• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    一株巨大芽孢桿菌J1的生胞培養(yǎng)及優(yōu)化

    2014-11-22 13:55司云龍等
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年10期
    關(guān)鍵詞:氮源碳源培養(yǎng)基

    司云龍等

    摘要:以巨大芽孢桿菌J1為材料,利用溶磷圈法測定了菌株的解磷能力,優(yōu)化了菌株的最佳發(fā)酵條件、最適培養(yǎng)基。結(jié)果表明,此菌株溶磷效果明顯;此菌株生長的最適培養(yǎng)時間為 28 h,最適接種量為6.7%,最適pH值為8.5;最佳碳源為玉米粉與葡萄糖的復(fù)合碳源,最佳氮源為大豆粉與硫酸銨的復(fù)合氮源。搖瓶培養(yǎng)的接種量為6.7%,pH值為8.5,250 mL 三角瓶中最適裝液體積為 30 mL,培養(yǎng)溫度為30 ℃,培養(yǎng)時間為28 h,最適宜轉(zhuǎn)速為180 r/min的搖瓶培養(yǎng)條件下,巨大芽孢桿菌活菌數(shù)各影響因素最佳組合為:玉米粉20 g/L,葡萄糖5 g/L,大豆粉7.5 g/L,硫酸銨 0.33 g/L,各因子對巨大芽孢桿菌活菌數(shù)的影響由大到小依次為:硫酸銨濃度>玉米粉濃度>葡萄糖濃度>大豆粉濃度。

    關(guān)鍵詞:巨大芽孢桿菌;培養(yǎng)基;芽孢率;氮源;碳源;培養(yǎng)條件

    中圖分類號: S144.9文獻標志碼: A文章編號:1002-1302(2014)10-0359-03

    收稿日期:2013-12-11

    基金項目:國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃(編號:201210449130)。

    作者簡介:司云龍(1990—),男,從事微生物肥料研究。E-mail:xiaosiwuqing@163.com。

    通信作者:任麗麗,講師,從事微生物肥料研究。E-mail:tutuya_001g@163.com。植物生長發(fā)育過程中,磷元素以多種方式參與生物體內(nèi)的代謝過程,是植物不可缺少的大量元素之一[1-2]。土壤中的磷元素主要以難溶磷酸鹽的形式存在,可溶性磷含量很少。據(jù)統(tǒng)計,世界土壤的平均含磷量約為0.04%,我國土壤的平均含磷量為0.02%~0.1%,南方酸性土壤含磷量低于0.04%[3-4]。研究發(fā)現(xiàn),土壤中存在解磷微生物,它們能夠?qū)⒘姿猁}轉(zhuǎn)化為可溶性磷供植物吸收利用,解磷菌還可以產(chǎn)生有機酸、生長素、抗生素等物質(zhì),刺激作物生長,抑制病原菌生長,改善土壤微環(huán)境,從而更有利于植物生長發(fā)育[5-9]。目前對磷細菌的研究僅局限于菌種分離選育及作用效果比較方面,對于影響磷細菌生長的因素研究較少[10-13]。微生物種類多樣,發(fā)酵過程中受各種因素的影響,導(dǎo)致菌株發(fā)酵水平相對較低[14]。本試驗探討環(huán)境因素對巨大芽孢桿菌生長的影響,并在此基礎(chǔ)上探討該菌的最佳發(fā)酵條件,旨在為擴大巨大芽孢桿菌生產(chǎn)規(guī)模提供理論依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1材料

    巨大芽孢桿菌J1由山東京博控股股份有限公司技術(shù)中心生物化工研究所提供。

    1.2培養(yǎng)基

    搖瓶基礎(chǔ)培養(yǎng)基:玉米粉 30 g,大豆粉15 g,K2HPO4 2.0 g,MgSO4 2.0 g,CaCO3 1.5 g,MnSO4 0.05 g,H2O 1 000 mL,pH 值為7。平板培養(yǎng)基:蛋白胨10 g,氯化鈉 5.0 g,牛肉膏粉 3.0 g,瓊脂15 g,H2O 1 000 mL。蛋黃培養(yǎng)基:將50%的蛋黃液按照6%的比例加入平板培養(yǎng)基中。

    1.3方法

    1.3.1巨大芽孢桿菌J1解磷效能測定 根據(jù)巨大芽孢桿菌J1在蛋黃培養(yǎng)基上形成的透明圈直徑判斷其解磷效能。

    1.3.2培養(yǎng)條件對巨大芽孢桿菌J1生長的影響

    1.3.2.1pH值對巨大芽孢桿菌J1生長的影響采用搖瓶基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng),分別于pH 值為5.5、6.5、7.5、8.5情況下180 r/min、30 ℃ 振蕩培養(yǎng)28 h 后進行平板計數(shù)。

    1.3.2.2培養(yǎng)時間對巨大芽孢桿菌J1生長的影響采用搖瓶基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng),在pH值為8.5、轉(zhuǎn)速為175 r/min、30 ℃ 下分別振蕩培養(yǎng)24、28、32、36 h后進行計數(shù)。

    1.3.2.3接種量對巨大芽孢桿菌J1生長的影響采用搖瓶基礎(chǔ)培養(yǎng)基,在 pH值為8.5、轉(zhuǎn)速為180 r/min條件下將接種量分別為 3.3%、6.7%、10.0%的搖瓶置于振蕩培養(yǎng)箱中30 ℃ 培養(yǎng)28 h 后進行計數(shù)。

    1.3.3最適培養(yǎng)條件下發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化按照設(shè)計方案,配制不同的培養(yǎng)基,250 mL三角瓶中每瓶裝量30 mL,原始pH 值為8.5,接種量為6.7%,180 r/min培養(yǎng)28 h后平板計數(shù),采用正交試驗法找出最適培養(yǎng)基及最佳碳源、氮源。

    2結(jié)果與分析

    2.1巨大芽孢桿菌J1解磷能力的測定

    由圖1可知,巨大芽孢桿菌J1在蛋黃培養(yǎng)基上培養(yǎng)2 d可產(chǎn)生明顯的溶磷圈,溶磷圈直徑與菌落直徑比值高達4.1,初步判斷巨大芽孢桿菌有解磷能力。

    2.2pH值對巨大芽孢桿菌J1菌株生長的影響

    由圖2可知,巨大芽孢桿菌J1在各pH值下長勢良好,在pH值為 8.5條件下生長最好,活菌數(shù)達35×107 CFU/mL。

    2.3培養(yǎng)時間對巨大芽孢桿菌J1生長的影響

    由圖3可知,培養(yǎng)28 h 菌株生長最好,活菌數(shù)為 35×107 CFU/mL,芽孢率為84%,到達某一時間拐點后繼續(xù)培養(yǎng),菌體會出現(xiàn)自溶現(xiàn)象。

    2.4接種量對巨大芽孢桿菌J1生長的影響

    接種量對菌體生長有影響,所以接種量要適度,接種量過低會導(dǎo)致延滯期過長,菌體量不高;接種量過高,帶入培養(yǎng)基內(nèi)的代謝產(chǎn)物過多,反而不利于菌體生長。由圖4可知,當接種量為 6.7% 時,菌株生長最好,活菌數(shù)為36×107 CFU/mL,芽孢率為86% 。

    2.5碳源對巨大芽孢桿菌J1生長的影響

    分別用30 g/L玉米粉、10 g/L葡萄糖、復(fù)合碳源(玉米粉、葡萄糖各減半混合在一起)配制碳源培養(yǎng)基,其他成分同搖瓶基礎(chǔ)培養(yǎng)基。接種后按照上述最佳培養(yǎng)條件,測定活菌總數(shù)及芽孢數(shù),結(jié)果表明,采用玉米粉與葡萄糖的復(fù)合碳源作為培養(yǎng)基獲得的活菌數(shù)、芽孢數(shù)較高,活菌數(shù)達到36×107 CFU/mL,芽孢數(shù)達到35×107 CFU/mL(圖5)。

    2.6氮源對巨大芽孢桿菌J1生長的影響

    以玉米粉為碳源,在搖瓶基礎(chǔ)培養(yǎng)基中其他成分不變的情況下,分別以15.0 g/L大豆粉、0.67 g/L硫酸銨、復(fù)合氮源(大豆粉、硫酸銨各減半)配制氮源培養(yǎng)基,接種后按照上述最佳培養(yǎng)條件,測定活菌數(shù)及芽孢數(shù),結(jié)果表明,采用復(fù)合氮源培養(yǎng)基獲得的活菌數(shù)、芽孢數(shù)較高,活菌數(shù)達 35×107 CFU/mL,芽孢數(shù)達33×107 CFU/mL,芽孢率達9591%(圖6)。

    2.7正交試驗結(jié)果

    以玉米粉與葡萄糖混合物作為碳源,以大豆粉、硫酸銨混合物作為氮源,結(jié)果表明,最佳組合為玉米粉20 g/L,葡萄糖5.0 g/L,大

    3結(jié)論與討論

    巨大芽孢桿菌J1具有較強的解磷能力,在蛋黃培養(yǎng)基上解磷圈明顯。在培養(yǎng)基配方為玉米粉30 g,大豆粉15 g,磷酸氫二鉀2.0 g,硫酸鎂2.0 g,碳酸鈣1.5 g,硫酸錳5.0 g,蒸餾水1 000 mL,轉(zhuǎn)速為180 r/min,溫度為30 ℃ 的培養(yǎng)條件下,巨大芽孢桿菌的最適pH值為8.5,活菌數(shù)達 35×107 CFU/mL;最適培養(yǎng)時間為28 h,活菌數(shù)達到35×107 CFU/mL,芽孢率為84%;最適接種量為6.7%,活菌數(shù)達36×107 CFU/mL,芽孢率為86%。本研究表明,培養(yǎng)基成分是影響芽孢形成的重要因素。巨大芽孢桿菌對于碳源、氮源及 Mg2+、Mn2+、Ca2+、Fe2+等離子反應(yīng)較敏感[15]。培養(yǎng)基配方不同直接導(dǎo)致發(fā)酵菌數(shù)存在巨大差異。搖瓶培養(yǎng)的接種量為67%,pH值為85,250 mL三角瓶中最適裝液體積為 30 mL,培養(yǎng)溫度為 30 ℃,培養(yǎng)時間為28 h,最適宜轉(zhuǎn)速為180 r/min的搖瓶培養(yǎng)條件下,巨大芽孢桿菌活菌數(shù)各影響因素最佳組合為:玉米粉 20 g/L,葡萄糖5.0 g/L,黃豆粉7.5 g/L,硫酸銨0.33 g/L,各因子對巨大芽孢桿菌活菌數(shù)的影響由大到小依次為:硫酸銨濃度>玉米粉濃度>葡萄糖濃度>大豆粉濃度。 芽孢的形成是一個極其復(fù)雜的過程,受形態(tài)結(jié)構(gòu)、化學(xué)成分等多方面因素的影響。巨大芽孢桿菌培養(yǎng)成功關(guān)鍵在于獲得較高活菌數(shù)的同時提高芽孢轉(zhuǎn)化率。本研究表明,巨大芽孢桿菌J1營養(yǎng)要求比較低,所需原料來源廣、成本低、芽孢率較高。本試驗獲得的最佳培養(yǎng)條件可以進一步應(yīng)用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)中。

    參考文獻:

    [1]Wallander H. Uptake of P from apatite by Pinus sylvestris seedlings colonised by different ectomycorrhizal fungi[J]. Plant and Soil,2000,218(1/2):249-256.

    [2]龐欣,李春儉,張福鎖. 缺磷脅迫對黃瓜體內(nèi)磷運輸及再分配的影響[J]. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報,1999,5(2):42-48.

    [3]蔣柏藩. 根據(jù)作物、土壤和磷礦條件來看我國磷肥發(fā)展的前景[J]. 土壤,1982,14(4):121-127.

    [4]孫波,張?zhí)伊?,趙其國. 南方紅壤丘陵區(qū)土壤養(yǎng)分貧瘠化的綜合評價[J]. 土壤,1995(3):119-128.

    [5]梁錦鋒. 解磷細菌(Bacillus megaterium var. phosphaticum)生長條件及解磷機理的研究[D]. 杭州:浙江大學(xué),2001.

    [6]臧威,孫劍秋,王鵬,等. 東北地區(qū)四種農(nóng)作物根際磷細菌的分布[J]. 中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報,2009,17(6):1206-1210.

    [7]林寶英,譚志瓊,張容意. 枯草芽孢桿菌B25抗菌物質(zhì)初步研究[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2013(1):82-84.

    [8]尹瑞齡. 我國旱地土壤的溶磷微生物[J]. 土壤,1988(5):243-246.

    [9]林啟美,趙小蓉,孫炎鑫,等. 四種不同生態(tài)系統(tǒng)的土壤解磷細菌數(shù)量及種群分布[J]. 土壤與環(huán)境,2000,9(1):34-37.

    [10]李福后,王偉霞,潘建梅. 有機磷分解細菌的選育及其發(fā)酵條件的研究[J]. 中國土壤與肥料,2007(6):74-77.

    [11]陳凱,李紀順,楊合同,等. 巨大芽孢桿菌P1的解磷效果與發(fā)酵條件研究[J]. 中國土壤與肥料,2010(4):73-76.

    [12]葉云峰,黎起秦,袁高慶,等. 枯草芽孢桿菌B47菌株高產(chǎn)抗菌物質(zhì)的培養(yǎng)基及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 微生物學(xué)通報,2011,38(9):1339-1346.

    [13]郭夏麗,狄源寧,王巖. 枯草芽孢桿菌產(chǎn)芽孢條件的優(yōu)化[J]. 中國土壤與肥料,2012(3):99-103.

    [14]梁錦鋒,陳欣,唐建軍. 1株磷細菌基本培養(yǎng)條件的研究[J]. 浙江林學(xué)院學(xué)報,2002,19(4):8-11.

    [15]張文芝,郭堅華. 微生物發(fā)酵工藝優(yōu)化研究進展[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2013(6):114-117.

    2.6氮源對巨大芽孢桿菌J1生長的影響

    以玉米粉為碳源,在搖瓶基礎(chǔ)培養(yǎng)基中其他成分不變的情況下,分別以15.0 g/L大豆粉、0.67 g/L硫酸銨、復(fù)合氮源(大豆粉、硫酸銨各減半)配制氮源培養(yǎng)基,接種后按照上述最佳培養(yǎng)條件,測定活菌數(shù)及芽孢數(shù),結(jié)果表明,采用復(fù)合氮源培養(yǎng)基獲得的活菌數(shù)、芽孢數(shù)較高,活菌數(shù)達 35×107 CFU/mL,芽孢數(shù)達33×107 CFU/mL,芽孢率達9591%(圖6)。

    2.7正交試驗結(jié)果

    以玉米粉與葡萄糖混合物作為碳源,以大豆粉、硫酸銨混合物作為氮源,結(jié)果表明,最佳組合為玉米粉20 g/L,葡萄糖5.0 g/L,大

    3結(jié)論與討論

    巨大芽孢桿菌J1具有較強的解磷能力,在蛋黃培養(yǎng)基上解磷圈明顯。在培養(yǎng)基配方為玉米粉30 g,大豆粉15 g,磷酸氫二鉀2.0 g,硫酸鎂2.0 g,碳酸鈣1.5 g,硫酸錳5.0 g,蒸餾水1 000 mL,轉(zhuǎn)速為180 r/min,溫度為30 ℃ 的培養(yǎng)條件下,巨大芽孢桿菌的最適pH值為8.5,活菌數(shù)達 35×107 CFU/mL;最適培養(yǎng)時間為28 h,活菌數(shù)達到35×107 CFU/mL,芽孢率為84%;最適接種量為6.7%,活菌數(shù)達36×107 CFU/mL,芽孢率為86%。本研究表明,培養(yǎng)基成分是影響芽孢形成的重要因素。巨大芽孢桿菌對于碳源、氮源及 Mg2+、Mn2+、Ca2+、Fe2+等離子反應(yīng)較敏感[15]。培養(yǎng)基配方不同直接導(dǎo)致發(fā)酵菌數(shù)存在巨大差異。搖瓶培養(yǎng)的接種量為67%,pH值為85,250 mL三角瓶中最適裝液體積為 30 mL,培養(yǎng)溫度為 30 ℃,培養(yǎng)時間為28 h,最適宜轉(zhuǎn)速為180 r/min的搖瓶培養(yǎng)條件下,巨大芽孢桿菌活菌數(shù)各影響因素最佳組合為:玉米粉 20 g/L,葡萄糖5.0 g/L,黃豆粉7.5 g/L,硫酸銨0.33 g/L,各因子對巨大芽孢桿菌活菌數(shù)的影響由大到小依次為:硫酸銨濃度>玉米粉濃度>葡萄糖濃度>大豆粉濃度。 芽孢的形成是一個極其復(fù)雜的過程,受形態(tài)結(jié)構(gòu)、化學(xué)成分等多方面因素的影響。巨大芽孢桿菌培養(yǎng)成功關(guān)鍵在于獲得較高活菌數(shù)的同時提高芽孢轉(zhuǎn)化率。本研究表明,巨大芽孢桿菌J1營養(yǎng)要求比較低,所需原料來源廣、成本低、芽孢率較高。本試驗獲得的最佳培養(yǎng)條件可以進一步應(yīng)用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)中。

    參考文獻:

    [1]Wallander H. Uptake of P from apatite by Pinus sylvestris seedlings colonised by different ectomycorrhizal fungi[J]. Plant and Soil,2000,218(1/2):249-256.

    [2]龐欣,李春儉,張福鎖. 缺磷脅迫對黃瓜體內(nèi)磷運輸及再分配的影響[J]. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報,1999,5(2):42-48.

    [3]蔣柏藩. 根據(jù)作物、土壤和磷礦條件來看我國磷肥發(fā)展的前景[J]. 土壤,1982,14(4):121-127.

    [4]孫波,張?zhí)伊?,趙其國. 南方紅壤丘陵區(qū)土壤養(yǎng)分貧瘠化的綜合評價[J]. 土壤,1995(3):119-128.

    [5]梁錦鋒. 解磷細菌(Bacillus megaterium var. phosphaticum)生長條件及解磷機理的研究[D]. 杭州:浙江大學(xué),2001.

    [6]臧威,孫劍秋,王鵬,等. 東北地區(qū)四種農(nóng)作物根際磷細菌的分布[J]. 中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報,2009,17(6):1206-1210.

    [7]林寶英,譚志瓊,張容意. 枯草芽孢桿菌B25抗菌物質(zhì)初步研究[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2013(1):82-84.

    [8]尹瑞齡. 我國旱地土壤的溶磷微生物[J]. 土壤,1988(5):243-246.

    [9]林啟美,趙小蓉,孫炎鑫,等. 四種不同生態(tài)系統(tǒng)的土壤解磷細菌數(shù)量及種群分布[J]. 土壤與環(huán)境,2000,9(1):34-37.

    [10]李福后,王偉霞,潘建梅. 有機磷分解細菌的選育及其發(fā)酵條件的研究[J]. 中國土壤與肥料,2007(6):74-77.

    [11]陳凱,李紀順,楊合同,等. 巨大芽孢桿菌P1的解磷效果與發(fā)酵條件研究[J]. 中國土壤與肥料,2010(4):73-76.

    [12]葉云峰,黎起秦,袁高慶,等. 枯草芽孢桿菌B47菌株高產(chǎn)抗菌物質(zhì)的培養(yǎng)基及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 微生物學(xué)通報,2011,38(9):1339-1346.

    [13]郭夏麗,狄源寧,王巖. 枯草芽孢桿菌產(chǎn)芽孢條件的優(yōu)化[J]. 中國土壤與肥料,2012(3):99-103.

    [14]梁錦鋒,陳欣,唐建軍. 1株磷細菌基本培養(yǎng)條件的研究[J]. 浙江林學(xué)院學(xué)報,2002,19(4):8-11.

    [15]張文芝,郭堅華. 微生物發(fā)酵工藝優(yōu)化研究進展[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2013(6):114-117.

    2.6氮源對巨大芽孢桿菌J1生長的影響

    以玉米粉為碳源,在搖瓶基礎(chǔ)培養(yǎng)基中其他成分不變的情況下,分別以15.0 g/L大豆粉、0.67 g/L硫酸銨、復(fù)合氮源(大豆粉、硫酸銨各減半)配制氮源培養(yǎng)基,接種后按照上述最佳培養(yǎng)條件,測定活菌數(shù)及芽孢數(shù),結(jié)果表明,采用復(fù)合氮源培養(yǎng)基獲得的活菌數(shù)、芽孢數(shù)較高,活菌數(shù)達 35×107 CFU/mL,芽孢數(shù)達33×107 CFU/mL,芽孢率達9591%(圖6)。

    2.7正交試驗結(jié)果

    以玉米粉與葡萄糖混合物作為碳源,以大豆粉、硫酸銨混合物作為氮源,結(jié)果表明,最佳組合為玉米粉20 g/L,葡萄糖5.0 g/L,大

    3結(jié)論與討論

    巨大芽孢桿菌J1具有較強的解磷能力,在蛋黃培養(yǎng)基上解磷圈明顯。在培養(yǎng)基配方為玉米粉30 g,大豆粉15 g,磷酸氫二鉀2.0 g,硫酸鎂2.0 g,碳酸鈣1.5 g,硫酸錳5.0 g,蒸餾水1 000 mL,轉(zhuǎn)速為180 r/min,溫度為30 ℃ 的培養(yǎng)條件下,巨大芽孢桿菌的最適pH值為8.5,活菌數(shù)達 35×107 CFU/mL;最適培養(yǎng)時間為28 h,活菌數(shù)達到35×107 CFU/mL,芽孢率為84%;最適接種量為6.7%,活菌數(shù)達36×107 CFU/mL,芽孢率為86%。本研究表明,培養(yǎng)基成分是影響芽孢形成的重要因素。巨大芽孢桿菌對于碳源、氮源及 Mg2+、Mn2+、Ca2+、Fe2+等離子反應(yīng)較敏感[15]。培養(yǎng)基配方不同直接導(dǎo)致發(fā)酵菌數(shù)存在巨大差異。搖瓶培養(yǎng)的接種量為67%,pH值為85,250 mL三角瓶中最適裝液體積為 30 mL,培養(yǎng)溫度為 30 ℃,培養(yǎng)時間為28 h,最適宜轉(zhuǎn)速為180 r/min的搖瓶培養(yǎng)條件下,巨大芽孢桿菌活菌數(shù)各影響因素最佳組合為:玉米粉 20 g/L,葡萄糖5.0 g/L,黃豆粉7.5 g/L,硫酸銨0.33 g/L,各因子對巨大芽孢桿菌活菌數(shù)的影響由大到小依次為:硫酸銨濃度>玉米粉濃度>葡萄糖濃度>大豆粉濃度。 芽孢的形成是一個極其復(fù)雜的過程,受形態(tài)結(jié)構(gòu)、化學(xué)成分等多方面因素的影響。巨大芽孢桿菌培養(yǎng)成功關(guān)鍵在于獲得較高活菌數(shù)的同時提高芽孢轉(zhuǎn)化率。本研究表明,巨大芽孢桿菌J1營養(yǎng)要求比較低,所需原料來源廣、成本低、芽孢率較高。本試驗獲得的最佳培養(yǎng)條件可以進一步應(yīng)用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)中。

    參考文獻:

    [1]Wallander H. Uptake of P from apatite by Pinus sylvestris seedlings colonised by different ectomycorrhizal fungi[J]. Plant and Soil,2000,218(1/2):249-256.

    [2]龐欣,李春儉,張福鎖. 缺磷脅迫對黃瓜體內(nèi)磷運輸及再分配的影響[J]. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報,1999,5(2):42-48.

    [3]蔣柏藩. 根據(jù)作物、土壤和磷礦條件來看我國磷肥發(fā)展的前景[J]. 土壤,1982,14(4):121-127.

    [4]孫波,張?zhí)伊?,趙其國. 南方紅壤丘陵區(qū)土壤養(yǎng)分貧瘠化的綜合評價[J]. 土壤,1995(3):119-128.

    [5]梁錦鋒. 解磷細菌(Bacillus megaterium var. phosphaticum)生長條件及解磷機理的研究[D]. 杭州:浙江大學(xué),2001.

    [6]臧威,孫劍秋,王鵬,等. 東北地區(qū)四種農(nóng)作物根際磷細菌的分布[J]. 中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報,2009,17(6):1206-1210.

    [7]林寶英,譚志瓊,張容意. 枯草芽孢桿菌B25抗菌物質(zhì)初步研究[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2013(1):82-84.

    [8]尹瑞齡. 我國旱地土壤的溶磷微生物[J]. 土壤,1988(5):243-246.

    [9]林啟美,趙小蓉,孫炎鑫,等. 四種不同生態(tài)系統(tǒng)的土壤解磷細菌數(shù)量及種群分布[J]. 土壤與環(huán)境,2000,9(1):34-37.

    [10]李福后,王偉霞,潘建梅. 有機磷分解細菌的選育及其發(fā)酵條件的研究[J]. 中國土壤與肥料,2007(6):74-77.

    [11]陳凱,李紀順,楊合同,等. 巨大芽孢桿菌P1的解磷效果與發(fā)酵條件研究[J]. 中國土壤與肥料,2010(4):73-76.

    [12]葉云峰,黎起秦,袁高慶,等. 枯草芽孢桿菌B47菌株高產(chǎn)抗菌物質(zhì)的培養(yǎng)基及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 微生物學(xué)通報,2011,38(9):1339-1346.

    [13]郭夏麗,狄源寧,王巖. 枯草芽孢桿菌產(chǎn)芽孢條件的優(yōu)化[J]. 中國土壤與肥料,2012(3):99-103.

    [14]梁錦鋒,陳欣,唐建軍. 1株磷細菌基本培養(yǎng)條件的研究[J]. 浙江林學(xué)院學(xué)報,2002,19(4):8-11.

    [15]張文芝,郭堅華. 微生物發(fā)酵工藝優(yōu)化研究進展[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2013(6):114-117.

    猜你喜歡
    氮源碳源培養(yǎng)基
    緩釋碳源促進生物反硝化脫氮技術(shù)研究進展
    不同碳源對銅溜槽用鋁碳質(zhì)涂抹料性能的影響
    蛹蟲草液體發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選
    各種培養(yǎng)基制作應(yīng)注意的幾個事項
    無機氮源對紅曲霉調(diào)控初探
    四甘醇作碳源合成Li3V2(PO4)3正極材料及其電化學(xué)性能
    KBM581培養(yǎng)基:人T細胞誘導(dǎo)與擴增培養(yǎng)基應(yīng)用指南
    茯磚茶中優(yōu)勢微生物在不同培養(yǎng)基的差異性比較
    中藥渣生產(chǎn)蛋白飼料的氮源優(yōu)化研究
    響應(yīng)面分析法和氮源改進優(yōu)化L-賴氨酸發(fā)酵工藝
    国产免费一区二区三区四区乱码| 国产日韩欧美亚洲二区| 少妇精品久久久久久久| a级一级毛片免费在线观看| 蜜桃在线观看..| 国产欧美亚洲国产| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | av天堂久久9| 色视频在线一区二区三区| 精品少妇久久久久久888优播| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 春色校园在线视频观看| 五月天丁香电影| 色视频www国产| 午夜精品国产一区二区电影| 涩涩av久久男人的天堂| a级一级毛片免费在线观看| 一个人看视频在线观看www免费| 黄色日韩在线| 日本免费在线观看一区| 亚洲av中文av极速乱| 69精品国产乱码久久久| 最近最新中文字幕免费大全7| 97在线视频观看| 高清不卡的av网站| 日韩强制内射视频| 黄色怎么调成土黄色| 日韩欧美精品免费久久| 欧美xxxx性猛交bbbb| 如何舔出高潮| 成人美女网站在线观看视频| 蜜桃在线观看..| 久久国产精品大桥未久av | 亚洲人与动物交配视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | av又黄又爽大尺度在线免费看| 成人影院久久| 六月丁香七月| 最近的中文字幕免费完整| 久久99热6这里只有精品| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲第一av免费看| 欧美人与善性xxx| 久久人妻熟女aⅴ| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲精品国产av蜜桃| 在线观看一区二区三区激情| 国产成人一区二区在线| 插逼视频在线观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 夫妻午夜视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产在视频线精品| 日韩一区二区三区影片| 极品少妇高潮喷水抽搐| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲成色77777| a级毛片在线看网站| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产男女内射视频| 99久久综合免费| 最近的中文字幕免费完整| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 欧美最新免费一区二区三区| 久久99精品国语久久久| 亚洲天堂av无毛| 各种免费的搞黄视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 一级毛片我不卡| 在线免费观看不下载黄p国产| 免费黄网站久久成人精品| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 大片电影免费在线观看免费| 观看美女的网站| 99久国产av精品国产电影| 成人二区视频| 男女无遮挡免费网站观看| 亚洲中文av在线| 91久久精品电影网| 免费高清在线观看视频在线观看| 日韩伦理黄色片| 亚洲欧洲日产国产| 女性被躁到高潮视频| 国产精品久久久久久精品古装| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲国产精品999| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 伦理电影大哥的女人| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲综合色惰| 午夜免费鲁丝| 国产成人aa在线观看| 亚洲精品一区蜜桃| 麻豆成人av视频| 在线看a的网站| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 欧美国产精品一级二级三级 | 中文字幕人妻丝袜制服| 免费观看a级毛片全部| 精品久久久久久久久av| 午夜91福利影院| 妹子高潮喷水视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 波野结衣二区三区在线| 欧美日韩在线观看h| 国产亚洲欧美精品永久| av卡一久久| 两个人的视频大全免费| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲欧洲日产国产| 我要看黄色一级片免费的| 欧美 日韩 精品 国产| 两个人免费观看高清视频 | 亚洲国产最新在线播放| 性色av一级| 精品视频人人做人人爽| 波野结衣二区三区在线| 日本色播在线视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 嘟嘟电影网在线观看| 久久久精品免费免费高清| 亚洲成人av在线免费| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 97超视频在线观看视频| 男男h啪啪无遮挡| 三级国产精品片| 免费少妇av软件| 久久久国产精品麻豆| 国产一区二区三区av在线| 精品久久国产蜜桃| 最近手机中文字幕大全| 久久久久久久国产电影| 亚洲,欧美,日韩| 精品人妻偷拍中文字幕| 777米奇影视久久| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 三上悠亚av全集在线观看 | 久久久久久久精品精品| 一级黄片播放器| videos熟女内射| av有码第一页| av免费观看日本| 国产精品女同一区二区软件| 少妇 在线观看| av专区在线播放| 国产精品无大码| 久久热精品热| 亚州av有码| 日日摸夜夜添夜夜爱| 免费在线观看成人毛片| 亚洲av不卡在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 2018国产大陆天天弄谢| 国产亚洲精品久久久com| 97在线人人人人妻| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 一区在线观看完整版| 国产综合精华液| 麻豆乱淫一区二区| 少妇的逼水好多| 天天操日日干夜夜撸| 99热网站在线观看| 美女福利国产在线| 18禁动态无遮挡网站| 欧美人与善性xxx| 日本与韩国留学比较| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 六月丁香七月| 亚洲av不卡在线观看| 亚洲国产日韩一区二区| 最近最新中文字幕免费大全7| 免费观看无遮挡的男女| 亚洲国产成人一精品久久久| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 色视频在线一区二区三区| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲国产精品999| 久久99精品国语久久久| 国产亚洲欧美精品永久| 精品一区二区三区视频在线| 一级爰片在线观看| 欧美xxⅹ黑人| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 久久99一区二区三区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产高清有码在线观看视频| 日本黄色片子视频| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲精品亚洲一区二区| 有码 亚洲区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产欧美日韩精品一区二区| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲内射少妇av| 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美精品高潮呻吟av久久| 免费观看在线日韩| 精品久久久久久电影网| 免费观看性生交大片5| 国产片特级美女逼逼视频| 97在线人人人人妻| 日本黄色日本黄色录像| 国产精品福利在线免费观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 18+在线观看网站| 一区二区三区精品91| 青春草亚洲视频在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 色5月婷婷丁香| 日本av免费视频播放| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | 国精品久久久久久国模美| 国产91av在线免费观看| 三级经典国产精品| 99热网站在线观看| 99久国产av精品国产电影| 精品一区二区三卡| 国产精品一区二区性色av| 亚洲自偷自拍三级| 国产精品久久久久久精品电影小说| 青春草视频在线免费观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 91精品伊人久久大香线蕉| 久久人人爽人人片av| a级片在线免费高清观看视频| 一区二区三区精品91| 嫩草影院新地址| 自线自在国产av| 国产熟女欧美一区二区| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 久久久久网色| 国产又色又爽无遮挡免| 黄片无遮挡物在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 99热这里只有精品一区| 欧美日韩综合久久久久久| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 久久这里有精品视频免费| 免费高清在线观看视频在线观看| 久久综合国产亚洲精品| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产精品国产av在线观看| 成人毛片60女人毛片免费| 日本vs欧美在线观看视频 | 午夜免费男女啪啪视频观看| 成人毛片60女人毛片免费| 黑人高潮一二区| 一区二区三区免费毛片| 久久久久久人妻| 国产成人freesex在线| 中文欧美无线码| 91精品伊人久久大香线蕉| 丁香六月天网| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 男女国产视频网站| 亚洲成人一二三区av| 亚洲经典国产精华液单| 爱豆传媒免费全集在线观看| 老司机亚洲免费影院| 午夜视频国产福利| 深夜a级毛片| 99久久综合免费| 欧美97在线视频| 日日啪夜夜撸| 久久97久久精品| 免费黄频网站在线观看国产| 边亲边吃奶的免费视频| av天堂久久9| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产黄片美女视频| 亚洲自偷自拍三级| 国产日韩欧美视频二区| 国产精品.久久久| 777米奇影视久久| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲欧美日韩东京热| 在线观看免费高清a一片| 国产在线一区二区三区精| 我的老师免费观看完整版| 国产亚洲最大av| 欧美成人精品欧美一级黄| 全区人妻精品视频| 午夜久久久在线观看| 国产精品一二三区在线看| 成人免费观看视频高清| 亚洲精品色激情综合| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产欧美亚洲国产| 日韩中文字幕视频在线看片| 国产视频内射| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 99热网站在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产探花极品一区二区| 亚洲国产精品专区欧美| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久久av网站| 日本av免费视频播放| 久久午夜福利片| 国产成人精品一,二区| 日韩av不卡免费在线播放| 日本av手机在线免费观看| 精品亚洲成a人片在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | 男男h啪啪无遮挡| 成人综合一区亚洲| 最新的欧美精品一区二区| 国产成人a∨麻豆精品| 成年女人在线观看亚洲视频| 欧美精品一区二区免费开放| 亚洲va在线va天堂va国产| 秋霞伦理黄片| 69精品国产乱码久久久| 国产精品嫩草影院av在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产一区二区在线观看av| 狂野欧美激情性bbbbbb| 久久久久久久久久久免费av| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产一级毛片在线| 日本黄大片高清| 观看美女的网站| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲高清免费不卡视频| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 国产精品久久久久久精品电影小说| 国产在线视频一区二区| av免费在线看不卡| 97精品久久久久久久久久精品| av有码第一页| 欧美少妇被猛烈插入视频| 老熟女久久久| 日日啪夜夜撸| 亚洲欧美清纯卡通| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲av.av天堂| 国产乱来视频区| 国产有黄有色有爽视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 又爽又黄a免费视频| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲国产精品999| 亚洲精品色激情综合| 久热久热在线精品观看| 日韩欧美 国产精品| 毛片一级片免费看久久久久| 少妇的逼水好多| 女人精品久久久久毛片| 人妻系列 视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 观看av在线不卡| 国产精品久久久久久精品电影小说| 大香蕉久久网| 国产男女内射视频| av线在线观看网站| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 少妇精品久久久久久久| 成人黄色视频免费在线看| 国产亚洲精品久久久com| 高清欧美精品videossex| 内射极品少妇av片p| 亚洲av福利一区| 久久久久久人妻| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 一级毛片我不卡| 国产精品99久久久久久久久| 国产亚洲欧美精品永久| 久久精品国产亚洲av天美| 日本与韩国留学比较| 成年人午夜在线观看视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 有码 亚洲区| 又爽又黄a免费视频| 欧美日韩视频精品一区| av女优亚洲男人天堂| 黑丝袜美女国产一区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 成年女人在线观看亚洲视频| 极品人妻少妇av视频| 一级av片app| av网站免费在线观看视频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 久久久久久久久久成人| 午夜激情久久久久久久| 亚洲不卡免费看| 男人舔奶头视频| 我要看黄色一级片免费的| 伦理电影大哥的女人| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产淫语在线视频| 国产一区二区在线观看av| 免费看日本二区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲欧美清纯卡通| 久久久国产精品麻豆| 青青草视频在线视频观看| a级一级毛片免费在线观看| 色吧在线观看| 中文字幕亚洲精品专区| 久久99精品国语久久久| 成年人午夜在线观看视频| 黑丝袜美女国产一区| 久久97久久精品| 在线播放无遮挡| 少妇的逼好多水| 亚洲美女搞黄在线观看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 99久国产av精品国产电影| 国产一区二区三区综合在线观看 | 成人免费观看视频高清| 综合色丁香网| 国产精品人妻久久久久久| 午夜激情久久久久久久| 乱码一卡2卡4卡精品| 成人国产麻豆网| 91精品国产九色| 2022亚洲国产成人精品| av女优亚洲男人天堂| 天堂中文最新版在线下载| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲国产日韩一区二区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 男人添女人高潮全过程视频| 久久久久久伊人网av| 熟妇人妻不卡中文字幕| 免费观看a级毛片全部| 在线免费观看不下载黄p国产| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 日日摸夜夜添夜夜爱| 在线精品无人区一区二区三| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 一区在线观看完整版| 青春草国产在线视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久久久精品性色| 日本黄大片高清| 一本大道久久a久久精品| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 久久av网站| 在线观看国产h片| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 欧美精品国产亚洲| 亚洲av成人精品一区久久| 日本vs欧美在线观看视频 | 亚洲av.av天堂| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 在线观看免费日韩欧美大片 | 亚洲成人一二三区av| 国产极品天堂在线| av女优亚洲男人天堂| 高清黄色对白视频在线免费看 | 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 交换朋友夫妻互换小说| 老司机影院成人| 日本黄大片高清| 一本一本综合久久| 欧美三级亚洲精品| 国产亚洲精品久久久com| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 精品国产国语对白av| 黄色日韩在线| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 色94色欧美一区二区| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 黄色配什么色好看| 久久6这里有精品| 黄色一级大片看看| 久久 成人 亚洲| 国产欧美亚洲国产| 国精品久久久久久国模美| 久久久久国产网址| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 午夜日本视频在线| 亚洲精品第二区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲av日韩在线播放| 成年人午夜在线观看视频| 成人毛片60女人毛片免费| 成年人午夜在线观看视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产片特级美女逼逼视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 久久久久网色| 久久热精品热| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产亚洲一区二区精品| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久99热6这里只有精品| 亚洲美女黄色视频免费看| 91精品国产九色| 3wmmmm亚洲av在线观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 极品人妻少妇av视频| 91成人精品电影| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 欧美另类一区| 日韩成人伦理影院| 91久久精品国产一区二区三区| 一个人免费看片子| 桃花免费在线播放| 一个人免费看片子| 欧美精品国产亚洲| 人妻 亚洲 视频| 亚洲国产精品一区三区| 99国产精品免费福利视频| 日日爽夜夜爽网站| 国产精品一区二区在线观看99| 人妻人人澡人人爽人人| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲精品国产成人久久av| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 日本爱情动作片www.在线观看| 少妇高潮的动态图| 丰满少妇做爰视频| 大话2 男鬼变身卡| 日韩 亚洲 欧美在线| 蜜臀久久99精品久久宅男| 丰满饥渴人妻一区二区三| 亚洲熟女精品中文字幕| 熟妇人妻不卡中文字幕| 七月丁香在线播放| 免费少妇av软件| a级毛片免费高清观看在线播放| 91精品一卡2卡3卡4卡| 人人澡人人妻人| 女人久久www免费人成看片| 午夜91福利影院| 日本黄大片高清| 少妇 在线观看| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 亚洲自偷自拍三级| 国产伦精品一区二区三区四那| 18禁在线播放成人免费| 亚洲中文av在线| 插阴视频在线观看视频| 全区人妻精品视频| 亚洲精品日本国产第一区| 亚洲精品自拍成人| 热re99久久精品国产66热6| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久久久久伊人网av| 男人添女人高潮全过程视频| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲欧美日韩东京热| videossex国产| 午夜福利网站1000一区二区三区| 秋霞在线观看毛片| av福利片在线| 极品少妇高潮喷水抽搐| 日韩av免费高清视频| 色5月婷婷丁香| 国产成人a∨麻豆精品| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 一个人看视频在线观看www免费| 男男h啪啪无遮挡| 国产成人精品久久久久久| 最近的中文字幕免费完整| av免费观看日本| 中文在线观看免费www的网站| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 人妻一区二区av| 国产成人免费无遮挡视频| 久久久久久久久久人人人人人人| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲精品视频女| 三上悠亚av全集在线观看 | 精品久久久噜噜| av天堂久久9| 女人久久www免费人成看片| 久久国内精品自在自线图片| a级毛片在线看网站| 欧美成人精品欧美一级黄| 中国三级夫妇交换| 国产又色又爽无遮挡免| 国产成人免费无遮挡视频| 免费观看av网站的网址| 亚洲精品成人av观看孕妇| 免费播放大片免费观看视频在线观看| videos熟女内射| 日韩强制内射视频| 一个人看视频在线观看www免费| 性色avwww在线观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 三上悠亚av全集在线观看 | 一级毛片aaaaaa免费看小| 视频中文字幕在线观看|