• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    大孔吸附樹脂吸附分離FK506的工藝研究

    2014-11-24 23:44:25諸敏
    上海醫(yī)藥 2014年21期
    關(guān)鍵詞:吸附樹脂

    諸敏

    摘 要 目的:研究并優(yōu)化FK506提取工藝。方法:通過(guò)幾種大孔吸附樹脂的吸附容量及分離能力比較實(shí)驗(yàn),篩選到一種吸附容量高又有分離能力的樹脂;通過(guò)吸附等溫線及柱分離實(shí)驗(yàn),確定最佳吸附濃度、上樣及洗脫流速等工藝參數(shù)。結(jié)果: FK506提取液通過(guò)HZ816樹脂吸附分離掉雜質(zhì),中間體濕粉含量達(dá)到60.1%(折干含量81.3%),吸附分離總收率達(dá)87.1 %。結(jié)論:HZ816樹脂可有效吸附分離FK506。

    關(guān)鍵詞 FK506 樹脂 吸附

    中圖分類號(hào):TQ460.64 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1006-1533(2014)21-0071-04

    Study on the technology for the isolation and purification

    of FK506 by macroporous resin

    ZHU Min*

    (Hangzhou Zhongmei Huadong Pharmaceutical Co. Ltd., Hangzhou 310011, China)

    ABSTRACT Objective: To optimize the technology for the isolation and purification of FK506. Methods: A macroporous absorption resin with high adsorption and separation capability was selected through experiments based on its adsorption capability and separation ability. Process parameters such as the volume and the optimum adsorption concentration of sample and the elution flow were determined via adsorption isotherm and column separation experiments. Results: The content of the wet powder of FK506 intermediate was 60.1% (81.3% on dry content) through the adsorption of impurities from FK506 extracts by resin HZ816 with total yield of 87.1%. Conclusion: FK506 can be effectively separated and purified by macroporous resin HZ816.

    KEY WORDS FK506; resin; adsorption

    FK506(他克莫司)系新一代免疫抑制劑,是繼環(huán)孢素之后的一個(gè)重大發(fā)現(xiàn)。通過(guò)體外、動(dòng)物和臨床研究證實(shí),其劑量在低于環(huán)抱素10倍的情況下即可起到很好的免疫抑制作用,且毒副反應(yīng)比環(huán)孢素小[1-2]。但是,在FK506的生產(chǎn)過(guò)程中,由于發(fā)酵液中有效組分單位較低,并有多個(gè)他克莫司類似物,包括FK520(即:子囊霉素)和2H-FK506(二氫他克莫司)等雜質(zhì),它們的結(jié)構(gòu)與他克莫司極為相似[3]。并且,F(xiàn)K506 和FK506異構(gòu)體Ⅰ及Ⅱ在溶劑中相互轉(zhuǎn)化[4],導(dǎo)致分離難度大,提取收率低。為了提高產(chǎn)品質(zhì)量、降低生產(chǎn)成本,對(duì)提取工藝作了進(jìn)一步研究,本文主要研究采用樹脂分離純化FK506中間體的工藝技術(shù)。

    材料與方法

    材料與儀器

    HZ816,HZ818,HZ820型大孔吸附樹脂(上海華震樹脂廠);X-5型大孔吸附樹脂(天津南開大學(xué)樹脂廠);FK506萃取脫色濃縮液(本公司自制);丙酮,去離子純化水,乙酸乙酯,乙醇等均為分析純;玻璃層析柱:45 mm ×1 000 mm;SHZ-3型循環(huán)水式真空泵(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司);RE-201D旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海一凱儀器設(shè)備有限公司);W201B恒溫水浴鍋(上海申勝生物技術(shù)有限公司);Agilent 1260型高效液相色譜儀(美國(guó)Agilent公司)。

    方法

    HPLC檢測(cè)方法

    色譜柱(Eclipse XDB-C8,4.6 mm×150 mm,5 ?m),流動(dòng)相為0.1%磷酸水-乙腈(60:40→ 44:56),梯度洗脫 1 h),流速1.0 ml/min,柱溫60 ℃,進(jìn)樣量20 ml,檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm。

    大孔吸附樹脂吸附容量比較

    FK506提取液中含有多個(gè)組分及色素和油脂等雜質(zhì),根據(jù)樹脂吸附原理[5]及FK506在各種溶劑中的溶解度大小,選用孔徑適合、比表面大的吸附樹脂HZ816、HZ818、HZ820、X-5各3 g分別裝入50 ml的三角瓶中;取FK506萃取脫色濃縮液25 ml,效價(jià)88.356 mg/ml,加丙酮和適量純水稀釋后效價(jià)為41.217 mg/ml,每份取12 ml分別加入上述吸附樹脂中。室溫(24 ℃)下振蕩吸附4 h,過(guò)濾后用HPLC測(cè)定吸附液中殘余的FK506效價(jià)。

    吸附等溫線試驗(yàn)

    在50 ml錐形瓶中加入3 g經(jīng)處理的吸附樹脂共5份,每份加入20 ml FK506溶液,效價(jià)分別為15、30、45、60、75 mg/ml,室溫(24 ℃)下振搖4 h,用HPLC測(cè)定溶液中殘余的FK506的效價(jià),計(jì)算樹脂的吸附容量。

    吸附及解吸

    取直徑4.5 cm玻璃柱,裝入HZ816樹脂500 ml,先用丙酮洗脫再生,至流出液的丙酮與水混合不顯白色渾濁為止(取1 ml流出液加5 ml蒸餾水),然后用大量純化水洗脫至無(wú)丙酮味后備用。取FK506萃取脫色濃縮液54 ml,效價(jià)92.056 mg/ml,濃縮液加適量丙酮和純水稀釋后(效價(jià):48 121 mg/ml)上柱,上樣吸附流速2.5 ml/min;上樣完畢先用丙酮-純水(3∶7)的混合溶液作解吸劑洗脫1.5倍柱體積,再用丙酮-純水(7∶3)的混合溶液作解吸劑洗脫,控制流速5 ml/min,分部收集(每流分220 ml),用HPLC測(cè)定效價(jià),計(jì)算、比較收率。

    濃縮和沉淀

    收集合并大于1.0 mg/ml解吸液,減壓、60 ℃濃縮至有白色固體粉末析出、濃縮液變清,移入5 ℃冰箱中放置1 d過(guò)濾,所得粉末按上述HPLC檢測(cè)方法測(cè)FK506含量。

    結(jié)果與討論

    樹脂吸附容量

    試驗(yàn)了4種不同樹脂靜態(tài)吸附提取液中FK506的效果(表1),按下式計(jì)算樹脂飽和吸附量[6]:飽和吸附量(mg/g)=(樣品溶液中FK506總量-吸附后殘余的FK506總量)/樹脂質(zhì)量。

    從表1可見,HZ816樹脂比其它幾種樹脂吸附容量大,這是由于樹脂孔徑、比表面積、孔容及極性的不同導(dǎo)致吸附的能力的差異,而選用的HZ816樹脂有較大的比表面積及適合的孔徑;同時(shí),加丙酮增加萃取脫色濃縮液的流動(dòng)性及加適量水增大極性和減小溶解度,有利樹脂吸附FK506。

    吸附等溫曲線

    HZ816樹脂在濃度不同的FK506溶液中對(duì)FK506進(jìn)行吸附,其吸附等溫線試驗(yàn)結(jié)果見圖1。

    從圖1可見,該等溫吸附曲線與Langmugir方程[7]吻合。樹脂吸附量隨溶液中FK506濃度提高而變大,當(dāng)濃度提高到50 mg/ml以上時(shí),其吸附容量提高幅度變小,而溶液黏度卻增大,考慮到萃取脫色濃縮液效價(jià)濃度在75 mg/ml時(shí),上柱吸附流速極小,因此對(duì)萃取脫色濃縮液需加溶劑丙酮增加萃取脫色濃縮液的流動(dòng)性,但要控制FK506溶液濃度在最佳吸附效價(jià)。綜上實(shí)驗(yàn)分析得出,可采用50 mg/ml濃度作為最佳吸附效價(jià)。

    解吸

    HZ816樹脂解吸實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

    從表2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可見,前2個(gè)流分可分離去除大量色素等雜質(zhì),提高了洗脫流分的純度,并且洗脫液?jiǎn)挝患校喜⑺占?~8解吸流分共1 301 ml,效價(jià)3.520 mg/ml,解吸收率達(dá)92.1 %。由于解吸流速小,有利交換洗脫,提高解吸液?jiǎn)挝?,故本?shí)驗(yàn)采用1/100(v/v·min)流速解吸。對(duì)選用的解吸溶劑必須能使大孔吸附樹脂溶脹,減少溶質(zhì)與樹脂間吸附力,同時(shí)使吸附物容易溶解,故本實(shí)驗(yàn)采用丙酮-純水(3∶7)的混合溶劑洗脫,可去掉部分極性大的雜質(zhì),然后用70%丙酮水溶劑解吸附的FK506。

    解吸液的質(zhì)量考察

    收集的解吸液于60 ℃減壓濃縮至有白色固體粉末析出、濃縮液變清,移入5 ℃冰箱中放置1 d,抽濾,獲得白色粉末,按上述HPLC檢測(cè)方法測(cè)FK506重量含量為60.1%,折干含量(即粉末干燥除去水分后的重量含量):81.3%,組分(即FK506歸一含量):達(dá)到91%左右,顯著提高了中間體(圖2)質(zhì)量。中間體經(jīng)精制可得高純度FK506成品(圖3),可見,采用HZ816樹脂吸附分離雜質(zhì),對(duì)后續(xù)精制工藝非常有利。

    解吸液于60 ℃減壓濃縮過(guò)程中,隨著濃縮液中丙酮量的減少,相對(duì)含水量增大,F(xiàn)K506在濃縮液中溶解度降低,有固體粉末析出,至濃縮液變清時(shí),F(xiàn)K506已基本析出,移入5 ℃冰箱中放置1 d,隨著溫度降低溶液中的FK506不斷析出,使固體粉末變粗,從而有利后續(xù)的抽濾并提高收率。

    討論

    HZ816樹脂可分離去除FK506萃取脫色濃縮液中的油脂、色素等雜質(zhì),比相關(guān)美國(guó)專利報(bào)道采用硅膠等一些分離介質(zhì)效果好,工藝操作簡(jiǎn)便[8]。通過(guò)HZ816樹脂分離所得FK506白色(或類白色)固體粉末,經(jīng)精制可得高純度FK506。產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)到國(guó)內(nèi)外藥典質(zhì)量要求,可與美國(guó)專利報(bào)道的質(zhì)量媲美[9]。采用HZ816樹脂取代硅膠分離介質(zhì)不僅收率高,而且樹脂可再生重復(fù)使用,有益環(huán)保。

    參考文獻(xiàn)

    張煒. 新型免疫抑制劑FK506[J]. 臨床皮膚科雜志, 1995, 24(1): 47.

    周吉海, 譚季春. FK506 的發(fā)現(xiàn)和開發(fā)應(yīng)用[J]. 日本醫(yī)學(xué)介紹, 1994, 15(6): 267-268.

    溫耀明, 肖麗華, 莊鴻, 等. 高速逆流色譜純化他克莫司工藝放大研究[J]. 中國(guó)抗生素雜志, 2014,39(4): 267-271.

    王傳喜, 樂(lè)占線, 陳宇翔, 等. 他克莫司互變異構(gòu)體的制備及其結(jié)構(gòu)鑒定[C]. 第十二屆全國(guó)抗生素學(xué)術(shù)會(huì)議論文集. 成都: 中國(guó)藥學(xué)會(huì)抗生素專業(yè)委員會(huì)、《中國(guó)抗生素雜志》雜志社、《中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù)》雜志社, 2013: 274-278.

    顧覺(jué)奮. 分離純化工藝原理[M]. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 1994: 117-123.

    王英豪, 邱頌平, 劉清華. 大孔吸附樹脂對(duì)山茱萸總黃酮的分離純化研究[J].中藥與臨床, 2012, 3(1): 18-26.

    何建勇. 生物制藥工藝學(xué)[M]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2007: 318-319.

    Cabri W, Paissoni P, Roletto J, et al. Process for the purification of tacrolimus: USA, 20080160586[P]. 2008-07-03.

    Choi BT, Ham YB, Yu SS, et al. Method for refining of high purity of tacrolimus: USA, 8362238[P]. 2013-01-29.

    (收稿日期:2013-04-15)

    濃縮和沉淀

    收集合并大于1.0 mg/ml解吸液,減壓、60 ℃濃縮至有白色固體粉末析出、濃縮液變清,移入5 ℃冰箱中放置1 d過(guò)濾,所得粉末按上述HPLC檢測(cè)方法測(cè)FK506含量。

    結(jié)果與討論

    樹脂吸附容量

    試驗(yàn)了4種不同樹脂靜態(tài)吸附提取液中FK506的效果(表1),按下式計(jì)算樹脂飽和吸附量[6]:飽和吸附量(mg/g)=(樣品溶液中FK506總量-吸附后殘余的FK506總量)/樹脂質(zhì)量。

    從表1可見,HZ816樹脂比其它幾種樹脂吸附容量大,這是由于樹脂孔徑、比表面積、孔容及極性的不同導(dǎo)致吸附的能力的差異,而選用的HZ816樹脂有較大的比表面積及適合的孔徑;同時(shí),加丙酮增加萃取脫色濃縮液的流動(dòng)性及加適量水增大極性和減小溶解度,有利樹脂吸附FK506。

    吸附等溫曲線

    HZ816樹脂在濃度不同的FK506溶液中對(duì)FK506進(jìn)行吸附,其吸附等溫線試驗(yàn)結(jié)果見圖1。

    從圖1可見,該等溫吸附曲線與Langmugir方程[7]吻合。樹脂吸附量隨溶液中FK506濃度提高而變大,當(dāng)濃度提高到50 mg/ml以上時(shí),其吸附容量提高幅度變小,而溶液黏度卻增大,考慮到萃取脫色濃縮液效價(jià)濃度在75 mg/ml時(shí),上柱吸附流速極小,因此對(duì)萃取脫色濃縮液需加溶劑丙酮增加萃取脫色濃縮液的流動(dòng)性,但要控制FK506溶液濃度在最佳吸附效價(jià)。綜上實(shí)驗(yàn)分析得出,可采用50 mg/ml濃度作為最佳吸附效價(jià)。

    解吸

    HZ816樹脂解吸實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

    從表2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可見,前2個(gè)流分可分離去除大量色素等雜質(zhì),提高了洗脫流分的純度,并且洗脫液?jiǎn)挝患?,合并所收集?~8解吸流分共1 301 ml,效價(jià)3.520 mg/ml,解吸收率達(dá)92.1 %。由于解吸流速小,有利交換洗脫,提高解吸液?jiǎn)挝唬时緦?shí)驗(yàn)采用1/100(v/v·min)流速解吸。對(duì)選用的解吸溶劑必須能使大孔吸附樹脂溶脹,減少溶質(zhì)與樹脂間吸附力,同時(shí)使吸附物容易溶解,故本實(shí)驗(yàn)采用丙酮-純水(3∶7)的混合溶劑洗脫,可去掉部分極性大的雜質(zhì),然后用70%丙酮水溶劑解吸附的FK506。

    解吸液的質(zhì)量考察

    收集的解吸液于60 ℃減壓濃縮至有白色固體粉末析出、濃縮液變清,移入5 ℃冰箱中放置1 d,抽濾,獲得白色粉末,按上述HPLC檢測(cè)方法測(cè)FK506重量含量為60.1%,折干含量(即粉末干燥除去水分后的重量含量):81.3%,組分(即FK506歸一含量):達(dá)到91%左右,顯著提高了中間體(圖2)質(zhì)量。中間體經(jīng)精制可得高純度FK506成品(圖3),可見,采用HZ816樹脂吸附分離雜質(zhì),對(duì)后續(xù)精制工藝非常有利。

    解吸液于60 ℃減壓濃縮過(guò)程中,隨著濃縮液中丙酮量的減少,相對(duì)含水量增大,F(xiàn)K506在濃縮液中溶解度降低,有固體粉末析出,至濃縮液變清時(shí),F(xiàn)K506已基本析出,移入5 ℃冰箱中放置1 d,隨著溫度降低溶液中的FK506不斷析出,使固體粉末變粗,從而有利后續(xù)的抽濾并提高收率。

    討論

    HZ816樹脂可分離去除FK506萃取脫色濃縮液中的油脂、色素等雜質(zhì),比相關(guān)美國(guó)專利報(bào)道采用硅膠等一些分離介質(zhì)效果好,工藝操作簡(jiǎn)便[8]。通過(guò)HZ816樹脂分離所得FK506白色(或類白色)固體粉末,經(jīng)精制可得高純度FK506。產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)到國(guó)內(nèi)外藥典質(zhì)量要求,可與美國(guó)專利報(bào)道的質(zhì)量媲美[9]。采用HZ816樹脂取代硅膠分離介質(zhì)不僅收率高,而且樹脂可再生重復(fù)使用,有益環(huán)保。

    參考文獻(xiàn)

    張煒. 新型免疫抑制劑FK506[J]. 臨床皮膚科雜志, 1995, 24(1): 47.

    周吉海, 譚季春. FK506 的發(fā)現(xiàn)和開發(fā)應(yīng)用[J]. 日本醫(yī)學(xué)介紹, 1994, 15(6): 267-268.

    溫耀明, 肖麗華, 莊鴻, 等. 高速逆流色譜純化他克莫司工藝放大研究[J]. 中國(guó)抗生素雜志, 2014,39(4): 267-271.

    王傳喜, 樂(lè)占線, 陳宇翔, 等. 他克莫司互變異構(gòu)體的制備及其結(jié)構(gòu)鑒定[C]. 第十二屆全國(guó)抗生素學(xué)術(shù)會(huì)議論文集. 成都: 中國(guó)藥學(xué)會(huì)抗生素專業(yè)委員會(huì)、《中國(guó)抗生素雜志》雜志社、《中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù)》雜志社, 2013: 274-278.

    顧覺(jué)奮. 分離純化工藝原理[M]. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 1994: 117-123.

    王英豪, 邱頌平, 劉清華. 大孔吸附樹脂對(duì)山茱萸總黃酮的分離純化研究[J].中藥與臨床, 2012, 3(1): 18-26.

    何建勇. 生物制藥工藝學(xué)[M]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2007: 318-319.

    Cabri W, Paissoni P, Roletto J, et al. Process for the purification of tacrolimus: USA, 20080160586[P]. 2008-07-03.

    Choi BT, Ham YB, Yu SS, et al. Method for refining of high purity of tacrolimus: USA, 8362238[P]. 2013-01-29.

    (收稿日期:2013-04-15)

    濃縮和沉淀

    收集合并大于1.0 mg/ml解吸液,減壓、60 ℃濃縮至有白色固體粉末析出、濃縮液變清,移入5 ℃冰箱中放置1 d過(guò)濾,所得粉末按上述HPLC檢測(cè)方法測(cè)FK506含量。

    結(jié)果與討論

    樹脂吸附容量

    試驗(yàn)了4種不同樹脂靜態(tài)吸附提取液中FK506的效果(表1),按下式計(jì)算樹脂飽和吸附量[6]:飽和吸附量(mg/g)=(樣品溶液中FK506總量-吸附后殘余的FK506總量)/樹脂質(zhì)量。

    從表1可見,HZ816樹脂比其它幾種樹脂吸附容量大,這是由于樹脂孔徑、比表面積、孔容及極性的不同導(dǎo)致吸附的能力的差異,而選用的HZ816樹脂有較大的比表面積及適合的孔徑;同時(shí),加丙酮增加萃取脫色濃縮液的流動(dòng)性及加適量水增大極性和減小溶解度,有利樹脂吸附FK506。

    吸附等溫曲線

    HZ816樹脂在濃度不同的FK506溶液中對(duì)FK506進(jìn)行吸附,其吸附等溫線試驗(yàn)結(jié)果見圖1。

    從圖1可見,該等溫吸附曲線與Langmugir方程[7]吻合。樹脂吸附量隨溶液中FK506濃度提高而變大,當(dāng)濃度提高到50 mg/ml以上時(shí),其吸附容量提高幅度變小,而溶液黏度卻增大,考慮到萃取脫色濃縮液效價(jià)濃度在75 mg/ml時(shí),上柱吸附流速極小,因此對(duì)萃取脫色濃縮液需加溶劑丙酮增加萃取脫色濃縮液的流動(dòng)性,但要控制FK506溶液濃度在最佳吸附效價(jià)。綜上實(shí)驗(yàn)分析得出,可采用50 mg/ml濃度作為最佳吸附效價(jià)。

    解吸

    HZ816樹脂解吸實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

    從表2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可見,前2個(gè)流分可分離去除大量色素等雜質(zhì),提高了洗脫流分的純度,并且洗脫液?jiǎn)挝患校喜⑺占?~8解吸流分共1 301 ml,效價(jià)3.520 mg/ml,解吸收率達(dá)92.1 %。由于解吸流速小,有利交換洗脫,提高解吸液?jiǎn)挝?,故本?shí)驗(yàn)采用1/100(v/v·min)流速解吸。對(duì)選用的解吸溶劑必須能使大孔吸附樹脂溶脹,減少溶質(zhì)與樹脂間吸附力,同時(shí)使吸附物容易溶解,故本實(shí)驗(yàn)采用丙酮-純水(3∶7)的混合溶劑洗脫,可去掉部分極性大的雜質(zhì),然后用70%丙酮水溶劑解吸附的FK506。

    解吸液的質(zhì)量考察

    收集的解吸液于60 ℃減壓濃縮至有白色固體粉末析出、濃縮液變清,移入5 ℃冰箱中放置1 d,抽濾,獲得白色粉末,按上述HPLC檢測(cè)方法測(cè)FK506重量含量為60.1%,折干含量(即粉末干燥除去水分后的重量含量):81.3%,組分(即FK506歸一含量):達(dá)到91%左右,顯著提高了中間體(圖2)質(zhì)量。中間體經(jīng)精制可得高純度FK506成品(圖3),可見,采用HZ816樹脂吸附分離雜質(zhì),對(duì)后續(xù)精制工藝非常有利。

    解吸液于60 ℃減壓濃縮過(guò)程中,隨著濃縮液中丙酮量的減少,相對(duì)含水量增大,F(xiàn)K506在濃縮液中溶解度降低,有固體粉末析出,至濃縮液變清時(shí),F(xiàn)K506已基本析出,移入5 ℃冰箱中放置1 d,隨著溫度降低溶液中的FK506不斷析出,使固體粉末變粗,從而有利后續(xù)的抽濾并提高收率。

    討論

    HZ816樹脂可分離去除FK506萃取脫色濃縮液中的油脂、色素等雜質(zhì),比相關(guān)美國(guó)專利報(bào)道采用硅膠等一些分離介質(zhì)效果好,工藝操作簡(jiǎn)便[8]。通過(guò)HZ816樹脂分離所得FK506白色(或類白色)固體粉末,經(jīng)精制可得高純度FK506。產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)到國(guó)內(nèi)外藥典質(zhì)量要求,可與美國(guó)專利報(bào)道的質(zhì)量媲美[9]。采用HZ816樹脂取代硅膠分離介質(zhì)不僅收率高,而且樹脂可再生重復(fù)使用,有益環(huán)保。

    參考文獻(xiàn)

    張煒. 新型免疫抑制劑FK506[J]. 臨床皮膚科雜志, 1995, 24(1): 47.

    周吉海, 譚季春. FK506 的發(fā)現(xiàn)和開發(fā)應(yīng)用[J]. 日本醫(yī)學(xué)介紹, 1994, 15(6): 267-268.

    溫耀明, 肖麗華, 莊鴻, 等. 高速逆流色譜純化他克莫司工藝放大研究[J]. 中國(guó)抗生素雜志, 2014,39(4): 267-271.

    王傳喜, 樂(lè)占線, 陳宇翔, 等. 他克莫司互變異構(gòu)體的制備及其結(jié)構(gòu)鑒定[C]. 第十二屆全國(guó)抗生素學(xué)術(shù)會(huì)議論文集. 成都: 中國(guó)藥學(xué)會(huì)抗生素專業(yè)委員會(huì)、《中國(guó)抗生素雜志》雜志社、《中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù)》雜志社, 2013: 274-278.

    顧覺(jué)奮. 分離純化工藝原理[M]. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 1994: 117-123.

    王英豪, 邱頌平, 劉清華. 大孔吸附樹脂對(duì)山茱萸總黃酮的分離純化研究[J].中藥與臨床, 2012, 3(1): 18-26.

    何建勇. 生物制藥工藝學(xué)[M]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2007: 318-319.

    Cabri W, Paissoni P, Roletto J, et al. Process for the purification of tacrolimus: USA, 20080160586[P]. 2008-07-03.

    Choi BT, Ham YB, Yu SS, et al. Method for refining of high purity of tacrolimus: USA, 8362238[P]. 2013-01-29.

    (收稿日期:2013-04-15)

    猜你喜歡
    吸附樹脂
    炫酷發(fā)明
    PVC糊樹脂生產(chǎn)工藝的發(fā)展
    2018年1—4月我國(guó)PVC樹脂產(chǎn)量
    聚氯乙烯(2018年5期)2018-02-18 03:30:28
    2018年3月PVC樹脂進(jìn)出口數(shù)據(jù)
    聚氯乙烯(2018年5期)2018-02-18 03:30:28
    磁性離子交換樹脂的制備及其對(duì)Cr3+的吸附
    一種吸附膜的制備及其吸附性能
    Fe(Ⅲ)負(fù)載改性核桃殼對(duì)Cu2+吸附研究
    炭氣凝膠的制備與吸附氫氣性能
    核桃殼基吸附材料的制備及性能測(cè)試
    科技視界(2016年25期)2016-11-25 12:30:06
    活化粉煤灰在煤焦油加工廢水預(yù)處理中的應(yīng)用
    在线观看免费日韩欧美大片 | 伊人亚洲综合成人网| kizo精华| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 免费高清在线观看视频在线观看| 国产毛片在线视频| 高清在线视频一区二区三区| 日韩亚洲欧美综合| 国产精品一区二区在线不卡| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲av二区三区四区| 日本欧美视频一区| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产综合精华液| 亚洲av成人精品一二三区| 免费观看av网站的网址| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 夜夜骑夜夜射夜夜干| av又黄又爽大尺度在线免费看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 久热这里只有精品99| 熟妇人妻不卡中文字幕| 免费日韩欧美在线观看| 免费观看性生交大片5| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲中文av在线| 黄色欧美视频在线观看| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 又大又黄又爽视频免费| 人妻系列 视频| 一级a做视频免费观看| 国产精品一国产av| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产成人精品无人区| 亚洲国产精品国产精品| 另类精品久久| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产成人aa在线观看| 久久精品夜色国产| 国产亚洲精品久久久com| 伦理电影免费视频| 国精品久久久久久国模美| 久久人人爽人人爽人人片va| 免费观看av网站的网址| 超碰97精品在线观看| av福利片在线| 国产精品蜜桃在线观看| 青春草亚洲视频在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 水蜜桃什么品种好| 亚洲综合色网址| 国产男女超爽视频在线观看| 精品少妇内射三级| 精品久久久久久久久av| 少妇人妻久久综合中文| 极品人妻少妇av视频| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲精品视频女| 熟女电影av网| 亚洲成色77777| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲国产最新在线播放| 七月丁香在线播放| 最新的欧美精品一区二区| 两个人的视频大全免费| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产免费又黄又爽又色| 老司机影院成人| xxx大片免费视频| 两个人的视频大全免费| 午夜福利,免费看| 欧美日韩亚洲高清精品| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产成人免费观看mmmm| 女性生殖器流出的白浆| 极品少妇高潮喷水抽搐| 热re99久久国产66热| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产精品人妻久久久久久| 中文字幕久久专区| 国产一区有黄有色的免费视频| 十八禁高潮呻吟视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 黄片无遮挡物在线观看| 永久免费av网站大全| 国产欧美亚洲国产| 国产精品人妻久久久久久| 18禁观看日本| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产精品成人在线| 国产精品国产av在线观看| 在线观看一区二区三区激情| 毛片一级片免费看久久久久| 又大又黄又爽视频免费| 男人操女人黄网站| 国产免费一级a男人的天堂| 涩涩av久久男人的天堂| 美女国产高潮福利片在线看| 女性被躁到高潮视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 免费日韩欧美在线观看| 婷婷色综合www| 在现免费观看毛片| 男女国产视频网站| av天堂久久9| 免费人妻精品一区二区三区视频| 欧美最新免费一区二区三区| 蜜桃国产av成人99| 久久久久久久精品精品| 我的女老师完整版在线观看| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲精品色激情综合| 少妇被粗大猛烈的视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 黑丝袜美女国产一区| 久久鲁丝午夜福利片| 性高湖久久久久久久久免费观看| 欧美激情 高清一区二区三区| 97精品久久久久久久久久精品| 日韩一区二区三区影片| 午夜激情福利司机影院| 91久久精品国产一区二区三区| 成人漫画全彩无遮挡| 色哟哟·www| 超色免费av| 满18在线观看网站| 国产一区二区三区av在线| 亚洲国产精品一区三区| 一区二区三区免费毛片| 亚洲欧洲国产日韩| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 国产精品一区二区在线不卡| 国产欧美亚洲国产| 亚洲av二区三区四区| 亚洲天堂av无毛| 亚洲国产精品一区三区| 成年人午夜在线观看视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 天堂8中文在线网| 成人二区视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 中文字幕制服av| 午夜福利在线观看免费完整高清在| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 777米奇影视久久| 女性被躁到高潮视频| 夜夜爽夜夜爽视频| 日本黄大片高清| 亚洲内射少妇av| 国产成人aa在线观看| 久久av网站| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 九色亚洲精品在线播放| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 在线观看免费高清a一片| 九九爱精品视频在线观看| 久久国产精品大桥未久av| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲色图综合在线观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 99精国产麻豆久久婷婷| 日日撸夜夜添| 老司机亚洲免费影院| 欧美精品高潮呻吟av久久| 国产免费一级a男人的天堂| 国产精品欧美亚洲77777| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲在久久综合| 超色免费av| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲少妇的诱惑av| 永久免费av网站大全| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲精品第二区| 十八禁网站网址无遮挡| 99热国产这里只有精品6| 日韩欧美精品免费久久| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 亚洲精品久久午夜乱码| 乱人伦中国视频| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 大片电影免费在线观看免费| 婷婷色综合www| 高清不卡的av网站| 免费观看a级毛片全部| 久久av网站| 男女无遮挡免费网站观看| 久热这里只有精品99| 中文字幕免费在线视频6| 美女视频免费永久观看网站| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 99久久综合免费| 午夜91福利影院| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产成人a∨麻豆精品| 99九九在线精品视频| videossex国产| 丝袜美足系列| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 免费观看无遮挡的男女| 亚洲情色 制服丝袜| 我要看黄色一级片免费的| 秋霞在线观看毛片| 美女视频免费永久观看网站| 日韩中字成人| 嫩草影院入口| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 午夜av观看不卡| 草草在线视频免费看| 亚洲美女视频黄频| 国产亚洲欧美精品永久| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 亚洲av.av天堂| 国产成人91sexporn| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 精品一区二区免费观看| 午夜激情久久久久久久| 91aial.com中文字幕在线观看| 各种免费的搞黄视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 久久久久久人妻| 国产成人精品福利久久| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产乱来视频区| 老司机影院毛片| 少妇的逼好多水| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 观看av在线不卡| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 中文欧美无线码| videossex国产| 在线播放无遮挡| 国产一区二区在线观看av| 成年人午夜在线观看视频| 看免费成人av毛片| 亚洲综合色惰| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲成人av在线免费| 日韩av免费高清视频| 晚上一个人看的免费电影| 男女免费视频国产| 一级二级三级毛片免费看| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 久久婷婷青草| 成人手机av| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美激情 高清一区二区三区| www.色视频.com| 国产 精品1| 久久这里有精品视频免费| 日韩精品有码人妻一区| a级毛片黄视频| 色94色欧美一区二区| 国产男女内射视频| 丝袜在线中文字幕| 欧美xxⅹ黑人| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产色婷婷99| 99热国产这里只有精品6| 久久精品夜色国产| 岛国毛片在线播放| 精品久久国产蜜桃| 国产日韩欧美亚洲二区| 日本与韩国留学比较| 五月天丁香电影| 少妇高潮的动态图| 中国国产av一级| 国产免费又黄又爽又色| av福利片在线| 狂野欧美激情性bbbbbb| 成人亚洲欧美一区二区av| 在线观看国产h片| 91成人精品电影| 成人黄色视频免费在线看| 国产精品99久久99久久久不卡 | 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 性高湖久久久久久久久免费观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲人与动物交配视频| 国产av精品麻豆| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲欧美色中文字幕在线| 视频区图区小说| 性色av一级| 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲国产最新在线播放| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产精品人妻久久久影院| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 在线观看免费日韩欧美大片 | 国产一区二区三区av在线| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲,一卡二卡三卡| 国产成人午夜福利电影在线观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久免费观看电影| 午夜91福利影院| 大香蕉久久网| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| a级毛片黄视频| 精品熟女少妇av免费看| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲久久久国产精品| 97在线视频观看| 国产日韩欧美在线精品| 成人国产av品久久久| 十八禁网站网址无遮挡| 各种免费的搞黄视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 91aial.com中文字幕在线观看| 成人影院久久| 黄色毛片三级朝国网站| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 国产黄色免费在线视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲综合精品二区| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 夫妻性生交免费视频一级片| 久久久午夜欧美精品| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 久久久亚洲精品成人影院| 五月伊人婷婷丁香| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 成年av动漫网址| 边亲边吃奶的免费视频| 久久久久人妻精品一区果冻| 国产av一区二区精品久久| 少妇的逼好多水| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 婷婷色综合www| 欧美日韩综合久久久久久| 日日爽夜夜爽网站| 国产欧美亚洲国产| 亚洲,一卡二卡三卡| 免费看光身美女| 黄色怎么调成土黄色| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久ye,这里只有精品| h视频一区二区三区| 日韩中文字幕视频在线看片| 又黄又爽又刺激的免费视频.| www.色视频.com| 伊人久久国产一区二区| 人人妻人人澡人人看| 免费黄网站久久成人精品| 免费观看a级毛片全部| 91精品国产九色| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲精品自拍成人| 欧美精品亚洲一区二区| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 亚洲精品国产av成人精品| 国产高清不卡午夜福利| 丝袜美足系列| 大陆偷拍与自拍| 精品卡一卡二卡四卡免费| 老司机影院毛片| 精品国产国语对白av| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 高清不卡的av网站| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产成人免费无遮挡视频| 女人久久www免费人成看片| 免费观看性生交大片5| 亚洲久久久国产精品| 精品少妇久久久久久888优播| 欧美+日韩+精品| 久久久久久久精品精品| 99国产精品免费福利视频| 久久99热这里只频精品6学生| 高清视频免费观看一区二区| 国产黄片视频在线免费观看| 国产一区二区三区综合在线观看 | 老熟女久久久| 美女国产视频在线观看| 高清在线视频一区二区三区| 日本vs欧美在线观看视频| 日本91视频免费播放| 中国三级夫妇交换| 成人综合一区亚洲| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久精品久久久久久久性| 男人操女人黄网站| 18禁观看日本| 亚洲国产av影院在线观看| 91成人精品电影| 在线观看三级黄色| 久热这里只有精品99| 搡老乐熟女国产| 国产精品99久久久久久久久| 高清不卡的av网站| 黑丝袜美女国产一区| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 性色avwww在线观看| 精品国产露脸久久av麻豆| 亚洲欧美清纯卡通| 国产免费福利视频在线观看| 午夜激情av网站| 日韩av在线免费看完整版不卡| 51国产日韩欧美| 国产黄色免费在线视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲欧洲国产日韩| 免费黄频网站在线观看国产| 国产精品人妻久久久影院| 日韩一区二区视频免费看| 欧美另类一区| 熟女av电影| 一区二区三区四区激情视频| 久久久国产精品麻豆| 91精品国产国语对白视频| 免费高清在线观看日韩| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产精品 国内视频| 国产亚洲一区二区精品| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 一本色道久久久久久精品综合| 国产色爽女视频免费观看| 国产男女内射视频| 国产伦理片在线播放av一区| 最近中文字幕高清免费大全6| 亚洲成色77777| 国内精品宾馆在线| 22中文网久久字幕| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产一区二区三区av在线| 高清毛片免费看| 最近最新中文字幕免费大全7| 日韩电影二区| 日韩强制内射视频| 91精品三级在线观看| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产高清不卡午夜福利| 美女国产高潮福利片在线看| 婷婷色麻豆天堂久久| 精品少妇久久久久久888优播| 看免费成人av毛片| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲怡红院男人天堂| tube8黄色片| 色哟哟·www| 亚洲无线观看免费| 一区二区三区免费毛片| 22中文网久久字幕| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲精品色激情综合| 久久久精品免费免费高清| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲经典国产精华液单| 在线 av 中文字幕| 国产黄频视频在线观看| 丝瓜视频免费看黄片| 午夜激情久久久久久久| 亚洲在久久综合| 精品久久久精品久久久| 国产精品 国内视频| 久热久热在线精品观看| 国产成人免费观看mmmm| 精品人妻在线不人妻| 日本爱情动作片www.在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 99久久精品国产国产毛片| 婷婷色麻豆天堂久久| 亚洲人成网站在线播| 各种免费的搞黄视频| 亚洲精品一二三| 日日摸夜夜添夜夜爱| 制服丝袜香蕉在线| 婷婷色av中文字幕| 中国三级夫妇交换| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲av欧美aⅴ国产| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲综合色惰| 国产不卡av网站在线观看| 人人澡人人妻人| 波野结衣二区三区在线| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲av成人精品一二三区| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产黄片视频在线免费观看| 日本黄大片高清| 超碰97精品在线观看| 成人国产av品久久久| 亚洲国产欧美在线一区| 中国美白少妇内射xxxbb| 好男人视频免费观看在线| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 飞空精品影院首页| 久久久国产一区二区| 日本黄色日本黄色录像| 女性被躁到高潮视频| 亚洲精品色激情综合| 欧美激情 高清一区二区三区| 一区二区三区免费毛片| freevideosex欧美| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产视频首页在线观看| 少妇高潮的动态图| 午夜激情av网站| 最新中文字幕久久久久| 精品一品国产午夜福利视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 男女免费视频国产| 欧美 日韩 精品 国产| 午夜激情久久久久久久| 黄色一级大片看看| 久久久久网色| 日本午夜av视频| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 国产av国产精品国产| 成人毛片60女人毛片免费| 国产精品蜜桃在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 免费看不卡的av| 美女福利国产在线| 永久免费av网站大全| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 国产在线视频一区二区| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产男人的电影天堂91| 大香蕉久久网| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲欧洲国产日韩| 国产精品人妻久久久久久| 99久久综合免费| 国产极品天堂在线| 国产高清三级在线| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 高清午夜精品一区二区三区| 蜜桃国产av成人99| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 另类亚洲欧美激情| 午夜老司机福利剧场| 国产精品成人在线| 在线观看人妻少妇| 国产成人av激情在线播放 | 卡戴珊不雅视频在线播放| 免费观看在线日韩| 18禁动态无遮挡网站| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲国产日韩一区二区| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲美女视频黄频| 久久av网站| 五月天丁香电影| 亚洲欧洲国产日韩| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲av免费高清在线观看| 大香蕉久久成人网| 男人添女人高潮全过程视频| 国精品久久久久久国模美| 男女边摸边吃奶| 日本91视频免费播放| 久久青草综合色| 边亲边吃奶的免费视频| 久久久久久久久久久丰满| 中文字幕最新亚洲高清| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲精品国产av蜜桃| 久久精品国产自在天天线| 另类亚洲欧美激情| 国产精品久久久久成人av| 日韩伦理黄色片| 国产av一区二区精品久久| 午夜福利影视在线免费观看| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 一个人看视频在线观看www免费| 老司机亚洲免费影院| 精品国产一区二区久久| 午夜视频国产福利| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 精品少妇内射三级| 久久女婷五月综合色啪小说| 妹子高潮喷水视频| 多毛熟女@视频| 大陆偷拍与自拍| 晚上一个人看的免费电影| 伦理电影免费视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久久久久久国产电影| 最黄视频免费看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 免费观看性生交大片5|