探討3項血清指標(biāo)聯(lián)合檢測在酒精性肝硬化診斷中的意義

李 楊（解放軍第二五二醫(yī)院檢驗科，河北保定 071000）

酒精性肝硬化（AC）是酒精性肝病的終末階段［1］，發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜。AC的發(fā)生與飲酒者的飲酒方式、性別、遺傳因素、營養(yǎng)狀況、肝細(xì)胞反復(fù)損傷、肝組織再生及進(jìn)行性纖維化等因素密切相關(guān)。其病情進(jìn)展快，預(yù)后差，病死率較高，嚴(yán)重威脅人們的生命健康。近年來，多種生化指標(biāo)聯(lián)合檢測在AC診斷中的作用引起了廣大醫(yī)務(wù)工作者的重視［2］。本研究通過對AC患者血清膽堿酯酶（CHE）、腺苷脫氨酶（ADA）和同型半胱氨酸（Hcy）水平動態(tài)追蹤的聯(lián)合檢測，根據(jù)Child－Turcotte－Pugh（CTP）分級法將不同肝功能患者進(jìn)行分組比較，最后對其結(jié)果的變化進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。旨在探討血清CHE、ADA和Hcy聯(lián)合檢測在AC患者肝臟損害情況、疾病嚴(yán)重程度以及診斷等方面的臨床應(yīng)用價值?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至2014年1月本院傳染科及消化內(nèi)科經(jīng)實驗室檢測，病理學(xué)、影像學(xué)或B超檢查確診的76例AC患者為試驗組，其中男71例，女5例，年齡31～78，平均年齡（48.0±7.2）歲，以上病例診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合2010年美國肝病學(xué)會酒精性肝病指南解讀［3］標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。76例AC患者CTP分級依據(jù)肝性腦病、腹腔積液、血清膽紅素、凝血酶原時間和清蛋白檢測結(jié)果進(jìn)行，其中A級29例，B級22例，C級25例，所有病例均排除膽管梗阻、急性肝損害、肝癌等情況。對照組為同期健康體檢者81例，其中男74例，女7例，年齡29～76歲，平均年齡（46.0±6.8）歲，經(jīng)實驗室檢查乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物、抗HCV均為陰性，無長期飲酒史，并排除心腦血管病、糖尿病、肝、腎、內(nèi)分泌、腫瘤疾病或其他對肝臟損害有關(guān)的疾病。兩組受試者的年齡、性別等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 兩組受試者均于第2天晨起空腹采集靜脈血5 mL，室溫靜置30min后，3 500 r／min離心10min，分離血清標(biāo)本，置－20℃冰箱5d內(nèi)用于CHE、ADA和Hcy檢測，檢測標(biāo)本均排除溶血和脂血。CHE采用DGKC推薦法，ADA采用黃嘌呤氧化酶法，Hcy采用循環(huán)酶法。

1.3 試劑及儀器 檢測試劑盒、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品均為四川省新成生物科技有限責(zé)任公司產(chǎn)品，試劑參數(shù)設(shè)置均嚴(yán)格遵照試劑盒說明書規(guī)定進(jìn)行。儀器操作嚴(yán)格按照日立7600－020全自動生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序以及醫(yī)院檢驗科標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序受控文件進(jìn)行。標(biāo)本測定前血清CHE、ADA和Hcy的質(zhì)控測定結(jié)果均在控制范圍內(nèi)，所有校準(zhǔn)及檢測由日立7600－020全自動生化分析儀完成。CHE低于3 500 U／L或超過11 000 U／L為陽性。ADA正常值為小于25U／L，Hcy正常值為小于25.0 μmmol／L，檢測結(jié)果超過參考值上限為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料采用表示，組間比較采用t檢驗；以α＝0.05為檢驗水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

試驗組患者CHE水平明顯低于對照組；ADA、Hcy水平明顯高于對照組，組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。隨著臨床CTP分級的級別增加，血清CHE水平逐漸降低，血清ADA、Hcy水平逐漸升高。見表2。

表1 兩組血清CHE、ADA和Hcy結(jié)果比較（）

表1 兩組血清CHE、ADA和Hcy結(jié)果比較（）

注：與對照組比較，aP＜0.01；b P＜0.05。

組別 n CHE（U／L） ADA（U／L） Hcy（μmol／L）對照組81 8 243.1±1 241 .2 14 .21±5.19 10.23±4.21試驗組 76 2 984.3±963.5a 36.91±9.64b 34.19±10.52b

表2 不同CTP分級血清CHE、ADA和Hcy結(jié)果比較（）

表2 不同CTP分級血清CHE、ADA和Hcy結(jié)果比較（）

注：與A級比較，aP＜0.05；與B級比較，b P＜0.01。

CTP分級 n CHE（U／L） ADA（U／L） Hcy（μmol／L）29 3 985.2±824.0 21.31±6.12 18.54±3.74 B級 22 2 356.9±964.2b 29.34±8.11a 26.38±10.23a C級 25 1 652.1±1 141 .2b 45.36±11.21a 39.47±16.52 A級a

3 討 論

肝臟為機(jī)體合成代謝血清CHE、ADA和Hcy等物質(zhì)的主要器官之一，也是乙醇解毒代謝的主要器官，對全身物質(zhì)代謝及生物轉(zhuǎn)化具有十分重要的作用。目前AC的發(fā)病機(jī)制仍不清楚，大量研究資料表明［4－5］，乙醇代謝產(chǎn)物乙醛是造成肝臟和其他臟器損害的主要因素。乙醛與機(jī)體蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，進(jìn)一步導(dǎo)致肝細(xì)胞毒性，引起肝細(xì)胞變性、壞死及結(jié)締組織增生，從而為假小葉及肝細(xì)胞的再生結(jié)節(jié)替代，使肝內(nèi)的血液循環(huán)受到嚴(yán)重障礙，最后使肝臟質(zhì)地變硬。檢測血清酶學(xué)能反映肝細(xì)胞受損、壞死、細(xì)胞膜的通透性等肝臟功能狀況。因此，對患者進(jìn)行血清酶學(xué)水平檢測可評估肝細(xì)胞受損狀況［6－7］。血清CHE是一類糖蛋白和水解各種不同的膽堿酯生成膽堿與羧酸的非特異性酯酶，絕大部分由肝實質(zhì)細(xì)胞合成后進(jìn)入血液，體內(nèi)以多種形式的同工酶存在。當(dāng)肝實質(zhì)細(xì)胞受損時，肝細(xì)胞壞死變性、纖維和結(jié)締組織增生。引起CHE合成減少，導(dǎo)致血清CHE水平降低［8］。本研究結(jié)果顯示，AC患者血清CHE水平顯著下降；同時在CTP分級中，C級AC患者血清CHE水平明顯低于A級和B級，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。說明血清CHE水平降低的程度與肝細(xì)胞受損程度一致，其水平隨肝功能的下降而降低?？梢姍z測CHE水平，在AC診斷、肝功能評定及病情判斷等方面具有十分重要的指導(dǎo)意義。與余書武［9］的報道一致。

ADA是肝細(xì)胞的胞漿酶，參與機(jī)體免疫功能以及嘌呤核苷酸代謝，其相對分子質(zhì)量比相關(guān)的血清學(xué)指標(biāo)?。?0］。廣泛存在于機(jī)體各組織中，盲腸和小腸黏膜中水平最高，肝、腎和心臟水平較低。肝臟水平僅為小腸的8%左右，肝臟內(nèi)90.0%的ADA存在于肝細(xì)胞漿的水溶性部分。因此，其活性變化能夠準(zhǔn)確反映肝實質(zhì)細(xì)胞損傷情況。當(dāng)肝細(xì)胞受損、壞死或通透性發(fā)生改變，使細(xì)胞膜的通透性增強(qiáng)，胞內(nèi)ADA迅速透過組織血液屏障釋放入血，導(dǎo)致血清中ADA水平升高。長期飲酒可導(dǎo)致肝細(xì)胞葉酸缺乏，從而影響Hcy的代謝［11］。有研究表明，乙醇直接抑制肝細(xì)胞中蛋氨酸合成酶活性，導(dǎo)致Hcy甲基轉(zhuǎn)移酶活性和Hcy水平增加。血清Hcy可誘導(dǎo)肝細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞Ⅰ型前膠原和組織抑制劑金屬蛋白酶－1基因的表達(dá)［12］，引起肝臟纖維化的嚴(yán)重后果。本研究結(jié)果顯示，AC患者血清ADA和Hcy明顯升高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。同時在CTP分級中，C級AC患者血清ADA和Hcy明顯高于A級和B級，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。說明血清ADA和Hcy水平在AC患者體內(nèi)有較明顯的改變，其水平改變能為AC患者疾病診斷、治療、肝細(xì)胞受損程度、肝臟纖維化程度、肝臟儲備功能以及病情判定提供可靠的實驗室依據(jù)。

綜上所述，對AC患者進(jìn)行血清CHE、ADA和Hcy的聯(lián)合檢測，有助于準(zhǔn)確評估AC患者肝臟的損傷情況，可作為AC的病情了解、診斷和預(yù)后判斷的檢測指標(biāo)，對判斷AC患者疾病嚴(yán)重程度和進(jìn)展具有重要的臨床指導(dǎo)意義。但由于本研究的患者數(shù)量有限，上述一些推測仍需要進(jìn)一步大量的實驗及臨床工作來證實。

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