蒙古蒲公英根化學(xué)成分研究

彭德乾，高 娟，郭秀梅，王金蘭，張樹軍*

(1.齊齊哈爾大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院，黑龍江齊齊哈爾 161006;2.黑龍江農(nóng)業(yè)經(jīng)濟職業(yè)學(xué)院，黑龍江牡丹江 157041)

蒲公英為菊科多年生草本植物，又名婆婆丁、黃花地丁等，為常用中草藥，具有清熱解毒、涼血散結(jié)、殺菌等功效，主治慢性胃炎、支氣管炎、肝炎、淋巴結(jié)核及尿路感染等多種疾?。?］，國內(nèi)外關(guān)于蒲公英全草化學(xué)成分的研究已有很多，但對其根部化學(xué)成分的研究較少。為進一步利用蒲公英植物資源，本實驗對蒙古蒲公英 Taraxacum mongolicum根部的化學(xué)成分進行了研究，從中分離得到16個單體化合物，化合物結(jié)構(gòu)見圖1。

圖1 化合物結(jié)構(gòu)Fig.1 Structures of compouds

1 儀器和材料

北京泰克儀器有限公司X-6顯微熔點測定儀;美國Nicolet公司Magna FTIR-750型傅立葉變換紅外光譜儀;Bruker AM-400核磁共振波譜儀 (TMS為內(nèi)標);高效液相色譜儀為HITACHI L-7100輸液泵，HITACHI L-3350 RI檢測器，GL Scirnces Inc.Inertsil Prep-ODS Φ 10 mm ×250 mm 和 Prep-sil Φ 10 mm×250 mm不銹鋼柱;柱色譜硅膠(200～300目，青島海洋化工廠產(chǎn)品)，溶劑為國藥集團上海試劑廠。蒲公英根2010年5月20日采于齊齊哈爾市區(qū)，于室內(nèi)陰干，經(jīng)齊齊哈爾大學(xué)植物學(xué)教授沙偉鑒定為Taraxacum mongolicum的根。

2 提取和分離

蒙古蒲公英根2.3 kg，剪碎后室溫下用8.0 L 95% 乙醇浸泡6 d后過濾，重復(fù)提取4次，合并浸出液濃縮至500 mL左右，加600 mL水混懸，依次用正己烷 (5×1.0 L)，乙酸乙酯 (5×1.0 L)，正丁醇(5×1.0 L)萃取，將各萃取液合并濃縮得正己烷萃取物41.3 g，乙酸乙酯萃取物10.9 g，正丁醇萃取物38.6 g。

取乙酸乙酯萃取物10.9 g，使用245 g硅膠柱層析分離，依次用正己烷-乙酸乙酯 (5∶5)(5.0 L)，100% 乙酸乙酯 (7.0 L)，乙酸乙酯-甲醇 (5∶5)(4.0 L)洗脫，合并相同餾分，得到8個部分(F1～F8)。F1(43.4 mg)使用18 g硅膠進行柱層析分離，依次用正己烷-乙酸乙酯(96∶4)(600 mL)，92 ∶8(500 mL)，5 ∶5(300 mL)洗脫，得到化合物3(8.3 mg);F2(86.8 mg)使用23 g硅膠進行柱層析分離，依次用正己烷-乙酸乙酯 (8∶2)(500 mL)，1∶1(200 mL)，100% 乙酸乙酯(300 mL)洗脫，得化合物2(31.9 mg);F3(501.0 mg)使用50 g硅膠進行柱層析分離，依次用正己烷-乙酸乙酯 (7∶3)(1.0 L)，100% 乙酸乙酯(500 mL)洗脫，得到3個部分(F3-1～F3-3)。F3-2(60.0 mg)使用21 g硅膠進行柱層析分離，依次用正己烷-乙酸乙酯(8∶2)(200 mL)，100% 乙酸乙酯(200 mL)洗脫得化合物16(10.1 mg)，F(xiàn)3-3(362.3 mg)經(jīng)反相HPLC［流動相為甲醇-水 (35∶65)，體積流量4.0 mL/min］分離，得化合物1(12.0 mg，tR=6.56 min)，6(5.6 mg，tR=10.33 min)，5(4.0 mg，tR=32.68 min)，10(14.5 mg，tR=34.03 min)，8(33.4 mg，tR=39.74 min);F4(2.3 g)使用300 g硅膠進行柱層析分離，依次用正己烷-乙酸乙酯 (5∶5)(3.0 L)，100% 乙酸乙酯(3.0 L)，乙酸乙酯-甲醇 (4∶1)(2.0 L)洗脫，得到7個部分 (F4-1～F4-7)。F4-4(195.7 mg)用反相 HPLC［流動相為甲醇-水 (3∶7)，體積流量4.0 mL/min］分離，得化合物10(4.1 mg，tR=9.26 min)，14(22.8 mg，tR=26.18 min)和15(27.2 mg，tR=28.56 min);F5(0.9 g)使用120 g硅膠進行柱層析分離，依次用正己烷-乙酸乙酯 (3∶7)(2.0 L)，100% 乙酸乙酯 (1.0 L)洗脫，得化合物 7(6.3 mg)，9(7.6 mg);F6(1.45 g)使用130 g硅膠柱層析分離，依次選用正己烷-乙酸乙酯 (2∶8)(1.5 L)，乙酸乙酯-甲醇(8∶2)(2.0 L)洗脫，得到4個部分(F6-1～F6-4)。F6-2經(jīng)反相 HPLC［流動相 甲醇-水 (15∶85)，體積流量4.0 mL/min］純化，得化合物4(9.2 mg，tR=24.31 min);F7(0.6 g)使用52 g硅膠進行柱層析分離，依次用 三氯甲烷-甲醇 (9∶1)(500 mL)，(5∶5)(300 mL)洗脫，得4個部分 (F7-1～F7-4)，F(xiàn)7-2(219.2 mg)經(jīng)反相HPLC［流動相為甲醇-水 (4∶6)，體積流量4.0 mL/min］純化，得化合物12(40.2 mg，tR=28.97 min)，13(11.3 mg，tR=34.99 min)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1:白色針狀結(jié)晶 (EtOAc)，mp 148.3～ 150.6 ℃。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ:6.67(2H，d，J=8.4 Hz，H-2，6)，7.00(2H，d，J=8.4 Hz，H-3，5)，3.46(2H，s，H-7)，9.27(1H，br s，OH)，12.18(1H，br s，COOH)。13CNMR(100 MHz， DMSO-d6) δ:176.2(C-8)，157.4(C-4)，131.2(C-2，6)，126.8(C-3，5)，41.3(C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［2］對照一致，鑒定為對羥基苯乙酸。

化合物2:淺黃色油狀物，1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.11(2H，d，J=8.4 Hz.H-2，6)，6.77(2H，d，J=8.4 Hz，H-3，5)，3.51(2H，s，H-7)，3.68(3H，s，OCH3)。13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ:172.9(C-8)，155.6(C-4)，130.2(C-2，6)，125.7(C-1)，115.1(C-3，5)，53.9(C-1')，40.8(C-7)。該結(jié)果與文獻 ［2］一致，確定為對羥基苯乙酸甲酯。

化合物3:淺黃色脂狀物，1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.14(2H，d，J=8.4 Hz，H-2，6)，6.78(2H，d，J=8.4 Hz，H-3，5)，3.54(2H，s，H-7)，4.14(2H，q，J=7.2 Hz，H-1')，1.25(3H，t，J=7.2 Hz，H-2')。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［3］對照一致，鑒定為對羥基苯乙酸乙酯。

化合物4:淺黃色粉末 (EtOAc)，mp 199.1～201.4℃。1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ:7.51(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，7.03(1H，s，H-2)，6.92(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.72(1H，d，J=8.0 Hz，H-6)，6.22(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)。13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ:171.6(C-9)，149.4(C-7)，148.6(C-3)，145.4(C-4)，128.3(C-1)，126.5(C-6)，115.1(C-2，5)，113.7(C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻［4］對照一致，鑒定為咖啡酸。

化合物5:無色針狀結(jié)晶 (EtOAc)，mp 140.7～142.2℃。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ:7.46(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，7.03(1H，s，H-2)，6.99(1H，d，J=8.0 Hz，H-6)，6.74(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.24(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，4.14(2H，q，J=7.2 Hz，OCH2CH3)，1.22(3H，t，J=7.2 Hz，OCH2CH3)。13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ:167.6(C-9)，149.1(C-7)，146.6(C-3)，146.0(C-4)，127.5(C-1)，122.8(C-6)，116.5(C-5)，115.8(C-8)，114.2(C-2)，60.1(C-1')，14.7(C-2')。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［5］對照一致，鑒定為咖啡酸乙酯。

化合物6:淺黃色粉末 (EtOAc)，mp 159.4～161.5℃。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ:7.46(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，7.27(1H，br s，H-2)，6.74(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.99(1H，d，J=8.0 Hz，H-6)，6.24(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，3.86(3H，s，OCH3)。該結(jié)果與文獻 ［6］一致，鑒定為咖啡酸甲酯。

化合物7:白色粉末 (EtOAc)，mp 173.4～176.5 ℃。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:6.59(4H，s，H-2'，6'，2''，6'')，4.71(2H，d，J=4.0 Hz，H-2，6)，4.28(2H，dd，J=9.2，6.8 Hz，H-4a，8a)，3.90(12H，s，-OCH3，H-3'，5'，3″，5″)，3.85(2H，m，H-4b，8b)，3.09(2H，m，H-1，5)。13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6) δ:147.2(C-3'，3''，5'，5'')，134.3(C-4'，4'')，132.1(C-1'，1″)，102.7(C-2'，2″，6'，6″)，86.1(C-4，8)，71.8(C-1，5)，56.4(C-3'，3″，5'，5″-OCH3)，54.3(C-2，6)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［7］對照一致，鑒定為(+)-丁香樹脂酚。

化合物8:淡黃色粉末 (MeOH)，mp 127.4～129.2℃;［α］D22.2(c 0.225，CH3OH)。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ:5.59(1H，br d，J=15.4 Hz，H-1)，4.87(1H，d，J=10.8 Hz，H-5)，4.66(1H，dd，J=10.8，8.0 Hz，H-6)，3.30(1H，m，H-2b)，2.64(1H，m，H-9a)，2.35(1H，m，H-2a)，2.35(1H，m，H-3b)，2.25(1H，m，H-3a)，2.18(2H，m，H-9b，H-11)，1.90～1.65(3H，m，H-7，H-8)，1.55(3H，s，H-15)，1.09(3H，d，J=7.2 Hz，H-13)。13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ:178.7(C-12)，172.5(C-14)，146.7(C-1)，141.0(C-4)，130.0(C-10)，126.7(C-5)，81.4(C-6)，54.0(C-7)，41.9(C-11)，38.6(C-3)，30.1(C-8)，36.2(C-9)，26.4(C-2)，16.8(C-13)，13.3(C-15)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［8］對照一致，鑒定為 11β，13-dihydrotaraxinic acid。

化合物 9:無色油狀;1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ:6.02(1H，d，J=3.2 Hz，H-13a)，5.52(1H，d，J=3.3 Hz，H-13b)，4.10(1H，t，J=10.7 Hz，H-6)，3.59(1H，dd，J=10.3，6.8 Hz，H-1)，2.62(4H，m，H-2ab，H-4，H-7)，2.10(2H，m，H-9)，1.65(1H，m，H-8a)，1.59(1H，t，J=11.2 Hz，H-5)，1.38(1H，m H-8b)，1.22(3H，d，J=6.6 Hz，H-15)，1.12(3H，s，H-14)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ 208.1(C-3)，170.0(C-12)，138.4(C-11)，117.6(C-13)，82.7(C-6)，76.2(C-1)，50.4(C-7)，50.2(C-5)，46.5(C-2)，44.5(C-4)，42.0(C-10)，36.2(C-9)，21.3(C-8)，13.6(C-15)，11.8(C-14).以上數(shù)據(jù)與文獻 ［9］對照一致，鑒定為artecalin。

化合物10:白色固體 (MeOH)，mp 185～186℃;［α］D-60(c 0.1，CH3OH)。1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ:5.83(1H，br d，J=15.4 Hz，H-1)，5.54(1H，d，J=7.60 Hz，H-1')，4.91(1H，d，J=10.8 Hz，H-5)，4.74(1H，dd，J=10.8，8.0 Hz，H-6)，3.83(1H，br t，J=10.0 Hz，H-2')，3.68(1H，dd，J=12.0，2.0 Hz，H-6'a)，3.66(1H，m，H-2b)，3.38(1H，dd，J=12.0，5.2 Hz，H-6＇b)，3.08-3.18(3H，m H-3'～ H-5')，2.84(2H，m，H-9a，H-3a)，2.05(2H，m，H-8a，H-11)，1.99-2.05(2H，m，H-2a，H-3b)，1.90(1H，m，H-9b)，1.78(1H，m，H-8b)，1.71(1H，m，H-7)，1.64(3H，s，H-15)，1.19(3H，d，J=7.0 Hz，H-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［10］對照一致，鑒定為 11β，13-dihydrotaraxinic acid β-glucopyranosyl ester。

化合物11:不定形粉末，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ:6.06(1H，d，J=3.6 Hz，H-13)，5.68(1H，d，J=3.6 Hz，H-13')，5.63(1H，br d，J=15.4 Hz，H-1)，5.00(1H，d，J=10.0 Hz，H-5)，4.68(1H，dd，J=10.0，8.8 Hz，H-6)，2.35(1H，m，H-2a)，3.30(1H，m，H-2b)，2.69(1H，m，H-7)，2.35(1H，H-3b)，2.25(1H，m，H-3a)，2.24(1H，m，H-8b)，2.31(1H，m，H-9b)，1.92(2H，m，H-8a，H-9a)，1.55(3H，s，H-15)。13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ:172.5(C-14)，170.4(C-12)，149.7(C-1)，142.3(C-11)，140.9(C-4)，130.6(C-10)，126.5(C-5)，119.9(C-13)，82.2(C-6)，49.7(C-7)，38.8(C-3)，36.1(C-9)，30.1(C-8)，26.6(C-2)，16.9(C-15)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［8］對照一致，鑒定為taraxinic acid。

化合物12:不定形粉末，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ:6.05(1H，d，J=3.6 Hz，H-13a)，5.81(1H，br dd，J=11.2，9.4 Hz，H-1)，5.68(1H，d，J=3.6 Hz，H-13b)，5.66(1H，d，J=8.0 Hz，H-1')，5.16(1H，m，H-2')，5.10(1H，m，H-3')，4.96(1H，d，J=10.8 Hz，H-5)，4.86(1H，m，H-4')，4.73(1H，dd，J=10.2，8.0 Hz，H-6)，4.47(1H，m，H-6'a)，4.07(1H，m，H-6'b)，3.63(1H，m，H-2b)，3.62(1H，m，H-5')，2.84(1H，m，H-9a)，2.65(1H，m，H-7)，2.23(2H，m，H-8a，H-3a)，2.08(2H，m，H-8b，H-11)，1.92～2.05(2H，m，H-2a，H-3b)，1.90(1H，m，H-9b)，1.74(3H，s，H-15)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［10］對照一致，鑒定為 taraxinic acid βglucopyranosyl ester。

化合物 13:淺黃色粉末 (MeOH)，mp 143.7～ 145.2 ℃; ［α］D-106.7 (c 0.225，CH3OH);1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ:4.90(1H，dd，J=10.0，2.4 Hz，H-5)，4.85(1H，br d，J=7.8 Hz，H-3)，4.80(1H，br d，J=10.0 Hz，H-1)，4.50(1H，dd，J=10.0，9.8 Hz，H-6)，4.21(1H，d，J=7.8 Hz，H-1')，3.89(1H，dd，J=12.0，2.0 Hz，H-6'a)，3.65(1H，dd，J=12.0，5.7 Hz，H-6'b)，3.2～3.4(4H，m，H-2'～5')，2.39(4H，m，H-2，H-9)，2.05(1H，m，H-11)，1.86(1H，m，H-7)，1.76(3H，br s，H-15)，1.74(2H，m，H-8)，1.51(3H，s，H-14)，1.21(3H，d，J=7.2 Hz，H-13)。13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ:179.3(C-12)，140.2(C-4)，137.6(C-10)，126.8(C-5)，124.5(C-1)，101.1(C-1')，82.9(C-3)，81.2(C-6)，76.6(C-5')，76.5(C-3')，73.9(C-2')，70.4(C-4')，61.4(C-6')，54.1(C-7)，41.9(C-11)，40.8(C-9)，32.5(C-2)，28.2(C-8)，15.2(C-14)，12.0(C-13)，10.9(C-15)。以上數(shù)據(jù)與文獻［11］對照一致，鑒定為sonchuside A

化合物 14:不定形粉末 (MeOH)，mp 192.1～193.9℃;［α］D20(c 0.25，CH3OH)。1HNMR(400 MHz，CD3OD)δ:4.15(1H，dd，J=10.4，10.0 Hz，H-6)，3.57(1H，dd，J=10.4，6.4 Hz，H-1)，2.62(1H，m，H-2a)，2.57(2H，m，H-2b，H-4)，2.42(1H，m，H-11)，2.09(1H，dt，J=13.0，3.0 Hz，H-9a)，1.88(1H，m，H-7)，1.65(1H，m，H-9a)，1.58(1H，m，H-8a)，1.43(1H，dd，J=11.2，11.3 Hz，H-5)，1.29(1H，m，H-8b)，1.18(3H，d，J=6.9 Hz，H-15)，1.17(3H，d，J=7.0 Hz，H-13)，1.14(3H，s，H-14)。13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ:209.9(C-3)，180.3(C-12)，83.0(C-6)，75.7(C-1)，53.1(C-7)，49.8(C-5)，46.0(C-2)，44.2(C-4)，41.9(C-10)，40.2(C-11)，36.4(C-9)，22.3(C-8)，12.6(C-15)，11.2(C-13)，10.8(C-14)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［12］對照一致，鑒定為 arsanin。

化合物15，不定形粉末 (EtOAc)，mp 92.8～94.2℃; ［α］D-160(c 0.075，CH3OH)。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6) δ:6.17(1H，s，H-3)，5.21(1H，d，J=4.4 Hz，-OH，加重水后消失)，3.73(1H，dd，J=10.2，9.6 Hz，H-6)，3.61(1H，d，J=9.5 Hz，H-5)，3.55(1H，m，H-8)，2.70(1H，d，J=2.9 Hz，H-9a)，2.61(1H，m，H-11)，2.25(1H，d，J=1.9 Hz，H-9b)，2.19(3H，s，H-14)，2.33(3H，s，H-15)，2.14(1H，m，H-7)，1.25(3H，d，J=7.0 Hz，H-13)。13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ:195.5(C-2)，178.4(C-12)，171.2(C-4)，146.8(C-10)，135.2(C-3)，133.0(C-1)，81.5(C-6)，68.4(C-8)，60.7(C-7)，50.9(C-5)，48.6(C-11)，40.7(C-9)，21.4(C-14)，19.9(C-15)，15.7(C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻［13］對照一致，鑒定為 desacetylmatricarin。

化合物16:白色晶體 (MeOH)，mp 81.3～82.9 ℃。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:9.93(1 H，s，CHO-1)，7.43(1H，m，H-6)，7.42(1H，m，H-5)，7.05(1H，s，H-2)，3.96(3H，s，-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［14］對照一致，鑒定為4-羥基-3-甲氧基苯甲醛。

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