飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔生長(zhǎng)性能、毛皮品質(zhì)、維生素A沉積、血清生化指標(biāo)及抗氧化性能的影響

朱曉強(qiáng) 李福昌 李萬(wàn)佳 付朝暉 張彩霞

(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，泰安 271018)

維生素A是動(dòng)物體內(nèi)必需的一種脂溶性維生素，研究表明，維生素A對(duì)于維持上皮細(xì)胞的完整性、正常視覺、基因調(diào)節(jié)、動(dòng)物繁殖、免疫功能、抗氧化作用等方面都是必不可少的。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，維生素A能增強(qiáng)機(jī)體抗感染能力，參與蛋白質(zhì)的合成，維持骨骼的正常生長(zhǎng)代謝［1］。Maden［2］進(jìn)一步研究表明維生素A在胚胎發(fā)育中也起重要作用。目前，我國(guó)還未正式出臺(tái)獺兔完整的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，因此對(duì)獺兔維生素A需要量的研究具有重要意義。本試驗(yàn)以生長(zhǎng)獺兔為研究對(duì)象，探討飼糧添加不同水平維生素A對(duì)其生長(zhǎng)性能、毛皮品質(zhì)、維生素A沉積、血清生化指標(biāo)和抗氧化性能的影響，尋求獺兔飼糧中維生素A適宜添加水平，為我國(guó)制定獺兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼糧

基礎(chǔ)飼糧參照NRC(1977)家兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制而成，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。在基礎(chǔ)飼糧中分別添加 0(對(duì)照組)、5 000、10 000、20 000、40 000 IU/kg維生素A醋酸酯，制成5種試驗(yàn)飼糧，加工成直徑4～6 mm的顆粒飼料，通風(fēng)干燥保存。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)選用健康、平均體重為(1.50±0.14)kg的3月齡獺兔200只，公母各占1/2，隨機(jī)分成5組，每組40個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只獺兔。分別飼喂以上5種飼糧，預(yù)試期7 d，正試期53 d。試兔單籠飼養(yǎng)，試驗(yàn)期間早晚各喂1次，采用常規(guī)飼養(yǎng)管理和免疫程序，自然采光、通風(fēng)。

1.3 樣品采集與制備

在試驗(yàn)開始后第53天早晨空腹稱重，每組隨機(jī)抽取8只試兔，立即心臟采血10 mL，37℃水浴40 min后，3 000 r/min離心15 min，分離所得血清分裝于Eppendorf管中，置于-20℃冷凍保存，待測(cè)血清維生素A含量、血清生化指標(biāo)和抗氧化性能指標(biāo)。

采血完成后將試兔頸動(dòng)脈放血屠宰，取毛皮進(jìn)行稱重，將毛皮沿腹中線剪開，量其長(zhǎng)、寬，記錄數(shù)據(jù)，計(jì)算毛皮面積;摘取肝臟放于液氮罐中保存，待測(cè)肝臟維生素A含量及抗氧化性能指標(biāo)。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)

試驗(yàn)結(jié)束后，以重復(fù)為單位稱量試兔的體重，并統(tǒng)計(jì)全期的喂料量，計(jì)算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.2 毛皮品質(zhì)

屠宰后，稱取毛皮重量，將毛皮平鋪后量取皮長(zhǎng)、皮寬(肩部、腰部、臀部各量1次，取平均值)計(jì)算毛皮面積，毛囊密度采用石蠟切片及蘇木精-伊紅(HE)染色法進(jìn)行圖像分析，每只試兔選取3張HE染色切片(肩部、背部及臀部各1張)，每張切片選2個(gè)視野拍照，用Image-Plus軟件對(duì)每個(gè)視野的毛囊個(gè)數(shù)、初級(jí)毛囊個(gè)數(shù)、次級(jí)毛囊個(gè)數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算出毛囊密度、初級(jí)毛囊密度和次級(jí)毛囊密度，并計(jì)算次級(jí)毛囊密度/初級(jí)毛囊密度(S/P)［3］。

1.4.3 血清和肝臟維生素A含量

高效液相色譜法，參照文獻(xiàn)［4］的方法。

1.4.4 血清生化指標(biāo)

血清尿素氮(UN)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、膽固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量均在日立7020型全自動(dòng)分析儀上測(cè)定，試劑盒購(gòu)自日本和光純藥工業(yè)株式會(huì)社。

1.4.5 血清和肝臟抗氧化性能指標(biāo)

血清和肝臟總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性、總抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量均在UV-2450型紫外可見分光光度計(jì)上測(cè)定，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)采用SAS 9.1統(tǒng)計(jì)軟件中的GLM進(jìn)行數(shù)據(jù)的方差分析，若有顯著差異，則采用Duncan氏法進(jìn)行數(shù)據(jù)的多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔生長(zhǎng)性能的影響

由表2可以看出，在初始體重?zé)o顯著差異(P＞0.05)的情況下，飼糧維生素A添加水平對(duì)獺兔ADG、ADFI影響不顯著(P＞0.05)，對(duì) F/G影響顯著(P＜0.05)，其中10 000 IU/kg維生素A添加組F/G最低，顯著低于對(duì)照組和5 000 IU/kg維生素A添加組(P＜0.05)，而10 000、20 000和40 000 IU/kg維生素A添加組之間差異不顯著(P＞0.05)，ADG在飼糧維生素A添加水平為10 000 IU/kg時(shí)最高。

2.2 飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔毛皮品質(zhì)的影響

由表3可以看出，飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔毛皮重量和毛皮面積的影響極顯著(P＜0.01)，毛皮重量及毛皮面積都隨飼糧維生素A添加水平增加呈先升高后降低的變化，10 000 IU/kg維生素A添加組均顯著高于其他4組(P＜0.05)，飼糧維生素A添加水平對(duì)毛囊密度、初級(jí)毛囊密度、S/P均無(wú)顯著影響(P＞0.05)。

表3 飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔毛皮品質(zhì)的影響Table 3 Effects of dietary vitamin A level on fur quality of growing Rex rabbits

2.3 飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔血清及肝臟維生素A沉積的影響

由表4可以看出，飼糧維生素A添加水平對(duì)血清中維生素A含量影響顯著(P＜0.05)，當(dāng)飼糧維生素A添加水平在0～20 000 IU/kg范圍內(nèi)時(shí)，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清維生素A含量呈升高趨勢(shì)，當(dāng)飼糧維生素A添加水平超過20 000 IU/kg后，血清維生素A含量趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對(duì)肝臟中維生素A含量影響顯著(P＜0.05)，隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟維生素A含量呈升高趨勢(shì)，且呈線性關(guān)系。

表4 飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔血清及肝臟維生素A沉積的影響Table 4 Effects of dietary vitamin A level on vitamin A deposition in serum and liver of growing Rex rabbits

2.4 飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔血清生化指標(biāo)的影響

由表5可以看出，飼糧維生素A添加水平對(duì)血清 UN含量影響顯著(P＜0.05)，10 000、20 000 IU/kg維生素A添加組顯著低于其他組(P＜0.05)，飼糧維生素A添加水平對(duì)血清TP含量影響不顯著(P＞0.05)，對(duì)血清ALB含量影響顯著(P＜0.05)，對(duì)照組顯著低于其他組(P＜0.05)，其他各組間無(wú)顯著差異(P＞0.05)，其中飼糧維生素A添加水平為10 000 IU/kg時(shí)血清ALB含量最高;飼糧維生素A添加水平對(duì)血清TG、CHO、HDL和 LDL含量影響均不顯著(P＞0.05)。

表5 飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary vitamin A level on serum biochemical indices of growing Rex rabbits

2.5 飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔血清和肝臟抗氧化性能指標(biāo)的影響

由表6可以看出，飼糧維生素A添加水平對(duì)血清GSH-Px和T-SOD活性影響極顯著(P＜0.01)，當(dāng)飼糧維生素 A添加水平在0～10 000 IU/kg范圍內(nèi)時(shí)，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趨勢(shì)，當(dāng)飼糧維生素A添加水平超過10 000 IU/kg時(shí)，都趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對(duì)血清MDA含量影響顯著(P＜0.05)，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清MDA含量呈降低趨勢(shì)，40 000 IU/kg維生素A添加組血清MDA含量最低。

飼糧維生素A添加水平對(duì)肝臟GSH-Px活性影響極顯著(P＜0.01)，對(duì)T-SOD活性影響顯著(P＜0.05)，當(dāng)飼糧維生素 A添加水平在0～10 000 IU/kg范圍內(nèi)時(shí)，隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趨勢(shì)，當(dāng)飼糧維生素A添加水平超過10 000 IU/kg時(shí)，都趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對(duì)肝臟MDA含量影響顯著(P＜0.05)，隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟MDA含量呈降低趨勢(shì)，40 000 IU/kg維生素A添加組肝臟MDA含量最低;飼糧維生素A添加水平對(duì)肝臟T-AOC影響不顯著(P＞0.05)，但隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟T-AOC先升高后降低，10 000 IU/kg維生素A添加組肝臟T-AOC最高。

表6 飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔血清和肝臟抗氧化性能指標(biāo)的影響Table 6 Effects of dietary vitamin A level on serum and liver antioxidant indices of growing Rex rabbits

3 討論

3.1 飼糧維生素A添加水平與生長(zhǎng)獺兔生長(zhǎng)性能

謝登玉等［5］以肉兔為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)6 000 IU/kg維生素A可顯著提高獺兔的ADG，降低 F/G。林 映 才 等［6］研 究 表 明 添 加 300～10 000 IU/kg維生素A顯著提高仔豬ADG，極顯著降低F/G。郭曉宇等［7］以肉雞為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)飼糧維生素A水平為3 000 IU/kg時(shí)，肉雞生長(zhǎng)性能較高;飼糧維生素 A水平為1 500、45 000 IU/kg時(shí)，生長(zhǎng)性能顯著下降;飼糧維生素A水平為15 000 IU/kg時(shí)，生長(zhǎng)性能呈降低趨勢(shì)。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，隨飼糧維生素A添加水平的提高，獺兔ADG、ADFI有上升趨勢(shì)，F(xiàn)/G呈降低趨勢(shì)。當(dāng)飼糧維生素A添加水平達(dá)到10 000 IU/kg時(shí)，獺兔的F/G顯著低于其他4組，說明當(dāng)飼糧維生素A添加水平為10 000 IU/kg時(shí)，可以顯著提高獺兔的飼料轉(zhuǎn)化率。因此，從生長(zhǎng)性能指標(biāo)分析可知，在本試驗(yàn)條件下，生長(zhǎng)獺兔飼糧的適宜維生素A添加水平為10 000 IU/kg。

3.2 飼糧維生素A添加水平與生長(zhǎng)獺兔毛皮品質(zhì)

獺兔是典型的皮用型兔，其經(jīng)濟(jì)價(jià)值主要在于其毛皮，毛皮品質(zhì)除了與品種有一定關(guān)系外，飼糧營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)也不可忽視。毛皮品質(zhì)可以從毛皮重量、毛皮面積、毛囊密度等諸多指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)定。張福勛［8］通過研究發(fā)現(xiàn)，斷奶至3月齡的獺兔應(yīng)保證足夠的營(yíng)養(yǎng)水平與采食量，這樣可以提高商品獺兔的毛皮品質(zhì)。任殿付等［9］通過研究發(fā)現(xiàn)飼糧中性洗滌纖維水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔的皮毛重量影響極顯著。本試驗(yàn)中，飼糧維生素A添加水平對(duì)生長(zhǎng)獺兔毛皮重量和毛皮面積的影響極顯著，毛皮重量及毛皮面積都隨飼糧維生素A添加水平增加呈先升高后降低的變化，而且均在維生素A添加水平10 000 IU/kg時(shí)達(dá)到最大值。

毛囊根據(jù)發(fā)生時(shí)間的早晚和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)分為初級(jí)毛囊和次級(jí)毛囊，毛和絨都是由毛囊產(chǎn)生的，獺兔的初級(jí)毛囊長(zhǎng)出的毛又被稱為針毛，次級(jí)毛囊長(zhǎng)出的毛稱為絨毛。由于毛囊發(fā)育的優(yōu)劣是影響毛皮重量的關(guān)鍵因素，所以對(duì)獺兔毛囊進(jìn)行研究為提高獺兔毛皮品質(zhì)具有重要的理論和實(shí)踐意義。張焱如［10］研究絨山羊羊皮表明，絨山羊在剛出生時(shí)其所有的初級(jí)毛囊基本完全發(fā)育成熟，而只有少數(shù)的次級(jí)毛囊發(fā)育成熟，出生后山羊針毛的數(shù)量是不變的，只是隨著皮張大小的變化，針毛的密度發(fā)生變化，受營(yíng)養(yǎng)等其他因素的影響，絨毛數(shù)量會(huì)有差異。Rasmussen等［11］研究表明，極低的飼糧蛋白質(zhì)水平可能阻礙毛囊的再生，而毛囊的再生直接影響著冬季毛皮的絨毛密度。本試驗(yàn)中飼糧維生素A添加水平對(duì)毛囊密度、初級(jí)毛囊密度、次級(jí)毛囊密度及S/P均無(wú)顯著影響，可能與5組飼糧蛋白質(zhì)水平一致有關(guān)。

3.3 飼糧維生素A添加水平與生長(zhǎng)獺兔血清和肝臟維生素A沉積

飼糧維生素A添加水平與體內(nèi)維生素A的狀況密切相關(guān)，維生素A的體內(nèi)代謝受飼糧中維生素A含量的影響很大［12-13］。血清維生素A和肝臟維生素A含量是監(jiān)測(cè)動(dòng)物機(jī)體維生素A的營(yíng)養(yǎng)狀況的常用指標(biāo)［14］。Shaik 等［15］對(duì)鱸魚的研究發(fā)現(xiàn)，血清維生素A含量在飼糧維生素A添加水平在210～3 764 IU/kg范圍內(nèi)，與飼糧維生素A添加水平呈正相關(guān)，在高水平維生素A飼糧下達(dá)到平臺(tái)期而不再升高。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧維生素A添加水平對(duì)血清中維生素A含量影響顯著，當(dāng)飼糧維生素A添加水平在0～20 000 IU/kg范圍內(nèi)時(shí)，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清維生素A含量呈升高趨勢(shì)，當(dāng)飼糧維生素A添加水平超過20 000 IU/kg后，血清維生素A含量趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對(duì)肝臟中維生素A含量影響顯著，隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟維生素A含量呈升高趨勢(shì)，且呈現(xiàn)線性關(guān)系。

3.4 飼糧維生素A添加水平與生長(zhǎng)獺兔血清生化指標(biāo)

梁鴻雁等［12］以獺兔為研究對(duì)象研究發(fā)現(xiàn)，血清維生素A含量隨飼糧維生素A添加水平的提高而有升高的趨勢(shì)，但不顯著，血清UN含量隨飼糧維生素A添加水平的提高而下降。謝登玉等［5］研究發(fā)現(xiàn)，飼糧維生素A添加水平對(duì)肉兔血液TG和CHO含量無(wú)顯著影響，對(duì)血液UN含量影響顯著。在本試驗(yàn)中，飼糧維生素A添加水平對(duì)血清UN含量影響顯著，10 000、20 000 IU/kg維生素A添加組顯著低于其他組，對(duì)血清ALB含量影響顯著，對(duì)血清 TP、TG、CHO、HDL和 LDL含量影響均不顯著。

3.5 飼糧維生素A添加水平與生長(zhǎng)獺兔血清和肝臟抗氧化性能

GSH-Px是動(dòng)物體內(nèi)廣泛存在的一種催化過氧化氫分解的酶，能催化已形成的過氧化氫生成水和氧氣，并防止過氧化物進(jìn)一步水解產(chǎn)生有害物質(zhì) MDA。Palacios等［16］報(bào)道維生素 A缺乏大鼠的肝組織中GSH-Px活性顯著低于正常對(duì)照組動(dòng)物。Dogra等［17］試驗(yàn)表明維生素A缺乏使小鼠肺中超氧化物歧化酶(SOD)活性顯著下降。Surai等［18］研究發(fā)現(xiàn)，大劑量維生素 A攝入可降低雞SOD活性，促進(jìn)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，使機(jī)體抗氧化能力減弱。李英哲等［19］研究發(fā)現(xiàn)，維生素A完全缺乏組和輕度缺乏組的大鼠血清、肝臟及腦組織的SOD活性顯著下降，全血、肝臟及腦組織GSH-Px活性顯著下降，而血清、肝臟及腦組織MDA含量顯著升高。本研究結(jié)果與此相似，飼糧維生素A添加水平對(duì)血清和肝臟GSH-Px活性影響極顯著，對(duì)血清T-SOD活性影響極顯著，對(duì)肝臟T-SOD活性影響顯著，當(dāng)飼糧維生素A添加水平在0～10 000 IU/kg范圍內(nèi)時(shí)，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清和肝臟GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趨勢(shì)，當(dāng)飼糧維生素A添加水平超過10 000 IU/kg時(shí)，都趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對(duì)血清和肝臟MDA含量影響顯著，隨飼糧維生素A添加水平增加，MDA含量呈降低趨勢(shì)。飼糧維生素A添加水平對(duì)肝臟T-AOC影響不顯著，但隨飼糧維生素A添加水平增加，T-AOC呈先升高后降低趨勢(shì)。飼糧中添加維生素A可以極大地改善血清和肝臟的抗氧化性能。

4 結(jié)論

綜合本試驗(yàn)測(cè)定的指標(biāo)可以得出，生長(zhǎng)獺兔的飼糧適宜維生素A添加水平為10 000 IU/kg。

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