異型淋巴細(xì)胞的檢驗(yàn)與傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷

郭振宇 余婷婷

傳染性單核細(xì)胞增多癥(infectious monouc leosis, IM)簡(jiǎn)稱傳單［1］, 又名腺性熱。是由Epstoin-Barr(EB)病毒感染所引起的一種淋巴細(xì)胞反應(yīng)性良性增生的急性或亞急性傳染病, 本病好發(fā)于兒童及青少年。由于該病可累積全身各個(gè)器官, 導(dǎo)致臨床表現(xiàn)多樣化, 故僅臨床表現(xiàn)診斷非常困難。作為本病的診斷依據(jù)之一, 異型淋巴細(xì)胞的檢驗(yàn)?zāi)芎?jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、快速篩選出大部分與本病臨床表現(xiàn)相似的病例, 進(jìn)而達(dá)到確認(rèn)的目的, 因而異型淋巴細(xì)胞的檢驗(yàn)在傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷中具有非常重要的作用。但在臨床上, 尚有部分檢驗(yàn)工作者不能正確的檢驗(yàn)異型淋巴細(xì)胞, 給臨床診斷帶來困難。本文將對(duì)異型淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生機(jī)理、形態(tài)分類、檢驗(yàn)與報(bào)告等方面作一個(gè)詳盡的闡述, 以利于檢驗(yàn)的工作。

1 異型淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生機(jī)理及其特點(diǎn)

異型淋巴細(xì)胞也稱非典型淋巴細(xì)胞、病毒細(xì)胞、刺激性淋巴細(xì)胞、傳染性單核細(xì)胞等。臨床通常將異型淋巴細(xì)胞增高用于診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥, 而近年來有研究發(fā)現(xiàn),異型淋巴細(xì)胞在自身免疫性疾病、肝炎病毒、流感病毒、原蟲、細(xì)菌、螺旋體感染性疾病及腫瘤等疾病中也存在增高現(xiàn)象, 其為臨床診斷帶來一定的困難。當(dāng)EB病毒進(jìn)入易感者體內(nèi)后, 即感染瓦爾代爾(Waldeyer)扁桃體的B淋巴細(xì)胞并進(jìn)行復(fù)制, 然后通過病毒血癥或受染的B淋巴細(xì)胞散播而感染其他部分的B淋巴細(xì)胞。病毒復(fù)制導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞的死亡, 病毒顆粒及病毒決定抗原被釋放后刺激了特殊的免疫反應(yīng)。在疾病早期, 部分受感染B細(xì)胞中的病毒復(fù)制即被抑制而成為帶有EB病毒基因的B細(xì)胞, 此類B細(xì)胞具有被淋巴細(xì)胞檢出的膜抗原(lymphocyte ditected membrane antgen), 能被T殺傷細(xì)胞所識(shí)別, T殺傷細(xì)胞因被刺激而增殖。此時(shí)血中出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞, 即被EB病毒感染的B淋巴細(xì)胞及受

刺激的T細(xì)胞。異型淋巴細(xì)胞的主要特點(diǎn)為胞體較大, 胞漿具有較強(qiáng)的嗜堿性, 經(jīng)胸腺嘧啶標(biāo)記技術(shù)研究發(fā)現(xiàn), 在細(xì)胞S期階段, 電鏡下可見胞漿內(nèi)產(chǎn)生大量核糖體及擴(kuò)張的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。正常人群血液中異型淋巴細(xì)胞十分少見, 當(dāng)發(fā)生大量病毒感染或其他原因時(shí), 異型淋巴細(xì)胞比例升高, 當(dāng)升高幅度>10%～20%時(shí), 診斷價(jià)值最為理想。

2 異型淋巴細(xì)胞的定義及其分類

異型淋巴細(xì)胞是由于感染、刺激而引起的發(fā)生了形態(tài)學(xué)及功能上改變的淋巴細(xì)胞。1923年Downey將異型淋巴細(xì)胞分為三類：Ⅰ型(漿細(xì)胞型或泡沫型)：中等度大, 胞核偏位,呈橢圓形、分葉形或腎形, 染色質(zhì)呈粗顆粒狀或粗網(wǎng)狀, 胞質(zhì)嗜堿性強(qiáng), 呈深藍(lán)色, 豐富, 含有大小不等的空泡或呈泡沫狀, 無顆?；蛏倭渴缺桨匪{(lán)顆粒；Ⅱ型(單核細(xì)胞樣型或不規(guī)則型)：胞體較大似單核細(xì)胞, 外形不規(guī)則, 常有多個(gè)偽足呈花過狀, 核呈圓形或不規(guī)則形, 染色質(zhì)較Ⅰ型細(xì)致, 胞質(zhì)量較豐富, 呈淺灰藍(lán)色, 有透明感, 邊緣處著色較深, 一般無空泡, 少有嗜天青顆粒；Ⅲ型(幼稚淋巴細(xì)胞樣型或幼稚型)：胞體較大, 核呈圓形或橢圓形, 染色質(zhì)呈細(xì)網(wǎng)狀, 可見1～2個(gè)核仁, 胞質(zhì)豐富, 深藍(lán)色, 無顆粒, 可見少量空泡。另《血液病形態(tài)診斷學(xué)》編者認(rèn)為, 異型淋巴細(xì)胞可分為五型：Ⅰ型,單核細(xì)胞型；Ⅱ型, 漿細(xì)胞型；Ⅲ型, 幼稚型；Ⅳ型, 原始型；Ⅴ型, 排除上述四種的其他異型淋巴細(xì)胞統(tǒng)歸此型?，F(xiàn)在全國(guó)及世界檢驗(yàn)學(xué)界, 一般都從于前者, 即Downey分型說。

3 異型淋巴細(xì)胞的檢驗(yàn)與報(bào)告

異型淋巴細(xì)胞雖然在形態(tài)學(xué)上變化較大, 但是由于其正常的淋巴細(xì)胞及其他白細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上有著顯著的差別, 故一般可在鏡下進(jìn)行檢驗(yàn)報(bào)告。檢驗(yàn)時(shí)用普通血片經(jīng)瑞氏染色后, 在油鏡下分?jǐn)?shù)100個(gè)或200個(gè)白細(xì)胞, 計(jì)數(shù)其中異型淋巴細(xì)胞的個(gè)數(shù), 求出異型淋巴細(xì)胞在白細(xì)胞內(nèi)所占的百分比即可?？蓤?bào)告為“未見異型淋巴細(xì)胞”或“異型淋巴細(xì)胞：X%”。值得注意的是, 由于現(xiàn)代血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的廣泛應(yīng)用,在一般醫(yī)療單位做“血常規(guī)＋異型淋巴細(xì)胞”時(shí), 較多的檢驗(yàn)工作者先是在儀器上做完血常規(guī), 將打印結(jié)果貼在報(bào)告單上后, 再分?jǐn)?shù)血片中100個(gè)白細(xì)胞, 計(jì)算出異型淋巴細(xì)胞百分比, 填在報(bào)告上。作者認(rèn)為, 這種做法不當(dāng), 因?yàn)楫愋土馨图?xì)胞報(bào)告為其占白細(xì)胞的百分比, 若按上述做法, 則有異型淋巴細(xì)胞加各類白細(xì)胞的和>100%, 故此不妥。應(yīng)將打印報(bào)告中淋巴細(xì)胞項(xiàng)減去異型淋巴細(xì)胞后才可報(bào)告為淋巴細(xì)胞百分比, 或?qū)准?xì)胞全部做鏡下分類報(bào)告之。異型淋巴細(xì)胞的正常參考值為0%～4%, 血常規(guī)檢查中將異型淋巴細(xì)胞比例>4%判定為儀器法陽性。涂片法將異型淋巴細(xì)胞比例>4%判定為陽性, 二者均為診斷異型淋巴細(xì)胞的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

4 異型淋巴細(xì)胞檢驗(yàn)對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥診斷的作用

一直以來, 臨床將外周血異型淋巴細(xì)胞比例>10%作為診斷IM的標(biāo)準(zhǔn), 近年來, 隨著電腦自動(dòng)化檢測(cè)方法的廣泛使用, 使檢驗(yàn)人員鑒別細(xì)胞形態(tài)的能力相對(duì)下降, 其在一定程度上導(dǎo)致異型淋巴檢出率有所降低。在國(guó)內(nèi), 傳染性單核細(xì)胞增多癥有如下的診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］：①臨床表現(xiàn)：變化多端, 有著較高的漏診率和誤診率；②實(shí)驗(yàn)室檢查：a.血象, 主要為異型淋巴細(xì)胞>10%, 陽性率高, 可達(dá)30%甚至90%以上；b.嗜異性凝集試驗(yàn), 有10%的青年及成人患者嗜異性凝集試驗(yàn)為陰性, 5歲以下的兒童嗜異性凝集試驗(yàn)也常為陰性, 故雖然其陽性時(shí)可以確診, 但是陰性時(shí)卻不可排除；c.EB病毒抗體測(cè)定, 特異性高, 但復(fù)雜, 一般實(shí)驗(yàn)室無法開展。IM患者發(fā)熱初期異型淋巴細(xì)胞多檢測(cè)不到或僅表現(xiàn)為輕度升高, l周后外因血異型淋巴細(xì)胞可增加至10%以上, 因而異型淋巴比值低于10%, 此時(shí)應(yīng)多次復(fù)查異型淋巴細(xì)胞和血常規(guī)。經(jīng)過多年臨床實(shí)踐［3-5］, 多項(xiàng)研究認(rèn)為將診斷標(biāo)準(zhǔn)異型淋巴細(xì)胞比例由10%降至8%或6%較為合適。對(duì)外因血異型淋巴細(xì)胞比值高于6%的患兒, 醫(yī)生應(yīng)結(jié)合臨床做EB病毒抗體檢測(cè)或嗜異性凝集試驗(yàn), 以進(jìn)一步確診。

5 小結(jié)

異型淋巴細(xì)胞的檢驗(yàn)對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷和鑒別診斷具有非常重要的作用, 在臨床上應(yīng)引起檢驗(yàn)工作者的足夠重視, 并應(yīng)用于實(shí)踐中去, 更好的為人民群眾的健康服務(wù)。

參考資料

［1］鄧家棟.臨床血液學(xué).上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社, 1985:770-774.

［2］張?jiān)?血液病的診斷與療效標(biāo)準(zhǔn).北京:科學(xué)出版社, 1998:252-257.

［3］劉淑玲, 任淑媛.異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)在傳染性單核細(xì)胞增多癥診斷中的應(yīng)用.北京醫(yī)學(xué), 2011, 33(5):436-438.

［4］劉瑞明, 丁信軍, 楊曉艷, 等.血液異型淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室分析.吉林醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2012, 23(2):98-99.

［5］張峰, 李鳳巧.異型淋巴細(xì)胞與轉(zhuǎn)氨酶聯(lián)合檢測(cè)診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥.哈爾濱醫(yī)藥, 2009, 27(5):39-42.