馬宏敏
(福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 350003)
近年來,水稻育種的研究重點逐步轉(zhuǎn)向高光效育種。C4植物具有光合效率高、CO2補(bǔ)償點低、幾乎沒有光呼吸等優(yōu)點,因而生物學(xué)產(chǎn)量也較高。在植物光合作用碳代謝過程中,CO2的固定同化及有機(jī)終產(chǎn)物的合成中起關(guān)鍵作用的酶,決定著植物光合效率的高低。磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶是C4植物光合CO2固定的關(guān)鍵酶之一,因此將C4型pepc基因?qū)隒3植物水稻中,有望大幅度提高水稻的光合效率,從而提高水稻單產(chǎn)。將C4型pepc基因?qū)隒3植物水稻中,是水稻高光效遺傳工程育種的基本設(shè)想。已有的研究表明,將來源于不同C4植物的pepc基因?qū)胨荆軌蛱岣咂淞姿嵯┐际奖狒然傅幕钚?。Ku和Agarie將玉米C4Ppc基因?qū)刖綤itaaken和Nipponbare品種中,轉(zhuǎn)基因植株P(guān)EPC酶活性比非轉(zhuǎn)基因植株高2~110倍。張方等將高粱的pepc基因?qū)朕r(nóng)墾58和中花10兩個粳稻品種,有53%轉(zhuǎn)基因水稻植株的PEPC酶的活性與高梁葉片中的PEPC酶活性相當(dāng),個別植株甚至超過高粱3倍。[1-2]福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所與福建農(nóng)林大學(xué)甘蔗研究所合作,將甘蔗pepc基因?qū)攵i稻恢復(fù)系N175,獲得了遺傳性狀穩(wěn)定的轉(zhuǎn)基因后代植株,其光合效率明顯提高[3]。本研究在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步評價其產(chǎn)量相關(guān)性狀,探討通過轉(zhuǎn)基因方法提高光合效率實現(xiàn)增產(chǎn)的可能性。
轉(zhuǎn)甘蔗pepc基因的秈稻恢復(fù)系N175(T6株系)與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ辗N子由福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所提供。轉(zhuǎn)基因供試材料為經(jīng)過世代繁殖,逐代檢測、選擇,得到第6代穩(wěn)定的種質(zhì)。
2010年6月10日播種,5葉齡移栽,單本插栽4行,每行10株,株行距20.0 cm×23.3 cm,記載始穗日期,計算播始?xì)v期,成熟期取10株調(diào)查株高、單株穗數(shù)、穗長、每穗總粒數(shù)、結(jié)實率、千粒重和單株產(chǎn)量等產(chǎn)量相關(guān)性狀。
光合參數(shù)測定:始穗后,選擇天氣晴朗的上午10:00~12:00,選取轉(zhuǎn)基因植株與未轉(zhuǎn)基因植株各5株,對完全展開的健康的劍葉中部進(jìn)行測定,采用Li-6400型便攜式光合作用測定儀測定凈二氧化碳同化速率,系統(tǒng)設(shè)定光強(qiáng)1200 μmol/(m2·s),環(huán)境溫度30℃左右。
從表1可以看出,轉(zhuǎn)基因植株的光合效率比非轉(zhuǎn)基因植株提高了29.56%,差異達(dá)顯著水平。說明導(dǎo)入的甘蔗pepc基因改善了秈稻恢復(fù)系N175的光合生理特性,增強(qiáng)了光合作用效率。而光合作用效率的提高,有可能進(jìn)一步提高N175的產(chǎn)量。
表1 轉(zhuǎn)甘蔗pepc基因的秈稻恢復(fù)系N175植株與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ展夂纤俾时容^
轉(zhuǎn)甘蔗pepc基因水稻與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ盏漠a(chǎn)量相關(guān)性狀見表2。由表2可見:轉(zhuǎn)基因植株與非轉(zhuǎn)基因植株相比較,在播始?xì)v期、株高、每穗總粒數(shù)、結(jié)實率4個性狀上差異不顯著;穗長、單株有效穗數(shù)2個性狀比非轉(zhuǎn)基因植株提高,差異達(dá)顯著水平;單株穗數(shù)、千粒重、單株產(chǎn)量3個性狀比非轉(zhuǎn)基因植株有明顯提高,差異達(dá)極顯著水平,特別是單株產(chǎn)量提高了15.60%,這與轉(zhuǎn)基因植株有較高的光合效率表現(xiàn)一致。由此可見,在秈稻恢復(fù)系N175中異源表達(dá)甘蔗pepc基因,通過提高植株的光合效率,使單株有效穗數(shù)、千粒重等重要產(chǎn)量性狀得以提升,從而達(dá)到增產(chǎn)目的。
表2 轉(zhuǎn)甘蔗pepc基因的秈稻恢復(fù)系N175植株與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ罩饕誀畋容^
甘蔗是高光效的C4作物之一,營養(yǎng)生長期長,在其生長發(fā)育過程中既有高溫潮濕強(qiáng)光下的快速生長期,也有在較低溫或干燥條件下的糖分積累期。因此,甘蔗的C4型pepc基因與玉米或高粱的C4型pepc基因比較,有其表達(dá)特點。本研究所用的轉(zhuǎn)基因受體是福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所提供的優(yōu)質(zhì)秈稻恢復(fù)系N175,該恢復(fù)系已配組出多個高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)雜交水稻新組合,并通過省級農(nóng)作物品種審定。以該恢復(fù)系作為轉(zhuǎn)基因受體,提高了本研究的起點,使研究結(jié)果與實際生產(chǎn)應(yīng)用結(jié)合得更加緊密。
C4型光合途徑是一種復(fù)雜的生理生化過程,涉及多個基因的協(xié)同表達(dá)。導(dǎo)入C4型pepc基因后,如何通過提高光合效率實現(xiàn)增產(chǎn)目的,還需要在分子機(jī)理上進(jìn)行進(jìn)一步探討和闡明。目前已有的研究工作只是實現(xiàn)了單一的C4型光合酶基因在轉(zhuǎn)基因C3植物中的高水平表達(dá),還沒有解決多個C4光合酶基因在轉(zhuǎn)基因C3植物中的協(xié)調(diào)表達(dá)和適宜有效表達(dá)的問題,多個C4光合酶基因在水稻中的聚合表達(dá),可能對改善水稻的光合生理特性,提高光合作用效率具有更大的意義[4-5]。
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[4]凌麗俐,林宏輝,焦德茂.轉(zhuǎn)PEPC基因水稻種質(zhì)的穩(wěn)定光合生理特性 [J].作物學(xué)報,2006,32(4):527-531.
[5]王德正,焦德茂,吳爽,等.轉(zhuǎn)玉米pepc基因的雜交水稻親本的選育 [J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(10):1165-1170.