酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清甲胎蛋白腫瘤標(biāo)志物結(jié)果的對(duì)比分析

李勇

【摘要】 目的 對(duì)比酶聯(lián)免疫法（ELISA）與電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）檢測(cè)血清甲胎蛋白（AFP）腫瘤標(biāo)志物的結(jié)果。方法 腫瘤科住院患者72例， 采集血清標(biāo)本， 分別利用酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法對(duì)各標(biāo)本中AFP水平進(jìn)行檢測(cè)， 對(duì)比兩組方法所得檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 ELISA與ECLIA均可清楚、準(zhǔn)確反映血清AFP水平， 且兩種檢測(cè)方法相關(guān)系數(shù)在0.99以上， 在95% CI可信區(qū)間內(nèi)， 雙尾檢驗(yàn)P=0.2861， 說(shuō)明ELISA與ECLIA的檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法可對(duì)血清甲胎蛋白這一腫瘤標(biāo)志物的水平予以準(zhǔn)確反映， 且檢測(cè)結(jié)果無(wú)顯著差異， 可為腫瘤診斷與治療提供重要依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 血清甲胎蛋白；酶聯(lián)免疫法；電化學(xué)發(fā)光法；相關(guān)性

血清甲胎蛋白（AFP）是胚胎發(fā)育早期的重要血清蛋白， 通常情況下健康人血清AFP含量均低于20 ng/ml， 而當(dāng)患者出現(xiàn)惡性腫瘤時(shí)血清AFP含量會(huì)有不同程度的升高[1]， 故而血清AFP可作為判斷原發(fā)性肝癌及肝病預(yù)后判斷的重要依據(jù)[2]。酶聯(lián)免疫法（ELISA）是甲胎蛋白經(jīng)典檢測(cè)方法， 而電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）是新型檢測(cè)方法。為探討這兩種檢測(cè)方法在AFP檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值， 作者選取72例腫瘤科住院患者血清， 對(duì)ELISA、ECLIA檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院腫瘤科2012年3月～2014年2月收治的住院患者72例， 其中男41例， 女31例， 年齡38～68歲， 平均年齡（53.6±2.8）歲；采集血清標(biāo)本72份， 其中37份血清AFP處于正常范圍內(nèi)， 其余35份標(biāo)本血清AFP水平比正常范圍高。

1. 2 方法 對(duì)所有患者采集3 ml靜脈血液， 離心后分離得血清， 置于-20℃環(huán)境中保存待檢。ELISA法檢測(cè)：使用鄭州安圖綠科生物工程有限公司制造的試劑盒、深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司制造的酶標(biāo)儀展開檢測(cè)。ECLIA法檢測(cè)時(shí)， 應(yīng)用Cobase-411電化學(xué)發(fā)光自動(dòng)分析儀（羅氏公司提供）和配套試劑、質(zhì)控品及定標(biāo)液展開檢測(cè)。在檢測(cè)時(shí)均嚴(yán)格根據(jù)儀器、試劑盒相應(yīng)說(shuō)明書展開操作。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS16.0對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)展開統(tǒng)計(jì)學(xué)分析， 計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

使用最小二乘法（OLS）擬合直線， 以ELISA檢測(cè)結(jié)果為Y軸， 以ECLIA檢測(cè)結(jié)果為X軸， 探討兩者間相關(guān)性。擬合直線為：Y=-3.255 51+1.211 006X （-6.138 57）（103.082 6）。通過(guò)對(duì)擬合直線結(jié)果進(jìn)行分析， 可知截距頂t值為-6.138 57， 比臨界值大（P<0.05）， 處于95%CI可信區(qū)間內(nèi)， 且截距頂顯著。X前系數(shù)項(xiàng)t值103.082 6， 比臨界值大（P<0.05）， 處于95%CI可信區(qū)間內(nèi)， X前系數(shù)項(xiàng)顯著。由此可見， X和Y之間線性關(guān)系成立， 相關(guān)系數(shù)為0.995623， 與1十分接近， 由此可見X和Y高度相關(guān)。通過(guò)分析可知， 95%CI可信區(qū)間內(nèi)， 雙尾檢驗(yàn)P=0.2861， 由此可見ELISA與ECLIA對(duì)于血清AFP的檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

AFP是胚胎血清主要蛋白， 為腫瘤相關(guān)性抗原， 主要是在胎兒時(shí)期由肝臟組織合成， 在胎兒娩出后其體內(nèi)AFP水平會(huì)快速下降， 出生1年內(nèi)AFP水平即會(huì)下降到正常范圍內(nèi)， 也即血清AFP水平在20 ng/ml以下。有關(guān)統(tǒng)計(jì)顯示， 70%～95%的原發(fā)性肝癌患者血清AFP水平會(huì)異常升高[3]， 急性病毒性肝炎、酒精性肝硬化及畸胎等患者體內(nèi)AFP水平也可輕度增高， 而轉(zhuǎn)移性肝癌患者體內(nèi)AFP水平也處于較高水平， 此類患者AFP水平均不超過(guò)350～400 IU/ml。

AFP是原發(fā)性肝癌特異性極強(qiáng)的腫瘤標(biāo)志物， 已有報(bào)道顯示， 在肝癌診斷中， AFP診斷符合率達(dá)70%～90%?，F(xiàn)階段AFP腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方法主要為免疫層析法、ELISA法、放射免疫法、ECLIA等。ELISA法是AFP經(jīng)典檢測(cè)方法， 操作簡(jiǎn)便且成本較低， 在基層醫(yī)院中甲胎蛋白篩查中極為適用。同時(shí)， 這一檢查方法敏感性、穩(wěn)定性及準(zhǔn)確性較低。ECLIA是近年來(lái)新興起來(lái)的新型標(biāo)記免疫分析法， 是通過(guò)將免疫測(cè)定與電化學(xué)發(fā)光方法相結(jié)合， 對(duì)甲胎蛋白水平展開檢測(cè)。ECLIA檢測(cè)迅速且結(jié)果準(zhǔn)確， 檢測(cè)范圍較寬， 不存在放射性污染， 同時(shí)其自動(dòng)化程度較高， 在腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的應(yīng)用中日益廣泛， 然而其檢測(cè)試劑及相應(yīng)設(shè)備價(jià)格較為昂貴， 限制了這一檢測(cè)方法在臨床中的大范圍推廣。通過(guò)分析可知， ELISA與ECLIA在AFP腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)上各有優(yōu)劣， 臨床應(yīng)用中各有局限， 當(dāng)應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)出陽(yáng)性或假陽(yáng)性時(shí)， 可經(jīng)由電化學(xué)發(fā)光法進(jìn)一步確認(rèn)。本次研究通過(guò)對(duì)72例腫瘤科住院患者血清AFP的ELISA檢測(cè)結(jié)果及與ECLIA檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比， 可知ELISA與ECLIA均可清楚、準(zhǔn)確反映血清AFP水平。經(jīng)最小二乘法擬合直線方式檢測(cè)， 經(jīng)羅氏Cobase-411電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)結(jié)果作為參考標(biāo)準(zhǔn)， 擬合直線于95%CI可信區(qū)間內(nèi)X前系數(shù)項(xiàng)顯著， 由此可見X和Y線性關(guān)系顯著， 說(shuō)明ELISA與ECLIA檢測(cè)結(jié)果具有相關(guān)性， 且兩種檢測(cè)方法相關(guān)系數(shù)在0.99以上， 在95%CI可信區(qū)間內(nèi)， 雙尾檢驗(yàn)P=0.2861， ELISA與ECLIA的檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

綜上所述， 酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法可對(duì)血清甲胎蛋白這一腫瘤標(biāo)志物的水平予以準(zhǔn)確反映， 且檢測(cè)結(jié)果無(wú)顯著差異， 可為腫瘤診斷與治療提供重要依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 趙琛， 李冬嚴(yán)， 張振文.多項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在前列腺腫瘤鑒別診斷中的意義.中國(guó)老年學(xué)雜志， 2013，33（24）：6137-6138.

[2] 竇倩， 商海濤， 葉進(jìn)， 等.血清及腹水腫瘤標(biāo)志物對(duì)良惡性腹水的鑒別診斷價(jià)值.華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）， 2014，43（1）： 98-101.

[3] 徐焰， 陳名聲， 郝曉柯.聯(lián)合檢測(cè)血清AFU、AFP腫瘤標(biāo)志物在原發(fā)性肝癌診斷中的臨床價(jià)值.重慶醫(yī)學(xué)， 2008，37（24）： 2805-2807.

[收稿日期：2014-07-02]endprint