核糖體蛋白S3a在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及意義

賈慶蘭，閆洪超

（1徐州醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)院，江蘇 徐州 221000;2滕州市中心人民醫(yī)院;3徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院）

近年來子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率逐年上升，并呈年輕化趨勢(shì)。核糖體蛋白質(zhì)（RP）是一種廣泛存在的RNA結(jié)合蛋白，既往研究認(rèn)為其與核糖體RNA（rRNA）共同參與蛋白質(zhì)的合成。近年來對(duì)RP功能的研究成為科學(xué)領(lǐng)域的一大熱點(diǎn)［1］。核糖體蛋白（RPs）是核糖體的重要組成部分，在細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)生物合成中發(fā)揮重要作用［2］。研究表明，核糖體與細(xì)胞增殖有關(guān)，RP失調(diào)促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制十分復(fù)雜［3］。核糖體蛋白S3a（RP-S3a）是核糖體40S亞基的組分之一，位于核糖體亞基的接觸面，可通過影響核糖體翻譯功能的啟動(dòng)，參與調(diào)控某些蛋白的合成，繼而調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化及凋亡等生物學(xué)活性［4］。本研究觀察了子宮內(nèi)膜癌組織中RP-S3a的表達(dá)變化，現(xiàn)分析結(jié)果并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集滕州市中心人民醫(yī)院病理科2010年1月～2013年12月間保存的手術(shù)及診刮活檢子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本110例份，其中子宮內(nèi)膜癌50例（內(nèi)膜癌組）、不典型增生30例（增生組）、正常子宮內(nèi)膜30例（正常組）。內(nèi)膜癌組患者年齡35～70歲，平均49.6歲，均未行化療或放療;組織學(xué)分型分為高分化（G1）21例、中分化（G2）18例、低分化（G3）11例;臨床分期分為Ⅰ期29例、Ⅱ期18例、Ⅲ期3例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移15例、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例。

1.2 RP-S3a表達(dá)檢測(cè) 采用免疫組化SP法，所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。采用已知肝癌切片作陽性對(duì)照，各組切片采用PBS緩沖液代替一抗。經(jīng)DAB顯色，蘇木素復(fù)染后封片，48 h內(nèi)光學(xué)顯微鏡下閱片，高倍鏡下隨機(jī)觀察10個(gè)視野，光鏡下細(xì)胞胞漿中出現(xiàn)褐色顆粒即判為陽性細(xì)胞。陽性細(xì)胞比例計(jì)分:陽性細(xì)胞比例＜10%為0分，10% ～20%為1分，21% ～50%為2分，＞50% 為3分;染色強(qiáng)度計(jì)分:無顯色為0分，淺黃色為1分，淺棕色為2分，棕褐色為3分。上兩項(xiàng)得分乘積≥3分為陽性，＜3分為陰性。分析RP-S3a表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

RP-S3a陽性表達(dá)率內(nèi)膜癌組為78.0%（39/50），增生組為 43.3%（13/30），對(duì)照組為 13.3%（4/30），三組間兩兩比較，P均 ＜0.05。RP-S3a表達(dá)與與子宮內(nèi)膜癌組織學(xué)分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與患者年齡無關(guān)。見表1。

表1 RP-S3a表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討論

細(xì)胞是人體最小的功能單位，可對(duì)外界信號(hào)做出感知和反應(yīng)，這個(gè)過程與細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄和翻譯密切相關(guān)。真核細(xì)胞中蛋白質(zhì)的翻譯需要高度統(tǒng)一協(xié)調(diào)的多步驟，核糖體是其中的重要細(xì)胞器。目前在真核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了80 種 RPs［5，6］，廣泛分布于各種組織中，與核糖核酸共同組成核糖體，在蛋白質(zhì)的生物合成中起重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，RPs可獨(dú)立于核糖體外發(fā)揮調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄、mRNA翻譯、細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等作用，其與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系已引起人們的重視。Blumenthal等［7］首次提出RP的核糖體外功能，他們發(fā)現(xiàn)Qβ噬菌體內(nèi)可編碼一種能與大腸桿菌宿主蛋白R(shí)PS1相結(jié)合的多肽，在噬菌體自身的復(fù)制過程中，RPS1作為RNA復(fù)制酶，與Qβ基因組的某個(gè)特異性位點(diǎn)相連接，是病毒鏈DNA復(fù)制起始所必需的蛋白質(zhì)之一。RP可與細(xì)胞內(nèi)其他非核糖體組分相互作用，這種相互作用可對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生某些生理效應(yīng);該生理效應(yīng)的產(chǎn)生與核糖體本身的功能無直接關(guān)系［8］。研究認(rèn)為，RP具有強(qiáng)大的核糖體外功能，深入研究其生物機(jī)制對(duì)疾病的預(yù)防和治療均有重要意義。有研究表明，核糖體蛋白S3a在多種腫瘤細(xì)胞中異常升高，如結(jié)腸腺癌、髓質(zhì)甲狀腺癌、肝癌、SIV相關(guān)的子淋巴瘤、鱗狀細(xì)胞肺癌等［9～12］。高表達(dá)于腫瘤細(xì)胞中的 RPS3a可能作用于細(xì)胞周期的S期，直接影響其增殖，其表達(dá)上調(diào)可使細(xì)胞快速增殖，維持未分化狀態(tài)或惡性表型［13］。本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜癌組織中 RPS3a表達(dá)明顯高于正常組織及不典型內(nèi)膜組織;RPS3a表達(dá)與內(nèi)膜癌組織學(xué)分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān);分化程度越差，其表達(dá)率越高;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者相對(duì)于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者RP-S3a表達(dá)率明顯較高;臨床分期越晚表達(dá)率越高，表明RP-S3a參與了子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與侵襲。關(guān)于子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展有多種信號(hào)通路學(xué)說，如 Wnt、Notch、PI3K/AKT 信號(hào)通路等［14］，而關(guān)于 RP 的核糖體外功能或許成為腫瘤治療與跟蹤的另一新的靶點(diǎn)，有待于進(jìn)一步研究。

［1］田媛，張俊平.核糖體蛋白質(zhì)的新功能及其與相關(guān)疾病的關(guān)系［J］.生命的化學(xué)，2011，31（4）:488-491.

［2］Lindstrom MS.Emerging functions of ribosomal proteins in genespecific transcription and translation［J］.Biochem Biophys Res Commun，2009，379（2）:167.

［3］Warner JR，McIntosh KB.How common are extra-ribosomal functions of ribosomal proteins［J］.Mol Cell，2009，34（1）:3-11.

［4］李英華，胡振林，張俊平.核糖體蛋白S3a在腫瘤細(xì)胞增殖分化和凋亡調(diào)控作用的研究概況［J］.藥學(xué)實(shí)踐雜志，2012，30（3）:165-167.

［5］Sollner-Webb B，Mougey EB.News from the nucleolus:rRNA gene expression［J］.Trends Biochem Sci，1991，16（2）:58-62.

［6］Uechi T，Tanaka T，Kenmochi N.A complete map of the human ribosomal protein genes:assignment of 80 genes to the cytogenetic map and implications for human disorders［J］.Genomics，2001，72（3）:223-230.

［7］Blumenthal T.RNA replication:function and structure of Qbetareplicase［J］.Annu Rev Biochem，1979，48:525-548.

［8］Warner JR，McIntosh KB.How common are extra-ribosomal functions of ribosomal proteins［J］.Mol Cell，2009，34（1）:3-11.

［9］Tarantul VZ，Nikolaev AI.Differential gene expression in B-cell non-Hodgkin＇s lymphoma of SIV-infected monkey［J］.AIDS Res Hum Retroviruses，2000，16（2）:173.

［10］鄭安玲，劉航.SCH 66336對(duì)胃癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響及作用機(jī)制［J］.山東醫(yī)藥，2010，50（31）:17-20.

［11］Slizhikova DK，Vinogradova TV.The NOLA2 and RPS3a genes as highly informative markers for human squamous cell lung cancer［J］.Bioorg Khim，2005，31（2）:195.

［12］Keo-Heun Lim.RPS3a over-expressed in HBV-associated hepatocellular carcinoma enhances the HBx-induced NF-κB signaling via its novel chaperoning function［J］.PLoS One，2011，6（8）:22258.

［13］ Pandolfi PP.Dose the ribosome transelate cancer［J］.Nat Rev Cancer，2003，3（3）:179.

［14］Wei YN，Zhang ZB，Liao H，et al.Nuclear strogen receptor-mediated Notch signaling and GPR30-mediated PI3K/AKT signaling in the regulation of endometrial cancer cell proliferation［J］.Oncol Rep，2012，27（2）:504-510.