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    VEGF、MMP-2、MMP-9在胰腺癌中的表達及臨床意義

    2014-12-03 08:34:18張小博李艷會李開良吉林大學(xué)第一醫(yī)院肝膽胰外科吉林長春300
    中國老年學(xué)雜志 2014年2期
    關(guān)鍵詞:胰腺癌胰腺組間

    張小博 李艷會 李開良 張 平 (吉林大學(xué)第一醫(yī)院肝膽胰外科,吉林 長春 300)

    胰腺癌是預(yù)后最差的腫瘤之一,具有發(fā)病隱匿、早期癥狀不典型、診斷困難、可出現(xiàn)局部淋巴結(jié)和血行轉(zhuǎn)移、惡性程度高以及對各種治療均不敏感等特點。有研究表明〔1〕,胰腺癌轉(zhuǎn)移是該病難以治愈的主要原因之一。腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移等過程與腫瘤血管生成密切相關(guān),也與多種細胞因子的作用有關(guān)〔2〕。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)主要作用于血管內(nèi)皮細胞?;|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是一類活性依賴于鋅離子和鈣離子的蛋白水解酶,幾乎在所有腫瘤組織中的表達均較正常組織明顯增加〔3〕,其過量表達后打破癌細胞生存的微環(huán)境平衡狀態(tài),破壞了細胞外基質(zhì)(ECM)和基底膜(BM)的結(jié)構(gòu),促進了癌細胞的侵襲能力和轉(zhuǎn)移能力。本文分析胰腺癌組織的中VEGF、MMP-2、MMP-9的表達情況及相關(guān)性。

    1 材料和方法

    1.1 標(biāo)本來源 取自2009年1月至2013年1月于吉林大學(xué)第一醫(yī)院接受手術(shù)治療的50例胰腺癌患者手術(shù)切除病理標(biāo)本作為樣本。年齡34~76〔平均(55.2±10.3)歲〕,中位年齡55歲,其中男33例,女17例。病理分化情況:低分化腺癌13例,中分化23例,高分化14例。所有患者均有完整的臨床資料。另取同期行膽胰腺癌根治術(shù)(胰十二指腸切除術(shù))的膽管癌或胰腺癌癌旁1 cm正常胰腺組織10例作為對照。

    1.2 SP法 所有標(biāo)本均經(jīng)過甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋;分別采用兔抗人VEGF多克隆抗體(bs-0279R)、兔抗人MMP-2多克隆抗體(bs-0412R)、兔抗人MMP-9多克隆抗體(bs-0397R)均購自北京博奧森生物制品廠。采用福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司的S-P免疫組化試劑盒及二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色,具體步驟參照邁新公司免疫組化染色步驟說明書。

    1.3 結(jié)果判斷 參照文獻〔4~6〕,MMP-2、MMP-9、VEGF 表達判定陽性的標(biāo)準(zhǔn):胞質(zhì)有棕黃色顆粒為陽性細胞,高倍鏡下(400倍)隨機取10個高倍視野,陽性細胞數(shù)>10%定為陽性,<10%定為陰性。染色強度與陽性細胞所占百分比結(jié)果評分相加,0~3分為陰性(-),4~7分為陽性(+)。見表1。

    表1 免疫組化計分標(biāo)準(zhǔn)

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進行分析,陽性率組間比較采用χ2檢驗,相關(guān)分析用非參數(shù)相關(guān)(Spearman)分析。

    2 結(jié)果

    2.1 MMP-2表達及與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系 MMP-2在胰腺癌組織及胰腺正常組織均有表達。胰腺癌患者MMP-2陽性表達〔34例(68%)〕明顯高于胰腺正常組織〔2例(20%)〕(P<0.05)。圖1。

    MMP-2的陽性表達率隨著胰腺癌分化程度的降低而呈上升趨勢,但三者間表達無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。MMP-2陽性表達率隨著胰腺癌臨床分期的增高而增強(P<0.05),有、無轉(zhuǎn)移組間表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而與年齡,性別,腫瘤部位及大小無關(guān)(P>0.05)。見表2。

    表2 MMP-2在胰腺癌中的表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系(n)

    2.2 MMP-9的表達及與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系 MMP-9在胰腺癌組織及胰腺正常組織均有表達。胰腺癌患者MMP-9陽性表達〔32例(64%)〕高于胰腺正常組織〔1例(10%)〕(P<0.01)。見圖1。

    MMP-9陽性表達率隨著胰腺癌臨床分期的增高而增強P<0.01,無轉(zhuǎn)移組間表達差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),但與年齡、性別、病理分化程度、腫瘤部位及大小無關(guān)(P>0.05)。見表3。

    表3 MMP-9在胰腺癌中的表達與腫瘤生物學(xué)指標(biāo)的關(guān)系(n)

    2.3 VEGF的表達及與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系 VEGF在胰腺癌組織及胰腺正常組織均有表達。胰腺癌患者VEGF陽性表達〔32例(64%)〕高于胰腺正常組織〔2例(20%)〕(P<0.05)。見圖1。

    VEGF陽性表達率隨著胰腺癌臨床分期的增高而增強(P<0.05),有、無轉(zhuǎn)移組及不同胰腺癌分化程度組間比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與年齡、性別、腫瘤部位及大小無關(guān)(P>0.05)。見表4。

    表4 VEGF在胰腺癌中的表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系(n)

    2.4 MMP-2、MMP-9、VEGF在胰腺癌組織中表達相關(guān)性VEGF、MMP-2與MMP-9三者之間表達均具有高度相關(guān)性(P<0.01,Kappa>0.4)。其中 MMP-9(+)時,VERF(+)26 例,(-)6例;MMP-9(-)時,VEGF(+)6例,(-)12例;MMP-2(+)時,VEGF(+)29例,(-)5例;MMP-2(-)時,VEGF(+)3 例,(-)13例;MMP-9(+)時,MMP-2(+)28例,(-)4例;MMP-9(-)時,MMP-2(+)6例,(-)12例。

    圖1 MMP-2、MMP-9、VEGF在胰腺癌組織的陽性表達(×400)

    3 討論

    腫瘤細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力作為腫瘤的主要特點之一,是決定惡性程度重要因素之一。其包括腫瘤細胞自身的黏附性降低,癌細胞與ECM之間相互作用。這將主要依賴于MMPs和VEGF的作用。MMPs是其中較為重要的一類,其中MMP-2、MMP-9的作用顯得尤為重要。Curran等〔7〕研究發(fā)現(xiàn)MTI-MMP可以激活 MMP-2酶原,激活的MMP-2反過來又可以激活MMP-9,從而形成正反饋回路,促進惡性腫瘤的擴散。血管的生成受到許多因子的調(diào)控,其中最重要的是VEGF,VEGF能誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞增殖,毛細血管袢形成,促進新生血管形成,并可增加微血管通透性。An等〔8〕認(rèn)為VEGF是調(diào)控因子中目前針對腫瘤新生血管過程中最強的,具有高度特異性。Suzuki等〔9〕認(rèn)為VEGF具有促進血管內(nèi)皮細胞生長、增殖、促進血管新生、增加血管通透性以及血管維持功能,還直接與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)。

    本研究提示MMP-2、MMP-9在胰腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中都起著重要作用。另外提示,MMP-2、MMP-9通過降解BM及ECM,促進胰腺癌細胞的浸潤和轉(zhuǎn)移,且MMP-2、MMP-9表達率越高,該腫瘤的浸潤性越強,因此,聯(lián)合檢測胰腺組織中MMP-2、MMP-9的表達,對于臨床上做出早期診斷,判斷預(yù)后具有一定的指導(dǎo)意義,同時又可為臨床選用合適的MMPs抑制劑進行后期治療提供參考。VEGF的表達與胰腺癌的分化程度相關(guān),這提示VEGF表達的高低與胰腺癌的惡性程度密切相關(guān),而胰腺癌的惡性程度與預(yù)后密切相關(guān)。這與有關(guān)的研究成果相一致〔10~13〕。

    本結(jié)果還表明MMP-2、MMP-9、VEGF可能在胰腺癌的發(fā)生發(fā)展及血管生成中發(fā)揮協(xié)同作用,促進BM及ECM的分解,有利于胰腺癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移,但其機制尚有待進一步研究。

    1 成文武,劉魯明,于爾辛.202例胰腺癌臨床分析〔J〕.中華消化雜志,2003;23(12):758-9.

    2 Gupta MK,Qin RY.Mechanism and its regulation of tumor-induced angiogenesis〔J〕.World J Gastroenterol,2003;9(6):1144-55.

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    4 Kikuchi R,Noguehi T,Takeno S,et al.Immunohistochemieal detection of membrane-type-l-matrix metalloproteinase in colorectal carcinoma〔J〕.Br J Cancer,2000;83:215-8.

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    8 An FQ,Matsuda M,F(xiàn)ujii H,et al.Expression of vascular endothelial growth factor in surgical specimens of hepatocellular carcinoma〔J〕.J Cancer Res Clino Ncol,2000;126(3):153-60.

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    10 李春龍,崔云甫,杜雪飛,等.VEGF和MMP-9在胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的表達及臨床意義〔J〕.世界華人消化雜志,2008;16(9):1012-6.

    11 朱學(xué)鋒,陳益君,顧繼禮,等.基質(zhì)金屬蛋白酶-2在胰腺癌組織中的表達及其臨床意義〔J〕.中國綜合臨床,2009;25(10):1032-4.

    12 陳建峰.HIF-lα、VEGF在胰腺癌組織中的表達及臨床意義〔J〕.肝膽胰外科雜志,2008,20(5):343-4.

    13 Bramhall SR,Neoptolemos JP,Stamp GW,et al.Imbalance of expression of matrix metalloproteinase(MMPs)and tissue inhibition of the matrix metalloproteinase(TIMPs)in human pancreatic carcinoma〔J〕.J Pathol,1997;182(3):347-55.

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