健脾化濁方對實驗性酒精性脂肪肝大鼠MDA、SOD含量的影響

席菊蘭，馮 明，吳秋玲，趙彥鵬，李朝喧

（1.山西中醫(yī)學院，山西太原 030024； 2.山西中醫(yī)學院附屬醫(yī)院，山西太原 030024）

近年來，我國酒精性肝?。ˋLD）的發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢，酒精已經(jīng)成為導致肝損害的第二大病因［1］，僅次于病毒性肝炎，其危害性已經(jīng)引起人們的廣泛關(guān)注。酒精性肝病是慢性肝病的主要類型，肝細胞反復發(fā)生脂肪變性、壞死和再生，最終導致肝纖維化和肝硬化。ALD病因復雜，發(fā)病機制不明確，治療效果不盡人意。我們在門診采用五苓散為基礎方化裁組成健脾化濁方（茯苓15g，豬苓10g，桂枝6g，白術(shù)10g，澤瀉 10g，生山楂 15g，虎杖 10g，草決明 15g），從2008年7月-2010年12月共治療酒精性肝病65例，取得了較好療效，總有效率達74.3%，顯效47.6%。該實驗主要探討健脾化濁方對實驗性酒精性脂肪肝大鼠丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 健康雄性SD大鼠SPF級54只，體重（180±20）g，山西醫(yī)科大學動物實驗中心提供，飼養(yǎng)于山西中醫(yī)學院實驗中心動物室，室溫控制在22℃左右（室溫上下相差不超過2℃），分籠飼養(yǎng)，進行普通飼料喂養(yǎng)，大鼠自由飲水、進食。

1.1.2 主要試劑 MDA測定試劑盒、總超氧化物歧化酶（T-SOD）活力測定試劑盒均為南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

1.2 實驗方法

1.2.1 分組與造模 54只健康雄性SD大鼠正常飼養(yǎng)1w后，隨機取9只正常飼養(yǎng)作為正常對照組，其余45只隨機分為模型對照組、聯(lián)苯雙酯組、健脾化濁低劑量組、健脾化濁中劑量組和健脾化濁高劑量組，每組9只。按照周寧等［2］的飼養(yǎng)辦法（采用1%膽固醇、5%豬油以及10%玉米油、84%基礎飼料進行混合制成飼料），并結(jié)合孫怡寧等［3］的方法，以5g/（kg·次）作為白酒初始量，每天早上8時給大鼠灌胃白酒，以后每10d根據(jù)大鼠的活動、反應及體重情況逐步增加酒量1g，最終達到8g/（kg·次）。前后共9w造模完成。

1.2.2 給藥方法 實驗用藥由山西中醫(yī)學院附屬醫(yī)院制劑室提供，每日上午8時給大鼠灌胃，連續(xù)30d。健脾化濁低劑量組、中劑量組和高劑量組按1mL/100g體重灌胃給藥，每毫升分別含生藥1g、2g、4g。正常對照組和模型對照組給予等量0.9%氯化鈉注射液灌胃，聯(lián)苯雙酯組用相應藥物制成水溶液等量灌胃治療。

1.2.3 指標觀察及檢測方法 于第30天末，所有大鼠均禁食12h，以離斷頸椎法處死大鼠，取出肝臟，HE染色，光鏡下觀察大鼠肝臟病理組織改變；制備肝勻漿，采用TBA法檢測肝勻漿中SOD活性和MDA含量，其方法按照試劑盒說明書嚴格操作。采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理。

2 結(jié)果

各組大鼠肝組織SOD活性和MDA含量比較，結(jié)果見表1。

表1 各組大鼠肝組織SOD活性和MDA含量的比較 （±s）

表1 各組大鼠肝組織SOD活性和MDA含量的比較 （±s）

注：與正常對照組比較，1）P＜0.05；與模型對照組比較，2）P＜0.05；與聯(lián)苯雙酯組比較，3）P＜0.05

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模型對照組中大鼠肝組織SOD活性比正常對照組明顯降低（P＜0.05），MDA含量較正常對照組升高（P＜0.05）。各治療組大鼠肝組織中SOD活性均高于模型對照組，MDA含量均低于模型對照組（P＜0.05）。健脾化濁方高、中、低劑量組肝組織中SOD活性均高于聯(lián)苯雙酯組，MDA含量均低于聯(lián)苯雙酯組（P＜0.05）。

3 討 論

健脾化濁方由茯苓、豬苓、桂枝、白術(shù)、澤瀉、生山楂、虎杖、草決明組成。方中以茯苓和白術(shù)益氣健脾化濕，桂枝溫化水飲、通陽利水，澤瀉配茯苓、豬苓加強利水、導濕下行、化痰行瘀，也體現(xiàn)“見肝之病，當先實脾”法則；生山楂開胃消食、化滯消積、活血散瘀，用于肉食積滯、癥瘕積聚、腹脹痞滿，現(xiàn)代藥理學研究證實，山楂具有降血脂、降血壓、抗心律不齊和強心作用；虎杖活血散痰、降血脂；有實驗證明草決明煎劑或決明子散劑喂飼大鼠8w，能降低高血脂癥大鼠血漿膽甾醇、甘油三酯含量及肝組織中甘油三酯含量［4］。以“五苓散”為基礎的健脾化濁方諸藥合用，共奏健脾養(yǎng)肝、氣血并調(diào)、痰瘀并治之功。實驗結(jié)果提示，健脾化濁方可以降低ALD大鼠肝組織中MDA含量，提高SOD活性，阻斷ALD的發(fā)生和發(fā)展，從而發(fā)揮治療作用。中藥高劑量治療組對大鼠血清生化學指標改善明顯，肝臟脂肪變性程度較輕，與正常組接近；中藥低、中劑量組以及聯(lián)苯雙酯組也能改善大鼠的肝組織病理情況，但沒有中藥高劑量組效果明顯。中藥低、中、高劑量組對肝勻漿SOD、MDA含量的影響要優(yōu)于聯(lián)苯雙酯組。該課題對指導臨床及抗酒精性脂肪肝的新藥開發(fā)具有積極的社會意義和應用價值。

［1］莊輝.酒精性肝病的流行病學［M］//江正輝，王泰齡.灑精性肝病.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2001：3-11.

［2］周寧，厲有名.大鼠酒精性肝纖維化模型的構(gòu)造［J］.東南大學學報：醫(yī)學版，2003，22（2）：93-97.

［3］孫怡寧，尚榮軍，羅金燕，等.白酒灌胃法建立大鼠早期酒精性肝病模型［J］.陜西醫(yī)學雜志，2002（6）：22.

［4］趙振名，張麗，王義和，等.復方?jīng)Q明子沖劑對大鼠血脂調(diào)節(jié)的研究［J］.武警醫(yī)學院學報，1998，7（3）：156.