溶血對(duì)果糖胺測(cè)定的影響分析

周 華，韋曉星，黃雪夏，黎 宇 (廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院輸血科，廣西 柳州 545005)

血清中白蛋白能與葡萄糖發(fā)生非酶促糖化反應(yīng)，形成高分子酮胺結(jié)構(gòu)的果糖胺(FRUC)，即糖化血清蛋白(GSP)。果糖胺的濃度與血糖水平正相關(guān)，其測(cè)定不受血糖的影響。同時(shí)，果糖胺能反映短期內(nèi)血糖的平均水平，為臨床評(píng)估和調(diào)整治療方案提供客觀依據(jù)，因此，果糖胺的檢測(cè)已成為糖尿病治療過(guò)程中的重要環(huán)節(jié)。但由于目前的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法和儀器的技術(shù)層面上的問(wèn)題仍存在一定的局限性，致使實(shí)驗(yàn)室檢查的大部分項(xiàng)目在遇到溶血、脂血、黃疸等異常標(biāo)本時(shí)，儀器不能自動(dòng)排除干擾而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室檢查大部分的項(xiàng)目失準(zhǔn)。筆者主要探討人為造成的標(biāo)本溶血是否會(huì)對(duì)果糖胺測(cè)定造成影響。意在明確在溶血情況下測(cè)定的果糖胺結(jié)果是否會(huì)受到干擾而失準(zhǔn)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般材料:選取到我院體檢的健康成年人血清216例，要求體檢者血糖在正常范圍內(nèi)及各項(xiàng)指標(biāo)基本正常，無(wú)服用降糖藥物史、無(wú)黃疸、無(wú)溶血、無(wú)高脂血癥。

1.2 儀器和試劑:儀器使用羅氏全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，生化試劑使用羅氏公司配套的果糖胺試劑盒。檢驗(yàn)操作過(guò)程嚴(yán)格按照廠家提供的說(shuō)明書及檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室制定的SOP文件執(zhí)行。

1.3 檢測(cè)方法:清晨抽取體檢者靜脈血3～4 ml于無(wú)抗凝劑試管中，3 000 r/min離心10 min后分離血清，檢測(cè)每份標(biāo)本中果糖胺的含量。然后使用玻璃棒隨機(jī)攪拌試管中的血塊，造成溶血并測(cè)定血清中血紅蛋白的含量。根據(jù)肉眼觀察溶血程度及血紅蛋白的測(cè)定值不同分為三組:輕度溶血組(血紅蛋白1.0～2.0 g/L)77例、中度溶血組(血紅蛋白4.0～7.5 g/L)64例、重度溶血組(血紅蛋白10～18 g/L)75例，再分別測(cè)定各組所有血清果糖胺含量并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有檢測(cè)應(yīng)盡快完成，以免出現(xiàn)其他原因?qū)е碌慕Y(jié)果異常［1］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:對(duì)每1份標(biāo)本在溶血前后各測(cè)定1次果糖胺數(shù)據(jù)，對(duì)比溶血前與不同程度溶血后各組數(shù)據(jù)的差異。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

未溶血前對(duì)照組與人為輕度溶血組和中度溶血組之間的血清FMN值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而與重度溶血組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 溶血對(duì)血清果糖胺測(cè)定結(jié)果的影響(±s)

表1 溶血對(duì)血清果糖胺測(cè)定結(jié)果的影響(±s)

組別 例數(shù) 未溶血前FMN(μmol/L)溶血后FMN(μmol/L) P值輕度溶血組77 252.43±17.21 257.72±15.78 ＞0.05中度溶血組 64 231.73±18.85 242.50±19.86 ＞0.05重度溶血組75 249.35±17.78 274.25±21.20 ＜0.05

3 討論

果糖胺是反映患者短期內(nèi)平均血糖水平的檢測(cè)指標(biāo)，其濃度與血糖水平正相關(guān)，并相對(duì)保持穩(wěn)定。當(dāng)血液標(biāo)本發(fā)生不同程度溶血時(shí)，會(huì)對(duì)果糖胺的測(cè)定產(chǎn)生影響，其原因在于果糖胺法是利用果糖胺在堿性條件下能被硝基四氮唑藍(lán)(NBT)還原生成紫色物質(zhì)，生成的紫色物在546 nm處有最大吸收峰，可做比色測(cè)定［2］，從而得出血清中果糖胺的含量。有的儀器采用單波長(zhǎng)測(cè)定，其易受標(biāo)本溶血、黃疸、脂濁等因素的干擾，而羅氏全自動(dòng)生化分析儀是采用雙波長(zhǎng)測(cè)定，其測(cè)出的是主波長(zhǎng)和副波長(zhǎng)的吸光度的差值。這樣對(duì)于輕度和中度溶血的干擾，可以通過(guò)副波長(zhǎng)的修正減少消除非特異性光吸收的干擾。但當(dāng)標(biāo)本嚴(yán)重溶血時(shí)，反應(yīng)杯中反應(yīng)混合物的色度對(duì)比色分析干擾較大，影響儀器光電部分的敏感性，導(dǎo)致果糖胺測(cè)定失準(zhǔn)。因此，為了能準(zhǔn)確反映血清果糖胺的含量，應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格避免標(biāo)本溶血，以免造成假性結(jié)果。

從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，輕度溶血對(duì)果糖胺的測(cè)定結(jié)果影響差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。而隨著溶血程度加重，血清顏色加深，果糖胺測(cè)定值明顯高于溶血前(P＜0.05)。故標(biāo)本溶血可不同程度地影響果糖胺含量的測(cè)定。因此，盡量排除和避免溶血因素的干擾，提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，才能為臨床提供更為準(zhǔn)確無(wú)誤的檢測(cè)數(shù)據(jù)。

［1］ 毛小君.淺談臨床血清標(biāo)本溶血對(duì)自動(dòng)生化儀檢驗(yàn)結(jié)果的影響［J］.實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30(1):93.

［2］ 趙海燕，吳愛(ài)紅，梁玉江.中生糖化血清蛋白試劑盒的抗干擾性能評(píng)價(jià)［J］.河北醫(yī)藥，2009，31(17):115.