殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌的抑制作用

顧麗嬙

摘要：研究了殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌的抑制作用，分別測(cè)定在不同濃度梯度下灰霉病菌的菌落直徑、產(chǎn)孢量、孢子萌發(fā)率，觀察了殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)形態(tài)的影響。結(jié)果表明，殼寡糖的濃度越大對(duì)灰霉病菌的抑制作用越明顯，1 500 mg/L 的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率1 d時(shí)為100%，2 d為86.32%，5 d為81.95%，菌絲形態(tài)發(fā)生顯著變化，菌絲直徑明顯增粗，菌隔增多，該濃度下對(duì)灰霉病菌的產(chǎn)孢抑制率達(dá)到83.82%，抑制孢子萌發(fā)率達(dá)52.97%。殼寡糖對(duì)灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)2 d的EC50為346.96 mg/L，對(duì)灰霉病菌產(chǎn)孢的EC50為521.96 mg/L，對(duì)孢子萌發(fā)的EC50為1 451.59 mg/L。

關(guān)鍵詞：殼寡糖；灰霉病菌；菌絲生長(zhǎng)；產(chǎn)孢；EC50

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

灰霉病菌：采自河北省唐山市郊區(qū)保護(hù)地番茄灰霉病果，PDA培養(yǎng)基分離、純化。殼寡糖：相對(duì)分子質(zhì)量≤3 000，脫乙酰度（DD）≥85%（浙江澳興科技生物有限公司生產(chǎn)）。番茄品種：巨豐（唐山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院科技開發(fā)中心提供）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢影響的測(cè)定制備含殼寡糖濃度為300、600、900、1 200、1 500 mg/L 的含藥平板，用打孔法反接5 mm的灰霉菌菌餅。25 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每天測(cè)量菌落直徑，待對(duì)照組菌落長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿為止，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。光暗周期12 h-12 h交替條件下繼續(xù)培養(yǎng)產(chǎn)孢，分別取各濃度梯度的菌落打取直徑為5 mm的菌餅5個(gè)，用2 mL無菌水配制成孢懸液，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，計(jì)算產(chǎn)孢抑制率。分別求出毒力回歸方程，計(jì)算EC50。

菌絲生長(zhǎng)抑制率=（對(duì)照組菌落直徑-處理組菌落直徑）/（對(duì)照組菌落直徑-5 mm）×100%；

產(chǎn)孢量=（孢子平均數(shù)/80）×4×106。

1.2.2殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌孢子萌發(fā)影響的測(cè)定灰霉病菌培養(yǎng)9～10 d后使其產(chǎn)孢，加無菌水稀釋至40倍鏡下每視野20～30個(gè)，用凹玻片加不同濃度的殼寡糖21 ℃黑暗培養(yǎng)12 h后，計(jì)算抑制孢子萌發(fā)率，求出毒力回歸方程，計(jì)算EC50。

孢子萌發(fā)率=萌發(fā)孢子數(shù)/視野下總孢子數(shù)×100%；

抑制孢子萌發(fā)率=（對(duì)照孢子萌發(fā)率-處理孢子萌發(fā)率）/對(duì)照孢子萌發(fā)率×100%。

1.2.3殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲形態(tài)影響的觀察在PDA平板上反接灰霉病菌2 d后，在菌落邊緣加0.2 mL的不同濃度殼寡糖溶液后豎插蓋玻片，待菌絲長(zhǎng)到蓋玻片上，取出，直接觀察菌絲形態(tài)進(jìn)行比較。

2結(jié)果與分析

2.1殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用

從表1可以看出，菌落直徑隨著殼寡糖濃度的增大呈現(xiàn)遞降的趨勢(shì)，濃度越大抑菌效果越明顯，其中300 mg/L殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率1 d時(shí)為32.12%，2 d為4735%，5 d為21.48%，1 500 mg/L的抑制率1 d時(shí)為100%，2 d為8632%，5 d為81.95%，900 mg/L以上的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率5 d內(nèi)均大于50%，1 500 mg/L 的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)抑制率5 d內(nèi)均大于80%。由表2可見，不同處理天數(shù)下，殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制中濃度EC50不同。其中2 d的EC50最小，為34696 mg/L，5 d的EC50最大，為629.65 mg/L。

2.2殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌孢子產(chǎn)生及萌發(fā)的抑制作用

從表3可見，殼寡糖對(duì)灰霉病菌的產(chǎn)孢量和孢子萌發(fā)率都有明顯的抑制作用，并且隨著處理濃度的升高產(chǎn)孢量和萌發(fā)量降低，抑制率增大。300 mg/L條件下，比對(duì)照組產(chǎn)孢量減少1.84×107個(gè)，抑制率達(dá)33.82%；孢子萌發(fā)率降低1360百分點(diǎn)，抑制孢子萌發(fā)率達(dá)到18.38%。

2.3殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲形態(tài)的影響

通過顯微觀察，對(duì)照組菌絲細(xì)長(zhǎng)、細(xì)胞壁光滑（圖1）；而不同濃度梯度的殼寡糖溶液處理組菌絲則出現(xiàn)不同程度的腫脹、菌絲變粗、分隔增多現(xiàn)象。殼寡糖濃度越大菌絲形態(tài)變化越明顯（圖2、圖3）。

3結(jié)論與討論

為了減少對(duì)灰霉病防治的農(nóng)藥使用，科研人員研究了不同抑菌物質(zhì)對(duì)灰霉病菌的抑制作用。黃芳等研究結(jié)果表明，用0.1% 硼處理灰霉病菌孢子后， 顯著抑制了孢子萌發(fā)和芽管伸

長(zhǎng)[4]；白文苑等研究蒼耳的丙酮提取物，其抑制菌絲生長(zhǎng)的EC50 為20. 27 mg/mL，在30 mg/mL 濃度下，對(duì)番茄灰霉菌孢子形成和孢子萌發(fā)的抑制率均在70%以上，對(duì)孢子形成和孢子萌發(fā)的EC50 分別為9. 06 、15. 21 mg/mL[5]；廖敏等研究結(jié)果表明，硅酸鈉在一定程度上能抑制灰霉病菌的生長(zhǎng)[6]。本試驗(yàn)研究可食用的殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明，1 500 mg/L殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率均在80%以上，殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)2dEC50使用濃度為

346.96 mg/L，低于蒼耳丙酮提取物；而對(duì)菌絲形態(tài)變化的觀察表明，在濃度為1 500 mg/L時(shí)，出現(xiàn)最大程度的腫脹、菌絲變粗、分隔增多的現(xiàn)象。1 500 mg/L殼寡糖對(duì)灰霉菌產(chǎn)孢量抑制率高達(dá)83. 82%，對(duì)孢子萌發(fā)的最大抑制率達(dá)55.97%。表明殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌生長(zhǎng)有一定的抑制作用，本試驗(yàn)結(jié)果為殼寡糖作為一種綠色藥劑防治番茄灰霉病提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]王克勤. 灰霉病菌抗藥性研究進(jìn)展及防治對(duì)策[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2000，7（5）：40-42.

[2]張新虎，何靜，沈慧敏. 蒼耳提取物對(duì)番茄灰霉病菌的抑制作用及抑菌機(jī)理初探[J]. 草業(yè)學(xué)報(bào)，2008，17（3）：99-104.

[3]張?bào)蓿霹i，張亞東. 殼寡糖抑菌作用的研究[J]. 食品工業(yè)科技，2009，30（1）：88-90.

[4]黃芳，王建明，徐玉梅. 硼抑制灰霉病菌孢子萌發(fā)機(jī)制的初步研究[J]. 植物病理學(xué)報(bào)，2008，38（4）：370-376.

[5]白文苑，沈慧敏. 蒼耳愈傷組織提取物對(duì)番茄灰霉病菌的抑菌活性[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，43（4）：82-86.

[6]廖敏，李淼. 硅對(duì)草莓灰霉病的防治效果研究[J]. 宿州教育學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，14（2）：174-176.王程亮，徐麗君，倪萌，等. 無錫地區(qū)桃園梨小食心蟲發(fā)生規(guī)律[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（9）：117-119.

摘要：研究了殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌的抑制作用，分別測(cè)定在不同濃度梯度下灰霉病菌的菌落直徑、產(chǎn)孢量、孢子萌發(fā)率，觀察了殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)形態(tài)的影響。結(jié)果表明，殼寡糖的濃度越大對(duì)灰霉病菌的抑制作用越明顯，1 500 mg/L 的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率1 d時(shí)為100%，2 d為86.32%，5 d為81.95%，菌絲形態(tài)發(fā)生顯著變化，菌絲直徑明顯增粗，菌隔增多，該濃度下對(duì)灰霉病菌的產(chǎn)孢抑制率達(dá)到83.82%，抑制孢子萌發(fā)率達(dá)52.97%。殼寡糖對(duì)灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)2 d的EC50為346.96 mg/L，對(duì)灰霉病菌產(chǎn)孢的EC50為521.96 mg/L，對(duì)孢子萌發(fā)的EC50為1 451.59 mg/L。

關(guān)鍵詞：殼寡糖；灰霉病菌；菌絲生長(zhǎng)；產(chǎn)孢；EC50

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

灰霉病菌：采自河北省唐山市郊區(qū)保護(hù)地番茄灰霉病果，PDA培養(yǎng)基分離、純化。殼寡糖：相對(duì)分子質(zhì)量≤3 000，脫乙酰度（DD）≥85%（浙江澳興科技生物有限公司生產(chǎn)）。番茄品種：巨豐（唐山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院科技開發(fā)中心提供）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢影響的測(cè)定制備含殼寡糖濃度為300、600、900、1 200、1 500 mg/L 的含藥平板，用打孔法反接5 mm的灰霉菌菌餅。25 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每天測(cè)量菌落直徑，待對(duì)照組菌落長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿為止，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。光暗周期12 h-12 h交替條件下繼續(xù)培養(yǎng)產(chǎn)孢，分別取各濃度梯度的菌落打取直徑為5 mm的菌餅5個(gè)，用2 mL無菌水配制成孢懸液，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，計(jì)算產(chǎn)孢抑制率。分別求出毒力回歸方程，計(jì)算EC50。

菌絲生長(zhǎng)抑制率=（對(duì)照組菌落直徑-處理組菌落直徑）/（對(duì)照組菌落直徑-5 mm）×100%；

產(chǎn)孢量=（孢子平均數(shù)/80）×4×106。

1.2.2殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌孢子萌發(fā)影響的測(cè)定灰霉病菌培養(yǎng)9～10 d后使其產(chǎn)孢，加無菌水稀釋至40倍鏡下每視野20～30個(gè)，用凹玻片加不同濃度的殼寡糖21 ℃黑暗培養(yǎng)12 h后，計(jì)算抑制孢子萌發(fā)率，求出毒力回歸方程，計(jì)算EC50。

孢子萌發(fā)率=萌發(fā)孢子數(shù)/視野下總孢子數(shù)×100%；

抑制孢子萌發(fā)率=（對(duì)照孢子萌發(fā)率-處理孢子萌發(fā)率）/對(duì)照孢子萌發(fā)率×100%。

1.2.3殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲形態(tài)影響的觀察在PDA平板上反接灰霉病菌2 d后，在菌落邊緣加0.2 mL的不同濃度殼寡糖溶液后豎插蓋玻片，待菌絲長(zhǎng)到蓋玻片上，取出，直接觀察菌絲形態(tài)進(jìn)行比較。

2結(jié)果與分析

2.1殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用

從表1可以看出，菌落直徑隨著殼寡糖濃度的增大呈現(xiàn)遞降的趨勢(shì)，濃度越大抑菌效果越明顯，其中300 mg/L殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率1 d時(shí)為32.12%，2 d為4735%，5 d為21.48%，1 500 mg/L的抑制率1 d時(shí)為100%，2 d為8632%，5 d為81.95%，900 mg/L以上的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率5 d內(nèi)均大于50%，1 500 mg/L 的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)抑制率5 d內(nèi)均大于80%。由表2可見，不同處理天數(shù)下，殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制中濃度EC50不同。其中2 d的EC50最小，為34696 mg/L，5 d的EC50最大，為629.65 mg/L。

2.2殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌孢子產(chǎn)生及萌發(fā)的抑制作用

從表3可見，殼寡糖對(duì)灰霉病菌的產(chǎn)孢量和孢子萌發(fā)率都有明顯的抑制作用，并且隨著處理濃度的升高產(chǎn)孢量和萌發(fā)量降低，抑制率增大。300 mg/L條件下，比對(duì)照組產(chǎn)孢量減少1.84×107個(gè)，抑制率達(dá)33.82%；孢子萌發(fā)率降低1360百分點(diǎn)，抑制孢子萌發(fā)率達(dá)到18.38%。

2.3殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲形態(tài)的影響

通過顯微觀察，對(duì)照組菌絲細(xì)長(zhǎng)、細(xì)胞壁光滑（圖1）；而不同濃度梯度的殼寡糖溶液處理組菌絲則出現(xiàn)不同程度的腫脹、菌絲變粗、分隔增多現(xiàn)象。殼寡糖濃度越大菌絲形態(tài)變化越明顯（圖2、圖3）。

3結(jié)論與討論

為了減少對(duì)灰霉病防治的農(nóng)藥使用，科研人員研究了不同抑菌物質(zhì)對(duì)灰霉病菌的抑制作用。黃芳等研究結(jié)果表明，用0.1% 硼處理灰霉病菌孢子后， 顯著抑制了孢子萌發(fā)和芽管伸

長(zhǎng)[4]；白文苑等研究蒼耳的丙酮提取物，其抑制菌絲生長(zhǎng)的EC50 為20. 27 mg/mL，在30 mg/mL 濃度下，對(duì)番茄灰霉菌孢子形成和孢子萌發(fā)的抑制率均在70%以上，對(duì)孢子形成和孢子萌發(fā)的EC50 分別為9. 06 、15. 21 mg/mL[5]；廖敏等研究結(jié)果表明，硅酸鈉在一定程度上能抑制灰霉病菌的生長(zhǎng)[6]。本試驗(yàn)研究可食用的殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明，1 500 mg/L殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率均在80%以上，殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)2dEC50使用濃度為

346.96 mg/L，低于蒼耳丙酮提取物；而對(duì)菌絲形態(tài)變化的觀察表明，在濃度為1 500 mg/L時(shí)，出現(xiàn)最大程度的腫脹、菌絲變粗、分隔增多的現(xiàn)象。1 500 mg/L殼寡糖對(duì)灰霉菌產(chǎn)孢量抑制率高達(dá)83. 82%，對(duì)孢子萌發(fā)的最大抑制率達(dá)55.97%。表明殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌生長(zhǎng)有一定的抑制作用，本試驗(yàn)結(jié)果為殼寡糖作為一種綠色藥劑防治番茄灰霉病提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]王克勤. 灰霉病菌抗藥性研究進(jìn)展及防治對(duì)策[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2000，7（5）：40-42.

[2]張新虎，何靜，沈慧敏. 蒼耳提取物對(duì)番茄灰霉病菌的抑制作用及抑菌機(jī)理初探[J]. 草業(yè)學(xué)報(bào)，2008，17（3）：99-104.

[3]張?bào)?，杜鵬，張亞東. 殼寡糖抑菌作用的研究[J]. 食品工業(yè)科技，2009，30（1）：88-90.

[4]黃芳，王建明，徐玉梅. 硼抑制灰霉病菌孢子萌發(fā)機(jī)制的初步研究[J]. 植物病理學(xué)報(bào)，2008，38（4）：370-376.

[5]白文苑，沈慧敏. 蒼耳愈傷組織提取物對(duì)番茄灰霉病菌的抑菌活性[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，43（4）：82-86.

[6]廖敏，李淼. 硅對(duì)草莓灰霉病的防治效果研究[J]. 宿州教育學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，14（2）：174-176.王程亮，徐麗君，倪萌，等. 無錫地區(qū)桃園梨小食心蟲發(fā)生規(guī)律[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（9）：117-119.

摘要：研究了殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌的抑制作用，分別測(cè)定在不同濃度梯度下灰霉病菌的菌落直徑、產(chǎn)孢量、孢子萌發(fā)率，觀察了殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)形態(tài)的影響。結(jié)果表明，殼寡糖的濃度越大對(duì)灰霉病菌的抑制作用越明顯，1 500 mg/L 的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率1 d時(shí)為100%，2 d為86.32%，5 d為81.95%，菌絲形態(tài)發(fā)生顯著變化，菌絲直徑明顯增粗，菌隔增多，該濃度下對(duì)灰霉病菌的產(chǎn)孢抑制率達(dá)到83.82%，抑制孢子萌發(fā)率達(dá)52.97%。殼寡糖對(duì)灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)2 d的EC50為346.96 mg/L，對(duì)灰霉病菌產(chǎn)孢的EC50為521.96 mg/L，對(duì)孢子萌發(fā)的EC50為1 451.59 mg/L。

關(guān)鍵詞：殼寡糖；灰霉病菌；菌絲生長(zhǎng)；產(chǎn)孢；EC50

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

灰霉病菌：采自河北省唐山市郊區(qū)保護(hù)地番茄灰霉病果，PDA培養(yǎng)基分離、純化。殼寡糖：相對(duì)分子質(zhì)量≤3 000，脫乙酰度（DD）≥85%（浙江澳興科技生物有限公司生產(chǎn)）。番茄品種：巨豐（唐山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院科技開發(fā)中心提供）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢影響的測(cè)定制備含殼寡糖濃度為300、600、900、1 200、1 500 mg/L 的含藥平板，用打孔法反接5 mm的灰霉菌菌餅。25 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每天測(cè)量菌落直徑，待對(duì)照組菌落長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿為止，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。光暗周期12 h-12 h交替條件下繼續(xù)培養(yǎng)產(chǎn)孢，分別取各濃度梯度的菌落打取直徑為5 mm的菌餅5個(gè)，用2 mL無菌水配制成孢懸液，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，計(jì)算產(chǎn)孢抑制率。分別求出毒力回歸方程，計(jì)算EC50。

菌絲生長(zhǎng)抑制率=（對(duì)照組菌落直徑-處理組菌落直徑）/（對(duì)照組菌落直徑-5 mm）×100%；

產(chǎn)孢量=（孢子平均數(shù)/80）×4×106。

1.2.2殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌孢子萌發(fā)影響的測(cè)定灰霉病菌培養(yǎng)9～10 d后使其產(chǎn)孢，加無菌水稀釋至40倍鏡下每視野20～30個(gè)，用凹玻片加不同濃度的殼寡糖21 ℃黑暗培養(yǎng)12 h后，計(jì)算抑制孢子萌發(fā)率，求出毒力回歸方程，計(jì)算EC50。

孢子萌發(fā)率=萌發(fā)孢子數(shù)/視野下總孢子數(shù)×100%；

抑制孢子萌發(fā)率=（對(duì)照孢子萌發(fā)率-處理孢子萌發(fā)率）/對(duì)照孢子萌發(fā)率×100%。

1.2.3殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲形態(tài)影響的觀察在PDA平板上反接灰霉病菌2 d后，在菌落邊緣加0.2 mL的不同濃度殼寡糖溶液后豎插蓋玻片，待菌絲長(zhǎng)到蓋玻片上，取出，直接觀察菌絲形態(tài)進(jìn)行比較。

2結(jié)果與分析

2.1殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用

從表1可以看出，菌落直徑隨著殼寡糖濃度的增大呈現(xiàn)遞降的趨勢(shì)，濃度越大抑菌效果越明顯，其中300 mg/L殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率1 d時(shí)為32.12%，2 d為4735%，5 d為21.48%，1 500 mg/L的抑制率1 d時(shí)為100%，2 d為8632%，5 d為81.95%，900 mg/L以上的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率5 d內(nèi)均大于50%，1 500 mg/L 的殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)抑制率5 d內(nèi)均大于80%。由表2可見，不同處理天數(shù)下，殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制中濃度EC50不同。其中2 d的EC50最小，為34696 mg/L，5 d的EC50最大，為629.65 mg/L。

2.2殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌孢子產(chǎn)生及萌發(fā)的抑制作用

從表3可見，殼寡糖對(duì)灰霉病菌的產(chǎn)孢量和孢子萌發(fā)率都有明顯的抑制作用，并且隨著處理濃度的升高產(chǎn)孢量和萌發(fā)量降低，抑制率增大。300 mg/L條件下，比對(duì)照組產(chǎn)孢量減少1.84×107個(gè)，抑制率達(dá)33.82%；孢子萌發(fā)率降低1360百分點(diǎn)，抑制孢子萌發(fā)率達(dá)到18.38%。

2.3殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲形態(tài)的影響

通過顯微觀察，對(duì)照組菌絲細(xì)長(zhǎng)、細(xì)胞壁光滑（圖1）；而不同濃度梯度的殼寡糖溶液處理組菌絲則出現(xiàn)不同程度的腫脹、菌絲變粗、分隔增多現(xiàn)象。殼寡糖濃度越大菌絲形態(tài)變化越明顯（圖2、圖3）。

3結(jié)論與討論

為了減少對(duì)灰霉病防治的農(nóng)藥使用，科研人員研究了不同抑菌物質(zhì)對(duì)灰霉病菌的抑制作用。黃芳等研究結(jié)果表明，用0.1% 硼處理灰霉病菌孢子后， 顯著抑制了孢子萌發(fā)和芽管伸

長(zhǎng)[4]；白文苑等研究蒼耳的丙酮提取物，其抑制菌絲生長(zhǎng)的EC50 為20. 27 mg/mL，在30 mg/mL 濃度下，對(duì)番茄灰霉菌孢子形成和孢子萌發(fā)的抑制率均在70%以上，對(duì)孢子形成和孢子萌發(fā)的EC50 分別為9. 06 、15. 21 mg/mL[5]；廖敏等研究結(jié)果表明，硅酸鈉在一定程度上能抑制灰霉病菌的生長(zhǎng)[6]。本試驗(yàn)研究可食用的殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明，1 500 mg/L殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率均在80%以上，殼寡糖對(duì)菌絲生長(zhǎng)2dEC50使用濃度為

346.96 mg/L，低于蒼耳丙酮提取物；而對(duì)菌絲形態(tài)變化的觀察表明，在濃度為1 500 mg/L時(shí)，出現(xiàn)最大程度的腫脹、菌絲變粗、分隔增多的現(xiàn)象。1 500 mg/L殼寡糖對(duì)灰霉菌產(chǎn)孢量抑制率高達(dá)83. 82%，對(duì)孢子萌發(fā)的最大抑制率達(dá)55.97%。表明殼寡糖對(duì)番茄灰霉病菌生長(zhǎng)有一定的抑制作用，本試驗(yàn)結(jié)果為殼寡糖作為一種綠色藥劑防治番茄灰霉病提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]王克勤. 灰霉病菌抗藥性研究進(jìn)展及防治對(duì)策[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2000，7（5）：40-42.

[2]張新虎，何靜，沈慧敏. 蒼耳提取物對(duì)番茄灰霉病菌的抑制作用及抑菌機(jī)理初探[J]. 草業(yè)學(xué)報(bào)，2008，17（3）：99-104.

[3]張?bào)蓿霹i，張亞東. 殼寡糖抑菌作用的研究[J]. 食品工業(yè)科技，2009，30（1）：88-90.

[4]黃芳，王建明，徐玉梅. 硼抑制灰霉病菌孢子萌發(fā)機(jī)制的初步研究[J]. 植物病理學(xué)報(bào)，2008，38（4）：370-376.

[5]白文苑，沈慧敏. 蒼耳愈傷組織提取物對(duì)番茄灰霉病菌的抑菌活性[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，43（4）：82-86.

[6]廖敏，李淼. 硅對(duì)草莓灰霉病的防治效果研究[J]. 宿州教育學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，14（2）：174-176.王程亮，徐麗君，倪萌，等. 無錫地區(qū)桃園梨小食心蟲發(fā)生規(guī)律[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（9）：117-119.