甘肅省甘草病害種類調(diào)查及病原鑒定△

曹占鳳，王艷，陳秀蓉

(1.甘肅省經(jīng)濟(jì)作物技術(shù)推廣站，甘肅 蘭州 730030；2.甘肅中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000；3.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院，草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心，甘肅 蘭州 730070)

甘肅省甘草病害種類調(diào)查及病原鑒定△

曹占鳳1，王艷2*，陳秀蓉3

(1.甘肅省經(jīng)濟(jì)作物技術(shù)推廣站，甘肅 蘭州 730030；2.甘肅中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000；3.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院，草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心，甘肅 蘭州 730070)

目的：為甘草病害綜合防治以及規(guī)范化種植提供理論依據(jù)。方法：2007～2013年對(duì)甘肅省民勤、岷縣、隴西、渭源，蘭州5個(gè)市縣的甘草病害進(jìn)行了田間系統(tǒng)調(diào)查和室內(nèi)病原鑒定。結(jié)果：共發(fā)現(xiàn)病害7種：褐斑病Cercosporaglycyrrhizae、銹病Uromycesglycyrrhiza、殼二孢輪紋病Ascochytaonobrychidis、灰霉病Botrytiscinerea、白粉病Erysiphesp.、鏈格孢黑斑病Alternariasp.和1種病毒病(毒源待定)。結(jié)論：甘肅省生產(chǎn)中甘草褐斑病和銹病發(fā)生為害嚴(yán)重，應(yīng)引起重視，并研究安全有效的防控對(duì)策。

甘草；病害調(diào)查；病原鑒定

甘草GlycyrrhizauralensisFisch.又名烏拉爾甘草、美草、蜜草，為豆科多年生草本植物，是一味大宗藥材。以根和根莖入藥，性平、味甘，有清熱解毒、潤(rùn)肺止咳、補(bǔ)脾益氣、調(diào)和諸藥的功效[1]；廣泛分布于我國(guó)西北干旱區(qū)域的溫帶荒漠區(qū)和溫帶草原區(qū)域[2]，全國(guó)以甘肅、寧夏和內(nèi)蒙古所產(chǎn)甘草品質(zhì)上乘。甘肅省主要分布于慶陽(yáng)市以及河西走廊一線[3]。敦煌、瓜州、民勤、高臺(tái)、靖遠(yuǎn)等地野生甘草面積較大，近年來，肅州、隴西、瓜州、榆中等地栽培甘草亦迅速增加。隨著國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)甘草的需求量不斷增加，供求矛盾十分突出，以往主要靠野生資源供給，長(zhǎng)期的濫采濫挖，導(dǎo)致野生甘草資源日趨枯竭，甘草的人工種植面積在逐步擴(kuò)大。隨著栽培面積逐年擴(kuò)大，病害發(fā)生日趨嚴(yán)重。國(guó)內(nèi)記載甘草主要病害有褐斑病Cercosporaastragalis[4-5]、銹病(Uromycesglycyrrhiza/Uromycespunctutatus、白粉病Erysiphesp.[6]、斑點(diǎn)病Phomaherbarum[7]、根腐病Fusariumsp.[8]。2007～2013年對(duì)甘肅省野生及栽培甘草進(jìn)行了病害調(diào)查和病原鑒定，旨在為甘草病害綜合防治以及規(guī)范化種植提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查時(shí)期和地點(diǎn)

2007年9月～2013年10月，對(duì)民勤縣、渭源縣路原鄉(xiāng)及清源鎮(zhèn)大田，岷縣藥材示范園及大田、隴西藥材示范園及大田、甘肅中醫(yī)學(xué)院藥材園等5個(gè)市縣的32個(gè)田塊的甘草，在苗期、成株期、采收期進(jìn)行了病害調(diào)查。

1.2 調(diào)查方法

采取五點(diǎn)取樣[9]，每點(diǎn)調(diào)查十株，記載發(fā)病率，嚴(yán)重度。采集典型病株，壓制標(biāo)本，保存并用于室內(nèi)進(jìn)行病原鑒定。

1.3 病原鑒定

對(duì)采集的標(biāo)本描述其癥狀，鏡檢病原形態(tài)，測(cè)定50個(gè)孢子的大小。根據(jù)癥狀特點(diǎn)、病原形態(tài)、大小、參照有關(guān)資料[6-14]進(jìn)行鑒定。

2 結(jié)果與分析

2.1 甘肅省甘草病害的發(fā)生情況

經(jīng)田間系統(tǒng)調(diào)查和室內(nèi)病原鑒定，發(fā)現(xiàn)甘肅省甘草病害有7種，其中病毒性病害1種，細(xì)菌性病害未見。

甘草褐斑病、銹病發(fā)生普遍且嚴(yán)重，7～8月高溫季節(jié)，降雨多、露時(shí)長(zhǎng)、濕度大時(shí)病害發(fā)生嚴(yán)重。在我省甘草主栽區(qū)均有發(fā)生，發(fā)病率可達(dá)58%～80%，有些田塊發(fā)病率≥80%，嚴(yán)重度3～5級(jí)。育苗地發(fā)生較輕，二年生生產(chǎn)田發(fā)生嚴(yán)重。栽培甘草病害重于野生甘草。其余病害均發(fā)生在栽培地甘草。殼二孢輪紋病主要分布于隴西和岷縣，發(fā)病率15～20%，嚴(yán)重度1～2級(jí)；灰霉病主要分布于隴西和岷縣，發(fā)病率46%，嚴(yán)重度2～3級(jí)。白粉病輕度發(fā)生，主要分布于岷縣和民勤；鏈格孢黑斑病輕度發(fā)生，主要分布于涼州區(qū)和岷縣。病毒病7～8月在渭源輕度發(fā)生。

2.2 甘草病害癥狀及病原鑒定

2.2.1 甘草褐斑病 癥狀：主要為害葉片。葉部產(chǎn)生中型(2～8 mm)病斑，通常在葉脈一側(cè)或主脈與側(cè)脈分叉處的三角區(qū)發(fā)生，呈多角形、不規(guī)則形、長(zhǎng)條形，褐色至黑褐色，病斑邊緣清晰或不清晰，環(huán)境潮濕條件下，斑上產(chǎn)生黑色點(diǎn)狀霉?fàn)钗?，后期病斑上覆蓋一層厚厚的黑色霉?fàn)钗?，及病菌的分生孢子梗及分生孢子。?yán)重發(fā)病時(shí)，病斑相互連接，葉片變?yōu)榈t褐色至紫黑色，大量脫落。葉柄上病斑長(zhǎng)條形、長(zhǎng)橢圓形，淡紫紅色至淡紫褐色。

病原：病原菌為有絲分裂孢子真菌中的甘草尾孢Cercosporaglycyrrhizae(Sǎvulescu & Sandu)Chupp。渭源路原標(biāo)樣為：子座生于葉面，近球形、橢圓形，淡灰褐色，大小37.6～62.3 μm×29.4～47.0(平均50.7×39.8)μm(見圖1A)；子座上有分生孢子梗9～34根束生，灰褐色，無隔，稍彎曲，頂部近平截，較圓，稍變狹，不分枝，具膝狀節(jié)，孢痕明顯，大小25.9～44.7 μm×3.5～4.7 μm(平均32.7×3.8)μm。(見圖1B、C)；分生孢子無色，鼠尾狀、鞭狀、直或稍彎曲，基部粗，上部細(xì)，0～6個(gè)隔膜，多為2～4個(gè)隔膜，基部平截，大小33.4～119.4 μm×2.3～4.5 μm(平均73.4×3.6)μm。有的分生孢子很長(zhǎng)，達(dá)144.59～206.65 μm(平均176.6 μm)，具11～12個(gè)隔膜(見圖1D)。

渭源清源鎮(zhèn)及隴西標(biāo)樣：分生孢子梗簇生(多5根以上)，淡褐色至褐色，具0～3個(gè)隔膜，大小14.1～34.1×4.7 μm。分生孢子無色、淡青褐色，透明，直或稍彎曲，基部平截，頂端鈍圓，具3～9個(gè)隔膜，多為5～6個(gè)，大小44.7～134.4 μm×1.8～4.1 μm(平均71.0×3.4)μm，未見典型子座結(jié)構(gòu)。

A.分生孢子座 B、C.分生孢子梗 D.分生孢子圖1 Cercospora glycyrrhizae

2.2.2 甘草銹病 癥狀：葉片、莖稈均受害。初期葉片正面癥狀不明顯，葉背面產(chǎn)生灰白色、灰黃色，圓形皰斑，后增大呈半球狀，表面光亮，表皮破裂后露出黃褐色夏孢子堆并散出夏孢子。發(fā)病嚴(yán)重時(shí)，整個(gè)葉片覆蓋夏孢子堆，引起葉片至全株葉片枯死。后期在葉片兩面產(chǎn)生黑褐色冬孢子堆，并散出黑粉。

病原：病原菌為真菌界擔(dān)子菌門甘草單胞銹菌Uromycesglycyrrhiza(Rabenh.)Maga.。夏孢子球形、近球形、橢圓形，淡黃色至淡黃褐色，表面有小刺，大小20.0～35.3 μm×17.6～23.5 μm(平均26.9×20.0)μm。冬孢子卵圓形、橢圓形，單胞，褐色，表面光滑，頂端明顯加厚，有無色短柄，孢子大小20.0～32.9 μm×15.3～18.8 μm(平均28.1×18.6)μm(見圖2)。

圖2 Uromyces glycyrrhiza冬孢子

2.2.3 甘草殼二孢輪紋病 癥狀：葉面產(chǎn)生中型(8～12 mm)圓形、橢圓形病斑，褐色，其上有輪紋，后期生有黑色小顆粒，即病菌的分生孢子器。

病原：病原菌為為有絲分裂孢子真菌中驢豆殼二孢AscochytaonobrychidisBond.-Mont.。分生孢子器扁球形、近球形，黑褐色，直徑179.2～201.6(平均189.9)μm，高143.3～170.2(平均157.7)μm。分生孢子具1個(gè)隔膜，無色，圓柱形、長(zhǎng)橢圓形，兩端圓，隔膜處隘縮或不隘縮，大小8.2～15.3 μm×4.7～5.9(平均11.8×5.2)μm。(見圖3)。為國(guó)內(nèi)新寄主。

圖3 Ascochyta onobrychidis分生孢子

2.2.4 甘草灰霉病 癥狀：主要為害葉片。病害多自葉尖或葉片中部產(chǎn)生大中型(10～22 mm)圓形、半圓形病斑，紅褐色、粉紅褐色，病斑表面稍現(xiàn)粉狀。病健組織交界處不明顯，葉背有稀疏的褐色絲狀物。

病原：病原菌為有絲分裂孢子真菌中灰葡萄孢BotrytiscinereaPers.。分生孢子梗褐色，有隔，長(zhǎng)寬1 343.7～1 432.0 μm×12.9～23.5 μm，頂部分支垂直，分支末端聚生分生孢子。分生孢子單胞，無色，卵圓形、橢圓形，大小18.8～25.9 μm×10.6～15.3μm(平均21.7×12.9)μm，孢子有小柄。

2.2.5 甘草白粉病 癥狀：葉片、葉柄、嫩莖均受害。初期葉部產(chǎn)生圓形小型(4～6 mm)白色粉斑，后擴(kuò)大連片，以至整個(gè)葉片覆蓋白粉，病部組織變黃，引起落葉，未見產(chǎn)生閉囊殼。

病原：病原菌為有絲分裂孢子真菌中的白粉菌屬Erysiphesp.。分生孢子單胞，無色，圓柱形、腰鼓形，大小23.5～36.5 μm×10.6～15.3 μm(平均29.2×12.1)μm。閉囊殼球形，近球形，大小33.0～68.8 μm(平均50.6 μm)；附屬絲菌絲狀，長(zhǎng)寬5.5～52.2 μm×2.5～4.8 μm(平均22.6×3.5)μm；子囊多個(gè)，袋狀，大小23.2～35.1 μm×14.5～24.4 μm(平均30.2×18.6)μm。

分布：岷縣、民勤。發(fā)病程度：輕度發(fā)生。

2.2.6 甘草鏈格孢黑斑病 癥狀：多自葉尖或葉緣發(fā)生，向內(nèi)擴(kuò)展呈半橢圓形至橢圓形病斑，褐色、淡褐色，后期中部變黑褐色，生有少量霉層。

病原：病原菌為為有絲分裂孢子真菌中的鏈格孢屬Alternariasp.。分生孢子倒棍棒狀，孢子大小32.9～71.7 μm×10.6～15.3 μm(47.1×12.9)μm，有短喙，具4～8橫隔膜及少數(shù)縱隔膜。隔膜處隘縮。

本菌與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)記載的豆科中的四種病菌明顯不同，故種待定。

2.2.7 病毒病 癥狀：葉部產(chǎn)生淡綠與深綠相間的花葉，嚴(yán)重時(shí)，葉片畸形。

病原：毒源待定。

A.閉囊殼 B、C.子囊圖4 Erysiphe sp.

圖5 Alternaria sp. 分生孢子

3 討論

3.1 關(guān)于甘草褐斑病

自甘肅省渭源縣路原鄉(xiāng)一帶采集的標(biāo)樣具有典型的子座結(jié)構(gòu)，且分生孢子生長(zhǎng)良好，有的分生孢子是隴西標(biāo)樣的2.5倍。這與該地潮濕溫暖的環(huán)境條件有關(guān)，而隴西以及渭源其他干旱地區(qū)的標(biāo)樣上無典型子座結(jié)構(gòu)，且很難形成孢子。國(guó)內(nèi)陸家云、韓金生報(bào)道甘草褐斑病是由黃芪尾孢Cercosporaastragalis引起[4-5]，劉錫進(jìn)記載為甘草假尾孢Pseudocercosporacavarae引起[12]，寧夏報(bào)道是由星形短梗霉Napicladiumasteroma引起，據(jù)甘肅省標(biāo)樣觀察，甘草褐斑病的病原為甘草尾孢Cercosporaglycyrrhizae。

3.2 甘草褐斑病和銹病

在各個(gè)甘草產(chǎn)區(qū)發(fā)病率均在80%以上，嚴(yán)重度達(dá)3～5級(jí)，每年在甘草生長(zhǎng)季節(jié)，發(fā)生非常普遍且嚴(yán)重，引起早期的葉片脫落、植株衰弱、枯死，是甘草生產(chǎn)區(qū)的主要病害。因此對(duì)于這兩種病害需進(jìn)行生物學(xué)特性、病害循環(huán)及發(fā)病條件以及防治方法等系統(tǒng)深入的研究，并開展藥劑防治。

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DiseaseSurveyandPathogenIdentificationofGlycyrrhizauralensiinGansuProvince

CAO Zhanfeng1，WANGyan2*，CHENXiurong3

(1.GansuProvincialCashCropsTechnologyExtensionCentre，Lanzhou730030，China；2.GansuCollegeofTraditionalChineseMedicine，Lanzhou730000，China；3.CollegeofPrataculturalScience，GansuAgriculturalUniversity；KeyLaboratoryofGrasslandEcosystem(GansuAgriculturalUniversity)，MinistryofEducation；Sino-U.S.CenterforGrazinglandEcosystemSustainability，Lanzhou730070)

Objective：Provide theoretical foundation for integrated disease control and standard cultivation ofGlycyrrhizauralensi.Methods：Field survey and morphology pathogen identification of wild and cultivated Glycyrrhiza uralensi were conducted in Minqin，Minxian，Longxi，Weiyuan，Lanzhou during 2007 to 2013.Results：Seven diseases have been found：brown spot(Cercosporaglycyrrhizae)，rust(Uromycesglycyrrhiza)，ring spot(Ascochytaonobrychidis)，grey mould(Botrytiscinerea)，powdery mildew(Erysiphesp.)，black spot(Alternariasp.)and a virus disease.Conclusion：Brown spot and rust are the serious diseases.The safety and efficient control methods need to be developed.

Glycyrrhizauralensi；Disease survey；Pathogen identification

2014-07-03)

國(guó)家自然基金項(xiàng)目(31460013)；甘肅省中藥材產(chǎn)業(yè)科技攻關(guān)項(xiàng)目(GYC13-03)；甘肅省中藥材產(chǎn)業(yè)科技攻關(guān)項(xiàng)目(GYC11-01)

*

王艷，副教授，從事藥用植物病理學(xué)研究。Tel(0931)8489713，E-mail：gswangyan101@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.12.012