浙江麗水地區(qū)畬族獻血人群稀有血型調(diào)查

紀勇平，趙龍友， 莊 杰，周 斌

(麗水市中心血站，浙江麗水323000)

人類血型抗原的基因頻率與分布狀況，隨著民族和地域的不同，會有很大的差異性。畬族作為我國一個歷史悠久的散居少數(shù)民族，全國約有人口70萬，公元二世紀至五世紀就已經(jīng)在長江中下游居住，目前主要分布在浙江和福建省的交界地帶，而浙江麗水為其主要的聚居區(qū)。目前國內(nèi)對于畬族稀有血型的篩查和研究較為局限，部分紅細胞血型的頻率尚不清楚。為獲得畬族人群更多的血型抗原信息資料，進一步開展紅細胞血型抗原的生物學研究，同時解決臨床稀有血型輸配血困難等問題，我們對浙江麗水地區(qū)3 580例非血緣關(guān)系的麗水地區(qū)畬族獻血者樣本進行了抗Ena、抗 H、抗 Lub、抗 Ge、Jk(a-b-)、抗 Wrb和成人i陽性等紅細胞稀有血型的頻率與分布情況進行了研究。

一、材料和方法

1.樣本來源 選擇無血緣關(guān)系且父母3代均為畬族的獻血者為研究對象，共計3 580例，其中男2 055例，女1 525例，年齡18～55周歲。其中O型樣本1 498例。分別采取靜脈血3 mL，用EDTA抗凝，將受檢者血樣配制成3%紅細胞懸液備用。

2.試劑儀器 抗-H、抗-i、和鼠源性抗-GPA、抗-GPC 、抗-Lub(批號:20120710)、抗-Wrb以及羊抗鼠IgG(二抗)均由上海市血液中心提供。分析純尿素試劑:使用前配制為2 mol/L濃度的應(yīng)用液。KA-2200血庫專用離心機(KUBOTA公司)、振蕩器(Heidolph Titramax 101)、平板離心機(KUBOTA 8100)，U型96孔微量板(蘇州康容生物公司)。

3.篩選方法 96孔微量板法篩選成人i陽性血型、孟買/類孟買血型和Ge-血型 在96孔微量板中加入3%受檢紅細胞懸液20μL，并加入對應(yīng)的抗體應(yīng)用液20μL。置振蕩器上振蕩15 s混勻后在平板離心機以90×g離心5 min，輕敲板側(cè)觀察結(jié)果，紅細胞凝集為陽性，反之為陰性。成人i血型篩選，以新鮮臍血紅細胞作陽性對照。孟買/類孟買血型篩選只選擇初篩為O型的紅細胞樣本。

96孔微量板法篩選 Lub-血型、Ena-血型和Wrb-血型在96孔微量板中加入受檢紅細胞懸液20μL，并加入對應(yīng)的抗體20μL，800 rpm振蕩15 s混勻。將混勻后的96孔板加蓋置37℃水浴30 min，再加入二抗40μL，振蕩混勻后在平板離心機以90×g離心5 min，輕敲板側(cè)判讀結(jié)果。紅細胞凝集為陽性，反之為陰性。

96孔板篩選Jk(a-b-)表型每孔加入受檢者紅細胞懸液20μL及2 mol/L尿素溶液100μL，800 rpm振蕩15 s混勻，在平板離心機上560×g離心1 min，判讀結(jié)果。Jk(a+b+)、Jk(a+b-)、Jk(a-b+)表型紅細胞在尿素溶液中立即溶血，而Jk(a-b-)表型紅細胞在2M尿素下可保持30 min內(nèi)不溶血。

稀有血型的確認經(jīng)上述方法初篩為稀有血型的樣本，分別通過鹽水凝集試驗或間接抗球蛋白試驗等血清學試管方法進行復查確認。

二、結(jié)果

在3 580例畬族獻血人群中分別篩選出Jk(a-b-)及 wrb-各 1例;未發(fā)現(xiàn) Ena-、Ge-、Lub-、成人i陽性等表型;對其中1 498例O型獻血者進行篩選，未篩選出孟買/類孟買血型。結(jié)果見表1。

表1 浙江麗水畬族獻血人群稀有血型篩選結(jié)果

三、討論

中國是一個人口眾多的多民族國家，不同的民族和地域，人類血型抗原頻率分布不盡相同。目前國內(nèi)對于畬族稀有血型研究較少［1-2］，而浙江麗水畬族獻血人群 Lub-、Ena-、Ge-、Wrb-、Jk(ab-)、H-和成人i等紅細胞血型抗原的篩查目前尚未見報道。

Kidd(Jk)血型系統(tǒng)的相關(guān)抗體可引起速發(fā)和遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)，偶爾可引起新生兒溶血病，對Jk(a-b-)表型及其分子生物學研究，對于預防輸血反應(yīng)有較為重要的免疫學意義。本研究對3 580例畬族獻血者樣本篩查發(fā)現(xiàn)，浙江麗水畬族獻血人群中Jk(a-b-)表型頻率為0.028%，與國內(nèi)報道的廣西壯族人群Jk(a-b-)表型頻率為0.044%［3］，上海地區(qū)人群為0.004%［4］和新疆地區(qū)漢族人群為0.006%［5］有一定差異，而與廣東番禺地區(qū)獻血人群的0.029%［6］接近，低于太平洋群島波利尼亞人 0.10%～0.14%［7］，表明 Jk(a-b-)的表型頻率存在地區(qū)及民族分布的差異性。

抗-Wrb多為IgG性質(zhì)的抗體，可引起溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病，Wrb抗原陰性多存在于南美印第安人、美國土著人與蒙古人中。本研究調(diào)查在3 580例畬族獻血者樣本中篩選出一例Wrb-表型的稀有血型，表型頻率為0.028%。而在國內(nèi)新疆維吾爾族、廣州番禺地區(qū)漢族、廣西壯族等人群調(diào)查中均未發(fā)現(xiàn)相同的表型。

同時，在本次篩查中3 580例畬族獻血者樣本中未發(fā)現(xiàn) Ena-、Ge-、Lub-、成人 i等稀有表型，對其中1 498例O型獻血者進行篩選，未篩選出孟買/類孟買血型。而在國內(nèi)廣西壯族及廣東番禺地區(qū)漢族人群的調(diào)查中Lub-表型頻率分別為1.26%和 0.048%［3，6］。1989年臺灣 Yang 等［8］曾報道922名中國人全部為Lu(a-b+)表型。

本研究針對浙江麗水地區(qū)畬族獻血人群Ena-、H-、Lub-、Ge-、Jk(a-b-)、Wrb-和成人 i陽性等紅細胞稀有血型的頻率篩查，結(jié)果顯示浙江麗水地區(qū)畬族作為一個少數(shù)民族群體，人群中稀有血型的表型頻率有其特點。同時本次篩查為進一步開展紅細胞血型抗原的生物學研究，提供了詳實的畬族少數(shù)民族的血型信息和數(shù)據(jù)。為有針對性地向本地區(qū)少數(shù)民族提供良好的輸配血服務(wù)，提高臨床輸血安全發(fā)揮積極作用。

［1］周火根，金 蕾，傅啟華.浙江畬族Kidd、Duffy血型基因型的調(diào)查［J］.中國輸血雜志，2001，14(4):239.

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［4］朱自嚴，沈 偉，陳和平，等.上海地區(qū)部分人群Jk(a-b-)、Dib-、Wrb-、K0、Ena-、Tja-、Ge-稀有血型篩選［J］.中國輸血雜志，2002，15(4):232-233.

［5］方春富，吐遜古麗，周麗君，等.新疆人群稀有血型篩選結(jié)果分析［J］.中國輸血雜志，2011，24(8):696-697.

［6］嚴康峰，鄧詩楨，曾玫玫，等.廣州番禺地區(qū)獻血人群稀有血型的篩選［J］.中國輸血雜志，2007，20(4):290-291.

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［8］李 勇，馬嚴學.實用血液免疫學血型理論和實驗技術(shù)［M］.北京:科學出版社，2006:237-238.