延胡索不同炮制方法的薄層色譜鑒別對比研究

王彥青

（鄭州市第八人民醫(yī)院藥劑科，河南 鄭州 450000）

延胡索是一種中國傳統(tǒng)藥材，為罌粟科植物延胡索的干燥塊莖，又稱元胡或玄胡。延胡索中含有多種生物堿，主要有延胡索乙素（dltetrahydropalmatine）、延胡索甲素（d-corydaline）和延胡索丙素（protopine）等，是臨床上常用的活血、止痛藥，具有活血、行氣、止痛等功能[1]。目前臨床上常用的延胡索是經(jīng)炮制后的延胡索，研究結(jié)果表明[2]，醋炙后的延胡索能提高它的行血、止痛作用，而酒炙后的延胡索能增強其活血、化瘀的功能。本文以延胡索的主要有效成分延胡索乙素為研究對象，采用超聲法提取經(jīng)不同方法炮制過后的延胡索中的有效成分，并應用薄層色譜法對有效成分進行鑒別和對比分析，以確定最佳的炮制方法，為延胡索的炮制及有效應用提供參考和依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

全自動薄層鋪板器（TD-Ⅱ型，上海科哲生化科技有限公司），超級循環(huán)水箱（HH-501型，金壇市鴻科儀器廠），臺式超聲波清洗器（KQ2200V型，昆山舒美超聲儀器有限公司），暗箱式微型雙光紫外分析儀（GL-200型，江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司），恒溫干燥箱（DHG-101-3A型，天津諾宏儀器制造有限公司），電子分析天平（CP225D型，德國賽多利斯科學儀器有限公司）

1.2 試藥

硅膠G（青島海洋化工有限公司），延胡索（天津中新藥業(yè)藥材公司，批號：070912）； 延胡索乙素對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110726-201112），山西老陳醋（山西老陳醋集團），黃酒（紹興花雕），其他所有試劑均為分析純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 炮制方法

首先將延胡索洗凈，將其干燥后打碎，再采用醋烘、醋煮、醋炙、酒炙的方法分別對其進行炮制。其中，①醋烘：稱取延胡索適量，加入20%總質(zhì)量的醋將其潤濕，待醋完全吸盡后，放入120 ℃的烘箱內(nèi)干燥45 min，隨后取出來放涼，備用；②醋煮：稱取延胡索適量，加20%總重量的醋將其潤濕，待醋完全吸盡后，再加入純化水將藥材浸沒，隨后用武火煮沸，再用文火煎煮，干燥備用；③醋炙：稱取延胡索適量，加入20%的醋潤濕，待醋完全吸盡后，以文火炒干，放涼后，備用；④酒炙：稱取延胡索適量，加20%的酒潤濕，悶透后，以文火炒干，放涼后，備用。

2.2 對照品溶液的制備

稱取延胡索乙素對照品10.5 mg，置于10 mL的容量瓶中，加少量甲醇溶解后，然后繼續(xù)用甲醇定容至刻度，混合均勻后，即得1.1 mg/mL的延胡索對照溶液，將其放置于冰箱中保存，備用。

2.3 供試品溶液的制備

取上述炮制后的延胡索及延胡索生品各取5 g，置于錐形瓶中，加入純化水100 mL，超聲提取25 min后，分離上清液，收集；然后將殘渣再重復上述操作1 次，合并2次的濾液；接著殘渣加入50 mL的水溶解后，再加10 mL濃氨水，然后乙醚萃取3 次，合并萃取液，蒸干；稱取0.2 g濃縮物，用2 mL甲醇溶解，混合均勻，即得供試品溶液，于冰箱中保存，備用。

2.4 薄層色譜的點樣、展開及處理

預先采用2%（W/V）的氫氧化鈉溶液制備硅膠G薄層板，然后將“2.2”項下的對照品和“2.3”項下的供試品溶液經(jīng)點樣器點于硅膠薄層板上（S為延胡索乙素對照品溶液，其余按標號為不同炮制方法的供試品溶液），展開劑為甲苯-丙酮（9∶2），展距7 cm。隨后取出薄層板，待晾干后，將其放置于密閉的碘缸中約5 min，取出，揮盡薄層板上所吸附的碘，最后放于紫外光燈（波長為365 nm）下，檢視，結(jié)果見圖1所示。

圖1 不同炮制方法下的延胡索的薄層色譜圖

從薄層色譜圖上可以看出，所有供試品的斑點均與對照品的斑點出現(xiàn)在同一位置上，且呈現(xiàn)出相同顏色的熒光。但未經(jīng)炮制的延胡索生品（9、10號）較其他炮制后的延胡索來說，斑點稍小且顏色稍淺，而經(jīng)醋烘、醋煮、醋炙、酒炙炮制后的延胡索中，斑點最大且最亮的為醋炙（5、6號）后的供試品溶液，其次為酒炙、醋烘、醋煮后的延胡索斑點。

3 討論

傳統(tǒng)的延胡索炮制方法主要有醋炙、醋烘、醋煮和灑炙等，目前，關(guān)于這些不同的炮制方法對延胡索中延胡索乙素影響的研究報道有許多，如許捷[3]曾用醋炙、醋煮、醋烘、酒炙的方法炮制延胡索，并采用高效液相色譜法測定炮制后延胡索中延胡索乙素的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)醋炙和酒炙這2種方法炮制后的延胡索中延胡索乙素含量較醋煮和醋烘高，而未經(jīng)任何炮制處理后的延胡索中延胡索乙素含量最低[4]。本研究通過薄層色譜分析也證實，醋炙延胡索、酒煮延胡索所、醋烘延胡索及酒炙延胡索后得到的斑點較延胡索生品的斑點大且顏色亮，且斑點的位置均與延胡索乙素對照品的薄層色譜位置一致，說明經(jīng)過炮制后，延胡索中的有效成分延胡索乙素含量有所提高，這可能是因為延胡索中的生物堿大多都是以游離態(tài)的形式存在，而游離態(tài)的生物堿卻難溶于水，但經(jīng)過醋制或酒制后，可能會形成生物堿的鹽類，而使其的溶解度增加，進而提高含量，使斑點變大且增亮。還有可能是因為延胡索經(jīng)醋炙和酒炙后，改變了延胡索中有效成分的結(jié)構(gòu)，有利于有效成分的浸潤、溶解、擴散，從而增強了延胡索乙素的溶出[5]。

醋煮炮制方法下延胡素的斑點較小較暗，提示該種炮制方法下得到的延胡索中乙素含量較低，其原因的可能是因為煮的時間過長，破壞了生物堿的結(jié)構(gòu)，進而影響了其含量，所以在采用醋煮的方法對延胡索進行炮制時，需注意煮的時間，以免破壞了有效成分的結(jié)構(gòu)。而醋炙后的斑點最大最亮，提示此炮制方法下得到的延胡索乙素含量最高，該種方法是一種較為合適的延胡索的炮制方法，但在采用該種方法炮制延胡索時，需嚴格掌握火候，因延胡索大小不一，若火力較大，則會出現(xiàn)受熱不均，炒制過渡，進而影響飲片的質(zhì)量[6]。

總而言之，延胡索是中醫(yī)臨床上常用的藥材，通常需經(jīng)炮制后再入藥，然而，由于多種炮制方法存在較大的差異，因此選擇一種優(yōu)質(zhì)的炮制方法就顯得尤其重要，本研究采用超聲法提取了不同炮制方法后的延胡索乙素，并采用薄層色譜對其進行鑒別和對比研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)醋炙法是炮制延胡索的最佳方法，該方法操作簡便，方法可行，且質(zhì)量可控，適用于延胡索的炮制，為其臨床用藥的有效性奠定了基礎(chǔ)。

[1]鄭弘,許紅瑋.延胡索不同炮制方法的薄層色譜鑒別對比研究[J].中醫(yī)學報,2013,28(5):695-696.

[2]沈志沖.元胡不同炮制方法對延胡索乙素含量的影響[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學,2011,38(21): 4454-4455.

[3]徐捷.不同炮制方法對延胡索有效成分影響研究[J].河北醫(yī)藥,2013,35(3): 454-455.

[4]李瑞麗,王喜民,張玉東.薄層色譜法鑒別胃康靈膠囊中白芍、三七和延胡索[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2013,9(3):19-20.

[5]劉霞,張小慧,仝立國,等.胃腸康定膠囊的質(zhì)量標準研究[J].中藥新藥與臨床藥理,2012,23(05):582-585.

[6]付莉,韓桂茹.三種制劑中多味藥材的同時鑒別研究[J].中國藥事,2012,26(1):69-71.