• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    煙草轉(zhuǎn)基因研究常用遺傳元件篩查策略

    2014-11-27 05:00:21余婧張孝廉趙丹鄒頡趙杰宏
    中國煙草學報 2014年1期
    關鍵詞:轉(zhuǎn)基因元件煙草

    余婧,張孝廉,趙丹,鄒頡,趙杰宏

    1 貴州省煙草科學研究院,煙草行業(yè)煙草分子遺傳重點實驗室,貴州 貴陽550081;

    2貴州煙葉復烤有限責任公司銅仁復烤廠,貴州 銅仁 554300;

    3 貴州大學貴州省農(nóng)業(yè)生物工程重點實驗 室,貴州 貴陽 550025

    生物技術

    煙草轉(zhuǎn)基因研究常用遺傳元件篩查策略

    余婧1,2,張孝廉1,趙丹3,鄒頡1,趙杰宏1

    1 貴州省煙草科學研究院,煙草行業(yè)煙草分子遺傳重點實驗室,貴州 貴陽550081;

    2貴州煙葉復烤有限責任公司銅仁復烤廠,貴州 銅仁 554300;

    3 貴州大學貴州省農(nóng)業(yè)生物工程重點實驗 室,貴州 貴陽 550025

    通過檢索國 內(nèi)外近10年煙草轉(zhuǎn)基因研究的相關文獻,建立了轉(zhuǎn)基因煙草常用轉(zhuǎn)化遺傳元件的數(shù)據(jù)庫,統(tǒng)計了每個遺傳元件及組合元件的使用頻率后,發(fā)現(xiàn)利用7種遺傳元件,包括:啟動子P-35S、標記基因NPT II、HPT、Bar和aadA、報告基因GUS及終止子T-NOS作為靶標元件組合,能使目前煙草轉(zhuǎn)基因 事件的理論篩 查率達到100%,從而構(gòu)建出轉(zhuǎn)基因煙草的優(yōu)化篩查策略。

    轉(zhuǎn)基因煙草;遺傳元件;轉(zhuǎn)基因篩查

    煙草制品作為一種特殊的消費品,其吸食安全性一直是爭論的焦點,轉(zhuǎn)基因煙草比其他轉(zhuǎn)基因植物更難獲得消費者的認可。轉(zhuǎn)基因煙草不能進行商業(yè)化生產(chǎn),且煙草制品中不能含有轉(zhuǎn)基因成分,煙草轉(zhuǎn)基因研究只能作為一種技術儲備[1]。在我國,我們一方面在加大轉(zhuǎn)基因研發(fā)力度,另一方面,也在強化對轉(zhuǎn)基因的監(jiān)管,嚴控轉(zhuǎn)基因污染[2]。煙草中轉(zhuǎn)基因成分的檢測是一個復雜的問題,涉及技術、法律及商業(yè)信息,國際上尚無統(tǒng)一的檢測標準。

    轉(zhuǎn)基因成分檢測主要包括基于DNA檢測和基于蛋白質(zhì)檢測的方法,其中基于DNA的轉(zhuǎn)基因檢測方法應用最為廣泛[3],例如實時熒 光定量聚合酶鏈式方應(RQ-PCR) 被廣泛應用于定量檢測食品或飼料中的轉(zhuǎn)基因成份含量[4]?;贒NA的轉(zhuǎn)基因檢測方法首先通過對某些遺傳元件進行篩查,例如導入的外源表達基因、用于篩選陽性植株的篩選標記基因、以及各種啟動子、終止子,挑選出使用頻率最高的少數(shù)幾個遺傳元件作為檢測靶標,如果檢測出其中任何一個元件,表明該樣品含有轉(zhuǎn)基因成分,如果未檢出,則表明樣品中不含有已知轉(zhuǎn)基因成分,不同作物使用的遺傳元件種類和頻次各不相同,因此不同作物需根據(jù)具體情況采用合適的篩查檢測策略[5-6]。

    目前關于轉(zhuǎn)基因作物遺傳元件篩查信息的報道,研究對象多為玉米、大豆、油菜、棉花、水稻等國際上商業(yè)化種植的轉(zhuǎn)基因作物[6-8],而有關轉(zhuǎn)基因煙草遺傳元件篩查的文獻未見報道,本文根據(jù)國內(nèi)外已發(fā)表的有關煙草遺傳轉(zhuǎn)化的研究文獻,統(tǒng)計部分常用遺傳轉(zhuǎn)化元件在煙草遺傳轉(zhuǎn)化中出現(xiàn)的頻率,以期篩選出煙草轉(zhuǎn)基因檢測中理論覆蓋率最高的基因元件組合,為煙草轉(zhuǎn)基因檢測奠定基礎。

    1 材料與方法

    在中國知網(wǎng)全文期刊數(shù)據(jù)庫(http://www.cnki.net/)輸入關鍵詞“轉(zhuǎn)基因煙草”,在google學術搜索(http://scholar.google.com/)輸入關鍵詞“transgenic tobacco”,搜索近10年來國內(nèi)及國外有關轉(zhuǎn)基因煙草的研究情況,對文獻所報道的轉(zhuǎn)入煙草的外源基因啟動子、終止子和篩選標記基因進行篩查,并統(tǒng)計各單個遺傳元件及遺傳元件組合在煙草遺傳轉(zhuǎn)化研究中的使用頻率。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 煙草轉(zhuǎn)基因研究中高頻使用遺傳元件

    在我們的篩查中,隨機選取近10年來有關煙草轉(zhuǎn)基因研究報道共229篇,根據(jù)所收集的信息,目前煙草轉(zhuǎn)基因研究中常用的啟動子主要有P-35S,篩選標記基因主要有:NPT II、HPT、Bar,報告基因主要有:GUS、GFP,終止子主要有T-NOS、T-35S、T-OCS。部分轉(zhuǎn)化事例中還使用到單子葉植物遺傳轉(zhuǎn)化常用啟動子P-Ubi[9-11],誘導表達或特異性表達啟動子Napin[12]、RD29A[13]、PrbcS[14]等啟動子約40種,aadA[15]、OFP[16]等篩選、報告基因及Cry1A[17]、OsLS[18]、PtrMAPK[19]等抗蟲、抗病、抗旱相關功能基因約200種,共涉及250種以上遺傳元件。部分較為常用的遺傳元件來源及功能見表1。

    表1 煙草遺傳轉(zhuǎn)化部分常用遺傳元件來源及功能Tab.1 Source and function of common genetic elements in genetic transformation part of tobacco

    2.2 轉(zhuǎn)基因煙草研究中單個遺傳元件使用頻率

    所篩查的有關轉(zhuǎn)基因煙草研究的229篇文獻中,國內(nèi)期刊文獻166篇,國外期刊文獻 63篇。由于涉及文獻數(shù)量及轉(zhuǎn)化事件較多,我們無法按目前國際上所流行的單個事件單個列出的方式進行矩陣統(tǒng)計[6-8],于是將搜索到的有關文獻按其轉(zhuǎn)化事件的目的進行分類,分為“品質(zhì)改良”、“生物反應器”、“生態(tài)環(huán)境效益改良”、“基因功能驗證分析”、“其它”五種類型,其中,“基因功能驗證分析”分為“啟動子功能”、“表達基因功能”兩種類型。

    以轉(zhuǎn)化事件的分類為列,常用遺傳元件為行,統(tǒng)計各遺傳元件在轉(zhuǎn)基因煙草研究中的使用頻率。統(tǒng)計結(jié)果如表2。表達基因啟動子P-35S使用頻率最高,在國內(nèi)及國外所報道的文獻中,其使用頻率分別為65.1%、74.6%,綜合使用頻率67.7%;表達基因終止子T-NOS使用頻率最高,綜合使用頻率67.7%;篩選標記基因NPT II使用頻率最高,綜合使用頻率63.3%;報告基因GUS使用頻率最高,綜合使用頻率25.8%。

    2.3 轉(zhuǎn)基因煙草研究中常用遺傳元件組合篩查

    從表2可以看出,沒有任何單個遺傳元件的使用頻率達到100%,因此無法用單個元件檢測出所有的轉(zhuǎn)基因煙草,為盡最大可能檢測到煙草轉(zhuǎn)基因事件,需使用兩個元件以 上的組合進行篩查。

    我們將使用頻率偏高的元件組合后進行篩查,篩查結(jié)果列于表3。其中①號組合:P-35S+T-NOS是國際上較為常用的轉(zhuǎn)基因作物篩查組合元件[3,20],目前批準商業(yè)化種植的轉(zhuǎn)基因作物90%以上至少含有這二種元件的一個[21],在我們的篩 查中,煙草轉(zhuǎn)基因研究中有86.0%的轉(zhuǎn)化事件使用到①號組合中的一個元件,即該組合的理論篩查覆蓋率為86.0%;表3中,③號組合:P-35S+T-NOS+NPT II理論篩查覆蓋率為90.0%,而CORESTA(Task Force Genetically Modified Tobacco-Detection Methods)[22]、GB/T 24310-2009 《煙草及煙草制品 轉(zhuǎn)基因檢測方法》[23]將P-35S、T-NOS、NPT II三種遺傳元件作為轉(zhuǎn)基因煙草檢測中共有序列標志,可是在該檢測中,即使用三個元件同時進行檢測,理論上仍然約有10%的煙草轉(zhuǎn)基因污染事件會被漏檢。

    為最大限度的檢測到煙草轉(zhuǎn)基因事件,我們在③號組合的基礎上加了GUS、HPT等常用遺傳元件組合,盡管⑦號組合:P-35S + T-NOS +NPT II+GUS+Hpt+Bar所選遺傳元件均為煙草轉(zhuǎn)基因事件中常使用的基因元件,但經(jīng)我們篩查,其覆蓋率為98.7%,理論上仍有1.3%的煙草轉(zhuǎn)基因事件會被漏檢,經(jīng)過統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)該漏檢元件均為aadA基因,aadA基因所編碼的壯觀霉素抗性基因是煙草葉綠體轉(zhuǎn)化技術中最常用、最好的篩選標記[24],在部分煙草葉綠體轉(zhuǎn)基因事件中,該篩選標記基因及表達基因的啟動子及終止子均為特異的[15,25-27],因此,即使使用⑦號組合中的所有元件進行檢測,也不能覆蓋到該類型的轉(zhuǎn)基因事件,在表2中,盡管所統(tǒng)計的aadA基因的使用頻率僅為4.4%,但鑒于該轉(zhuǎn)化事件的特殊性,為不使煙草葉綠體轉(zhuǎn)化事件漏檢,最高限度降低轉(zhuǎn)基因事件的漏檢 率,綜合以上 分析,我們建議以⑨號組合:P-35S + T-NOS +NPT II+GUS+HPT+Bar+aadA進行篩查,能最大限度檢測到轉(zhuǎn)基因事件,該組合涉及7個遺傳元件,理論篩查覆蓋率為100%。

    表2 煙草轉(zhuǎn)基因研究中常用遺傳元件使用頻率Tab.2 Usage frequency of common genetic elements in transgenic tobacco research

    表2(續(xù))

    表3 煙草轉(zhuǎn)基因研究中常用遺傳元件組合篩查Tab.3 Screening of common combined genetic elements in the study of transgenic tobacco

    3 討論

    1983年,首例含有抗生素藥類的轉(zhuǎn)基因煙草在美國培育成功[28],之后的30年間,轉(zhuǎn)基因技術發(fā)展十分常迅猛,轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品大量問世[29-30]。煙草作為基因工程研究中使用最為廣泛,遺傳轉(zhuǎn)化技術最為成熟的模式植物[31-32],各科研單位遺傳轉(zhuǎn)化煙草的目的不僅僅是對其品質(zhì)進行遺傳改良[33],更多的是將外源基因?qū)霟煵?,在轉(zhuǎn)基因煙草中對未知基因進行分析、驗證、發(fā)掘,或?qū)煵葑鳛樯锓磻魃a(chǎn)研制基因工程藥物、天然香料及化工原料等[30,32-34]。

    隨著煙草轉(zhuǎn)基因研發(fā)力度的不斷加大,國家局為保證我國煙草制品吸食安全性,自2003年,便已下發(fā)《國家煙草專賣局關于加強對轉(zhuǎn)基因煙草監(jiān)控的通知》國煙科〔2003〕387號,對轉(zhuǎn)基因煙草進行監(jiān)控、檢測,嚴防煙草制品轉(zhuǎn)基因污染。

    已有文獻報道,隨著轉(zhuǎn)基因技術的不斷發(fā)展,越來越多的轉(zhuǎn)基因案例中采用了全新的啟動子、終止子和標記基因,使得現(xiàn)在常用的篩選元件覆蓋面減小,失去篩選的意義[20],因此,對煙草轉(zhuǎn)基因檢測而言,有必要對現(xiàn)有轉(zhuǎn)基因事件中所使用的遺傳元件進行分析,并根據(jù)這些信息再次篩選合適的篩查靶標。本文通過對229篇轉(zhuǎn)基因煙草研究中所用遺傳元件進行篩查,最終選定P-35S+T-NOS+NPT II+GUS+HPT+Bar+aadA這一組合為理想篩查組合,主要考慮以下因素:1)盡管部分煙草轉(zhuǎn)基因事件采用新的遺傳元件,但P-35S、T-NOS、NPT II三種元件在遺傳轉(zhuǎn)化研究中原理、技術最為成熟,因此,煙草轉(zhuǎn)化事件中使用三種元件其中之一分別作為啟動子、終止子或篩選標記基因的頻率仍然較高,且它們?yōu)閲H上較為流行的轉(zhuǎn)基因作物檢測靶標序列;2)在以上三種元件組合使用的基礎上,加入GUS、HPT、Bar三種遺傳元件能增加篩查覆蓋頻率;3)加入aadA基因能檢測到部分煙草葉綠體轉(zhuǎn)化事件,降低漏檢風險。

    本文首次統(tǒng)計并分析了近10年來國內(nèi)外文獻所報道的煙草轉(zhuǎn)基因事件,建立了煙草轉(zhuǎn)基因研究常用遺傳元件數(shù)據(jù)庫,構(gòu)建P-35S+T-NOS+NPT II+GUS+HPT+Bar+aadA 7種遺傳元件的最優(yōu)篩查組合策略,理論篩查覆蓋率為100%,并首次提 出將aadA基因納入篩查組合,防止部分煙草葉綠體轉(zhuǎn)化事件的漏檢。值得提出的是,我們的篩查組合是通過對煙草轉(zhuǎn)基因“已發(fā)生事件”的統(tǒng)計而篩選出,就目前而言是可行的,但隨著轉(zhuǎn)基因技術的不斷進步及發(fā)展, 該策略并不意味著對“將來發(fā)生事件”的檢測能達到100%。

    綜上,該篩查策略的提出,進一步完善了現(xiàn)有的轉(zhuǎn)基因檢測體系,為行業(yè)當前煙草轉(zhuǎn)基因的檢測提供了篩查依據(jù)。

    [1]李正風,劉勇,夏玉珍.黃瓜花葉病毒及抗病轉(zhuǎn)基因煙草研究進展[J].生物技術,2006,16(5):80-82.

    [2]吳明生,云曉敏,宋歌,等.轉(zhuǎn)基因玉米種子快速篩查方法研究與應用[J].生物技術通報,2013,(1):102-106.

    [3]Holden M J,Levine M,Scholdberg T,et al.The use of 35S and Tnos expression elements in the measurement of genetically engineered plant materials [J].Analytical and bioanalytical chemistry,2010,396(6):2175-2187.

    [4]Trapmann S,Emons H.Reliable GMO analysis [J].Analytical and bioanalytical chemistry,2005,381(1):72-74.

    [5]Tengs T,Zhang H,Holst-Jensen A,et al.Characterization of unknown genetic modifications using high throughput sequencing and computational subtraction [J].BMC biotechnology,2009,9(1):87-92.

    [6]張麗,武玉花,吳剛,等.轉(zhuǎn)基因油菜篩查檢測策略研究[J].中國油料作物學報,2012,34(1):74-81.

    [7]Van den Bulcke M,Lievens A,Barbau-Piednoir E,et al.A theoretical introduction to “Combinatory SYBR?Green qPCR Screening”,a matrix-based approach for the detection of materials derived from genetically modified plants [J].Analytical and bioanalytical chemistry,2010,396(6):211 3-2123.

    [8]Holst-Jensen A,Bertheau Y,de Loose M,et al.Detecting un-authorized genetically modi fied organisms (GMOs) and derived materials [J].Biotechnology advances,2012,30(6):1318-1335.

    [9]梁衛(wèi)紅,李莉,彭威風,等.水稻光敏色素相互作用因子基因OsPIL11的表達模式及其在光信號傳導中作用的初步分析[J].中國水稻科學,2012,26(3):255-260.

    [10]封偉,肖姍姍,常閃閃,等.超表達OsSsr1基因增強煙草耐鹽性[J].山東農(nóng)業(yè)大學學報:自然科學版,2012,43(1):12-17.

    [11]吳文俊,賈小霞,張金文,等.Chi和Bar基因雙價植物表達載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因煙草的初步檢測[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學學報,2010,45(3):56-59.

    [12]陳桂敏,吳剛,武玉花,等.轉(zhuǎn) Barnase 基因無籽植物的研究[J].農(nóng)業(yè)生物技術學報,2012,20(2):113-120.

    [13]劉榮梅,李鳳蘭,胡國富,等.轉(zhuǎn)CBF3基因煙草的抗寒性研究[J].東北農(nóng)業(yè)大學學報,2011,42(11):119-123.

    [14]王奇峰,胡清泉,趙玥,等.光誘導和組成型啟動子控制檸檬酸合酶基因過量表達對轉(zhuǎn)基因煙草耐鋁性影響的比較[J].浙江大學學報(農(nóng)業(yè)與生命科學版),2011,1:31-39.

    [15]Waheed M T,Th?nes N,Müller M,et al.Transplastomic expression of a modi fied human papillomavirus L1 protein leading to the assembly of capsomeres in tobacco:a step towards cost-effective second-generation vaccines [J].Transgenic research,2011,20(2):271-282.

    [16]Mann D,Abercrombie L,Rudis M,et al.Very bright orange fluorescent plants:endoplasmic reticulum targeting of orange fluorescent proteins as visual reporters in transgenic plants [J].BMC biotechnology,2012,12(1):17-26.

    [17]管敏,崔洪志,等.啟動子驅(qū)動CrylA基因在煙草中特異性表達研究[J].作物學報,2008,34(4):565-570.

    [18]Wu Tingquan,Guo An,Zhao Yanying,et al.Ectopic expression of the rice lumazine synthase gene contributes to defense responses in transgenic tobacco [J].Phytopathology,2010,100(6):573-581.

    [19]Huang Xiaosan,Luo Tao,Fu Xingzhenget al.Cloning and molecular characterization of a mitogen-activated protein kinase gene from Poncirus trifoliata whose ectopic expression confers dehydration/drought tolerance in transgenic tobacco [J].Journal of experimental botany,2011,62(14):5191-5206.

    [20]Debode F,Janssen E,Berben G.Development of 10 new screening PCR assays for GMO detection targeting promoters (pFMV,pNOS,pSSuAra,pTA29,pUbi,pRice actin) and terminators (t35S,tE9,tOCS,tg7) [J].European Food Research and Technology,2013,236:659-669.

    [21]胡尚杰,吳剛,武玉花等.轉(zhuǎn)基因作物篩查用陽性質(zhì)粒分子的構(gòu)建及應用研究 [J].中國油料作物學報,2010,32(2):173-179.

    [22]Bindler G,Borne F D,Gadani Fet al.Task Force Genetically Modified Tobacco – Detection Methods [C]//CORESTA.1999.

    [23]中國國家標準化管理委員會,GB/T 24310-2009 《煙草及煙草制品 轉(zhuǎn)基因檢測方法》[S].北京:中國標準出版社,2009.

    [24]侯丙凱,陳正華.高等植物的質(zhì)體基因轉(zhuǎn)化[J].生物工程進展,2000,20(1):70-73.

    [25]丁玉梅,楊正安,周曉罡等.Bt基因轉(zhuǎn)入煙草葉綠體獲得轉(zhuǎn)化植株的研究[J].湖南農(nóng)業(yè)大學學報:自然科學版,2007,33:189-192.

    [26]王玉華,吳忠義,張秀海等.PHAs合酶基因轉(zhuǎn)化煙草葉綠體的研究[J].農(nóng)業(yè)生物技術學報,2006,14(2):213-218.

    [27]Lenzi P,Scotti N,Alagna F,et al.Translational fusion of chloroplast-expressed human papillomavirus type 16 L1 capsid p rotein enhances antigen accumulation in transplastomic tobacco [J].Transgenic research,2008,17(6):1091-1102.

    [28]Zambryski P,Joos H,Genetello C,et al.Ti plasmid vector for the introduction of D NA into plant cells without alteration of their normal regeneration capacity [J].The EMBO journal,1983,2(12):2143-2150.

    [29]胡平,姚國新,盛繼群.轉(zhuǎn)基因作物安全性研究進展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2006,34(16):3955-3956.

    [30]黃鈴,包巨南.轉(zhuǎn)基因技術的發(fā)展及其社會影響[J].化工時刊,2007,21(04):50-55.

    [31]章鎮(zhèn),孫愛君,房經(jīng)貴等.農(nóng)桿菌介導 rolC 基因轉(zhuǎn)化煙草植株的研究[J].南京農(nóng)業(yè)大學學報,2001,24(1):25-29.

    [32]徐宜民,時焦.轉(zhuǎn)基因煙草與生物制藥[J].世界農(nóng)業(yè),2002,279(7):44-46.

    [33]楊鐵釗,李欽奎,李偉.植物次生代謝與煙草香味物質(zhì)[J].中國煙草科學,2005,4:23-26.

    [34]李軼女,胡英考,沈桂芳.轉(zhuǎn)基因植物基因工程疫苗[J].生物技術通報,2002,2(4):11-15.

    Screening strategy of genetic elements used in transgenic study

    YU Jing1,2,ZHANG Xiaolian1,ZHAO Dan3,ZOU Jie1,ZHAO Jiehong1
    1 Key Laboratory of Molecular Genetics,Guizhou Tobacco Research Institute,Guiyang 550081,Guizhou,China;
    2 Guizhou Tongren Tobacco Leaf Redrying Co.,Ltd.,Tongren 554300,Guizhou,China;
    3 Guizhou Key Laboratory of Agricultural Bioengineering,Guizhou University,Guiyang 550025,Guizhou,China

    A transgenic tobacco database of routine genetic elements was established based on literature review of t ransgenic tobacco research in the last 10 years.Genetic elements that were commonly used in transgenic tobacco research were screened to reveal frequency of individual and combination of genetic elements.A combination of P-35S promoter,NPT II/HPT/Bar/aadA selective marker genes,GUS reporter gene and T-NOS te r minator as screening target elements can make screening rate of transgenic tobacco reach 100% in theory.Thus,an optimized screening s trategy for transgenic tobacco is being laid out.

    transgenic tobacco; genetic elements; transgenic screening

    10.3969/j.issn.1004-5708.2014.01.015

    TS413

    A

    1004-5708(2014)01-0078-06

    貴州省科學技術基金“富鉀基因發(fā)掘及無選擇標記轉(zhuǎn)基因煙草培育研究”(黔科合J字[2010]2251);中國煙草總公司貴州省公司科技項目“抗TMV富K轉(zhuǎn)基因煙草育種研究”(200910); 貴州省科技支撐計劃農(nóng)業(yè)攻關“轉(zhuǎn)基因烤煙檢測標準物質(zhì)和檢測技術研究及應用”(黔科合NY[2013]3020號)

    余婧(1983—),女,碩士,農(nóng)藝師,主要從事煙草轉(zhuǎn)基因檢測及煙草生物技術研究,Email:yujingbio@126.com

    趙杰宏(1978—),男,博士,副研究員,主要從事煙草生物技術研究,Email:zhaojiehong@126.com

    2013-05-30

    猜你喜歡
    轉(zhuǎn)基因元件煙草
    煙草具有輻射性?
    探秘轉(zhuǎn)基因
    學與玩(2022年10期)2022-11-23 08:32:00
    轉(zhuǎn)基因,你吃了嗎?
    煙草依賴的診斷標準
    QFN元件的返工指南
    煙草中茄酮的富集和應用
    天然的轉(zhuǎn)基因天然的轉(zhuǎn)基因“工程師”及其對轉(zhuǎn)基因食品的意蘊
    在新興產(chǎn)業(yè)看小元件如何發(fā)揮大作用
    寶馬i3高電壓元件介紹(上)
    Cu4簇合物“元件組裝”合成及其結(jié)構(gòu)與電催化作用
    一本大道久久a久久精品| 精品乱码久久久久久99久播| 韩国av一区二区三区四区| 免费在线观看黄色视频的| or卡值多少钱| 久久精品国产清高在天天线| 老司机深夜福利视频在线观看| 少妇的丰满在线观看| 国产高清有码在线观看视频 | 真人做人爱边吃奶动态| 看片在线看免费视频| 日韩精品中文字幕看吧| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲av五月六月丁香网| 一级a爱视频在线免费观看| 麻豆成人av在线观看| 欧美成人午夜精品| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 久久 成人 亚洲| 久久久国产成人免费| 性色av乱码一区二区三区2| 欧美午夜高清在线| 91麻豆精品激情在线观看国产| 精品人妻1区二区| 亚洲国产精品合色在线| 观看免费一级毛片| 人人妻人人澡人人看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产精品免费一区二区三区在线| 婷婷精品国产亚洲av在线| 精品福利观看| 九色国产91popny在线| 在线看三级毛片| 1024视频免费在线观看| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 女同久久另类99精品国产91| 脱女人内裤的视频| 国产成人欧美在线观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 欧美性猛交黑人性爽| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 欧美日韩一级在线毛片| 91av网站免费观看| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 动漫黄色视频在线观看| 国产亚洲精品一区二区www| 国产精品久久电影中文字幕| 午夜精品久久久久久毛片777| 日韩欧美免费精品| 久久精品国产清高在天天线| 自线自在国产av| 又紧又爽又黄一区二区| 久久 成人 亚洲| 美女扒开内裤让男人捅视频| av福利片在线| 一级片免费观看大全| 亚洲精品粉嫩美女一区| 18禁国产床啪视频网站| 一二三四在线观看免费中文在| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 99久久国产精品久久久| 一级片免费观看大全| 女性生殖器流出的白浆| 国产精品久久久久久精品电影 | 日韩欧美一区视频在线观看| 国产精品免费视频内射| 日韩精品中文字幕看吧| xxx96com| 十分钟在线观看高清视频www| 后天国语完整版免费观看| 久久中文字幕一级| 欧美黄色片欧美黄色片| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 男人舔女人的私密视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 一级毛片女人18水好多| 午夜久久久在线观看| aaaaa片日本免费| 成年人黄色毛片网站| 两性夫妻黄色片| 亚洲五月婷婷丁香| 十八禁人妻一区二区| 1024手机看黄色片| tocl精华| 日韩有码中文字幕| 精品一区二区三区四区五区乱码| 99精品久久久久人妻精品| 久9热在线精品视频| 麻豆国产av国片精品| 免费在线观看黄色视频的| 真人一进一出gif抽搐免费| 亚洲五月天丁香| 麻豆av在线久日| 国产成人精品久久二区二区91| a级毛片a级免费在线| 亚洲精品美女久久av网站| 女性生殖器流出的白浆| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 久99久视频精品免费| 男女视频在线观看网站免费 | 99热只有精品国产| 午夜免费成人在线视频| 欧美又色又爽又黄视频| 亚洲精品在线观看二区| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 亚洲精品在线美女| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 超碰成人久久| 岛国在线观看网站| 精品福利观看| 久热爱精品视频在线9| 手机成人av网站| 韩国av一区二区三区四区| netflix在线观看网站| 欧美乱色亚洲激情| 成人国产综合亚洲| 一本大道久久a久久精品| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产单亲对白刺激| av片东京热男人的天堂| 免费在线观看成人毛片| 少妇的丰满在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 特大巨黑吊av在线直播 | 999久久久精品免费观看国产| 午夜视频精品福利| 亚洲第一青青草原| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 免费搜索国产男女视频| 香蕉丝袜av| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 国产色视频综合| 精品欧美国产一区二区三| 亚洲一区高清亚洲精品| 级片在线观看| 窝窝影院91人妻| 精品国产国语对白av| 国产精品98久久久久久宅男小说| 在线观看www视频免费| 悠悠久久av| 午夜福利18| 免费av毛片视频| 国产精品av久久久久免费| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 欧美中文综合在线视频| 午夜成年电影在线免费观看| www.熟女人妻精品国产| 级片在线观看| 脱女人内裤的视频| 窝窝影院91人妻| 91在线观看av| 99国产精品一区二区三区| 香蕉久久夜色| 国产精品国产高清国产av| 婷婷亚洲欧美| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 精品福利观看| 女同久久另类99精品国产91| 一边摸一边做爽爽视频免费| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 少妇粗大呻吟视频| 午夜福利高清视频| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产成人欧美| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 老司机午夜十八禁免费视频| 久久这里只有精品19| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | 最近最新中文字幕大全电影3 | 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 中文资源天堂在线| 757午夜福利合集在线观看| 美女国产高潮福利片在线看| 在线观看66精品国产| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 精品国产亚洲在线| ponron亚洲| 男人舔奶头视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产主播在线观看一区二区| 午夜免费观看网址| www.999成人在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 麻豆国产av国片精品| 亚洲成人久久爱视频| 女人被狂操c到高潮| 日本三级黄在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产精品国产高清国产av| 久久精品91蜜桃| 亚洲国产精品sss在线观看| 在线永久观看黄色视频| 国产黄a三级三级三级人| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久精品91无色码中文字幕| 麻豆国产av国片精品| 在线av久久热| 成人18禁在线播放| 久久青草综合色| 国产亚洲精品一区二区www| 久热爱精品视频在线9| 自线自在国产av| 午夜福利欧美成人| 日本精品一区二区三区蜜桃| 精品久久久久久久毛片微露脸| 人成视频在线观看免费观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 久久这里只有精品19| 亚洲欧美精品综合久久99| 在线播放国产精品三级| 99精品在免费线老司机午夜| 手机成人av网站| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 久久中文看片网| videosex国产| 亚洲黑人精品在线| 自线自在国产av| 午夜福利在线在线| 午夜福利欧美成人| 久久香蕉国产精品| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 丝袜人妻中文字幕| 国产成人av教育| 亚洲avbb在线观看| 香蕉国产在线看| 国产区一区二久久| 精品第一国产精品| 欧美日本视频| 在线观看66精品国产| 男人舔奶头视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 黄色视频不卡| 大型av网站在线播放| 麻豆成人午夜福利视频| 中出人妻视频一区二区| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 99国产精品一区二区三区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 久99久视频精品免费| 欧美日韩乱码在线| 桃红色精品国产亚洲av| 99久久精品国产亚洲精品| 国产高清videossex| 精品国产国语对白av| 亚洲成人久久性| 91麻豆精品激情在线观看国产| 欧美激情高清一区二区三区| 男人操女人黄网站| 欧美中文综合在线视频| 99国产精品99久久久久| 久久香蕉精品热| 欧美黑人精品巨大| 在线观看免费日韩欧美大片| 午夜久久久久精精品| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 88av欧美| 亚洲黑人精品在线| av片东京热男人的天堂| 国产精品永久免费网站| 韩国av一区二区三区四区| 身体一侧抽搐| 国产精品免费一区二区三区在线| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产精品,欧美在线| 日本a在线网址| 99久久国产精品久久久| 黄片播放在线免费| 亚洲一区中文字幕在线| 午夜福利在线在线| 天堂√8在线中文| 这个男人来自地球电影免费观看| 桃色一区二区三区在线观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| www日本黄色视频网| 国产三级黄色录像| 91国产中文字幕| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 人人妻人人看人人澡| 欧美三级亚洲精品| 国产av一区二区精品久久| 亚洲av熟女| 欧美黄色淫秽网站| 午夜日韩欧美国产| 成人av一区二区三区在线看| 国产一卡二卡三卡精品| 免费搜索国产男女视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 欧美乱色亚洲激情| 自线自在国产av| 哪里可以看免费的av片| 亚洲精品久久国产高清桃花| 欧美成人免费av一区二区三区| 看黄色毛片网站| 欧美一区二区精品小视频在线| 日韩欧美三级三区| 久久久久九九精品影院| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产乱人伦免费视频| 一区福利在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲avbb在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | www.www免费av| 校园春色视频在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 婷婷精品国产亚洲av在线| 黄色视频不卡| 真人一进一出gif抽搐免费| 欧美大码av| 亚洲色图av天堂| 国产成人系列免费观看| 男女视频在线观看网站免费 | 免费看日本二区| 亚洲av中文字字幕乱码综合 | 两个人视频免费观看高清| 亚洲免费av在线视频| 人人妻人人看人人澡| 999久久久国产精品视频| 亚洲av美国av| 在线观看午夜福利视频| 国产精品一区二区免费欧美| 欧美成人午夜精品| 午夜福利一区二区在线看| a级毛片在线看网站| 欧美一级毛片孕妇| 国产伦一二天堂av在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线 | 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲色图av天堂| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲精品中文字幕在线视频| 免费电影在线观看免费观看| 最近最新免费中文字幕在线| 欧美久久黑人一区二区| 在线观看免费视频日本深夜| 久久狼人影院| 欧美成人性av电影在线观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 搡老熟女国产l中国老女人| 999精品在线视频| 88av欧美| 国产色视频综合| 国产成人av激情在线播放| 亚洲电影在线观看av| 精品国产美女av久久久久小说| 一级片免费观看大全| 久久伊人香网站| 亚洲五月色婷婷综合| 免费av毛片视频| 午夜免费激情av| 午夜久久久久精精品| 久久香蕉精品热| 啦啦啦 在线观看视频| 男人操女人黄网站| 欧美乱码精品一区二区三区| 最好的美女福利视频网| 99精品欧美一区二区三区四区| 午夜福利视频1000在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 久热爱精品视频在线9| 国产私拍福利视频在线观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3 | 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 亚洲国产毛片av蜜桃av| 母亲3免费完整高清在线观看| xxx96com| 日韩欧美 国产精品| 夜夜爽天天搞| 国产精品电影一区二区三区| av天堂在线播放| 十八禁人妻一区二区| 成人精品一区二区免费| 国产又色又爽无遮挡免费看| 免费搜索国产男女视频| 黄色a级毛片大全视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 美女大奶头视频| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 给我免费播放毛片高清在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 日韩免费av在线播放| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 性欧美人与动物交配| 国语自产精品视频在线第100页| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 日韩欧美在线二视频| 亚洲成人久久性| av视频在线观看入口| 级片在线观看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 午夜亚洲福利在线播放| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 久久久久久大精品| 99久久综合精品五月天人人| 麻豆成人av在线观看| 淫秽高清视频在线观看| www国产在线视频色| 国产精品免费视频内射| 日韩三级视频一区二区三区| 婷婷丁香在线五月| 国产99白浆流出| 午夜福利免费观看在线| 亚洲第一电影网av| 婷婷精品国产亚洲av在线| 日本 欧美在线| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久久国产欧美日韩av| 国产色视频综合| 91九色精品人成在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 国产高清激情床上av| 给我免费播放毛片高清在线观看| 成人国产综合亚洲| 免费电影在线观看免费观看| 中出人妻视频一区二区| 亚洲成人免费电影在线观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 国产精品 欧美亚洲| 欧美日韩黄片免| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲 欧美一区二区三区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美日本视频| 国产免费av片在线观看野外av| 国产成人影院久久av| 亚洲中文日韩欧美视频| 草草在线视频免费看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| videosex国产| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 精品国产亚洲在线| 日日干狠狠操夜夜爽| 日本在线视频免费播放| 精品电影一区二区在线| 精品免费久久久久久久清纯| 久久国产精品人妻蜜桃| 男女午夜视频在线观看| 制服诱惑二区| 天天一区二区日本电影三级| 成人免费观看视频高清| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 日韩欧美 国产精品| 免费观看人在逋| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 波多野结衣高清无吗| 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲熟女毛片儿| 满18在线观看网站| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 最近在线观看免费完整版| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产午夜精品久久久久久| 最新美女视频免费是黄的| 国产主播在线观看一区二区| 免费看日本二区| 久久久久久人人人人人| 中国美女看黄片| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲精品色激情综合| 婷婷丁香在线五月| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲精华国产精华精| 中文资源天堂在线| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产av一区在线观看免费| 亚洲欧美日韩无卡精品| 无人区码免费观看不卡| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲av熟女| 热re99久久国产66热| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 国产精品亚洲一级av第二区| 欧美zozozo另类| 香蕉久久夜色| 极品教师在线免费播放| 久久国产精品人妻蜜桃| 美女免费视频网站| 日韩有码中文字幕| 国产亚洲av高清不卡| 国产亚洲精品久久久久5区| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久久国产欧美日韩av| 在线观看免费午夜福利视频| 欧美日韩精品网址| 亚洲人成77777在线视频| 91大片在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 黄色成人免费大全| 俄罗斯特黄特色一大片| 精品国产乱子伦一区二区三区| 一区福利在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 老司机靠b影院| a在线观看视频网站| 老司机在亚洲福利影院| 制服丝袜大香蕉在线| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲久久久国产精品| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 婷婷精品国产亚洲av在线| 午夜精品在线福利| 欧美成人午夜精品| 欧美zozozo另类| 黑人操中国人逼视频| 十八禁网站免费在线| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 精品人妻1区二区| 亚洲人成电影免费在线| 欧美成人午夜精品| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 一本综合久久免费| 香蕉丝袜av| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 国产精品电影一区二区三区| 88av欧美| 日韩欧美国产在线观看| 国产av一区二区精品久久| 精品日产1卡2卡| 久久国产乱子伦精品免费另类| 精品无人区乱码1区二区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 国产1区2区3区精品| 日韩欧美三级三区| 日本三级黄在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 91字幕亚洲| 精品熟女少妇八av免费久了| 在线观看www视频免费| 一区二区三区精品91| 婷婷精品国产亚洲av| 国产高清有码在线观看视频 | 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久香蕉激情| 久久婷婷成人综合色麻豆| 一区二区三区精品91| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 国产亚洲欧美精品永久| 国产成人系列免费观看| 少妇的丰满在线观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 欧美丝袜亚洲另类 | 欧美一区二区精品小视频在线| 一本一本综合久久| 一进一出抽搐gif免费好疼| 99在线视频只有这里精品首页| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美日本视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲av成人一区二区三| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 黄色成人免费大全| 欧美日韩一级在线毛片| 国产精品久久久av美女十八| 高清在线国产一区| 亚洲熟妇熟女久久| 无限看片的www在线观看| cao死你这个sao货| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产av又大| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲一区高清亚洲精品| 美女午夜性视频免费| 欧美色欧美亚洲另类二区| 自线自在国产av| 久久这里只有精品19| 午夜免费成人在线视频| 国产亚洲欧美98| 亚洲第一av免费看| 在线播放国产精品三级| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国内精品久久久久精免费| 长腿黑丝高跟| 一区二区三区国产精品乱码| 90打野战视频偷拍视频| 久久久久免费精品人妻一区二区 | 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲精品中文字幕在线视频| 最近在线观看免费完整版| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 无人区码免费观看不卡| 亚洲精品一区av在线观看| 婷婷丁香在线五月| 久久精品aⅴ一区二区三区四区|