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    釀酒酵母細(xì)胞壁合生元對(duì)肉仔鴨腸道結(jié)構(gòu)的影響

    2014-10-19 06:01:18馮治敏伍金娥王學(xué)東張敬明
    中國(guó)飼料 2014年14期
    關(guān)鍵詞:合生元腸絨毛隱窩

    常 超*, 馮治敏, 王 琨, 伍金娥, 王學(xué)東, 張敬明

    (1.武漢輕工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,湖北武漢 430023;2.武漢科諾生物有限公司,湖北武漢 430074)

    胃腸道在營(yíng)養(yǎng)成分的消化和吸收方面發(fā)揮著核心作用。胃腸道上分布著大量的微生物菌群,在黏膜層上形成一道防御屏障,腸上皮細(xì)胞能分泌一種糖蛋白,可減少腸道細(xì)菌在腸壁上黏附(Blomberg等,1993)。另外,胃腸道上天然存在著不同類型的有益菌和致病菌,當(dāng)病原微生物的數(shù)量過(guò)多時(shí),就可能損害動(dòng)物的健康,導(dǎo)致腸道炎癥的發(fā)生,從而降低動(dòng)物生產(chǎn)性能,增加死亡率。甘露糖和酵母細(xì)胞壁已被證明與具有Ⅰ型菌毛的致病菌(如沙門桿菌、大腸桿菌)對(duì)腸壁的黏附作用有較強(qiáng)競(jìng)爭(zhēng)力。在飼料中添加酵母細(xì)胞壁,不僅能改變腸道內(nèi)益生菌和病原菌的比例,并且通過(guò)增加杯狀細(xì)胞的數(shù)量和大小,改善腸道形態(tài)學(xué),對(duì)腸道的健康起著積極的影響 (Dimitroglou等,2009;Shen等,2009)。本試驗(yàn)通過(guò)研究合生元對(duì)櫻桃谷肉鴨腸道結(jié)構(gòu)的影響,為進(jìn)一步合理利用合生元提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧 選1日齡櫻桃谷肉鴨200羽(由湖北春江鴨廠提供),隨機(jī)分成4組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10羽。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,抗生素組飼喂基礎(chǔ)日糧中添加 4 mg/kg黃霉素,復(fù)合芽孢菌組飼喂基礎(chǔ)日糧中添加2 mg/kg黃霉素和1×106cfu/g復(fù)合芽孢菌,合生元組飼喂基礎(chǔ)日糧中添加2 mg/kg黃霉素、0.5×106cfu/g復(fù)合芽孢菌和0.3 g/kg酵母細(xì)胞壁。芽孢桿菌及多糖的用量是綜合考慮前人試驗(yàn)效果及添加成本來(lái)調(diào)整的。試驗(yàn)期35 d,其中1~2周為試驗(yàn)前期,3~5周為試驗(yàn)后期。各期基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)鴨于室內(nèi)同一環(huán)境下散養(yǎng)。每個(gè)重復(fù)1欄,24 h光照,每天喂料2次,自由采食和飲水,每天記錄飼料投放量和剩余量,每天清洗飲水器和料槽1次。免疫接種及疾病預(yù)防、消毒按常規(guī)方法進(jìn)行。

    表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

    1.2 樣品采集及測(cè)定 選取35日齡各試驗(yàn)組和對(duì)照組鴨各8只,屠宰后分離腸段,用溫?zé)嵘睇}水小心沖洗至無(wú)腸內(nèi)容物后,取十二指腸、空腸中段及回腸中回盲瓣前端2 cm處,約2 cm腸段用生理鹽水沖洗干凈,置于10%福爾馬林溶液中固定;將固定好的腸段制作組織切片;選取3張絨毛完整,走向平直的組織切片,對(duì)比觀察腸黏膜和腸絨毛組織形態(tài)的變化,使用Nikon熒光生物顯微鏡并應(yīng)用愛普?qǐng)D像處理分析軟件4.0測(cè)定每個(gè)視野中3條最長(zhǎng)絨毛長(zhǎng)度及隱窩深度。

    1.3 數(shù)據(jù)處理與分析 利用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)整理,采用SPSS 16.0軟件中的平衡試驗(yàn)設(shè)計(jì)方差分析過(guò)程(Anova)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,均值的多重比較采用Duncan’s法,結(jié)果采用 “平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 合生元對(duì)十二指腸組織形態(tài)的影響 由表2可知,合生元組對(duì)刺激十二指腸絨毛的生長(zhǎng)并未表現(xiàn)出明顯的作用,與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)。隱窩深度方面,合生元組與對(duì)照組、抗生素組相比無(wú)顯著差異(P>0.05),較復(fù)合芽孢菌組降低了11.80%(P<0.05)。絨毛長(zhǎng)度/隱窩深度的比值(V/C)方面,合生元組較其他三組差異均不顯著(P>0.05)。表明合生元對(duì)十二指腸生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)顯著影響。

    表2 合生元添加劑對(duì)肉鴨十二指腸結(jié)構(gòu)的影響(n=24)

    2.2 合生元對(duì)肉鴨空腸結(jié)構(gòu)的影響 由表3可知,在空腸部分,抗生素組、復(fù)合芽孢菌組和合生元組組間絨毛長(zhǎng)度無(wú)顯著差異(P>0.05),但在降低隱窩深度方面,合生元組較對(duì)照組、抗生素組、復(fù)合芽孢菌組分別下降12.93%、13.31%和14.00%(P<0.05)。V/C值方面,各組間無(wú)顯著差異(P>0.05),但合生元組較對(duì)照組略高出5.13%(P>0.05)。

    表3 合生元添加劑對(duì)肉鴨空腸結(jié)構(gòu)的影響(n=24)

    2.3 合生元對(duì)肉鴨回腸結(jié)構(gòu)的影響 由表4可知,在回腸部分,合生元組作用于回腸效果明顯,回腸絨毛長(zhǎng)度較對(duì)照組、抗生素組與復(fù)合芽孢菌組分別增加了1.46%(P > 0.05)、11.65%(P >0.05)、27.09%(P < 0.05)。 合生元組、復(fù)合芽孢菌組隱窩深度較對(duì)照組分別下降3.65%、14.18%(P>0.05),合生元組V/C較對(duì)照組、抗生素組和復(fù)合芽孢菌組分別增加13.06%(P>0.05)、27.85%(P< 0.05)和 19.73%(P< 0.05)。合生元組處理的回腸腸絨毛粗壯且排列整齊、緊密,皺褶增多,此結(jié)果綜合表明,回腸上皮細(xì)胞成熟率上升,吸收功能增強(qiáng),回腸是合生元作用的主要腸道位點(diǎn),合生元具有改善回腸消化吸收的能力。

    表4 合生元添加劑對(duì)肉鴨回腸結(jié)構(gòu)的影響(n=24)

    3 討論

    近年來(lái),隨著微生態(tài)研究的飛速發(fā)展,家禽的腸道健康已引起越來(lái)越多學(xué)者的高度重視。家禽小腸黏膜的結(jié)構(gòu)和狀態(tài)顯示著其腸道的健康水平,與自身的快速生長(zhǎng)及抗病防病有著重要的關(guān)系。因此,維持健康狀態(tài)或修復(fù)病理狀態(tài)下腸道結(jié)構(gòu)和功能的完整性,保持腸道健康已成為家禽健康生產(chǎn)的關(guān)鍵所在。小腸內(nèi)容物中的有毒物質(zhì)會(huì)影響小腸微絨毛的長(zhǎng)短和小腸上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)。腸絨毛的數(shù)量、長(zhǎng)度和形態(tài)結(jié)構(gòu)很大程度上決定消化道的消化吸收功能(楊玉榮等,2006)。小腸絨毛是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的主要組織,絨毛的長(zhǎng)度與其腸上皮細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),絨毛短時(shí),成熟的絨毛細(xì)胞減少,對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的吸收能力降低。隱窩深度是反映腸上皮細(xì)胞生成率的指標(biāo)。正常狀態(tài)下,小腸隱窩基部的上皮細(xì)胞不斷增殖,并向絨毛上皮移行,同時(shí)伴隨著具有吸收能力的腸上皮細(xì)胞的分化、成熟和衰老,不斷修復(fù)著正常脫落的腸上皮。如果此過(guò)程減慢,則隱窩變深。因此,隱窩變淺意味著腸上皮細(xì)胞成熟率增加,其分泌和吸收功能增強(qiáng)。絨毛長(zhǎng)度/隱窩深度的比值(V/C)綜合反映小腸的功能狀況,比值下降,表示黏膜受損,消化吸收功能降低,常伴有腹瀉的發(fā)生,動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育受阻;比值上升,則黏膜改善,消化吸收功能增強(qiáng),腹瀉率降低,生長(zhǎng)發(fā)育加快 (伍金娥等,2011;Santin 等,2001)。 眾多的試驗(yàn)證明,合生元制劑能調(diào)整、維持腸道內(nèi)正常微生物菌群平衡,減少腸道內(nèi)氨、胺等毒害物質(zhì)的產(chǎn)生,增強(qiáng)動(dòng)物免疫功能,促進(jìn)腸道消化吸收,從而達(dá)到防病治病、提高飼料轉(zhuǎn)化率和動(dòng)物生產(chǎn)性能的目的(王學(xué)東等,2012;郝光等,2008;井明艷和趙樹盛,2005)。綜合本試驗(yàn)的結(jié)果來(lái)看,合生元降低了空腸的隱窩深度,提高了回腸的絨毛長(zhǎng)度,其絨毛長(zhǎng)度/隱窩深度的比值(V/C)較對(duì)照組有不同程度的提高,研究表明,使用的合生元替代了商業(yè)日糧中添加的50%抗生素后,對(duì)肉鴨的腸道結(jié)構(gòu)具有積極的改善作用。

    合生元組作用的腸段部位表現(xiàn)出明顯差異,與對(duì)照組相比并未表現(xiàn)出顯著的刺激十二指腸和回腸絨毛的增長(zhǎng),未能有效刺激十二指腸的腸細(xì)胞成熟與分化。Santin(2001)等在肉雞的基礎(chǔ)飼料中添加0.2%酵母細(xì)胞壁飼喂1日齡肉雞的生長(zhǎng)試驗(yàn),并開展了對(duì)各腸道絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度的研究。結(jié)果顯示,0.2%酵母細(xì)胞壁具有促進(jìn)生長(zhǎng)、提高飼料利用率的作用;與對(duì)照組相比,飼喂酵母細(xì)胞壁處理組的十二指腸、回腸絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度及其絨毛高度/隱窩深度并未表現(xiàn)出顯著影響,只有在空腸部分表現(xiàn)出顯著增加。本研究中,在促進(jìn)絨毛生長(zhǎng)和促進(jìn)上皮細(xì)胞成熟率方面,合生元作用回腸的效果最佳。究其原因可能在于,一是本試驗(yàn)中制備的是酵母細(xì)胞壁與復(fù)合芽孢菌的合生元,導(dǎo)致了其作用位點(diǎn)與之不一樣。二是本試驗(yàn)中試驗(yàn)動(dòng)物為鴨,是否存在動(dòng)物的種屬差異,有待進(jìn)一步確證。但是在降低隱窩深度方面表現(xiàn)出獨(dú)特優(yōu)勢(shì),加速了上皮細(xì)胞的成熟與分化,該結(jié)果與 Santin(2001)等研究一致。

    本研究中發(fā)現(xiàn),合生元組的絨毛高度/隱窩深度指數(shù)要優(yōu)于復(fù)合芽孢菌組,這說(shuō)明在復(fù)合芽孢菌組中添加釀酒酵母細(xì)胞壁具有增強(qiáng)益生菌的效果,能夠促進(jìn)腸細(xì)胞的分化、生長(zhǎng),增強(qiáng)消化吸收功能,從而提高飼料轉(zhuǎn)化率和動(dòng)物生產(chǎn)性能。

    [1]郝光,王振國(guó),王雪飛,等.合生元的研究進(jìn)展[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2008,20(5):511 ~ 513.

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    [4]王學(xué)東,劉華梅,伍金娥,等.肉鴨日糧中合生元部分替代抗生素的應(yīng)用研究[J].飼料工業(yè),2012,33(5):35 ~ 37.

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