灸法治療類風濕關節(jié)炎動物實驗研究進展

王婕　尚秀葵

摘要：目的研究灸法治療類風濕關節(jié)炎動物實驗研究的最新進展。方法從神經-免疫-內分泌網絡、細胞因子、蛋白、信號分子的調控及鎮(zhèn)痛和抗炎免疫作用等6個方面對自2008年至今灸法治療類風濕性關節(jié)炎的動物實驗研究進行總結論述。結論通過以上總結提出問題并在此基礎上對今后動物實驗的研究方向和研究思路進行展望。

關鍵詞：類風濕關節(jié)炎；灸法；動物實驗

中圖分類號：R593文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）05-0084-03

類風濕關節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是以類風濕致病因子侵犯關節(jié)和周圍組織為主的一種慢性全身性自身免疫性疾病[1]，屬于中醫(yī)“痹證”范疇?，F(xiàn)代醫(yī)學研究中醫(yī)藥治療類風濕性關節(jié)炎具有良好的前景，為廣泛運用艾灸有效治療關節(jié)炎，探討其作用機制研究，現(xiàn)將近幾年來有關艾灸對類風濕性關節(jié)炎的動物實驗研究按其作用機制綜述如下。

1神經-免疫-內分泌網絡的調整

灸法是通過神經-免疫-內分泌調節(jié)網絡來調整內分泌系統(tǒng)的功能[2]。周海燕[3]研究艾灸腎俞、足三里穴對RA大鼠炎癥的影響，發(fā)現(xiàn)艾灸能明顯抑制實驗性RA大鼠的炎癥反應，調控RA大鼠CRH、ACTH、GC的異常水平，但在腹腔注射GR激動劑后這些作用均消失，提示GR激動劑在艾灸的抗炎作用及其對神經-免疫-內分泌調節(jié)網絡的調整中具有重要地位和作用。

2鎮(zhèn)痛作用

方若儀等[4]觀察溫和灸對實驗性關節(jié)炎大鼠足趾腫脹及痛閾的影響，發(fā)現(xiàn)艾灸組大鼠的機械痛閾明顯高于模型組，且艾灸組的熱疼痛潛伏期較長，表明溫和灸能顯著提高實驗性關節(jié)炎大鼠的機械痛閾，且有一定的鎮(zhèn)痛作用。鄭保主[5]研究發(fā)現(xiàn)艾灸能提高大鼠下丘腦POMC mRNA和PDYN mRNA的表達，增強機體的鎮(zhèn)痛能力，從而起到提高壓痛閾的效果，以此證明艾灸具有鎮(zhèn)痛作用。

3對細胞因子的調節(jié)作用

目前細胞因子已對關節(jié)炎癥和關節(jié)損傷具有重要的作用[6]。高駿等[7]發(fā)現(xiàn)艾灸腎俞和足三里可以抑制Th1致炎因子且促進Th2抗炎因子分泌，發(fā)揮艾灸的整體調節(jié)及雙向良性調整作用，調整Th1/Th2細胞因子失衡，可以從從整體上治療類風濕關節(jié)炎，恢復RA過程中的致炎因子與抑炎因子失衡。并且研究[8]艾灸腎俞、足三里可能通過下調血清褪黑激素水平，促進抗炎因子IL-4分泌，調節(jié)Th1/Th2細胞因子平衡，從而發(fā)揮抗炎作用，對緩解RA慢性病程以及RA預后都可能起到積極的治療意義。羅磊等[9]觀察艾灸腎俞、足三里對類風濕關節(jié)炎模型大鼠跖關節(jié)中細胞因子的影響，證明艾灸具有降低局部跖關節(jié)中促炎癥細胞因子IL-1β和TNF-α，提高T細胞生長因子IL-2的效應，可良性調整Th1/Th2平衡，糾正細胞免疫紊亂。劉明雪等[10]研究艾灸對佐劑性關節(jié)炎大鼠血清TNF-α、IFN-γ的影響差異，TNF-α是一種主要由單核細胞和巨噬細胞產生的單核因子，IFN-γ又稱免疫干擾素，IFN-γ對關節(jié)腫脹、晨僵改善明顯，因此，降低TNF-α水平、升高IFN-γ是治療類風濕關節(jié)炎獲效環(huán)節(jié)之一，且證明艾灸降低TNF-α水平和升高IFN-γ水平作用更為顯著。周峰等[11]通過觀察艾灸對類風濕關節(jié)炎模型大鼠血清及滑膜組織細胞間黏附分子-1（ICAM-1）的影響，與模型組相比，艾灸可降低類風濕關節(jié)炎大鼠血清中ICAM-1含量，可使滑膜組織中ICAM-1表達顯著降低，從而抑制炎性細胞的浸潤、黏附、跨內皮移動，使滑膜炎癥逐漸好轉，關節(jié)腫脹、關節(jié)僵硬等癥狀得到緩解。楊涵淇等[12]研究發(fā)現(xiàn)不同灸法治療類風濕關節(jié)炎有明顯的抗炎效應，且以隔姜灸作用最為顯著；不同灸法抑制IL-1、TNF-α炎性反應因子表達可能是其發(fā)揮抗炎效應的重要機制之一。

4對蛋白的調節(jié)作用

魏錚等[13]對實驗性類風濕關節(jié)炎大鼠艾灸治療后，滑膜細胞CyclinD1和CDK4蛋白的表達降低，表明CyclinD1和CDK4可能是類風濕關節(jié)炎滑膜細胞異常增殖的關鍵蛋白之一。CyclinD1和CDK4蛋白的上調，使類風濕關節(jié)炎滑膜細胞內形成的CyclinD1和CDK4復合物明顯增多，繼而完成細胞異常增殖，而艾灸對類風濕關節(jié)炎的滑膜細胞異常增殖有抑制作用，而且可能是通過抑制CyclinD1和CDK4蛋白的過度表達而完成的。馬騰等[14]觀察不同灸法（溫和灸和疤痕灸）對類風濕關節(jié)炎大鼠下丘腦HSP7O的表達，與模型組相比，溫和灸組和瘢痕灸組可以降低下丘腦HSP70的表達，提高炎癥組織HSP7O的表達，不同灸法（溫和灸和瘢痕灸）抗炎效應的機制可能是灸法的溫熱刺激調節(jié)了中樞器官下丘腦HSP70的表達，從而激發(fā)了炎癥組織HSP7O的大量表達。彭傳玉等[15]觀察艾灸對類風濕關節(jié)炎大鼠的治療作用及其發(fā)生機制，發(fā)現(xiàn)艾灸治療能顯著改善大鼠類風濕關節(jié)炎的癥狀，調節(jié)關節(jié)滑膜中 Fas/FasL 蛋白的表達，使滑膜細胞逐漸凋亡，這是艾灸發(fā)揮溫通作用的有效機制之一。

5對免疫功能的影響

艾灸能改善機體免疫功能是通過抗炎免疫作用達到的[16]。李建武等[17]采用隔物溫和灸治療類風濕關節(jié)炎大鼠，觀察大鼠趾圍變化及血清中的sIL-2R的變化，實驗結果顯示隔物溫和灸能抑制血清中sIL-2R分泌，減輕類風濕關節(jié)炎大鼠的關節(jié)腫脹，并且隔物溫和灸還能抑制類風濕關節(jié)炎大鼠血清中IL-1B、TNF-A的分泌水平，減輕類風濕關節(jié)炎大鼠足跖關節(jié)的腫脹程度。

6對信號分子的調控

高駿等[18]對下丘腦-垂體-腎上腺軸在艾灸治療類風濕性關節(jié)炎大鼠滑膜組織核轉錄因子信號通路中的作用進行了相關性分析，深入探討艾灸治療類風濕關節(jié)炎抗炎效應的細胞信號轉導發(fā)生、發(fā)展的作用機制。認為艾灸可以通過調節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺軸的功能抑制類風濕性關節(jié)炎的發(fā)病及遷延的過程。楊馨等[19]采用基因芯片檢測及生物信息分析技術觀察艾灸對滑膜細胞JAK-STAT信號通路相關信號分子表達的影響，表示艾灸腎俞可明顯改善實驗性類風濕關節(jié)炎家兔膝關節(jié)腫脹，揭示艾灸具有明顯的抗炎消腫作用。類風濕關節(jié)炎家兔造模后滑膜細胞PK通路上大量信號分子表達上調，而經艾灸腎俞治療后，這些相關信號分子的表達均下調。說明艾灸對類風濕關節(jié)炎的滑膜細胞MAPK信號通路中相關信號分子表達具有調控作用。endprint

7展望

目前該病病因及發(fā)病機制尚不明確，縱觀近年來的大量研究，類風濕關節(jié)炎的發(fā)病被認為是一個受抗原驅動的連鎖反應的病理過程。炎癥、細胞分子及自身的免疫反應是類風濕關節(jié)炎發(fā)生及發(fā)展的關鍵環(huán)節(jié)[20]。而遺傳、內分泌和環(huán)境因素等則加劇了類風濕關節(jié)炎的易感性。其中免疫異?？赡苁侵饕蛩?。而受遺傳因素的影響，機體在體內、外致病因素的反應作用下，致免疫功能平衡失調，反應亢進，產生自身抗體，激發(fā)各個血管、細胞，產生致炎性物質，引起炎癥，再演變成軟骨和骨質等組織損傷。西醫(yī)對類風濕關節(jié)炎的診斷和治療上針對性較強，大多要求依靠客觀的理化檢查指標，但是結果癥狀緩解、實驗室指標恢復正常并不意味著病情得到控制。就此，中醫(yī)可以防治疾病并注重人體自身內在機能狀態(tài)的調整，還可起到預防的作用。艾灸治療關節(jié)炎的機制研究表明，艾灸不僅可以緩解關節(jié)形態(tài)腫脹，保護軟骨和骨質，同時可調節(jié)自身免疫反應，影響關節(jié)組織的腫脹、炎癥與增殖，起到抗炎免疫的作用。

綜上所述，艾灸治療RA的實驗研究已開展開展起來。灸法可以調整RA機體的機能活動，有很好的療效。但仍存在諸多問題：（1）目前艾灸對于類風濕的機理研究多為溫和灸或單一灸法作為干預手段的研究對象，而不同艾灸模式（如鋪灸、隔物灸等）對RA的實驗性研究相對較少，基于艾灸方法不同治療實驗性RA的療效比較和作用機制尚需進一步深入細致的研究；（2）灸法可治療多種疾病，但取效的關鍵與其灸時、灸量密切相關，選取方法針對不同程度的疾病能起到針對性的治療效果，但目前這方面的研究較少，沒有將灸時、灸量與療效的關系聯(lián)系在一起，尚需展開研究。（3）以上實驗研究結果與臨床療效的評判仍存在一定距離，尚需將二者緊密聯(lián)系起來，將動物實驗與臨床研究相結合，將作用機制與療效相結合，以進一步探明灸法治療關節(jié)炎的機理，更好地提高臨床療效。（4）艾灸對于細胞因子和蛋白等研究尚多，但目前主要是集中在其中個別的幾種細胞因子及蛋白，尚不能用以說明全部的細胞因子和蛋白，所研究的個別指標也不夠典型，仍需按照其分類進行多方面展開研究與探索。（5）以上研究表明灸法對神經-免疫-內分泌網絡、細胞因子、蛋白、信號分子的調控及鎮(zhèn)痛和抗炎免疫作用等方面的研究已取得一定進展，但仍需要擴展至其他各個領域加以研究，目前已有人從RNA領域探索艾灸機制，Stanczyk等[21]發(fā)現(xiàn)，與骨關節(jié)炎患者相比，在RA患者關節(jié)滑液及滑膜組織中miRNA-155高表達，同時RA患者滑液CD14+細胞和外周血CD14+細胞的miRNA-155的水平也升高。Nakasa等[22]報道，miRNA-146在類風濕關節(jié)炎發(fā)病中起重要的作用，研究證實miRNA-146a在類風濕關節(jié)炎關節(jié)滑膜組織中的表達主要集中在原始CD68+巨噬細胞中，也可見其存在于少量CD3+T 細胞及CD79+B細胞中。目前，已經有越來越多的研究證實miRNA異常與RA的發(fā)生密切相關，但其作用機制還不是很清楚，基于現(xiàn)階段的研究，miRNA很可能作為新的診斷標志和治療靶點應用于臨床，相信miRNA將會給類風濕關節(jié)炎疾病的診療帶來新的希望[23]。如果能從艾灸方向找到與這一新指標的相應關系，那么對灸法治療類風濕關節(jié)炎將會有新的突破。

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（收稿日期：2014-02-24）endprint