高中生物有關(guān)核仁教學的幾點釋疑

王源

核仁在高中生物教學中多次涉及，學生在學習過程中會產(chǎn)生一些疑問，比如：核仁結(jié)構(gòu)究竟如何？核仁功能與rRNA合成有關(guān)，RNA由DNA轉(zhuǎn)錄，核仁跟DNA什么關(guān)系？細胞分裂時，核仁為何會周期性的消失和重現(xiàn)？這些不僅是學生的疑問，甚至多數(shù)生物教師也不甚了解。筆者在教學過程中發(fā)現(xiàn)，解釋了這些疑問，能更好地幫助學生掌握核仁相關(guān)知識。 1 核仁的概述 在光學顯微鏡下，染過色的細胞內(nèi)或者相差顯微鏡下的活細胞中或者分離細胞的細胞核內(nèi)，都容易看到核仁，它通常是單一的或者多個勻質(zhì)的球形小體，呈圓球形或橢球形的顆粒狀結(jié)構(gòu)，沒有外膜。核仁的大小、形狀隨生物的種類、細胞類型和細胞代謝狀態(tài)不同有很大差別。蛋白質(zhì)合成旺盛、活躍生長的細胞,如分泌細胞、卵母細胞的核仁大，可占總核體積25%；不具蛋白質(zhì)合成能力的細胞，如肌肉細胞、休眠的植物細胞，其核仁很小。各種生物的核仁數(shù)目一般是一定的，如非洲爪蛙有2個核仁，人類的細胞只有一個核仁。核仁參與核糖體核糖核酸(rRNA)的合成和核糖體的形成，因此常被稱為“核糖體工廠”。核仁所含蛋白質(zhì)約占干重的80%，如核糖體蛋白、組蛋白、非組蛋白及多種酶類；RNA約占其干重的10%，與蛋白質(zhì)相結(jié)合形成核糖核蛋白(RNP)；此外還含有少量DNA。 2 核仁的超微結(jié)構(gòu) 電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，核仁的超微結(jié)構(gòu)與細胞質(zhì)中其他的細胞器不同，周圍沒有界膜包圍，可辨認出有3個特征性的區(qū)域：纖維中心(FC)、致密纖維組分(DFC)和顆粒成分(GC)。纖維中心(FC)是被致密纖維組分不同程度包圍著的一些低電子密度區(qū)，其主要成分為RNA聚合酶Ⅰ和rDNA。致密纖維組分(DFC)為核仁中電子密度最高的區(qū)域，由致密的纖維組成。根據(jù)電鏡原位雜交證明，DFC是rDNA活躍轉(zhuǎn)錄rRNA的區(qū)域，含有一些特異性RNA結(jié)合蛋白，如核仁纖維蛋白和核仁素等。顆粒組分(GC)是由2～3 nm的rRNA細絲與蛋白質(zhì)結(jié)合形成的15～20 nmRNA核糖核蛋白體，通常位于核仁周邊部分。除上述三種基本組分外，核仁區(qū)周緣被或多或少的染色質(zhì)所包圍，這層染色質(zhì)稱為核仁相隨染色質(zhì)，核仁相隨染色質(zhì)為一些不活躍的異染色質(zhì)和常染色質(zhì)，其中包圍在核仁周圍的染色質(zhì)，高度螺旋，屬異染色質(zhì)；伸入核仁內(nèi)的染色質(zhì)，處于非螺旋狀態(tài)，屬常染色質(zhì)，載有rRNA基因（rDNA），此段DNA稱核仁組織區(qū)（NOR），它是形成核仁的部位。 3 核仁的發(fā)生 核仁是核仁組織區(qū)（NOR）中的基因活動而形成的可見的球體結(jié)構(gòu)。核仁組織區(qū)參與形成核仁的染色體區(qū)并形成核仁的一部分，具有NOR的染色體稱為核仁染色體。核仁組織區(qū)多定位在核仁染色體次縊痕處，含有rRNA基因的一段染色體區(qū)域，與核糖體的形成有關(guān)。核仁組織區(qū)的染色體數(shù)目依不同細胞種類而異，許多動植物細胞只有一對這樣的染色體，稱為隨體染色體。但也有不少種類的細胞有幾對，甚至許多對這樣的染色體參與核仁形成。人類的rRNA基因分別位于第13號、14號、15號、21號、22號5對染色體上，這10條含有rRNA基因的區(qū)段以袢環(huán)的形式集結(jié)在核仁中（圖1），每一個袢環(huán)上成串排列的rRNA基因就叫做一個核仁組織區(qū)，即專門為合成rRNA提供模板的rDNA。這些袢環(huán)上含有核糖體核糖核酸（rRNA）的基因。在所有真核生物的細胞中，這種基因約有50～1 000個相同拷貝，因而得以維持適當數(shù)量的rRNA的合成。牛的雙倍體基因組有10個NOR，分別位于2、3、4、11和28號染色體的端粒區(qū)。rDNA的活躍轉(zhuǎn)錄導致核仁在NOR附近產(chǎn)生，實際上，核仁可被視為這些染色體的延伸。核仁形成后常發(fā)生融合現(xiàn)象，所以雖存在多對染色體，但常見間期細胞中僅有1～2個核仁，人二倍體間期細胞中含一個大的核仁。 4 核仁的功能 4.1 合成、加工rRNA和裝配核糖體亞基的重要場所 4.1.1 rRNA基因的轉(zhuǎn)錄 rRNA基因定位在核仁組織區(qū)，該區(qū)域的基因編碼28 S、18 S和5.8 S rRNA，這三個基因組成一個轉(zhuǎn)錄單位。rRNA基因在染色質(zhì)軸絲上呈串聯(lián)重復(fù)排列（中度重復(fù)順序）；沿轉(zhuǎn)錄方向，新生rRNA鏈從DNA長軸兩側(cè)垂直伸展出來，而且從一端到另一端有規(guī)律地逐漸增長，形成箭頭狀，外形似“圣誕樹”。每個箭頭狀結(jié)構(gòu)代表是rRNA基因轉(zhuǎn)錄單位，在箭頭狀結(jié)構(gòu)間存在著裸露的不被轉(zhuǎn)錄的DNA間隔片斷（圖2）。 4.1.2 rRNA前體的加工成熟 每個rRNA基因轉(zhuǎn)錄單位由RNA聚合酶Ⅰ轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生相同的初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物——rRNA前體。不同生物的rRNA前體大小不同，哺乳類為45 S rRNA。轉(zhuǎn)錄出的45 S rRNA前體很快被甲基化，并剪接為41 S rRNA前體；41 S rRNA在相同的剪接位點可按照不同的剪接順序產(chǎn)生不同的中間前體rRNA，最終將41 S rRNA前體剪接為28 S、18S和5.8 S rRNA。5 S rRNA基因不定位在核仁組織區(qū)，不同物種其位置不同，5 S rRNA轉(zhuǎn)錄后經(jīng)適當加工即參與核糖體大小亞單位的裝配。 4.1.3 核糖體亞基的組裝 核糖體的生物發(fā)生包括rRNA的合成、加工和核糖體亞單位的裝配等過程，是一個向量過程，從核仁纖維組分開始，向顆粒組分延續(xù)。核仁組分分析發(fā)現(xiàn)完整的45 S rRNA前體首先與蛋白質(zhì)結(jié)合，被包裝成80 S的RNP復(fù)合體。在加工過程中，80 S的RNP再逐漸失去一些RNA和蛋白質(zhì)，然后剪切成兩種大小不同的核糖體亞單位前體。核糖體小亞單位成熟較早，大亞單位成熟較晚。核糖體的大小亞基在核仁中裝配成熟后，通過核孔轉(zhuǎn)運至細胞質(zhì)中，形成有功能的核糖體（圖3）。核糖體的成熟作用僅發(fā)生在它們的亞單位被轉(zhuǎn)移到細胞質(zhì)以后，兩個亞單位只有分別通過核孔進入細胞質(zhì)中才能形成功能單位，這可阻止有功能的核糖體與核內(nèi)加工不完全的hnRNA分子接近。4.2 核仁的其他功能 除作為核糖體的單一工廠外，核仁還具有另外的功能，包括mRNA的輸出與降解，一些小RNA的核苷酸修飾，在信號識別顆粒的生物合成中可能發(fā)揮作用，與基因沉默(相關(guān)蛋白質(zhì)的相隔離和釋出、細胞衰老，以及細胞分裂等有關(guān)。 5 核仁在細胞分裂周期中會周期性的消失和重建 在細胞周期過程中，核仁是一個高度動態(tài)的結(jié)構(gòu)，隨細胞周期的變化而變化，即“形成——消失——形成”，這種變化稱為核仁周期。當細胞進入有絲分裂時，核仁首先變形和變??；其后染色質(zhì)凝集和停止核糖核酸（RNA）合成，包含有核糖體RNA（rRNA）基因的DNA袢環(huán)逐漸收縮回到相應(yīng)染色體的核仁組織區(qū)；核膜破裂進入中期，核仁消失；在有絲分裂末期時，核仁組織區(qū)DNA解凝集，rRNA合成重新開始，極小的核仁重新出現(xiàn)在染色體核仁組織區(qū)附近。核仁的重建過程與原有的核仁組分的協(xié)助和參與有關(guān)。簡而言之，細胞間期核仁出現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄、裝配核糖體，合成蛋白質(zhì)；進入前期后，染色體逐漸螺旋化，rRNA合成停止，rDNA袢環(huán)逐漸縮回到染色體，核仁消失；分裂末期染色體解旋，rDNA伸展，合成rRNA，組建成新的核仁。 6 原核細胞沒有核仁如何合成核糖體 原核細胞無核仁，但控制rRNA的基因位于擬核DNA上。有實驗發(fā)現(xiàn)最原始的單細胞真核生物賈第蟲雖然沒有核仁結(jié)構(gòu)形成，但其rDNA的轉(zhuǎn)錄活動已集中在核內(nèi)。從銀染后銀粒在核中的分布來看，其rDNA并未集中在一起，也許是因為在雙滴蟲類的細胞核中，諸染色體彼此分化的程度極低，每個染色體上都只有很少的幾個rRNA基因，從而不可能起到核仁組織者的作用。其轉(zhuǎn)錄活動不足以促成核仁的形成，這也許正代表著進化過程中核仁發(fā)生以前的一種原始狀況。真核細胞核糖體亞基的裝配部位為核仁，而原核細胞核糖體亞基的裝配部位為細胞質(zhì)。 參考文獻： ［1］ 隋宏書，譚景和.哺乳動物卵母細胞及早期胚胎核仁結(jié)構(gòu)與rRNA基因表達研究進展［J］.生物學通報.2002，37（11）：4-6. ［2］ 盧義欽，劉俊凡.核仁的蛋白質(zhì)組學［J］.生命的化學.2003，23（4）：245-247. ［3］ 陳泳宏，郭建，李靖炎等.無核仁原生動物藍氏賈第蟲rDNA的分布［J］.動物學雜志.2002，37（5）：2-5. ［4］ 翟中和，王喜忠，丁明孝.細胞生物學［M］.北京：高等教育出版社，2000：283-290.

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核仁在高中生物教學中多次涉及，學生在學習過程中會產(chǎn)生一些疑問，比如：核仁結(jié)構(gòu)究竟如何？核仁功能與rRNA合成有關(guān)，RNA由DNA轉(zhuǎn)錄，核仁跟DNA什么關(guān)系？細胞分裂時，核仁為何會周期性的消失和重現(xiàn)？這些不僅是學生的疑問，甚至多數(shù)生物教師也不甚了解。筆者在教學過程中發(fā)現(xiàn)，解釋了這些疑問，能更好地幫助學生掌握核仁相關(guān)知識。 1 核仁的概述 在光學顯微鏡下，染過色的細胞內(nèi)或者相差顯微鏡下的活細胞中或者分離細胞的細胞核內(nèi)，都容易看到核仁，它通常是單一的或者多個勻質(zhì)的球形小體，呈圓球形或橢球形的顆粒狀結(jié)構(gòu)，沒有外膜。核仁的大小、形狀隨生物的種類、細胞類型和細胞代謝狀態(tài)不同有很大差別。蛋白質(zhì)合成旺盛、活躍生長的細胞,如分泌細胞、卵母細胞的核仁大，可占總核體積25%；不具蛋白質(zhì)合成能力的細胞，如肌肉細胞、休眠的植物細胞，其核仁很小。各種生物的核仁數(shù)目一般是一定的，如非洲爪蛙有2個核仁，人類的細胞只有一個核仁。核仁參與核糖體核糖核酸(rRNA)的合成和核糖體的形成，因此常被稱為“核糖體工廠”。核仁所含蛋白質(zhì)約占干重的80%，如核糖體蛋白、組蛋白、非組蛋白及多種酶類；RNA約占其干重的10%，與蛋白質(zhì)相結(jié)合形成核糖核蛋白(RNP)；此外還含有少量DNA。 2 核仁的超微結(jié)構(gòu) 電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，核仁的超微結(jié)構(gòu)與細胞質(zhì)中其他的細胞器不同，周圍沒有界膜包圍，可辨認出有3個特征性的區(qū)域：纖維中心(FC)、致密纖維組分(DFC)和顆粒成分(GC)。纖維中心(FC)是被致密纖維組分不同程度包圍著的一些低電子密度區(qū)，其主要成分為RNA聚合酶Ⅰ和rDNA。致密纖維組分(DFC)為核仁中電子密度最高的區(qū)域，由致密的纖維組成。根據(jù)電鏡原位雜交證明，DFC是rDNA活躍轉(zhuǎn)錄rRNA的區(qū)域，含有一些特異性RNA結(jié)合蛋白，如核仁纖維蛋白和核仁素等。顆粒組分(GC)是由2～3 nm的rRNA細絲與蛋白質(zhì)結(jié)合形成的15～20 nmRNA核糖核蛋白體，通常位于核仁周邊部分。除上述三種基本組分外，核仁區(qū)周緣被或多或少的染色質(zhì)所包圍，這層染色質(zhì)稱為核仁相隨染色質(zhì)，核仁相隨染色質(zhì)為一些不活躍的異染色質(zhì)和常染色質(zhì)，其中包圍在核仁周圍的染色質(zhì)，高度螺旋，屬異染色質(zhì)；伸入核仁內(nèi)的染色質(zhì)，處于非螺旋狀態(tài)，屬常染色質(zhì)，載有rRNA基因（rDNA），此段DNA稱核仁組織區(qū)（NOR），它是形成核仁的部位。 3 核仁的發(fā)生 核仁是核仁組織區(qū)（NOR）中的基因活動而形成的可見的球體結(jié)構(gòu)。核仁組織區(qū)參與形成核仁的染色體區(qū)并形成核仁的一部分，具有NOR的染色體稱為核仁染色體。核仁組織區(qū)多定位在核仁染色體次縊痕處，含有rRNA基因的一段染色體區(qū)域，與核糖體的形成有關(guān)。核仁組織區(qū)的染色體數(shù)目依不同細胞種類而異，許多動植物細胞只有一對這樣的染色體，稱為隨體染色體。但也有不少種類的細胞有幾對，甚至許多對這樣的染色體參與核仁形成。人類的rRNA基因分別位于第13號、14號、15號、21號、22號5對染色體上，這10條含有rRNA基因的區(qū)段以袢環(huán)的形式集結(jié)在核仁中（圖1），每一個袢環(huán)上成串排列的rRNA基因就叫做一個核仁組織區(qū)，即專門為合成rRNA提供模板的rDNA。這些袢環(huán)上含有核糖體核糖核酸（rRNA）的基因。在所有真核生物的細胞中，這種基因約有50～1 000個相同拷貝，因而得以維持適當數(shù)量的rRNA的合成。牛的雙倍體基因組有10個NOR，分別位于2、3、4、11和28號染色體的端粒區(qū)。rDNA的活躍轉(zhuǎn)錄導致核仁在NOR附近產(chǎn)生，實際上，核仁可被視為這些染色體的延伸。核仁形成后常發(fā)生融合現(xiàn)象，所以雖存在多對染色體，但常見間期細胞中僅有1～2個核仁，人二倍體間期細胞中含一個大的核仁。 4 核仁的功能 4.1 合成、加工rRNA和裝配核糖體亞基的重要場所 4.1.1 rRNA基因的轉(zhuǎn)錄 rRNA基因定位在核仁組織區(qū)，該區(qū)域的基因編碼28 S、18 S和5.8 S rRNA，這三個基因組成一個轉(zhuǎn)錄單位。rRNA基因在染色質(zhì)軸絲上呈串聯(lián)重復(fù)排列（中度重復(fù)順序）；沿轉(zhuǎn)錄方向，新生rRNA鏈從DNA長軸兩側(cè)垂直伸展出來，而且從一端到另一端有規(guī)律地逐漸增長，形成箭頭狀，外形似“圣誕樹”。每個箭頭狀結(jié)構(gòu)代表是rRNA基因轉(zhuǎn)錄單位，在箭頭狀結(jié)構(gòu)間存在著裸露的不被轉(zhuǎn)錄的DNA間隔片斷（圖2）。 4.1.2 rRNA前體的加工成熟 每個rRNA基因轉(zhuǎn)錄單位由RNA聚合酶Ⅰ轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生相同的初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物——rRNA前體。不同生物的rRNA前體大小不同，哺乳類為45 S rRNA。轉(zhuǎn)錄出的45 S rRNA前體很快被甲基化，并剪接為41 S rRNA前體；41 S rRNA在相同的剪接位點可按照不同的剪接順序產(chǎn)生不同的中間前體rRNA，最終將41 S rRNA前體剪接為28 S、18S和5.8 S rRNA。5 S rRNA基因不定位在核仁組織區(qū)，不同物種其位置不同，5 S rRNA轉(zhuǎn)錄后經(jīng)適當加工即參與核糖體大小亞單位的裝配。 4.1.3 核糖體亞基的組裝 核糖體的生物發(fā)生包括rRNA的合成、加工和核糖體亞單位的裝配等過程，是一個向量過程，從核仁纖維組分開始，向顆粒組分延續(xù)。核仁組分分析發(fā)現(xiàn)完整的45 S rRNA前體首先與蛋白質(zhì)結(jié)合，被包裝成80 S的RNP復(fù)合體。在加工過程中，80 S的RNP再逐漸失去一些RNA和蛋白質(zhì)，然后剪切成兩種大小不同的核糖體亞單位前體。核糖體小亞單位成熟較早，大亞單位成熟較晚。核糖體的大小亞基在核仁中裝配成熟后，通過核孔轉(zhuǎn)運至細胞質(zhì)中，形成有功能的核糖體（圖3）。核糖體的成熟作用僅發(fā)生在它們的亞單位被轉(zhuǎn)移到細胞質(zhì)以后，兩個亞單位只有分別通過核孔進入細胞質(zhì)中才能形成功能單位，這可阻止有功能的核糖體與核內(nèi)加工不完全的hnRNA分子接近。4.2 核仁的其他功能 除作為核糖體的單一工廠外，核仁還具有另外的功能，包括mRNA的輸出與降解，一些小RNA的核苷酸修飾，在信號識別顆粒的生物合成中可能發(fā)揮作用，與基因沉默(相關(guān)蛋白質(zhì)的相隔離和釋出、細胞衰老，以及細胞分裂等有關(guān)。 5 核仁在細胞分裂周期中會周期性的消失和重建 在細胞周期過程中，核仁是一個高度動態(tài)的結(jié)構(gòu)，隨細胞周期的變化而變化，即“形成——消失——形成”，這種變化稱為核仁周期。當細胞進入有絲分裂時，核仁首先變形和變??；其后染色質(zhì)凝集和停止核糖核酸（RNA）合成，包含有核糖體RNA（rRNA）基因的DNA袢環(huán)逐漸收縮回到相應(yīng)染色體的核仁組織區(qū)；核膜破裂進入中期，核仁消失；在有絲分裂末期時，核仁組織區(qū)DNA解凝集，rRNA合成重新開始，極小的核仁重新出現(xiàn)在染色體核仁組織區(qū)附近。核仁的重建過程與原有的核仁組分的協(xié)助和參與有關(guān)。簡而言之，細胞間期核仁出現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄、裝配核糖體，合成蛋白質(zhì)；進入前期后，染色體逐漸螺旋化，rRNA合成停止，rDNA袢環(huán)逐漸縮回到染色體，核仁消失；分裂末期染色體解旋，rDNA伸展，合成rRNA，組建成新的核仁。 6 原核細胞沒有核仁如何合成核糖體 原核細胞無核仁，但控制rRNA的基因位于擬核DNA上。有實驗發(fā)現(xiàn)最原始的單細胞真核生物賈第蟲雖然沒有核仁結(jié)構(gòu)形成，但其rDNA的轉(zhuǎn)錄活動已集中在核內(nèi)。從銀染后銀粒在核中的分布來看，其rDNA并未集中在一起，也許是因為在雙滴蟲類的細胞核中，諸染色體彼此分化的程度極低，每個染色體上都只有很少的幾個rRNA基因，從而不可能起到核仁組織者的作用。其轉(zhuǎn)錄活動不足以促成核仁的形成，這也許正代表著進化過程中核仁發(fā)生以前的一種原始狀況。真核細胞核糖體亞基的裝配部位為核仁，而原核細胞核糖體亞基的裝配部位為細胞質(zhì)。 參考文獻： ［1］ 隋宏書，譚景和.哺乳動物卵母細胞及早期胚胎核仁結(jié)構(gòu)與rRNA基因表達研究進展［J］.生物學通報.2002，37（11）：4-6. ［2］ 盧義欽，劉俊凡.核仁的蛋白質(zhì)組學［J］.生命的化學.2003，23（4）：245-247. ［3］ 陳泳宏，郭建，李靖炎等.無核仁原生動物藍氏賈第蟲rDNA的分布［J］.動物學雜志.2002，37（5）：2-5. ［4］ 翟中和，王喜忠，丁明孝.細胞生物學［M］.北京：高等教育出版社，2000：283-290.

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核仁在高中生物教學中多次涉及，學生在學習過程中會產(chǎn)生一些疑問，比如：核仁結(jié)構(gòu)究竟如何？核仁功能與rRNA合成有關(guān)，RNA由DNA轉(zhuǎn)錄，核仁跟DNA什么關(guān)系？細胞分裂時，核仁為何會周期性的消失和重現(xiàn)？這些不僅是學生的疑問，甚至多數(shù)生物教師也不甚了解。筆者在教學過程中發(fā)現(xiàn)，解釋了這些疑問，能更好地幫助學生掌握核仁相關(guān)知識。 1 核仁的概述 在光學顯微鏡下，染過色的細胞內(nèi)或者相差顯微鏡下的活細胞中或者分離細胞的細胞核內(nèi)，都容易看到核仁，它通常是單一的或者多個勻質(zhì)的球形小體，呈圓球形或橢球形的顆粒狀結(jié)構(gòu)，沒有外膜。核仁的大小、形狀隨生物的種類、細胞類型和細胞代謝狀態(tài)不同有很大差別。蛋白質(zhì)合成旺盛、活躍生長的細胞,如分泌細胞、卵母細胞的核仁大，可占總核體積25%；不具蛋白質(zhì)合成能力的細胞，如肌肉細胞、休眠的植物細胞，其核仁很小。各種生物的核仁數(shù)目一般是一定的，如非洲爪蛙有2個核仁，人類的細胞只有一個核仁。核仁參與核糖體核糖核酸(rRNA)的合成和核糖體的形成，因此常被稱為“核糖體工廠”。核仁所含蛋白質(zhì)約占干重的80%，如核糖體蛋白、組蛋白、非組蛋白及多種酶類；RNA約占其干重的10%，與蛋白質(zhì)相結(jié)合形成核糖核蛋白(RNP)；此外還含有少量DNA。 2 核仁的超微結(jié)構(gòu) 電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，核仁的超微結(jié)構(gòu)與細胞質(zhì)中其他的細胞器不同，周圍沒有界膜包圍，可辨認出有3個特征性的區(qū)域：纖維中心(FC)、致密纖維組分(DFC)和顆粒成分(GC)。纖維中心(FC)是被致密纖維組分不同程度包圍著的一些低電子密度區(qū)，其主要成分為RNA聚合酶Ⅰ和rDNA。致密纖維組分(DFC)為核仁中電子密度最高的區(qū)域，由致密的纖維組成。根據(jù)電鏡原位雜交證明，DFC是rDNA活躍轉(zhuǎn)錄rRNA的區(qū)域，含有一些特異性RNA結(jié)合蛋白，如核仁纖維蛋白和核仁素等。顆粒組分(GC)是由2～3 nm的rRNA細絲與蛋白質(zhì)結(jié)合形成的15～20 nmRNA核糖核蛋白體，通常位于核仁周邊部分。除上述三種基本組分外，核仁區(qū)周緣被或多或少的染色質(zhì)所包圍，這層染色質(zhì)稱為核仁相隨染色質(zhì)，核仁相隨染色質(zhì)為一些不活躍的異染色質(zhì)和常染色質(zhì)，其中包圍在核仁周圍的染色質(zhì)，高度螺旋，屬異染色質(zhì)；伸入核仁內(nèi)的染色質(zhì)，處于非螺旋狀態(tài)，屬常染色質(zhì)，載有rRNA基因（rDNA），此段DNA稱核仁組織區(qū)（NOR），它是形成核仁的部位。 3 核仁的發(fā)生 核仁是核仁組織區(qū)（NOR）中的基因活動而形成的可見的球體結(jié)構(gòu)。核仁組織區(qū)參與形成核仁的染色體區(qū)并形成核仁的一部分，具有NOR的染色體稱為核仁染色體。核仁組織區(qū)多定位在核仁染色體次縊痕處，含有rRNA基因的一段染色體區(qū)域，與核糖體的形成有關(guān)。核仁組織區(qū)的染色體數(shù)目依不同細胞種類而異，許多動植物細胞只有一對這樣的染色體，稱為隨體染色體。但也有不少種類的細胞有幾對，甚至許多對這樣的染色體參與核仁形成。人類的rRNA基因分別位于第13號、14號、15號、21號、22號5對染色體上，這10條含有rRNA基因的區(qū)段以袢環(huán)的形式集結(jié)在核仁中（圖1），每一個袢環(huán)上成串排列的rRNA基因就叫做一個核仁組織區(qū)，即專門為合成rRNA提供模板的rDNA。這些袢環(huán)上含有核糖體核糖核酸（rRNA）的基因。在所有真核生物的細胞中，這種基因約有50～1 000個相同拷貝，因而得以維持適當數(shù)量的rRNA的合成。牛的雙倍體基因組有10個NOR，分別位于2、3、4、11和28號染色體的端粒區(qū)。rDNA的活躍轉(zhuǎn)錄導致核仁在NOR附近產(chǎn)生，實際上，核仁可被視為這些染色體的延伸。核仁形成后常發(fā)生融合現(xiàn)象，所以雖存在多對染色體，但常見間期細胞中僅有1～2個核仁，人二倍體間期細胞中含一個大的核仁。 4 核仁的功能 4.1 合成、加工rRNA和裝配核糖體亞基的重要場所 4.1.1 rRNA基因的轉(zhuǎn)錄 rRNA基因定位在核仁組織區(qū)，該區(qū)域的基因編碼28 S、18 S和5.8 S rRNA，這三個基因組成一個轉(zhuǎn)錄單位。rRNA基因在染色質(zhì)軸絲上呈串聯(lián)重復(fù)排列（中度重復(fù)順序）；沿轉(zhuǎn)錄方向，新生rRNA鏈從DNA長軸兩側(cè)垂直伸展出來，而且從一端到另一端有規(guī)律地逐漸增長，形成箭頭狀，外形似“圣誕樹”。每個箭頭狀結(jié)構(gòu)代表是rRNA基因轉(zhuǎn)錄單位，在箭頭狀結(jié)構(gòu)間存在著裸露的不被轉(zhuǎn)錄的DNA間隔片斷（圖2）。 4.1.2 rRNA前體的加工成熟 每個rRNA基因轉(zhuǎn)錄單位由RNA聚合酶Ⅰ轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生相同的初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物——rRNA前體。不同生物的rRNA前體大小不同，哺乳類為45 S rRNA。轉(zhuǎn)錄出的45 S rRNA前體很快被甲基化，并剪接為41 S rRNA前體；41 S rRNA在相同的剪接位點可按照不同的剪接順序產(chǎn)生不同的中間前體rRNA，最終將41 S rRNA前體剪接為28 S、18S和5.8 S rRNA。5 S rRNA基因不定位在核仁組織區(qū)，不同物種其位置不同，5 S rRNA轉(zhuǎn)錄后經(jīng)適當加工即參與核糖體大小亞單位的裝配。 4.1.3 核糖體亞基的組裝 核糖體的生物發(fā)生包括rRNA的合成、加工和核糖體亞單位的裝配等過程，是一個向量過程，從核仁纖維組分開始，向顆粒組分延續(xù)。核仁組分分析發(fā)現(xiàn)完整的45 S rRNA前體首先與蛋白質(zhì)結(jié)合，被包裝成80 S的RNP復(fù)合體。在加工過程中，80 S的RNP再逐漸失去一些RNA和蛋白質(zhì)，然后剪切成兩種大小不同的核糖體亞單位前體。核糖體小亞單位成熟較早，大亞單位成熟較晚。核糖體的大小亞基在核仁中裝配成熟后，通過核孔轉(zhuǎn)運至細胞質(zhì)中，形成有功能的核糖體（圖3）。核糖體的成熟作用僅發(fā)生在它們的亞單位被轉(zhuǎn)移到細胞質(zhì)以后，兩個亞單位只有分別通過核孔進入細胞質(zhì)中才能形成功能單位，這可阻止有功能的核糖體與核內(nèi)加工不完全的hnRNA分子接近。4.2 核仁的其他功能 除作為核糖體的單一工廠外，核仁還具有另外的功能，包括mRNA的輸出與降解，一些小RNA的核苷酸修飾，在信號識別顆粒的生物合成中可能發(fā)揮作用，與基因沉默(相關(guān)蛋白質(zhì)的相隔離和釋出、細胞衰老，以及細胞分裂等有關(guān)。 5 核仁在細胞分裂周期中會周期性的消失和重建 在細胞周期過程中，核仁是一個高度動態(tài)的結(jié)構(gòu)，隨細胞周期的變化而變化，即“形成——消失——形成”，這種變化稱為核仁周期。當細胞進入有絲分裂時，核仁首先變形和變小；其后染色質(zhì)凝集和停止核糖核酸（RNA）合成，包含有核糖體RNA（rRNA）基因的DNA袢環(huán)逐漸收縮回到相應(yīng)染色體的核仁組織區(qū)；核膜破裂進入中期，核仁消失；在有絲分裂末期時，核仁組織區(qū)DNA解凝集，rRNA合成重新開始，極小的核仁重新出現(xiàn)在染色體核仁組織區(qū)附近。核仁的重建過程與原有的核仁組分的協(xié)助和參與有關(guān)。簡而言之，細胞間期核仁出現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄、裝配核糖體，合成蛋白質(zhì)；進入前期后，染色體逐漸螺旋化，rRNA合成停止，rDNA袢環(huán)逐漸縮回到染色體，核仁消失；分裂末期染色體解旋，rDNA伸展，合成rRNA，組建成新的核仁。 6 原核細胞沒有核仁如何合成核糖體 原核細胞無核仁，但控制rRNA的基因位于擬核DNA上。有實驗發(fā)現(xiàn)最原始的單細胞真核生物賈第蟲雖然沒有核仁結(jié)構(gòu)形成，但其rDNA的轉(zhuǎn)錄活動已集中在核內(nèi)。從銀染后銀粒在核中的分布來看，其rDNA并未集中在一起，也許是因為在雙滴蟲類的細胞核中，諸染色體彼此分化的程度極低，每個染色體上都只有很少的幾個rRNA基因，從而不可能起到核仁組織者的作用。其轉(zhuǎn)錄活動不足以促成核仁的形成，這也許正代表著進化過程中核仁發(fā)生以前的一種原始狀況。真核細胞核糖體亞基的裝配部位為核仁，而原核細胞核糖體亞基的裝配部位為細胞質(zhì)。 參考文獻： ［1］ 隋宏書，譚景和.哺乳動物卵母細胞及早期胚胎核仁結(jié)構(gòu)與rRNA基因表達研究進展［J］.生物學通報.2002，37（11）：4-6. ［2］ 盧義欽，劉俊凡.核仁的蛋白質(zhì)組學［J］.生命的化學.2003，23（4）：245-247. ［3］ 陳泳宏，郭建，李靖炎等.無核仁原生動物藍氏賈第蟲rDNA的分布［J］.動物學雜志.2002，37（5）：2-5. ［4］ 翟中和，王喜忠，丁明孝.細胞生物學［M］.北京：高等教育出版社，2000：283-290.

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