(xì)胞色素P450 領(lǐng)域文獻(xiàn)的年際分布Fig.2 the amount of literature in CNKI related to insect cytochrome P450 during 1999-2012

2.2 中國昆蟲細(xì)胞色素P450 領(lǐng)域文獻(xiàn)的基金資助分析

科研論文是否獲得各類科學(xué)研究基金的資助，一定程度上反映了學(xué)術(shù)研究的背景和質(zhì)量;基金文獻(xiàn)率的大小則反映出一個(gè)研究領(lǐng)域受資助、受關(guān)注的程度。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，1999-2012年國內(nèi)細(xì)胞色素P450 研究領(lǐng)域有206 篇中英文文獻(xiàn)，顯示有基金支持的占全部文獻(xiàn)的59.7%，其中76 篇文獻(xiàn)得到兩項(xiàng)或兩項(xiàng)以上的基金資助，占總文獻(xiàn)數(shù)的36.9%，說明了我國昆蟲細(xì)胞色素P450 研究的國內(nèi)實(shí)際需求，以及各級政府部門的重視和支持。通過基金項(xiàng)目的資助，能夠保證研究者研究方向的穩(wěn)定性和研究的連續(xù)性，提升研究深度和科研成果的質(zhì)量。

2.3 昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究動(dòng)態(tài)

依據(jù)表1、表2 的變化，綜合考慮國內(nèi)外文獻(xiàn)數(shù)的年際間變化及時(shí)間序列，將1999-2012年對半劃分成1999-2005年、2006-2012年2個(gè)時(shí)間段，文獻(xiàn)中所出現(xiàn)的關(guān)鍵詞對應(yīng)排序，使相同或近似的關(guān)鍵詞都聚集在一起，并對關(guān)鍵詞進(jìn)行規(guī)范和分類匯總，統(tǒng)計(jì)出各個(gè)關(guān)鍵詞出現(xiàn)的頻次，最后按頻次的高低進(jìn)行排列分析。

由表1 和表2 可以看出，關(guān)鍵詞在兩個(gè)時(shí)間段有著明顯的變化，我們根據(jù)這種變化，將關(guān)鍵詞分成3 大類:第1 類是詞頻相對穩(wěn)定型，如家蠅、煙草天蛾和殺蟲劑抗性等;第2 類是詞頻逐年增長型，例如果蠅、P450 基因、棉鈴蟲、埃及斑蚊和家蠶等;第3 類是新增型，從無到有，例如小麥癭蚊、小菜蛾、褐飛虱、沙漠蝗、定量PCR、基因表達(dá)和Sf9 細(xì)胞等。

科技文獻(xiàn)是體現(xiàn)技術(shù)研究水平的載體，關(guān)鍵詞最能體現(xiàn)文獻(xiàn)的研究內(nèi)容，關(guān)鍵詞的變化將在一定程度上反映出某個(gè)時(shí)間段技術(shù)研究的變化。在1999-2012年間，昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究出現(xiàn)了以下趨勢和新的研究熱點(diǎn)。第一，研究對象擴(kuò)大化，不僅僅局限于果蠅等有限昆蟲物種，由原來的模式昆蟲果蠅向嚴(yán)重影響人們身體健康的衛(wèi)生害蟲(蚊類、蠅類)、給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來重大經(jīng)濟(jì)損失的農(nóng)業(yè)害蟲(棉鈴蟲、小麥癭蚊和煙粉虱等)以及經(jīng)濟(jì)昆蟲(家蠶)轉(zhuǎn)變，這些昆蟲成為新的研究對象;第二，研究層次的深化，研究內(nèi)容從原來P450 酶的生物化學(xué)性質(zhì)(Warren and Gilbert，1986;Rose and Terriere，1980)、簡單分子生物學(xué)向縱深發(fā)展。自1985年Feyereisen 等從家蠅中分離出第一個(gè)昆蟲P450 基因，便開始了昆蟲P450 分子水平上的研究(Feyereisen et al.，1989)，到上個(gè)世紀(jì)90年代末期達(dá)到小高潮，主要表現(xiàn)為昆蟲P450 基因的克隆及其表達(dá)規(guī)律研究(Wang and Hobbs，1995;Zhang and Scott，1996;Ranasinghe et al.，1997;Rose et al.，1997;Ranasinghe and Hobbs，1998;Scott et al.，1998;Li et al.，2001)，其后在2006年前后，深入到昆蟲P450 基因功能與調(diào)控的研究(Mao et al.，2007;Zhang et al.，2013);第三，研究由理論向?qū)嵺`拓展，正是由于前期昆蟲P450 蛋白和分子水平上大量研究成果的積累，人們的研究目光轉(zhuǎn)向科技成果的轉(zhuǎn)化應(yīng)用研究，如中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院植物生理生態(tài)研究所利用植物介導(dǎo)棉鈴蟲P450 基因RNA 干擾，獲得了含CYP6AE14 相應(yīng)序列的dsRNA 轉(zhuǎn)基因植物，當(dāng)棉鈴蟲進(jìn)食這種轉(zhuǎn)基因植物后，棉鈴蟲P450 基因的表達(dá)顯著降低，繼而致使棉鈴蟲生長緩慢，發(fā)育受到抑制(Mao et al.，2007)，這為棉鈴蟲等農(nóng)業(yè)害蟲防治探索特異性更強(qiáng)且環(huán)境安全的新技術(shù)奠定基礎(chǔ)。

表1 基于Science direct 數(shù)據(jù)庫1999-2006年昆蟲P450 發(fā)表文章關(guān)鍵詞頻次分布Table 1 Statistical results of keyword frequency distribution of articles related to insect cytochrome P450 during 1999-2006 on the basis of Science direct database

表2 基于Science direct 數(shù)據(jù)庫2007-2012年昆蟲P450 發(fā)表文章關(guān)鍵詞頻次分布Table 2 Statistical results of keyword frequency distribution of articles related to insect cytochrome P450 during 2007-2012 on the basis of Science direct database

(續(xù)上表)

3 結(jié)論與討論

通過對近十多年來，在昆蟲細(xì)胞色素P450 研究領(lǐng)域，國內(nèi)外公開發(fā)表的中英文文獻(xiàn)進(jìn)行查詢，并按照文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)、關(guān)鍵詞詞頻法進(jìn)行分年度統(tǒng)計(jì)分析，為國內(nèi)在昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究進(jìn)行回顧，分析現(xiàn)狀及所出現(xiàn)的動(dòng)態(tài)變化，提出今后努力的方向和重點(diǎn)。從國內(nèi)外機(jī)構(gòu)、研究者所發(fā)表的英文文獻(xiàn)呈現(xiàn)出逐年增加的態(tài)勢，顯示出有關(guān)昆蟲細(xì)胞色素P450 的研究日益受到國內(nèi)外學(xué)者、研究機(jī)構(gòu)的重視，研究的深度日益加深。研究的昆蟲種類由最早的模式昆蟲果蠅向衛(wèi)生害蟲、農(nóng)業(yè)害蟲、經(jīng)濟(jì)昆蟲等范圍擴(kuò)展;研究內(nèi)容從原來P450 酶的生物化學(xué)性質(zhì)(Rose and Terriere，1980;Warren and Gilbert，1986)及簡單分子生物學(xué)向基因組學(xué)等縱深發(fā)展;研究方向及重點(diǎn)由理論研究向?qū)嵺`轉(zhuǎn)化應(yīng)用研究拓展。

研究技術(shù)對研究領(lǐng)域內(nèi)的方向、重點(diǎn)會產(chǎn)生巨大的影響，近年來，分子生物學(xué)、基因組學(xué)技術(shù)發(fā)展較快，技術(shù)突破和成果較多，對各研究領(lǐng)域均產(chǎn)生了巨大影響，為了占據(jù)昆蟲細(xì)胞色素P450 研究制高點(diǎn)，必然需要加強(qiáng)對生物學(xué)的前沿技術(shù)研究和跟蹤。

人類自從知道蘇云金桿菌伴孢晶體對鱗翅目昆蟲具有毒殺作用而對哺乳動(dòng)物無毒，開發(fā)了很多生物制劑，多年來，一直停留在此階段。與此同時(shí)，世界先進(jìn)國家在分子生物學(xué)、基因組學(xué)上的突破，帶動(dòng)了對蘇云金桿菌伴孢晶體的研究，并成功獲得經(jīng)人工修飾的轉(zhuǎn)Bt 基因棉花品種推廣應(yīng)用。盡管存在一定的爭議，但無可厚非的是保障了棉花生產(chǎn)的穩(wěn)定和連續(xù)，也取得了顯著的經(jīng)濟(jì)效益。這種模式、理念值得在昆蟲細(xì)胞色素P450 研究中借鑒。

昆蟲細(xì)胞色素P450 是一類廣泛存在的多功能代謝酶系，生理功能及其重要。在廣泛認(rèn)知其結(jié)構(gòu)與功能的基礎(chǔ)上，深入研究P450 的基因調(diào)控、抑制表達(dá)機(jī)制，獲得對昆蟲細(xì)胞色素的人工調(diào)控技術(shù)，進(jìn)而轉(zhuǎn)向轉(zhuǎn)基因植株研究，獲得高表達(dá)活性且穩(wěn)定遺傳的種質(zhì)資源。將成為眾多學(xué)者、研究機(jī)構(gòu)努力的方向和重點(diǎn)。

運(yùn)用文獻(xiàn)計(jì)量和關(guān)鍵詞計(jì)量分析的方法展示一個(gè)學(xué)科領(lǐng)域的研究動(dòng)向，這是一項(xiàng)實(shí)證研究。進(jìn)行大工作量的數(shù)據(jù)檢索和處理，目的就是盡可能增加本文結(jié)論的可信度。雖然對大量文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的查詢非常認(rèn)真和嚴(yán)謹(jǐn)，但不可避免的會存在一定的局限性，比如時(shí)間跨度問題、文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫選擇及個(gè)別遺漏或者重復(fù)文獻(xiàn)等(梁立明和謝彩霞，2003)，但總體上能夠反映出國內(nèi)外在昆蟲細(xì)胞色素P450 研究的概況;利用科學(xué)合理的分析方法，亦能夠反映出其研究的動(dòng)態(tài)變化。文中對某些分析結(jié)果的認(rèn)識分析還僅僅停留在表象上，我們感興趣的也有科研指導(dǎo)意義的昆蟲細(xì)胞色素P450 前沿?zé)狳c(diǎn)領(lǐng)域分析，昆蟲細(xì)胞色素P450 論文的半衰期等等，是今后值得進(jìn)一步深入探討研究的問題。

References)

Feyereisen R，Koener JF，F(xiàn)arnsworth DE，et al.Isolation and sequence of cDNA encoding a Cytochrome P-450 from an insecticide-resistant strain of the house fly，Musca domestica［J］.Proceedings of the National Academy of Sciences，1989，86(5):1465-1469.

Gotoh O.Substrate recognition sites in cytochrome P450 family 2(CYP2)protein inferred from comparative analyses of amino acid and coding nucleotide sequences［J］.Journal of Biological Chemistry，1992，267:83-90.

Leng XF，Qiu XH.Structural Function and Application Prospect of Cytochrome P450 Monooxygenase in Insects［M］.Beijing:Science Press，2001，1-55.［冷欣夫，邱星輝.細(xì)胞色素P450 酶系的結(jié)構(gòu)功能與應(yīng)用前景［M］.北京:科學(xué)出版社，2001，1-55］

Li X，Baudry J，Berenbaum MR，et al.Molecular cloning and expression of CYP6B8:a xanthotoxin-inducible cytochrome P450 cDNA from Helicoverpa zea［J］.Insect Biochemistry Molecular Biology，2000，30:75-84.

Liang LM，Xie CX.Analysis ofresearch trend on nanotechnology in China by the method of keywords frequency［J］.Science research，2003(4):138-l42.［梁立明，謝彩霞.詞頻分析法用于我國納米科技研究動(dòng)向分析［J］.科學(xué)科究，2003(4):138-l42.］

Mao YB，Cai W，Wang J，et al.Silencing a cotton bollworm P450 mono-oxygenase gene by plant-mediated RNAi impairs larval tolerance of gossypol［J］.Nature Biotechnology，2007，25，1307-1313.

Nebert DW，Nelson DR，Coon M，et al.The P450 superfamily:update on new sequences，gene mapping and recommended nomenclature［J］.DNA Cell Biology，1991，10:1-14.

Negishi M，Uno T，Darden TA，et al.Structural flexibility and functional versatility of mammalian P450 enzymes［J］.Federation of American Societies for Experimental Biology，1996，10:683-689.

Nelson DR，Kamatki T，Waxman DJ，et al.The P450 superfamily:update on new sequence，gene mapping，accession numbers，early trivial names of enzymes and nomenclature［J］.DNA Cell Biology，1993，12(1):1-51.

Nelson DR，Metazoan cytochrome P450 evolution［J］.Comparative Biochemistry and Physiology，1998，C121，15-22.

Ranasinghe C，Headlam M，Hobbs AA.Induction of the mRNA for CYP6B2，a pyrethroid inducible cytochrome P450，in Helicoverpa armigera(Hübner)by dietary monoterpenes［J］.Archives of Insect Biochemistry and Physiology，1997，34:99-109.

Ranasinghe C，Hobbs AA.Isolation and characterization of two cytochrome P450 cDNA clones for CYP6B6 and CYP6B7 from Helicoverpa armigera(Hübner):possible involvement of CYP6B7in pyrethroid resistance［J］.Insect Biochemistry and Molecular Biology，1998，28:571-580.

Rose HA，Terriere LC.Microsomal oxidase activity of three blowfly species and its induction by phenobarbital and β-naphthflavone［J］.Pesticide Biocheistry Phyisology，1980，14:275-281.

Rose RL，Doreen G，Deborah M，et al.Cytochrome P450 CYP9A1 in Heliothis virescens:the first member of a new CYP family［J］.Insect.Molecular Biology，1997，27:605-615.

Scott JG，Liu N，Wen Z.Insect cytochromes P450:Diversity，insecticide resistance and tolerance to plant toxins［J］.Comparative Biochemistry and Physiology，1998，121C:147-155.

Wang F.Research focus on the logistics science inChina during 2005-2006—on the basis of statistical analysis of the keywords［J］.Economic Forum，2007，13:85-88.［王芳.我國2005-2006年物流學(xué)研究熱點(diǎn)—基于詞頻的統(tǒng)計(jì)分析.經(jīng)濟(jì)論壇，2007，13:85-88］

Wang XP，Hobbs AA.Isolation and sequence analysis of a cDNA clone for a pyrethroid inducible cytochrome P450 from Helicoverpa armigera［J］.Insect Biochemistry and Molecular Biology，1995，25(9):1001-1009.

Warren JT，Gilbert LI.Molecular and biochemical characterization of two P450 enzymes in the ecdysteroidogenic pathway of Drosophila melanogaste［J］.Insect Biochemistry，1986，16，65-82.

Zhang M，Scott JG.Cytochrome b5 is essential for cytochrome P450-6D1-mediated cypermethrin resistance in LPR houseflies［J］.Pesticide Biocheistry Physology，1996，55:150-156.

Zhang XT，Liu XN，Ma J，et al.Silencing of cytochrome P450 geneof cotton bollworm(Helicoverpa armigera)by RNAi［J］.Bulletin of Entomological Research，2013，40:1211-1217.