待定模板印跡聚合物對高豐度雞蛋清蛋白質(zhì)的脫除

楊春　欒新杰　劉國峰　周興璐　王建　胡效亞

1引言

在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，人們已經(jīng)積累了大量關(guān)于已知蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)。 目前的研究重點(diǎn)主要集中在發(fā)現(xiàn)具有新功能、或與疾病診斷和治療相關(guān)的蛋白質(zhì)方面＼[1＼]。為了從復(fù)雜樣品里提取和鑒定未知的低豐度蛋白質(zhì)，樣品分離或高豐度蛋白質(zhì)的脫除是十分必要的＼[2～4＼]。在各種蛋白質(zhì)脫除方法中，使用抗體、染料或者配基的親和技術(shù)是最常用的方法＼[5～10＼]，其它方法還包括多維分離＼[11＼]、限進(jìn)介質(zhì)（Restrictedaccess）材料＼[12＼]或者集成方法＼[13，14＼]。

印跡材料廣泛涉及分子識別、分離及催化等領(lǐng)域＼[15～21＼]，其中，冰膠（Cryogel）聚合物是一種大孔親水性材料，具有良好的穩(wěn)定性及傳質(zhì)性能，適于大分子（如蛋白質(zhì)）的印跡研究，也可用于高豐度蛋白質(zhì)的脫除＼[22＼]。本研究組曾報(bào)道了處理復(fù)雜樣品的冰膠材料，其中“待定模板”印跡聚合物起著關(guān)鍵作用，印跡位點(diǎn)的種類及數(shù)量可通過改變模板的濃度進(jìn)行調(diào)節(jié)＼[23，24＼]。這類聚合物可將樣品拆分為兩部分。一部分吸附在聚合物上，一部分保留在溶液中。根據(jù)這種方法，理論上可用n個聚合物將復(fù)雜樣品分成任意n+1份，充分降低樣品的復(fù)雜性，從而有利于蛋白質(zhì)組學(xué)研究或生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)。

本研究合成了4個冰膠聚合物，其中3個印跡聚合物均顯示出高豐度蛋白質(zhì)的脫除能力。在去除部分高豐度組分之后，流出液仍有3組蛋白質(zhì)的信號。硼酸吸附實(shí)驗(yàn)表明，它們可能是糖基化成分。“待定模板”印跡聚合物在脫除高豐度蛋白質(zhì)的同時，能夠保留從而富集翻譯后修飾蛋白質(zhì)（如糖蛋白等）。

2實(shí)驗(yàn)部分

2.1材料與試劑

1引言

在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，人們已經(jīng)積累了大量關(guān)于已知蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)。 目前的研究重點(diǎn)主要集中在發(fā)現(xiàn)具有新功能、或與疾病診斷和治療相關(guān)的蛋白質(zhì)方面＼[1＼]。為了從復(fù)雜樣品里提取和鑒定未知的低豐度蛋白質(zhì)，樣品分離或高豐度蛋白質(zhì)的脫除是十分必要的＼[2～4＼]。在各種蛋白質(zhì)脫除方法中，使用抗體、染料或者配基的親和技術(shù)是最常用的方法＼[5～10＼]，其它方法還包括多維分離＼[11＼]、限進(jìn)介質(zhì)（Restrictedaccess）材料＼[12＼]或者集成方法＼[13，14＼]。

印跡材料廣泛涉及分子識別、分離及催化等領(lǐng)域＼[15～21＼]，其中，冰膠（Cryogel）聚合物是一種大孔親水性材料，具有良好的穩(wěn)定性及傳質(zhì)性能，適于大分子（如蛋白質(zhì)）的印跡研究，也可用于高豐度蛋白質(zhì)的脫除＼[22＼]。本研究組曾報(bào)道了處理復(fù)雜樣品的冰膠材料，其中“待定模板”印跡聚合物起著關(guān)鍵作用，印跡位點(diǎn)的種類及數(shù)量可通過改變模板的濃度進(jìn)行調(diào)節(jié)＼[23，24＼]。這類聚合物可將樣品拆分為兩部分。一部分吸附在聚合物上，一部分保留在溶液中。根據(jù)這種方法，理論上可用n個聚合物將復(fù)雜樣品分成任意n+1份，充分降低樣品的復(fù)雜性，從而有利于蛋白質(zhì)組學(xué)研究或生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)。

本研究合成了4個冰膠聚合物，其中3個印跡聚合物均顯示出高豐度蛋白質(zhì)的脫除能力。在去除部分高豐度組分之后，流出液仍有3組蛋白質(zhì)的信號。硼酸吸附實(shí)驗(yàn)表明，它們可能是糖基化成分。“待定模板”印跡聚合物在脫除高豐度蛋白質(zhì)的同時，能夠保留從而富集翻譯后修飾蛋白質(zhì)（如糖蛋白等）。

2實(shí)驗(yàn)部分

2.1材料與試劑

1引言

在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，人們已經(jīng)積累了大量關(guān)于已知蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)。 目前的研究重點(diǎn)主要集中在發(fā)現(xiàn)具有新功能、或與疾病診斷和治療相關(guān)的蛋白質(zhì)方面＼[1＼]。為了從復(fù)雜樣品里提取和鑒定未知的低豐度蛋白質(zhì)，樣品分離或高豐度蛋白質(zhì)的脫除是十分必要的＼[2～4＼]。在各種蛋白質(zhì)脫除方法中，使用抗體、染料或者配基的親和技術(shù)是最常用的方法＼[5～10＼]，其它方法還包括多維分離＼[11＼]、限進(jìn)介質(zhì)（Restrictedaccess）材料＼[12＼]或者集成方法＼[13，14＼]。

印跡材料廣泛涉及分子識別、分離及催化等領(lǐng)域＼[15～21＼]，其中，冰膠（Cryogel）聚合物是一種大孔親水性材料，具有良好的穩(wěn)定性及傳質(zhì)性能，適于大分子（如蛋白質(zhì)）的印跡研究，也可用于高豐度蛋白質(zhì)的脫除＼[22＼]。本研究組曾報(bào)道了處理復(fù)雜樣品的冰膠材料，其中“待定模板”印跡聚合物起著關(guān)鍵作用，印跡位點(diǎn)的種類及數(shù)量可通過改變模板的濃度進(jìn)行調(diào)節(jié)＼[23，24＼]。這類聚合物可將樣品拆分為兩部分。一部分吸附在聚合物上，一部分保留在溶液中。根據(jù)這種方法，理論上可用n個聚合物將復(fù)雜樣品分成任意n+1份，充分降低樣品的復(fù)雜性，從而有利于蛋白質(zhì)組學(xué)研究或生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)。

本研究合成了4個冰膠聚合物，其中3個印跡聚合物均顯示出高豐度蛋白質(zhì)的脫除能力。在去除部分高豐度組分之后，流出液仍有3組蛋白質(zhì)的信號。硼酸吸附實(shí)驗(yàn)表明，它們可能是糖基化成分。“待定模板”印跡聚合物在脫除高豐度蛋白質(zhì)的同時，能夠保留從而富集翻譯后修飾蛋白質(zhì)（如糖蛋白等）。

2實(shí)驗(yàn)部分

2.1材料與試劑