電針天樞等腹部腧穴對(duì)單純性肥胖大鼠血脂及血清脂聯(lián)素的影響

韓志敏，侯玉鐸，閆麗萍，司原成

（山西中醫(yī)學(xué)院，山西太原 030024）

隨著社會(huì)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展、人們生活水平的不斷提高，單純性肥胖癥發(fā)病率日漸增加。針灸減肥以其安全、有效、簡(jiǎn)便、無(wú)毒副作用而深受廣大患者的歡迎，對(duì)其機(jī)制研究也成果顯著。臨床上發(fā)現(xiàn)針刺天樞等腹部腧穴有很好的減肥效果，而近十幾年來(lái)相關(guān)文獻(xiàn)查閱結(jié)果發(fā)現(xiàn)，單純針刺腹部腧穴的降脂效應(yīng)研究相關(guān)的報(bào)道較少。本研究旨在進(jìn)一步證實(shí)針刺腹部腧穴的降脂效應(yīng)，研究針刺腹部腧穴的降脂機(jī)制，為臨床針灸治療單純性肥胖提供更多方法和實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與儀器 健康清潔級(jí)SD大鼠100只，雄性，體質(zhì)量（160±10）g。由中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)SCXK-（軍）2007-004。電子秤、電子精密天平JA2003、華佗牌SDZ-II型電子針療儀、LD5-Z電動(dòng)離心機(jī)、BMVII生物組織包埋機(jī)、BM-VII冷凍臺(tái)、CS-VI攤片烤片機(jī)、QP-V生物組織切片機(jī)、OLYMPUS-BX53正置熒光顯微鏡、DHP-9162電熱恒溫培養(yǎng)箱、酶標(biāo)儀（伯樂(lè)-5700）。

1.1.2 藥品與試劑 烏拉坦（分析純）、水合氯醛、4%多聚甲醛（PF）、二甲苯、蘇木素-伊紅染色液、脂聯(lián)素試劑盒（美國(guó)Becton，Dickinson and Company公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 造模與分組 100只SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1w后，按隨機(jī)數(shù)字表選取10只作為正常組，用普通飼料喂養(yǎng)，其余90只大鼠喂養(yǎng)自制高脂飼料。高脂飼料配方：以豬油5%、蔗糖5%、奶粉5%、花生5%、雞蛋10%、麻油1%、食鹽2%和普通飼料67%混合而成［1］。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后，每周固定時(shí)間稱體質(zhì)量、測(cè)體長(zhǎng)1次，共喂養(yǎng)8w。8w后，體質(zhì)量超過(guò)普食喂養(yǎng)大鼠20%的大鼠為造模成功。篩選造模成功大鼠30只，將其隨機(jī)分成模型組、電針1組（天樞、中脘、關(guān)元、大橫穴）、電針2組（后三里、三陰交、中脘、關(guān)元穴），每組10只。

1.2.2 治療方法 腧穴定位參照李忠仁《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》［2］。中脘，肚臍上約 20mm，腹白線上；天樞參照文獻(xiàn)［3］；三陰交，后肢內(nèi)踝尖上10mm；后三里，膝關(guān)節(jié)后外側(cè)，腓骨小頭下約5mm，脛腓骨間隙中；關(guān)元，臍下約2.5mm，腹白線上；大橫，鎖骨中線與臍水平線交點(diǎn)處。每天上午8時(shí)～9時(shí)將電針組大鼠固定于鼠板上（自制），電針1組取中脘、關(guān)元、雙側(cè)天樞及大橫穴，電針2組取中脘、關(guān)元、雙側(cè)后三里及三陰交穴。75%酒精消毒后，使用0.5寸（0.30mm×13mm）的針灸針，直刺2mm～4mm，接通電針，頻率100Hz，強(qiáng)度以穴位部肌肉微微顫動(dòng)為宜，連續(xù)波，每次15min，每日1次，連續(xù)20d。正常組與模型組大鼠同樣抓取，固定，每日1次。各組大鼠在治療期間自由攝食和飲水。

1.2.3 標(biāo)本采集與檢測(cè) 最后1次針刺治療后，各組大鼠禁食24h，測(cè)定各組實(shí)驗(yàn)大鼠的體重、體長(zhǎng)（從鼻尖到肛門(mén)的長(zhǎng)度）及過(guò)臍腰圍，每只大鼠測(cè)2次，如果2次所測(cè)值相近取其平均值，如果相差很大，測(cè)量第3次，取2個(gè)相近值的平均值作為測(cè)量結(jié)果。用10%水合氯醛（1mL/100g）腹腔注射麻醉后采血5mL，以3000r/min的速度離心分離血清，于全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定三酰甘油（TG）、總膽固醇（CHO）、高密度脂蛋白（HDL-C）和低密度脂蛋白（LDL-C）含量，酶聯(lián)免疫法測(cè)脂聯(lián)素含量?？焖俜蛛x大鼠腎周脂肪、附睪周脂肪，用濾紙吸出脂肪組織中水分，采用電子天平分別稱其質(zhì)量；取左腎與腎門(mén)相對(duì)應(yīng)的小塊脂肪組織，用10%中性甲醛固定，石蠟包埋后做病理切片和HE染色，在顯微鏡下觀察脂肪細(xì)胞直徑大小的變化。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPPS17.0進(jìn)行，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較用單因素方差分析檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 針刺腧穴對(duì)單純性肥胖大鼠體質(zhì)量及腎周脂肪、附睪周脂肪質(zhì)量的影響

模型組大鼠的體質(zhì)量及腎周脂肪、附睪周脂肪質(zhì)量明顯高于正常組（P<0.01），表明造模成功；治療組大鼠上述指標(biāo)明顯低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.05），提示電針可能主要對(duì)于內(nèi)臟脂肪分布有改善作用；電針1組與電針2組比較，上述指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但電針1組有更好的減肥趨勢(shì)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 實(shí)驗(yàn)各組體質(zhì)量及腎周脂肪、附睪周脂肪質(zhì)量的比較 （g，±s）

表1 實(shí)驗(yàn)各組體質(zhì)量及腎周脂肪、附睪周脂肪質(zhì)量的比較 （g，±s）

注：與正常組比較，1）P<0.01；與模型組比較，2）P<0.05，3）P<0.01

組別 n 體質(zhì)量 腎周脂肪質(zhì)量 附睪周脂肪質(zhì)量正常組 10303.70±30.45 1.30±0.18 4.00±0.85模型組 10388.96±34.031） 1.76±0.41） 6.62±1.311）電針 1組 10343.44±26.973） 1.38±0.263） 4.40±1.233）電針 2組 10338.02±40.13） 1.42±0.332） 4.60±1.053）

2.2 光鏡結(jié)果

模型組大鼠腎周脂肪細(xì)胞直徑較正常組明顯增大，表明造模成功；電針組大鼠經(jīng)治療后，脂肪細(xì)胞的直徑明顯較模型組小，提示電針天樞等腹部腧穴可能有減小脂肪細(xì)胞直徑的作用。結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 光鏡結(jié)果

2.3 針刺腧穴對(duì)單純性肥胖大鼠血脂及脂聯(lián)素的影響

與模型組比較，電針組TG、CHO、LDL-C含量明顯降低（P<0.01，P<0.05），HDL-C、血清脂聯(lián)素含量明顯升高（P<0.01，P<0.05），電針 1組和電針2組上述指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。以上表明，針刺有降低肥胖大鼠血脂的作用，并能調(diào)節(jié)與脂代謝有關(guān)激素的水平。電針1組較電針2組作用更明顯。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠血脂及脂聯(lián)素比較 （±s）

表2 各組大鼠血脂及脂聯(lián)素比較 （±s）

注：與正常組比較，1）P<0.01；與模型組比較，2）P<0.05，3）P<0.01

組別 n TG（mmol/L） CHO（mmol/L） LDL（mmol/L） HDL（mmol/L）脂聯(lián)素（μg/mL）正常組 10 0.47±0.16 1.40±0.27 0.19±0.05 0.41±0.07 0.28±0.04模型組 10 0.76±0.211） 1.79±0.281） 0.31±0.081） 0.31±0.081） 0.21±0.02電針 1組 10 0.58±0.162） 1.42±0.333） 0.22±0.093） 0.40±0.073） 0.26±0.05電針 2組 10 0.60±0.102） 1.53±0.202） 0.23±0.072） 0.39±0.052） 0.25±0.04

3 討論

肥胖是指由于能量攝入超過(guò)消耗，導(dǎo)致體內(nèi)脂肪積聚過(guò)多而造成的一種代謝性疾病，也稱之為“單純性肥胖癥”［4］。其發(fā)病機(jī)制多認(rèn)為與遺傳、中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常、內(nèi)分泌功能紊亂、代謝因素和營(yíng)養(yǎng)因素不平衡等有關(guān)［5］。中醫(yī)認(rèn)為單純性肥胖癥病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，發(fā)病與脾胃相關(guān)，乃脾運(yùn)化功能失常，大量痰濁在體內(nèi)聚集所致。本虛主要是以氣虛為主，氣虛影響脾運(yùn)化功能，而致標(biāo)實(shí)［6］。積極控制肥胖病的發(fā)生和發(fā)展是當(dāng)前人類(lèi)社會(huì)亟須解決的難題，目前常用的治療方法包括手術(shù)去脂、西藥減肥、饑餓療法、禁食、運(yùn)動(dòng)等，但實(shí)際療效存在很多問(wèn)題，如藥物治療存在明顯的副作用且長(zhǎng)期療效不理想，運(yùn)動(dòng)容易反彈［5］。而針灸減肥以其療效高且鞏固、無(wú)毒副作用、安全、有效、簡(jiǎn)便等深受廣大患者的歡迎。電針腹部腧穴減肥由于腹部的疼痛呈彌散性，痛覺(jué)遲鈍，減少了病人對(duì)針刺疼痛的顧慮，患者更容易接受，便于治療的開(kāi)展。

本研究中電針1組選用的穴位中，天樞為大腸的募穴，具有健脾和胃、化痰利濕、通調(diào)腸胃、疏導(dǎo)陽(yáng)明經(jīng)氣的功能，既能通便，又治脾虛；中脘為任脈經(jīng)穴，胃之募穴，具有健脾和胃的作用；關(guān)元為任脈經(jīng)穴、小腸募穴，主益氣固本，助氣行水；大橫為足太陰與陰維脈交會(huì)穴，有除濕散結(jié)、理氣健脾、通調(diào)腸胃的作用［7］。上述諸穴配合可健脾和胃、化痰利濕。電針2組作為對(duì)照組，穴位的選擇依據(jù)近十年來(lái)針灸減肥文獻(xiàn)中療效顯著、出現(xiàn)頻率較高的腧穴，是針對(duì)肥胖癥脾虛胃盛、痰濕壅滯的病機(jī)而定?，F(xiàn)代研究認(rèn)為可抑制過(guò)旺食欲，調(diào)整胃腸蠕動(dòng)、胰島素分泌及水鹽代謝，對(duì)神經(jīng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)功能也有良好調(diào)節(jié)作用［8］。脂聯(lián)素是一種以脂肪組織為唯一來(lái)源的活性多肽，又稱脂肪細(xì)胞補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白，可抑制糖異生，減少內(nèi)源性葡萄糖產(chǎn)生，使血糖水平下降，減少脂肪產(chǎn)生，在機(jī)體肥胖時(shí)表達(dá)下調(diào)［9］，因此它的生成與消長(zhǎng)必定與脂肪組織的數(shù)量有關(guān)。單純性肥胖大鼠經(jīng)過(guò)電針治療后，血清中脂聯(lián)素的含量升高，說(shuō)明電針天樞等穴有一定的減肥效果。

綜上所述，單純性肥胖大鼠經(jīng)過(guò)電針天樞等腹部腧穴治療后，電針組大鼠的體質(zhì)量、腎周脂肪質(zhì)量、附睪周脂肪質(zhì)量、血脂較模型組明顯下降，血清脂聯(lián)素水平較模型組明顯升高，腎周脂肪細(xì)胞直徑明顯減小，說(shuō)明電針天樞等腹部腧穴有一定的降脂效應(yīng)。電針1組（天樞、中脘、關(guān)元、大橫穴）與電針2組（后三里、三陰交、中脘、關(guān)元穴）上述指標(biāo)組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但電針1組較電針2組有較好的減肥效應(yīng)的趨勢(shì)。由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間短，樣本數(shù)少，此減肥方法有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

［1］余敏，肖曉秋，唐成林，等.不同強(qiáng)度電針對(duì)肥胖大鼠血脂、脂肪組織巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1及腫瘤壞死因子-α的影響［J］.針刺研究，2011，36（2）：79-84.

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