幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)

張 兵，郭運(yùn)芬，劉孟涓

（1.南充市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科·川北醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院，四川 南充 637000；2.重慶醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，重慶 400016）

幽門螺桿菌（helicobacter－pylori，Hp）是一種生活于人體胃和十二指腸的螺旋狀格蘭氏陰性桿菌，是慢性活動(dòng)性胃炎的主要致病因子。我國幽門螺桿菌（Hp）感染率為40%～90%，平均為59%［1］。95%的十二指腸球部潰瘍患者伴Hp感染，而復(fù)發(fā)性十二指腸潰瘍患者幾乎100%與Hp感染有關(guān)。還有證據(jù)表明，Hp與胃潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤和胃癌的發(fā)生有密切關(guān)系［2］，幽門螺桿菌可能是IgA腎病的重要致病抗原［3］。目前確診HP病原體的方法主要有13C和14C呼吸試驗(yàn)，由于操作繁瑣、耗時(shí)和具有一定的放射性，不適合做大規(guī)模的篩查。本文以14C－呼氣試驗(yàn)作為HP診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）在檢測HP感染臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 對(duì)象 隨機(jī)選取臨床上有反復(fù)腹痛或伴有惡心、嘔吐等上消化道癥狀，4周內(nèi)未經(jīng)治療或已停服抗生素、鉍劑、H2受體拮抗劑和質(zhì)子泵抑制劑等對(duì)Hp檢測有影響的藥物的門診、住院患者50例，均為2011年1～3月在本院接受檢查者，其中男性29例，年齡17～72歲，平均年齡46歲；女性21例，年齡19～68歲，平均年齡49歲。

1.2 儀器和試劑 幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法），由北京康美天鴻生物科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào)： 010664。有關(guān)產(chǎn)品在應(yīng)用前按相關(guān)說明書要求保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 方法

1.3.114C－尿素呼氣試驗(yàn) 患者空腹收集本底氣體，隨即飲服溶于100ml冷開水中的100mg14C－尿素，每10min收集一次呼氣標(biāo)本，連續(xù)收集3小時(shí)。收集的氣體標(biāo)本用質(zhì)譜儀分析，計(jì)算14CO2含量。有Hp感染者在口服試液后20min即出現(xiàn)14CO2升高，在100min內(nèi)持續(xù)升高，而無Hp感染者無14CO2呼出。

1.3.2 幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試驗(yàn) 采集患者靜脈血，常規(guī)分離血清。血清標(biāo)本應(yīng)為無脂血、無黃疸和溶血。收集的血清貯存－20℃冰柜中冷凍備用。操作步驟：①測試前將待測樣本恢復(fù)至室溫（20℃～30℃）。②取出測試板置于干凈的水平臺(tái)上。③在測試板樣品孔中加入100ul（約4滴）待測血漿，室溫靜置10～15分鐘左右觀察結(jié)果，超過20分鐘結(jié)果無效。④結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)：陽性（＋）：兩條紅色線出現(xiàn)。一條是質(zhì)控線（C），一條是測試線（T）。陰性（－）：僅質(zhì)控線（C）出現(xiàn)一條紅色條帶，測試線（T）未出現(xiàn)。無效：質(zhì)控線（C）未出現(xiàn)紅色條帶。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 11.5軟件將兩種方法陽性和陰性例數(shù)做配對(duì)χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

50例患者接受以14C－呼氣試驗(yàn)和尿素酶抗體檢測試驗(yàn)的陽性例數(shù)和陰性例數(shù)見表1。該試劑盒檢測Hp感染的靈敏度為84.62%，特異度為91.67%，假陽性率為8.33%，假陰性率為15.38% ，約登指數(shù)為76.29%，觀察一致率為88%，機(jī)遇一致率為49.92%，kappa值為0.76，總符合率為88%。經(jīng)配對(duì)四格表資料的χ2檢驗(yàn)，該試劑盒（膠體金法）與14C－呼氣試驗(yàn)相比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝0.67，P＞0.05），尚不能認(rèn)為兩種方法檢測結(jié)果的陽性率不同。

表1 50例患者14C－呼氣試驗(yàn)和尿素酶抗體檢測試驗(yàn)結(jié)果比較（n）Table 1 Results of 14C－breath test and anti－urease antibody from 50patients

3 討論

Hp感染與上消化道疾病之間的關(guān)系越來越受到醫(yī)學(xué)界的重視。1994年世界衛(wèi)生組織下屬的國際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）已將其列為人類胃癌的Ⅰ類致癌物［4］。1997年Tomb等在世界上首次完成了Hp基因組的全序列測定分析工作，推動(dòng)了Hp的基因功能、基因變異與疾病關(guān)系的研究，同時(shí)也為Hp感染相關(guān)疾病的研究奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)［5］。現(xiàn)已證實(shí)，幽門螺桿菌是慢性胃炎、消化性潰瘍的重要致病因子，亦與胃腺癌和淋巴瘤的發(fā)生有關(guān)系［6～8］。最近觀察到它也和缺鐵性貧血、身材矮小、慢性蕁麻疹等有關(guān)。許多感染是在青春期或兒童期獲得的，因而早期的正確診斷至關(guān)重要［9］。Hp在人群中的感染率與患者所居住國家或地區(qū)的社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)程度有關(guān)。如發(fā)達(dá)國家10歲內(nèi)感染率僅有3.5%，而在發(fā)展中國家10歲即有一半或一半以上的人感染Hp。我國人群Hp感染率接近世界平均水平。國內(nèi)不同地區(qū)Hp感染率從42%～84%不等，平均感染率為54.8%［10］。幽門螺桿菌是一種定植于胃粘膜并可引起胃十二指腸疾病的革蘭氏陰性細(xì)菌，自1983年通過胃鏡取活檢標(biāo)本分離培養(yǎng)成功以來，對(duì)Hp感染的診斷已發(fā)展出了許多方法，包括有細(xì)菌學(xué)、病理學(xué)、血清學(xué)、同位素示蹤、分子生物學(xué)等方面。但總的講來，從標(biāo)本采集的角度看，可以分為侵入性和非侵入性兩大類。侵入性方法主要指必需通過胃鏡取活檢標(biāo)本檢查的方法，是目前消化病學(xué)科的常規(guī)方法。它包括細(xì)菌的分離培養(yǎng)和直接涂片、快速尿素酶試驗(yàn)，藥敏試驗(yàn)等。非侵入性方法主要指不通過胃鏡取活檢標(biāo)本診斷幽門螺桿菌標(biāo)本感染的方法。這類方法包括抗體檢測、抗原檢測、13C／14C－尿素呼氣試驗(yàn)等。后者因具有無創(chuàng)、簡便、快速、可靠等特點(diǎn)，正逐漸被臨床采用。

與14C－尿素尿素呼氣試驗(yàn)相比，幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）實(shí)驗(yàn)表該試劑盒檢測Hp感染的靈敏度為84.62%，特異度為91.67%，總符合率為88%，13C／14C－尿素尿素呼氣試驗(yàn)為目前幽門螺桿菌現(xiàn)癥感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)之一，但需排除藥物影響因素，操作繁瑣。不適合做大規(guī)模的篩查，且13C／14C具有一定的放射性，不適于孕婦及兒童。幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）采用雙抗原夾心法免疫測定原理，結(jié)合膠體金免疫層析法即時(shí)檢驗(yàn)技術(shù)，靈敏度高，特異性強(qiáng)?？赏瑫r(shí)檢查樣本中Hp尿素酶IgG、IgM、IgA抗體。操作更為簡便，無需專用儀器和設(shè)備。血清學(xué)檢查為微創(chuàng)傷檢查，且價(jià)格低廉，易于為大眾接受。我們的實(shí)驗(yàn)表明：幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒檢測Hp，靈敏度為84.62%，特異度為91.67%，假陽性率為8.33%，假陰性率為15.38%，與14C－尿素尿素呼氣試驗(yàn)相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝0.67，P＞0.05）。

4 結(jié)論

幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）是一種靈敏度和特異性都較高的幽門螺桿菌感染血清學(xué)抗體快速檢測法，可用于健康體檢、社區(qū)門診或醫(yī)院床旁檢驗(yàn)等。

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