勐侖翅子樹化學(xué)成分的研究

馬艷芳，蔣金和，詹 睿，劉 瑩，陳業(yè)高

（云南師范大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院，云南 昆明 650500）

勐侖翅子樹（Pterospermum menglunense Hsue）為梧桐科翅子樹屬植物，常綠喬木，瀕危種，分布于云南南部西雙版納勐侖，生于石灰?guī)r山林疏林中[1].本品味微苦，民間用于散瘀止血、補(bǔ)益，治外傷及跌打損傷腫痛.翅子樹屬植物具有良好的免疫抑制[2]，抗氧化[3]，抗?jié)僛4]及止血[5]等功效.藥理實(shí)驗(yàn)表明，翅子樹葉的乙醇提取物有較強(qiáng)抑制大腸桿菌生長(zhǎng)和縮短小白鼠凝血時(shí)間的作用[6].勐侖翅子樹的化學(xué)成分尚未見(jiàn)報(bào)道，為進(jìn)一步開發(fā)其藥用價(jià)值，闡述其有效成分，本文對(duì)勐侖翅子樹的化學(xué)成分進(jìn)行了分離鑒定.采用各種分離方法包括硅膠柱層析、MCI柱層析、凝膠層析和和C-18反相柱層析等分離方法，從中分得9個(gè)化合物.經(jīng)過(guò)波譜分析(核磁共振氫譜、碳譜)確定它們的結(jié)構(gòu)分別為teraxeryl acetate（1），β-sitosterol（2），7β-hydroxysitosterol（3），daucosterol（4），24-ethylcholesta-7,22-diene-3β,5α,6β-triol（5），24(S)-24-enthyl-5α-cholestane-3β,5,6β-triol（6），6β-hydroxy stigmast-4-en-3-one（7），(22E,24R)-23-methylergosta-7,22-diene-3β,5α,6β-triol（8），glycerol monopalmitate（9）.所有化合物均為首次從該種植物分離得到，其中（3）、（5）～（9）為首次從該屬植物中分離得到.其結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1.

圖1 化合物結(jié)構(gòu)圖Fig.1 Structure diagram of compound

1 藥材和儀器

1.1 儀器

Bruker DRX-500MHz超導(dǎo)核磁共振儀（瑞士Bruker公司）；ZF-Ⅱ型紫外分析儀（上海顧村中實(shí)儀器廠）；EYELA IV-1100型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海愛(ài)朗儀器有限公司）.

1.2 試劑

層析硅膠（青島海洋化工廠出品），高效薄層層析硅膠G板（煙臺(tái)化工研究院），Sephadex LH-20：20-80 m（Pharmacia Fine Chemical Co.，Ltd.），MCI（CHP20P，日本三菱公司）；反相RP-18（德國(guó)Merck公司）.顯色劑：10%硫酸乙醇溶液.所用溶劑為工業(yè)純，重蒸，其它試劑為化學(xué)純或分析純.

1.3 藥材

勐侖翅子樹枝葉采自云南西雙版納，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物開發(fā)研究所云南分所彭朝中先生采集，并鑒定為Pterospermum menglunense Hsue的枝葉.

2 試驗(yàn)方法

干燥的勐侖翅子樹枝葉部分（9.0 kg），用工業(yè)甲醇室溫浸提4次，浸出液減壓濃縮得甲醇提取物，為黑色浸膏.浸膏用水懸溶，乙酸乙酯萃取，萃取液減壓濃縮，得乙酸乙酯浸膏147 g.乙酸乙酯部分進(jìn)行MCI柱層析（甲醇/水 8：2→10：0，丙酮），依此得到甲醇/水 8：2（A）28 g，甲醇/水 9：1（B）34 g，甲醇（C）74 g和丙酮部分.C部分經(jīng)硅膠柱層析，凝膠柱層析和C-18反相柱層析反復(fù)分離純化，得化合物1（220 mg），2（190 mg），3（5.0 mg），4（6.8 mg），5（3.0 mg），6（6.0 mg），7（9.0 mg），8（6.0 mg）和9（18 mg）.

3 結(jié)果與討論

從勐侖翅子樹枝葉分離得到9個(gè)成分，利用現(xiàn)代核磁共振波譜法，結(jié)合理化分析進(jìn)行鑒定，9個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)分別為teraxeryl acetate（1），β-sitosterol（2），7β-hydroxysitosterol（3），daucosterol（4），24-ethylcholesta-7,22-diene-3β,5α,6β-triol（5），24(S)-24-enthyl-5α-cholestane-3β,5,6β-triol（6），6β-hydroxy stigmast-4-en-3-one（7），(22E,24R)-23-methylergosta-7,22-diene-3β,5α,6β-triol（8），glycerol monopalmitate（9）.所有化合物均為首次從該種植物分離得到，其中（3）、（5）～（9）為首次從該屬植物中分離得到.

化合物1：無(wú)色針狀結(jié)晶，分子式為C32H52O2，溶于氯仿.1H-NMR（500 MHz,CDCl3）：δ 5.54（1H,dd,J=2.5,2.5 Hz,H-15），4.47（1H,dd,J=5.5,5 Hz,H-3）表明有烯氫質(zhì)子，2.05（3H,s,-COCH3），1.91（1H,dd,J=15 Hz,H-16a），1.09（3H,s,H-26），0.96（3H,s,H-23），0.91（3H,s,H-30），0.88（3H,s,H-30），0.86（3H,s,H-29），0.83（3H,s,H-24）；13C-NMR（CDCl3,125 MHz）：δ 171.0（s,-COCH3），158.0（s,C-14），116.9（d,C-15），81.0（d,C-3），55.6（d,C-5），49.2（d,C-9），48.8（d,C-18），41.2（t,C-19），39.0（d,C-8），38.9（s,C-4），37.9（s,C-13），37.7（t,C-1），37.6（s,C-10），37.4（t,C-22），36.7（t,C-12），35.8（s,C-17），35.1（t,C-21），33.7（t,C-16），33.4（q,C-29），33.1（t,C-7），29.9（q,C-27），29.8（q,C-28），28.8（s,C-20），28.0（q,C-23），25.9（t,C-2），21.3（q,C-30;q,-COCH3），18.8（t,C-6），17.5（t,C-11），16.6（q,C-24），15.4（q,C-25）.數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報(bào)道的化合物teraxeryl acetate完全一致，因此化合物1的結(jié)構(gòu)確定為teraxeryl acetate.

化合物2：無(wú)色針狀結(jié)晶，分子式為C29H50O，易溶于氯仿，難溶于甲醇.10%濃硫酸-乙醇顯色為紫紅色，與β-Sitosterol標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行TLC展開，多種不同的展開劑系統(tǒng)的Rf值均相同.根據(jù)以上理化性質(zhì)，結(jié)合文獻(xiàn)[8]報(bào)道，鑒定化合物2為β-Sitosterol.

化合物3：無(wú)色粉末，分子式為C29H50O2，可溶于氯仿、甲醇.1H-NMR（500 MHz,CDCl3）：δ 5.32（1H,brs,H-6），3.87（1H,d,J=7.5 Hz,H-7），3.57（1H,m,H-3），1.07（3H,s,H-19），0.94（3H,d,J=7.0 Hz,H-21），0.87（2H,t,J=7.3 Hz,H-28），0.84（3H,d,J=6.5 Hz,H-26），0.81（3H,d,J=6.5 Hz,H-27），0.72（3H,s,H-18）；13C-NMR（500 MHz,CDCl3）：δ 143.5（s,C-5），125.5（d,C-6），73.4（d,C-7），71.5（d,C-3），56.0（d,C-14），55.4（d,C-17），48.3（d,C-9），45.9（d,C-24），42.3（d,C-8），42.2（t,C-4），41.8（s,C-13），39.6（t,C-12），37.0（t,C-1），36.9（s,C-10），36.5（d,C-20），36.1（t,C-22），31.6（t,C-2），29.2（d,C-25），28.6（t,C-16），26.4（t,C-15），26.1（t,C-23），23.1（t,C-28），21.1（t,C-11），19.8（q,C-26），19.2（q,C-27），19.0（q,C-19），18.8（q,C-21），12.0（q,C-18），11.8（q,C-29）.數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道的化合物7β-hydroxysitosterol完全一致，因此化合物3的結(jié)構(gòu)確定為7βhydroxysitosterol.

化合物4：無(wú)色粉末，分子式為C35H60O6，可溶于氯仿、丙酮.10%濃硫酸-乙醇顯色為紫紅色，與daucosterol標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行TLC展開，多種不同的展開劑系統(tǒng)的Rf值均相同.根據(jù)以上理化性質(zhì)，結(jié)合文獻(xiàn)[10]報(bào)道，鑒定化合物4為daucosterol.

化合物5：無(wú)色粉末，分子式為C29H48O3，可溶于吡啶.1H-NMR（500 MHz,C5D5N）：δ 5.73（1H,brs,H-7），5.20（1H,dd,J=15.0,6.8 Hz,H-23），5.18（1H,dd,J=12,6.8 Hz,H-22），4.83（1H,m,H-3），4.32（1H,d,J=4.5 Hz,H-6），3.05（1H,t,J=12.0 Hz,H-4），2.56（1H,m,H-9），1.71（1H,m,H-16β），1.69（2H,m,H-11），1.53（3H,s,H-19），1.26（1H,m,H-16α），1.24（1H,m,H-14），1.05（3H,d,J=6.5 Hz,H-21），0.93（1H,d,J=6.6 Hz,H-22），0.85（3H,d,J=4.0 Hz,H-26），0.83（3H,d,J=4.5 Hz,H-27），0.64（3H,s,H-18）；13C-NMR（C5D5N,125 MHz）：δ 141.3（s,C-8），136.0（d,C-22），131.8（d,C-23），120.2（d,C-7），75.9（s,C-5），74.0（d,C-6），67.3（d,C-3），55.9（d,C-17），55.0（d,C-14），43.5（d,C-9），43.5（s,C-13），43.0（d,C-24），41.7（t,C-4），40.6（d,C-20），39.6（t,C-12），37.8（s,C-10），33.6（d,C-25），33.1（t,C-2），32.4（t,C-1），29.7（t,C-28），28.2（t,C-16），23.2（t,C-15），22.1（t,C-11），21.1（q,C-26），19.9（q,C-21），19.6（q,C-27），18.5（q,C-19），17.6（q,C-29），12.3（q,C-18）.數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道的化合物24-ethylcholesta-7,22-diene-3β,5α,6β-triol完全一致，因此化合物5的結(jié)構(gòu)確定為24-ethylcholesta-7,22-diene-3β,5α,6β-triol.

化合物6：無(wú)色粉末，分子式為C29H52O3，可溶于吡啶.1H-NMR（500 MHz,C5D5N）：δ 5.24（m,1H,H-3），4.14（m,1H,H-6），0.69（s,3H,H-18），0.80（d,3H,J=6.5 Hz,H-26），0.82（d,3H,J=7.0 Hz,H-27），0.85（t,3H,J=7.5 Hz,H-29），0.9l（d,3H,J=6.6 Hz,H-21），1.18（s,3H,H-19）表明有6個(gè)甲基質(zhì)子信號(hào).13C-NMR（C5D5N,125 MHz）：δ 76.2(d,C-6），75.8（s,C-5），67.3（d,C-3），56.5（d,C-14），56.5（d,C-17），46.0（d,C-24），46.0（d,C-9），43.0（s,C-13），42.8（t,C-4），40.6（t,C-12），39.0（(s,C-10），36.4（t,C-20），35.6（t,C-7），34.1（t,C-22），33.2（t,C-2），32.4（t,C-1），31.1（d,C-8），29.3（d,C-25），28.6（t,C-16），26.3（t,C-23），24.6（t,C-15），23.3（t,C-28），21.7（t,C-11），19.9（q,C-27），19.1（q,C-26），18.9（q,C-21），17.1（q,C-19），12.3（q,C-18），12.0（q,C-29）.數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道的化合物24(S)-24-enthyl-5α-cholestane-3β,5,6β-triol完全一致，因此化合物6的結(jié)構(gòu)確定為24(S)-24-enthyl-5α-cholestane-3β,5,6β-triol.

化合物7：無(wú)色結(jié)晶，分子式為C29H48O2，可溶于吡啶.1H-NMR（500 MHz,C5D5N）：δ 6.04(s,1H,H-4），4.54（s,1H,H-6），2.56（m,2H,H-7），1.88（m,1H,H-25），1.53（s,3H,H-19），1.38（s,1H,H-20），1.30（m,2H,H-7），1.26（m,2H,H-28），0.98（d,J=6.5 Hz,3H,H-21），0.88（s,3H,H-29），0.87（d,J=6.56 Hz,3H,H-27），0.85（d,J=7 Hz,3H,H-26),0.71（s,3H,H-18）；13C-NMR（C5D5N,125 MHz）：δ 199.4（s,C-3），169.6（s,C-5），125.6（d,C-4），72.3（d,C-6），56.0（d,C-14），55.9（d,C-17），53.9（d,C-9），45.9（d,C-24），42.5（s,C-13），39.7（t,C-12），39.5（t,C-7），38.2（s,C-10），37.3（t,C-1），36.2（d,C-20），34.5（t,C-2），34.0（t,C-22），30.1（d,C-8),29.3（d,C-25），28.3（t,C-16），26.2（t,C-23），24.3（t,C-15），23.2（t,C-28），21.1（t,C-11），19.8（q,C-26），19.4），q,C-19），19.0（q,C-27），18.8（q,C-21），11.9（q,C-18）.數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道的化合物6β-hydroxy stigmast-4-en-3-one完全一致，因此化合物7的結(jié)構(gòu)確定為6β-hydroxy stigmast-4-en-3-one.

化合物8：無(wú)色粉末，分子式為C29H48O3，可溶于氯仿，甲醇，吡啶.1H-NMR（500 MHz,C5D5N）：δ 5.32（dd,1H,J=5.5,2.6 Hz,H-7），4.90（dd,J=9.5,1.5 Hz,1H,H-22），4.08（m,1H,H-3），3.63（m,1H,H-6），2.36（m,1H,H-20），2.15（dd,1H,J=12.8,12.1 Hz,H-4），1.51（d,3H,J=1.5 Hz,H-29），1.09（s,3H,H-19），0.95（d,3H,J=6.6 Hz,H-21），0.94（d,3H,J=7.0 Hz,H-28），0.85（d,3H,J=6.6 Hz,H-26），0.79（d,3H,J=6.6 Hz,H-27），0.62（s,3H,H-18）；13C-NMR（C5D5N,125 MHz）：δ 143.2（s,C-8），135.7（s,C-23），131.8（d,C-22），115.8（d,C-7），75.5（s,C-5），73.9（d,C-6），67.1（d,C-3），57.0（d,C-17），54.5（d,C-14），43.5（d,C-9），43.0（s,C-13），39.3（t,C-12），39.1（t,C-4），37.0（s,C-10），34.5（d,C-20），33.0（t,C-1），30.7（d,C-25），30.5（t,C-2），27.0（t,C-16），22.6（t,C-11），22.0（t,C-15），21.4（q,C-27），20.6（q,C-26），19.9（q,C-21），18.7（q,C-19），17.0（q,C-28），13.1（q,C-29），12.2（q,C-18）.數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道的化合物(22E,24R)-23-methylergosta-7,22-diene-3β,5α,6β-triol完全一致，因此化合物8的結(jié)構(gòu)確定為(22E,24R)-23-methylergosta-7,22-diene-3β,5α,6β-triol.

化合物9：無(wú)色粉末，分子式為C20H40O4，可溶于氯仿、丙酮.1H-NMR（500 MHz,CDCl3）：δ 4.16（d,1H,J=7.0 Hz,1’-OH），4.07（m,1H,3’-OH），3.84（m,1H,H-1’），3.58（dd,2H,J=2.5,2.5 Hz,H-2’），2.38（m,2H,H-1’），1.38（m,28H,H-2～H-15），0.92（t,3H,H-16）；13C-NMR（CDCl3,125 MHz）：δ 174.4（s,C-1），70.3（d,C-2’），65.2（t,C-1’），63.4（t,C-3’），34.2（t,C-2），31.2（t,C-14），29.1～79.7（t,C-4～C-13），24.9（t,C-3），22.7（t,C-15），14.1（q,C-16）.數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道的化合物glycerol monopalmitate完全一致，因此化合物9的結(jié)構(gòu)確定為glycerol monopalmitate.

[1]中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志[M].北京：北京科學(xué)出版社,1984：177.

[2]Manisha P,Nasreen B,Preety D,et al.Immunosuppressive activity of hexane and ethanolic extracts of Pterospermum acerifolium seeds in BALB/c mice[J].Med Chem Res,2011,20,1667-1673.

[3]Shweta S,Ritesh T,Khadabadi S S,et al.In vitroantioxidant activity and total phenolic,flavonoidcontents of the crude extracts of Pterospermum acerifolium wild leaves(Sterculiaceae)[J].J Chem Pharm Res,2010,2(3)：417-423.

[4]Manna A K,Behera A K,Jena J,et al.The antiulcer activity of Pterospermum acerifoliumbark extract in experimental ani-mal[J].J.Pharm Res,2009,2(5)：785-788.

[5]Manna A K,Bhunia S K,Nanda U,et al.Wound healing properties of Pterospermum acerifolium wild[J].J PharmRes,2010,3(3)：537-538.

[6]鐘永利,蘇鏡娛,曾隴梅,等.翅子樹葉中的三萜化合物[J].高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào),1993,14(2)：214-216.

[7]石妍,李帥,李紅玉,等.翻白葉樹根化學(xué)成分的研究[J].中國(guó)中藥雜志,2008,33(16)：1994-1996.

[8]戚歡陽(yáng),王瑞,劉勇,等.白條黨參化學(xué)成分研究[J].中藥材,2011,34(4)：546-548.

[9]侯朋藝,黃健,孫博航,等.新疆雪蓮化學(xué)成分的分離與鑒定[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,28(2)：120-123.

[10]鮑長(zhǎng)余,范超君,陳湛娟,等.海南產(chǎn)三叉苦的化學(xué)成分研究[J].海南師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2012,25(1)：66-69.

[11]Lee H S,Hwang I H,Kim J A,et al.Isolation of Protein Tyrosine Phosphatase 1B Inhibitory Constituents from the Sclerotia of Polyporus umbellatus Fries[J].Bull.Korean Chem.Soc.,2011,32(2)：697-700.

[12]劉青,劉珍伶,田瑄,等.羽裂蟹甲草中的甾醇類化合物[J].中國(guó)中藥雜志,2008,33(9)：1035-1038.Patricia G,Muriel S,Heinz R,et al.

[13]Ketosteroids and hydroxyketosteroids,minor metabolites of sugarcane wax[J].Steroids,2007,71(8)：647-652.

[14]Yaoita Y,Endo M,Tani Y,et al.Sterol Constituents from Seven Mushrooms[J].Chem Pharm Bull,1999,47(6)：847-851.

[15]孫彥君,李占林,陳虹,等.桃兒七化學(xué)成分研究[J].中藥材,2012,35(10)：1607-1609.