病理制片質(zhì)量控制的常見差錯及應(yīng)對措施

劉憲軍

[摘要] 隨著當(dāng)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，越來越多的疾病需要進(jìn)行病理診斷，同時病理診斷也是尸體解剖、司法鑒定最具權(quán)威的手段，因此，病理診斷被冠以金色招牌，而組織制片的質(zhì)量又是臨床病理診斷和司法病理診斷的基礎(chǔ)，臨床病理醫(yī)生及司法鑒定專家極其重視組織切片的質(zhì)量，一組優(yōu)秀的切片可以準(zhǔn)確完整地反映疾病的病情、性質(zhì)、預(yù)后并可為司法鑒定提供證據(jù)，因此質(zhì)量好的病理切片是臨床診斷及司法鑒定的基礎(chǔ)。本研究通過總結(jié)分析常規(guī)病理制片中常易出現(xiàn)的問題，對實(shí)際工作的影響加以探討，以期不斷提高切片質(zhì)量，從而保證準(zhǔn)確、完整的臨床病理診斷，為患者提供更好的服務(wù)。

[關(guān)鍵詞] 病理技術(shù)；質(zhì)量控制；常見問題；對策

[中圖分類號] R446.8 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1674-4721（2014）08（a）-0148-03

The common problems and measures to control the quality of pathological section

LIU Xian-jun

Department of Pathology，Jilin Central Hospital in Jilin Province，Jilin 132001，China

[Abstract] With the development of modern medicine，more and more diseases need for pathological diagnosis，at the same time，pathological diagnosis is becoming the most authoritative method of for autopsy，forensic identification，so the pathological diagnosis was dubbed the golden signboard，the quality of tissue sectioning is the basis of clinical and forensic pathological diagnosis，clinicaldoctors and forensic experts attached great importance to the quality of tissue sections，a group of excellent slices can accurately reflect the disease condition，，properties，prognosis and provide evidence for forensic identification，therefore the good quality pathological sections is basis of clinical diagnosis and forensic identification.In this study，through the analysis of common problems in routine pathological section，discusses the influence to the practical work in order to constantly improve the chip quality，thus ensuring the clinical accurate and complete pathological diagnosis of complete to provide the better service for patients.

[Key words] Pathological technique；Quality control；Common problems；Countermeasures

石蠟制片技術(shù)是臨床病理技術(shù)的基礎(chǔ)，病理實(shí)驗(yàn)員是這個工作的操作者。石蠟制片技術(shù)包括標(biāo)本受理、組織固定、醫(yī)生取材、組織的脫水、透明、浸蠟包埋處理及切片、染色等一系列過程，每個步驟都有其特殊的意義，順序唯一，試劑唯一，技術(shù)人員必須熟練掌握其每一步驟 ，確保最終病理切片[1-2]的質(zhì)量，使病理醫(yī)生簽發(fā)出準(zhǔn)確的病情診斷。現(xiàn)將活體組織石蠟制片中的常見問題及應(yīng)對方法總結(jié)如下。

1 標(biāo)本接收

標(biāo)本接收是病理室石蠟制片的第一步，在實(shí)際工作中常被忽視，很容易出現(xiàn)一些差錯，如送檢標(biāo)本件數(shù)與申請單上所填寫的不符；標(biāo)本名稱部位與實(shí)際不符[3]；接收的標(biāo)本未及時固定；標(biāo)本袋上的姓名與申請單上不符等。技術(shù)員要及時、準(zhǔn)確地為病理申請單編號，同時將此編號粘貼在對應(yīng)患者的標(biāo)本袋上。不能將粘貼標(biāo)簽污損，模糊不清。要做好接收標(biāo)本，首先需要提高技術(shù)人員的責(zé)任心，從主觀思想上認(rèn)識到接收標(biāo)本的重要性；科室應(yīng)建立完善的工作制度，由專職技術(shù)員負(fù)責(zé)接收標(biāo)本，認(rèn)真核查登記。初步掌握該患者的基本信息及臨床資料，為下一步取材作準(zhǔn)備。

2 取材環(huán)節(jié)

取材環(huán)節(jié)需要技術(shù)員與診斷醫(yī)生高度配合。技術(shù)員要準(zhǔn)確無誤地向取材醫(yī)生提供該患者的姓名、性別、年齡、標(biāo)本名稱及病史、檢查項(xiàng)目、手術(shù)所見、傳染病史等，取材過程中技術(shù)員要準(zhǔn)確地錄入取材記錄，同時書寫與病理申請單號碼相同的包埋盒遞送給取材醫(yī)生。每一個標(biāo)本或全部標(biāo)本取完材，必須核對好某個標(biāo)本和全部標(biāo)本的材塊數(shù)。對于小的組織或特殊標(biāo)本，技術(shù)員應(yīng)親自參與取材，以備包埋及切片時引起重視。

3 取材后的組織處理

根據(jù)實(shí)際工作中遇到的問題加以闡述，現(xiàn)在病理科已經(jīng)應(yīng)用自動脫水機(jī)，在夜間進(jìn)行自動脫水時組織提籃有時卡在外面，未進(jìn)行組織脫水，第2天發(fā)現(xiàn)組織已干枯，此時的處理方法是將干枯的組織浸入40℃的生理鹽水中浸泡30 min[4]，使干枯的組織盡量恢復(fù)到原狀態(tài)，目的是軟化組織，使細(xì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)變化很小，然后進(jìn)行AF液的處理30 min，經(jīng)兩次95%乙醇，兩次無水乙醇各60 min，然后進(jìn)入二甲苯透明 45 min，最后進(jìn)行浸蠟處理，時間2 h以上，這樣可挽救處理過程中的失誤。再者因脫水機(jī)的故障直接透明了，此時應(yīng)將組織提籃迅速移除，使用無水乙醇加溫45℃換洗兩次，再用蒸餾水換洗兩次，校對好脫水機(jī)后，重新從AF液開始組織處理。在實(shí)際工作中還發(fā)生過組織直接浸蠟了，此時應(yīng)將組織框及時取出，反復(fù)水浴加熱70℃ 30 min 3次，倒掉水分，再用無水乙醇洗滌兩次，然后水浴加熱45℃二甲苯容器30 min，再用無水乙醇洗滌兩次，再進(jìn)行組織脫水處理。endprint

4 包埋

包埋環(huán)節(jié)處理得當(dāng)，可以為切片做好幫助，一些難處理的標(biāo)本，如宮頸錐切組織可以與切片刀鋒方向小角度順長包埋，淋巴結(jié)每個包埋盒以3枚最佳[5]，各種鏡檢的小組織要聚集緊湊，而且在同一包埋面上要利于切面完整，連續(xù)切片。所有管腔組織、囊壁組織均應(yīng)立式包埋，鏡下才能看到上皮組織，對于前列腺電切組織應(yīng)該整齊排列包埋，橫向?qū)R，每盒4條為宜；對于乳腺、甲狀腺、腎活檢、淋巴結(jié)等各種穿刺活檢組織每條長度以0.5 cm為宜，過長組織應(yīng)折返包埋，每盒3條，確保于同一切面且完整，最大限度地切出病變。小組織的包埋是包埋環(huán)節(jié)的重點(diǎn)，容易丟失，難以確認(rèn)包埋面，可以在取材時點(diǎn)上低濃度的伊紅或蘇木精染液，借助放大鏡使用電熱鑷子準(zhǔn)確輕柔地夾持組織包埋。不宜使用涼的普通鑷子夾持組織，避免將小組織因石蠟?zāi)處ё?，造成技術(shù)事故。

5 切片

切片是病理制片較難的一步，即使從事技術(shù)工作十?dāng)?shù)年，也會出現(xiàn)一些問題。

5.1 常規(guī)石蠟切片

常規(guī)石蠟切片厚度以2 μm為宜，但是有一些特殊組織如凝血組織，膠質(zhì)豐富的甲狀腺組織、鈣化組織、骨組織等切片厚度以1 μm為好，且烤片時應(yīng)使切片緊貼在烤片機(jī)面上15 min方可。切片時為了防止崩飛組織，刀頭、刀片、蠟塊均應(yīng)夾緊，角度一般以10°為宜，動作均勻，輕柔，削蠟塊深淺適中，以暴露最大組織切面即可[6]，連續(xù)切片。所用的載玻片需潔凈，防止脫片，展片水面潔凈防止混入，溫度以42～43℃為宜，展脂肪組織切片溫度40℃即可，組織應(yīng)撈在載玻片磨砂面一側(cè)，利于粘貼不干膠時同時封住鉛筆的號碼?？酒臏囟嚷愿哌^石蠟熔點(diǎn)，平放在烤片機(jī)面上2 min即可。如果未直接烤片，則烤片機(jī)應(yīng)調(diào)整到80℃ 15 min。

5.2 切片

切片過程中時有切片不完整，主要是包埋時組織沒在同一平面，組織塊固定不牢，刀片未夾緊，注意事項(xiàng)及處理方法已經(jīng)在前面探討過。

5.3 切片厚薄不均，難以連續(xù)切片

切片厚薄不均，難以連續(xù)切片的主要原因是組織處理過程中的問題，未及時更換刀片。如果組織有限，處理方法是重新浸蠟2 h，及時更換刀片，能夠取得較理想的效果。實(shí)際工作中總結(jié)提示，95%乙醇中脫水效果更佳，所以此方法也是解決制片過程中組織處理不好的手段，對骨組織、甲狀腺鈣化組織、骨髓活檢組織需要脫鈣處理，脫鈣液用8%～10%的稀硝酸處理效果不錯[7]，30 min為好，以取材刀片能切下但不能成泥樣為準(zhǔn)，否則組織成分都被破壞，無法制片了。

5.4 手工染色

現(xiàn)在有的病理科使用了全自動染色機(jī)，但是手工染色還是每一個病理技術(shù)員必須掌握的。我科室在實(shí)際工作中使用了如下方法，組織切片烤片后進(jìn)入二甲苯脫蠟45 min后，經(jīng)過無水乙醇，95%的乙醇后直接進(jìn)入85～90℃的熱水水洗，吹去漂浮的石蠟，放入蘇木精染液中染色，再用同樣的熱水洗滌，也能達(dá)到返蘭的目的，效果也很好。切片染色的成功主要是前期組織處理好的情況下，脫蠟要徹底，之后酒精洗滌時要保證酒精的純度，水洗后載玻片均勻，無水流，染液濃度適宜，染色時間因染液的濃度而掌握，染完色水洗后保證梯度酒精的濃度，最后進(jìn)入不同的容器二甲苯透明5～7 min即可。

6 封片

封片環(huán)節(jié)看似簡單，但要注意以下事項(xiàng)，手工封片應(yīng)采用濕封法，可以使中性樹膠順暢展開，同時可避免氣泡的產(chǎn)生[8]，蓋玻片應(yīng)從載玻片的下沿行排趕法驅(qū)使中性樹膠均勻向上移動，可使樹膠分布均勻。

總之，隨著科技的發(fā)展，先進(jìn)的技術(shù)為病理診斷技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展提供了強(qiáng)大的支持，為臨床病理診斷疾病起到了不可替代的作用，病理技術(shù)人員在實(shí)際工作中更應(yīng)該注重病理技術(shù)質(zhì)量監(jiān)控，不斷地總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，改進(jìn)制片工作的程序，消除隱患，不斷提高工作效率，從而制作出合格的病理切片。

[參考文獻(xiàn)]

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（收稿日期：2014-05-26 本文編輯：許俊琴）endprint