不同方法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油氣質(zhì)聯(lián)用分析

龔志強　談遠鋒　黃敏　等

摘要分別采用超臨界CO2流體萃取法（SFE）、超聲波溶劑萃取法及水蒸氣蒸餾法（SD）提取四數(shù)九里香中揮發(fā)油，并用GC-MS對其化學(xué)成分進行分析，采用峰面積歸一法確定各組分相對含量.結(jié)果表明，超臨界C02流體萃取法提取揮發(fā)油共鑒定了38種成分；超聲提取法提取揮發(fā)油共鑒定12種成分；水蒸氣蒸餾法法提取的揮發(fā)油共鑒定了33種成分，含量最高組分均為薄荷酮.3種提取方法所得揮發(fā)油組分與含量差別較大，為進一步開發(fā)應(yīng)用四數(shù)九里香揮發(fā)性成分提供了實驗依據(jù)

關(guān)鍵詞四數(shù)九里香；提取方法；揮發(fā)油；氣質(zhì)聯(lián)用

中圖分類號R284～1；O657～63文獻標識碼A文章編號1000-2537（2014）02-0047-04

四數(shù)九里香Murraya tetramera Huang為蕓香科九里香屬植物，以干燥樹葉入藥，全年均可采收.主產(chǎn)于云南、廣西、貴州、福建、臺灣等亞洲熱帶及亞熱帶地區(qū)[1].其味辛、微苦，性微溫，具有祛風(fēng)解表、行氣、活血散痛、抗炎、解熱之功效[2].可治胃痛、風(fēng)濕痹痛，外用則可治牙痛、跌撲腫痛、蟲蛇咬傷等[3].著名胃藥三九胃泰的主要組成即為四數(shù)九里香[4].對四數(shù)九里香化學(xué)成分的研究已有文獻報告，陳家源等[5]用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油并確認了其中37個組分，牙啟康等[6]運用硅膠層析色譜分離了其中的5個化合物，張柯媛等[7]選用補骨脂素作為指標成為建立其定性定量方法.研究表明四數(shù)九里香揮發(fā)油有顯著的抗炎和鎮(zhèn)痛作用[8]，為進一步全面真實地反映四數(shù)九里香揮發(fā)油的化學(xué)成分，本文分別采用水蒸氣蒸餾、超臨界CO2流體萃取及超聲波溶劑萃取3種方法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油化學(xué)成分并進行了分析和比較.

1儀器與材料

7890A/5975C氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC/MS，美國Agilent公司）；HL-5+1L/50-Ⅱ AQ型超臨界CO2萃取裝置（杭州華黎泵業(yè)有限公司）；DHG-9240A型電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱（上海精密試驗設(shè)備有限公司）；無水乙醇（分析純）；無水硫酸鈉（分析純）. 四數(shù)九里香（2011年5月采于廣西龍州縣）經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)劉壽養(yǎng)副教授鑒定為Murraya tetramera Huang.

湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報第37卷

第2期

龔志強等：不同方法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油氣質(zhì)聯(lián)用分析

2方法與結(jié)果

2.1四數(shù)九里香揮發(fā)油的提取

2.1.1水蒸氣蒸餾提取根據(jù)2010年版《中國藥典》一部附錄XD[5]，取20 g粗粉（過750 μm篩）加500 mL蒸餾水，蒸餾時間5 h，得到淡黃色薄荷香氣味透明液體，收油率3.23%.餾出液用無水乙醚萃取后，用無水硫酸鈉干燥備用.

2.1.2超臨界CO2流體萃取以四數(shù)九里香干燥莖葉粉為實驗材料，采用正交實驗篩選超臨界CO2萃取最優(yōu)方案，即萃取溫度40 ℃，壓力25 MPa，萃取時間45 min，將200 g干燥莖葉粉末投入裝置萃取3次，得黃色濃郁薄荷香氣味透明液體， 收油率約5.11%.餾出液用無水乙醚萃取后，用無水硫酸鈉干燥備用.

2.1.3超聲波溶劑萃取法取5 g干葉粗粉（過750 μm篩），加入50 mL石油醚，超聲30 min，過濾得到濾液.濾液用無水乙醚萃取后，用無水硫酸鈉干燥備用.

3討論

超臨界CO2流體萃取法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油鑒定了其中的38種成分.其中相對質(zhì)量分數(shù)最高的是薄荷酮（38.17%）、異薄荷酮（12.34%）、胡椒酮（10.90%）和β-水芹烯（9.75%）.水蒸氣蒸餾法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油鑒定了其中的33種成分.其中胡椒酮（17.40%）、薄荷酮（20.51%）、異薄荷酮（6.94%）、β-水芹烯（11～59%）、萜品烯（13.38%）.超聲波溶劑萃取法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油鑒定了其中的12種成分.其中相對質(zhì)量分數(shù)最高的是薄荷酮（43.45%）、異薄荷酮（16.31%）、胡椒酮（9.97%）、側(cè)柏烯（11.40%）、β-水芹烯（9～35%）.

對比3種提取方法得到的揮發(fā)油組分及其相對質(zhì)量分數(shù)差異較大，質(zhì)量分數(shù)較高均為薄荷酮，可用于四數(shù)九里香質(zhì)量控制指標[10.其中SFE和超聲波溶劑萃取法的異薄荷酮質(zhì)量分數(shù)都相比SD高.而SD中胡椒酮質(zhì)量分數(shù)明顯高于SFE和超聲波溶劑萃取法，SD操作簡便，成本低.SFE得到揮發(fā)的化學(xué)成分更加詳細真實，與文獻報道一致[5，因萃取溫度低，對于低沸點的易揮發(fā)性化合物組分不易損失，其中脂肪族化合物種類及質(zhì)量分數(shù)明顯多于水蒸汽蒸餾法和超聲提取法的揮發(fā)油，可能是由于SD溫度高、受熱時間長，對部分熱敏性組分產(chǎn)生了破壞[11，超聲波提取技術(shù)操作簡便，耗時少，無需加熱，可是對溶劑選擇、超聲功率、提取時間等未進行考察[12，對實驗結(jié)果有一定的影響.采用3種不同方法提取得到的四數(shù)九里香揮發(fā)性化合物數(shù)據(jù)，為其進一步的開發(fā)和利用提供了實驗依據(jù).

參考文獻：

[1]中國科學(xué)院中國植物志編輯部委員會.中國植物志[M].北京：科學(xué)技術(shù)出版社， 1997：145-146.

[2]中華本草編委會.中華本草[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社， 1998：947-948.

[3]全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編（上冊）[M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社， 1996：10-11.

[4]羅輝，麥揚，鐘天恒，等. 三九胃泰方抗胃潰瘍有效部位的研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志， 2013，19（12）：215-218.

[5]陳家源，牙啟康，盧文杰，等.GC-MS分析四數(shù)九里香的揮發(fā)油成分[J].華西藥學(xué)雜志， 2009，24（6）：671-672.

[6]牙啟康，盧文杰， 陳家源，等.四數(shù)九里香的化學(xué)成分研究[J].廣西科學(xué)， 2010，17（4）：347-352.

[7]張柯媛，黃艷，劉布鳴，等.四數(shù)九里香藥材中補骨脂素的定性定量分析方法研究[J].廣西科學(xué)， 2012，19（4）：352-354.

[8]毛長智，黃蓓， 庾志斌.四數(shù)九里香揮發(fā)油抗炎及鎮(zhèn)痛作用研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志， 2011，32（8）：74-75.

[9]國家藥典委員會.中國藥典，I部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社， 2010：附錄63.

[10]葛爾寧. 毛細管氣相色譜法測定薄荷煎劑中薄荷腦和（-）-薄荷酮的含量及變化[J].中國實驗方劑學(xué)雜志， 2007，13（5）：7-9.

[11]鄧超澄，朱小勇，韋建華，等. 水蒸氣蒸餾法與超臨界CO2萃取法提取青翹揮發(fā)油的化學(xué)成分比較[J].中國實驗方劑學(xué)雜志， 2010，16（16）：76-79.

[12]張如新，羊衛(wèi)平，樊勤. 超聲波法提取山茱萸中熊果酸的工藝研究[J].湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報， 2008，31（3）：102-104.

（編輯楊春明）

摘要分別采用超臨界CO2流體萃取法（SFE）、超聲波溶劑萃取法及水蒸氣蒸餾法（SD）提取四數(shù)九里香中揮發(fā)油，并用GC-MS對其化學(xué)成分進行分析，采用峰面積歸一法確定各組分相對含量.結(jié)果表明，超臨界C02流體萃取法提取揮發(fā)油共鑒定了38種成分；超聲提取法提取揮發(fā)油共鑒定12種成分；水蒸氣蒸餾法法提取的揮發(fā)油共鑒定了33種成分，含量最高組分均為薄荷酮.3種提取方法所得揮發(fā)油組分與含量差別較大，為進一步開發(fā)應(yīng)用四數(shù)九里香揮發(fā)性成分提供了實驗依據(jù)

關(guān)鍵詞四數(shù)九里香；提取方法；揮發(fā)油；氣質(zhì)聯(lián)用

中圖分類號R284～1；O657～63文獻標識碼A文章編號1000-2537（2014）02-0047-04

四數(shù)九里香Murraya tetramera Huang為蕓香科九里香屬植物，以干燥樹葉入藥，全年均可采收.主產(chǎn)于云南、廣西、貴州、福建、臺灣等亞洲熱帶及亞熱帶地區(qū)[1].其味辛、微苦，性微溫，具有祛風(fēng)解表、行氣、活血散痛、抗炎、解熱之功效[2].可治胃痛、風(fēng)濕痹痛，外用則可治牙痛、跌撲腫痛、蟲蛇咬傷等[3].著名胃藥三九胃泰的主要組成即為四數(shù)九里香[4].對四數(shù)九里香化學(xué)成分的研究已有文獻報告，陳家源等[5]用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油并確認了其中37個組分，牙啟康等[6]運用硅膠層析色譜分離了其中的5個化合物，張柯媛等[7]選用補骨脂素作為指標成為建立其定性定量方法.研究表明四數(shù)九里香揮發(fā)油有顯著的抗炎和鎮(zhèn)痛作用[8]，為進一步全面真實地反映四數(shù)九里香揮發(fā)油的化學(xué)成分，本文分別采用水蒸氣蒸餾、超臨界CO2流體萃取及超聲波溶劑萃取3種方法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油化學(xué)成分并進行了分析和比較.

1儀器與材料

7890A/5975C氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC/MS，美國Agilent公司）；HL-5+1L/50-Ⅱ AQ型超臨界CO2萃取裝置（杭州華黎泵業(yè)有限公司）；DHG-9240A型電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱（上海精密試驗設(shè)備有限公司）；無水乙醇（分析純）；無水硫酸鈉（分析純）. 四數(shù)九里香（2011年5月采于廣西龍州縣）經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)劉壽養(yǎng)副教授鑒定為Murraya tetramera Huang.

湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報第37卷

第2期

龔志強等：不同方法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油氣質(zhì)聯(lián)用分析

2方法與結(jié)果

2.1四數(shù)九里香揮發(fā)油的提取

2.1.1水蒸氣蒸餾提取根據(jù)2010年版《中國藥典》一部附錄XD[5]，取20 g粗粉（過750 μm篩）加500 mL蒸餾水，蒸餾時間5 h，得到淡黃色薄荷香氣味透明液體，收油率3.23%.餾出液用無水乙醚萃取后，用無水硫酸鈉干燥備用.

2.1.2超臨界CO2流體萃取以四數(shù)九里香干燥莖葉粉為實驗材料，采用正交實驗篩選超臨界CO2萃取最優(yōu)方案，即萃取溫度40 ℃，壓力25 MPa，萃取時間45 min，將200 g干燥莖葉粉末投入裝置萃取3次，得黃色濃郁薄荷香氣味透明液體， 收油率約5.11%.餾出液用無水乙醚萃取后，用無水硫酸鈉干燥備用.

2.1.3超聲波溶劑萃取法取5 g干葉粗粉（過750 μm篩），加入50 mL石油醚，超聲30 min，過濾得到濾液.濾液用無水乙醚萃取后，用無水硫酸鈉干燥備用.

3討論

超臨界CO2流體萃取法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油鑒定了其中的38種成分.其中相對質(zhì)量分數(shù)最高的是薄荷酮（38.17%）、異薄荷酮（12.34%）、胡椒酮（10.90%）和β-水芹烯（9.75%）.水蒸氣蒸餾法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油鑒定了其中的33種成分.其中胡椒酮（17.40%）、薄荷酮（20.51%）、異薄荷酮（6.94%）、β-水芹烯（11～59%）、萜品烯（13.38%）.超聲波溶劑萃取法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油鑒定了其中的12種成分.其中相對質(zhì)量分數(shù)最高的是薄荷酮（43.45%）、異薄荷酮（16.31%）、胡椒酮（9.97%）、側(cè)柏烯（11.40%）、β-水芹烯（9～35%）.

對比3種提取方法得到的揮發(fā)油組分及其相對質(zhì)量分數(shù)差異較大，質(zhì)量分數(shù)較高均為薄荷酮，可用于四數(shù)九里香質(zhì)量控制指標[10.其中SFE和超聲波溶劑萃取法的異薄荷酮質(zhì)量分數(shù)都相比SD高.而SD中胡椒酮質(zhì)量分數(shù)明顯高于SFE和超聲波溶劑萃取法，SD操作簡便，成本低.SFE得到揮發(fā)的化學(xué)成分更加詳細真實，與文獻報道一致[5，因萃取溫度低，對于低沸點的易揮發(fā)性化合物組分不易損失，其中脂肪族化合物種類及質(zhì)量分數(shù)明顯多于水蒸汽蒸餾法和超聲提取法的揮發(fā)油，可能是由于SD溫度高、受熱時間長，對部分熱敏性組分產(chǎn)生了破壞[11，超聲波提取技術(shù)操作簡便，耗時少，無需加熱，可是對溶劑選擇、超聲功率、提取時間等未進行考察[12，對實驗結(jié)果有一定的影響.采用3種不同方法提取得到的四數(shù)九里香揮發(fā)性化合物數(shù)據(jù)，為其進一步的開發(fā)和利用提供了實驗依據(jù).

參考文獻：

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[5]陳家源，牙啟康，盧文杰，等.GC-MS分析四數(shù)九里香的揮發(fā)油成分[J].華西藥學(xué)雜志， 2009，24（6）：671-672.

[6]牙啟康，盧文杰， 陳家源，等.四數(shù)九里香的化學(xué)成分研究[J].廣西科學(xué)， 2010，17（4）：347-352.

[7]張柯媛，黃艷，劉布鳴，等.四數(shù)九里香藥材中補骨脂素的定性定量分析方法研究[J].廣西科學(xué)， 2012，19（4）：352-354.

[8]毛長智，黃蓓， 庾志斌.四數(shù)九里香揮發(fā)油抗炎及鎮(zhèn)痛作用研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志， 2011，32（8）：74-75.

[9]國家藥典委員會.中國藥典，I部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社， 2010：附錄63.

[10]葛爾寧. 毛細管氣相色譜法測定薄荷煎劑中薄荷腦和（-）-薄荷酮的含量及變化[J].中國實驗方劑學(xué)雜志， 2007，13（5）：7-9.

[11]鄧超澄，朱小勇，韋建華，等. 水蒸氣蒸餾法與超臨界CO2萃取法提取青翹揮發(fā)油的化學(xué)成分比較[J].中國實驗方劑學(xué)雜志， 2010，16（16）：76-79.

[12]張如新，羊衛(wèi)平，樊勤. 超聲波法提取山茱萸中熊果酸的工藝研究[J].湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報， 2008，31（3）：102-104.

（編輯楊春明）

摘要分別采用超臨界CO2流體萃取法（SFE）、超聲波溶劑萃取法及水蒸氣蒸餾法（SD）提取四數(shù)九里香中揮發(fā)油，并用GC-MS對其化學(xué)成分進行分析，采用峰面積歸一法確定各組分相對含量.結(jié)果表明，超臨界C02流體萃取法提取揮發(fā)油共鑒定了38種成分；超聲提取法提取揮發(fā)油共鑒定12種成分；水蒸氣蒸餾法法提取的揮發(fā)油共鑒定了33種成分，含量最高組分均為薄荷酮.3種提取方法所得揮發(fā)油組分與含量差別較大，為進一步開發(fā)應(yīng)用四數(shù)九里香揮發(fā)性成分提供了實驗依據(jù)

關(guān)鍵詞四數(shù)九里香；提取方法；揮發(fā)油；氣質(zhì)聯(lián)用

中圖分類號R284～1；O657～63文獻標識碼A文章編號1000-2537（2014）02-0047-04

四數(shù)九里香Murraya tetramera Huang為蕓香科九里香屬植物，以干燥樹葉入藥，全年均可采收.主產(chǎn)于云南、廣西、貴州、福建、臺灣等亞洲熱帶及亞熱帶地區(qū)[1].其味辛、微苦，性微溫，具有祛風(fēng)解表、行氣、活血散痛、抗炎、解熱之功效[2].可治胃痛、風(fēng)濕痹痛，外用則可治牙痛、跌撲腫痛、蟲蛇咬傷等[3].著名胃藥三九胃泰的主要組成即為四數(shù)九里香[4].對四數(shù)九里香化學(xué)成分的研究已有文獻報告，陳家源等[5]用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油并確認了其中37個組分，牙啟康等[6]運用硅膠層析色譜分離了其中的5個化合物，張柯媛等[7]選用補骨脂素作為指標成為建立其定性定量方法.研究表明四數(shù)九里香揮發(fā)油有顯著的抗炎和鎮(zhèn)痛作用[8]，為進一步全面真實地反映四數(shù)九里香揮發(fā)油的化學(xué)成分，本文分別采用水蒸氣蒸餾、超臨界CO2流體萃取及超聲波溶劑萃取3種方法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油化學(xué)成分并進行了分析和比較.

1儀器與材料

7890A/5975C氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC/MS，美國Agilent公司）；HL-5+1L/50-Ⅱ AQ型超臨界CO2萃取裝置（杭州華黎泵業(yè)有限公司）；DHG-9240A型電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱（上海精密試驗設(shè)備有限公司）；無水乙醇（分析純）；無水硫酸鈉（分析純）. 四數(shù)九里香（2011年5月采于廣西龍州縣）經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)劉壽養(yǎng)副教授鑒定為Murraya tetramera Huang.

湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報第37卷

第2期

龔志強等：不同方法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油氣質(zhì)聯(lián)用分析

2方法與結(jié)果

2.1四數(shù)九里香揮發(fā)油的提取

2.1.1水蒸氣蒸餾提取根據(jù)2010年版《中國藥典》一部附錄XD[5]，取20 g粗粉（過750 μm篩）加500 mL蒸餾水，蒸餾時間5 h，得到淡黃色薄荷香氣味透明液體，收油率3.23%.餾出液用無水乙醚萃取后，用無水硫酸鈉干燥備用.

2.1.2超臨界CO2流體萃取以四數(shù)九里香干燥莖葉粉為實驗材料，采用正交實驗篩選超臨界CO2萃取最優(yōu)方案，即萃取溫度40 ℃，壓力25 MPa，萃取時間45 min，將200 g干燥莖葉粉末投入裝置萃取3次，得黃色濃郁薄荷香氣味透明液體， 收油率約5.11%.餾出液用無水乙醚萃取后，用無水硫酸鈉干燥備用.

2.1.3超聲波溶劑萃取法取5 g干葉粗粉（過750 μm篩），加入50 mL石油醚，超聲30 min，過濾得到濾液.濾液用無水乙醚萃取后，用無水硫酸鈉干燥備用.

3討論

超臨界CO2流體萃取法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油鑒定了其中的38種成分.其中相對質(zhì)量分數(shù)最高的是薄荷酮（38.17%）、異薄荷酮（12.34%）、胡椒酮（10.90%）和β-水芹烯（9.75%）.水蒸氣蒸餾法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油鑒定了其中的33種成分.其中胡椒酮（17.40%）、薄荷酮（20.51%）、異薄荷酮（6.94%）、β-水芹烯（11～59%）、萜品烯（13.38%）.超聲波溶劑萃取法提取四數(shù)九里香揮發(fā)油鑒定了其中的12種成分.其中相對質(zhì)量分數(shù)最高的是薄荷酮（43.45%）、異薄荷酮（16.31%）、胡椒酮（9.97%）、側(cè)柏烯（11.40%）、β-水芹烯（9～35%）.

對比3種提取方法得到的揮發(fā)油組分及其相對質(zhì)量分數(shù)差異較大，質(zhì)量分數(shù)較高均為薄荷酮，可用于四數(shù)九里香質(zhì)量控制指標[10.其中SFE和超聲波溶劑萃取法的異薄荷酮質(zhì)量分數(shù)都相比SD高.而SD中胡椒酮質(zhì)量分數(shù)明顯高于SFE和超聲波溶劑萃取法，SD操作簡便，成本低.SFE得到揮發(fā)的化學(xué)成分更加詳細真實，與文獻報道一致[5，因萃取溫度低，對于低沸點的易揮發(fā)性化合物組分不易損失，其中脂肪族化合物種類及質(zhì)量分數(shù)明顯多于水蒸汽蒸餾法和超聲提取法的揮發(fā)油，可能是由于SD溫度高、受熱時間長，對部分熱敏性組分產(chǎn)生了破壞[11，超聲波提取技術(shù)操作簡便，耗時少，無需加熱，可是對溶劑選擇、超聲功率、提取時間等未進行考察[12，對實驗結(jié)果有一定的影響.采用3種不同方法提取得到的四數(shù)九里香揮發(fā)性化合物數(shù)據(jù)，為其進一步的開發(fā)和利用提供了實驗依據(jù).

參考文獻：

[1]中國科學(xué)院中國植物志編輯部委員會.中國植物志[M].北京：科學(xué)技術(shù)出版社， 1997：145-146.

[2]中華本草編委會.中華本草[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社， 1998：947-948.

[3]全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編（上冊）[M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社， 1996：10-11.

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（編輯楊春明）