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    曲安奈德益康唑乳膏中防腐劑苯甲酸含量測(cè)定

    2014-11-07 08:22:40聶鶴云王森朱衛(wèi)豐沈冬冬
    關(guān)鍵詞:曲安苯甲酸防腐劑

    ★ 聶鶴云 王森 朱衛(wèi)豐 沈冬冬

    (1.江西中醫(yī)藥大學(xué)現(xiàn)代中藥制劑教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 江西 南昌330004;2.上海百安制藥有限公司 上海201501)

    防腐劑[1]是指能防止或抑制病原微生物生長發(fā)育的化學(xué)藥品,作為制劑處方中的重要組成部分之一,在防止藥品被微生物污染,確保藥品質(zhì)量方面起著重要作用。同時(shí)由于防腐劑本身存在著一定的毒性,若制劑中防腐劑的選擇與用量控制不當(dāng),將對(duì)人體產(chǎn)生不良反應(yīng)[2],因此在藥物制劑研發(fā)過程中確定防腐劑的選擇與用量是一關(guān)鍵項(xiàng)目。在常用的外用O/W型乳膏劑中,苯甲酸常作為防腐劑加入其中以確保藥品質(zhì)量[3],而在現(xiàn)行中國藥典(2010版)并未對(duì)其做含量測(cè)定要求。本文以派瑞松(西安楊森制藥有限公司)為例,對(duì)其防腐劑苯甲酸進(jìn)行含量測(cè)定。

    1 儀器設(shè)備及試藥

    1.1 儀器設(shè)備 Agilent 1200高效液相色譜儀(美國安捷倫科技有限公司)、BT25S Sartorius電子天平(北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)、SZ-93自動(dòng)雙重純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠)。

    1.2 試藥 苯甲酸對(duì)照品(純度100%,中國食品藥品檢驗(yàn)研究院)、曲安奈德益康唑乳膏(西安楊森制藥有限公司,派瑞松)、甲醇(HPLC,TEDIA,US)、異丙醇(HPLC,TEDIA,US)、乙腈(HPLC,TEDIA,US)、己烷磺酸鈉(HPLC,上海展云化工有限公司)、85%磷酸(AR,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)、重蒸水(自制)。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)[4]色譜柱Phenomenex C8柱(250mm ×4.6mm)柱溫:40℃,以乙腈:異丙醇:雙蒸水:己烷磺酸鈉:85%磷酸(140∶140∶720∶0.94∶1)為流動(dòng)相 A 相;甲醇:雙蒸水:己烷磺酸鈉:85%磷酸(900∶100:0.94∶1)為 B相;流速:1mL/min;檢測(cè)波長:240nm,進(jìn)樣量10μL,梯度洗脫條件如表1。苯甲酸峰對(duì)稱因子為0.98,分離度10.6,見圖1、圖2。

    表1 梯度洗脫程序

    圖1 苯甲酸對(duì)照品圖譜

    圖2 曲安奈德益康唑乳膏供試品圖譜

    2.2 溶液制備

    2.2.1 乳膏供試品溶液 取派瑞松(批次:110219654)1.25g,精密稱定,置25mL量瓶中,加2mL四氫呋喃振搖使溶解,甲醇定容至刻度即得供試品溶液。

    2.2.2 苯甲酸對(duì)照品儲(chǔ)備液 精密量取苯甲酸8.00mg置100mL量瓶中,加甲醇溶解,加入四氫呋喃2mL,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得800.0μg/mL苯甲酸對(duì)照品儲(chǔ)備液。

    2.3 線性試驗(yàn) 精密量取苯甲酸對(duì)照品儲(chǔ)備液0.15mL、0.3mL、0.6mL、1.2mL、2.4mL、4.8mL 置10mL量瓶中,制備成系列對(duì)照品溶液。按2.1方法精密吸取上述對(duì)照品溶液10μL注入高效液相色譜儀,按色譜條件測(cè)定峰面積。以峰面積分值為橫坐標(biāo),對(duì)照品濃度(μg/mL)為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為:Y=0.0181X+1.7348,r=0.9996,苯甲酸在12.0~384.0μg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

    2.4 精密度試驗(yàn) 精密吸取線性系列同一對(duì)照品溶液10μL,重復(fù)進(jìn)樣測(cè)定8次,苯甲酸峰面積RSD為0.31%,精密度良好,符合要求。

    2.5 溶液穩(wěn)定性 取制備的乳膏供試品溶液分別于0h、2h、4h、6h、8h、12h、24h 進(jìn)樣,測(cè)定,苯甲酸面積RSD為1.26%,表明樣品在24h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.6 回收率試驗(yàn) 分別取派瑞松乳膏供試品溶液0.8mL、1mL、1.2mL,相應(yīng)加入苯甲酸對(duì)照品儲(chǔ)備液0.8mL、1mL、1.2mL,按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定,計(jì)算回收率,結(jié)果見表2。

    表2 回收率結(jié)果(n=9)

    2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取上述回收率試驗(yàn)的一份供試品溶液,按上述色譜條件分別精密量取各10μL注入液相色譜儀,進(jìn)樣6次測(cè)定,記錄色譜圖,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),結(jié)果見表2,RSD為1.96%,表明該方法重復(fù)性較好。

    2.8 苯甲酸含量測(cè)定 取曲安奈德益康唑乳膏(派瑞松,批次:110219654、110219655、110219656)供試品溶液各兩份,按上述色譜條件分別精密量取各10μL注入液相色譜儀,進(jìn)樣測(cè)定,用外標(biāo)法計(jì)算含量,結(jié)果見表3。

    表3 防腐劑含量測(cè)定結(jié)果

    3 結(jié)果與討論

    試驗(yàn)表明,上述方法在測(cè)定曲安奈德益康唑乳膏時(shí),靈敏度高、操作簡便,且在測(cè)定該乳膏主藥曲安奈德、硝酸益康唑時(shí)能兼顧本防腐劑的測(cè)定,對(duì)于企業(yè)提升產(chǎn)品質(zhì)量內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn),降低質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)具有一定意義[5]。同時(shí)測(cè)得該乳膏苯甲酸含量為0.15%,為該品種仿制藥研發(fā)防腐劑處方設(shè)計(jì)提供了參比依據(jù)。

    [1]李慧敏.HPLC法檢測(cè)口服液類保健食品中苯甲酸和山梨酸的含量[J].中國藥事,2013(1):38.

    [2]成海平.藥品研發(fā)中防腐劑的應(yīng)用及質(zhì)控[J].中國新藥雜志,2005(8):954.

    [3]何應(yīng)龍.醋酸曲安奈德益康唑乳膏的研究[D].湖北中醫(yī)藥大學(xué),2011.

    [4]國家藥典委員會(huì).中國藥典二部[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:269.

    [5]金樹輝,劉樹林.藥品生產(chǎn)過程質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理探討[J].中國藥物警戒,2007(6):352.

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